复方有效部位与组方药材指纹图谱色谱峰相关性研究

 目的在色谱指纹图谱分析的基础上,研究复方有效部位与组方药材指纹图谱色谱峰相关性,进而分析有效部位化学组成。方法以精制血府逐瘀汤降血脂有效部位(FP)为研究对象,通过HPLC/DAD联用建立复方有效部位及各药材相应部位指纹图谱,以色谱峰保留时间相对偏差△t和紫外光谱相似度为考察指标,对方剂有效部位化学指纹图谱色谱峰归属进行分析。结果对复方有效部位FP中的16个色谱峰进行了归属分析,确定其主要来源于枳壳、川芎、赤芍、红花,为黄酮及萜类化合物。结论该方法能较好地判别FP部位主要色谱峰与药材化学组分间的相关性,帮助确定FP部位指纹峰的归属,可应用于中药复方有效部位化学组成及来源分析。     

复方苦参汤乙酸乙酯部位指纹图谱试验研究

正复方苦参汤是治疗溃疡性结肠炎(UC)大肠湿热证的有效验方~([1-3]),疗效好,副作用少,患者容易接受。复方苦参汤由苦参、青黛、地榆、白及等组成,具有清热燥湿、凉血的的功效。本课题组采用系统溶剂法,将复方苦参汤分为石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水溶液部位,并采用2、4、6三硝基苯磺酸钠(TNBS)诱导的UC大鼠模型,运用免疫组化、分子生物学等方法,对复方苦参汤治疗UC的有效部位进行筛选,确定了主要有效部     

复方脑脉通有效部位与药材指纹图谱相关性研究

目的:建立脑脉通(大黄、人参、葛根)有效部位的HPLC指纹图谱,研究复方与组方药材指纹图谱色谱峰相关性。方法:采用HPLC-PDAD方法,建立脑脉通有效部位及各药材在203nm检测波长下的指纹图谱,以色谱峰保留时间为考察指标,对复方指纹图谱色谱峰归属进行分析。结果:建立了脑脉通复方有效部位的HPLC对照指纹图谱,标示出36个共有指纹峰,对复方特征峰进行了归属分析,确定了14个特征峰的药材归属。结论:该指纹图谱有助于提高脑脉通有效部位的质量控制水平。     

鲜姜有效部位HPLC指纹图谱研究

目的:研究建立鲜姜有效部位HPLC色谱指纹图谱,提供较完整的质量信息,更有效地监控质量。方法:采用RP-HPLC,色谱柱:Inertsil(ODS-3柱(100 mm×2.1 mm,3μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,柱温为30℃,检测波长为230 nm与190 nm~400 nm,分析时间为100 min,流速为0.2 ml/min,进行了鲜姜有效部位指纹图谱研究。结果:运用梯度洗脱法得到的色谱图各色谱峰分离较好,达到指纹图谱要求。结论:采用该法可为控制鲜姜有效部位的内在质量提供依据。     

川芎抗偏头痛作用的有效部位筛选及指纹图谱研究

目的:确定川芎对偏头痛模型大鼠镇痛作用的有效部位,并建立该有效部位的HPLC指纹图谱,为其质量控制提供可靠有效的方法。方法:采用皮下注射硝酸甘油建立大鼠偏头痛模型,比较川芎各有效部位的镇痛效果,并通过HPLC对各有效部位的化学成分进行对比分析,确定川芎治疗偏头痛的主要有效部位。采用GS-120-5-C18(250mm×4. 6mm,5μm)色谱柱;以甲醇-水为流动相梯度洗脱;流速1. 0 m L/min;柱温25℃;检测波长280 nm;进样量20μL。进行不同产地川芎乙酸乙酯部位的指纹图谱研究,并对所得指纹图谱进行相似度评价和主成分分析。结果:川芎各有效部位化学成分的种类和含量存在差异。石油醚部位主要为脂溶性成分,二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位以及正丁醇部位既有脂溶性成分,也有水溶性成分,但含量有所差异。结合药效学试验结果分析,川芎治疗偏头痛的主要有效部位为乙酸乙酯有效部位; 24批川芎的乙酸乙酯有效部位共确立了8个共有峰,建立了川芎乙酸乙酯部位的HPLC对照指纹图谱,通过结合保留时间和紫外光谱,指认了洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、藁本内酯4个特征峰。24批川芎乙酸乙酯有效部位的相似度在0. 967～1. 000之间。对8个共有峰进行主成分分析,其综合评判得分在-0. 584～1. 145之间。结论:川芎乙酸乙酯部位是抗偏头痛作用的主要有效部位,所建立的指纹图谱具有良好的精密度、重复性和稳定性,可以为川芎乙酸乙酯部位的质量控制提供全面的信息。     

水蛭仿生酶解有效部位HPLC指纹图谱的研究

目的:建立水蛭仿生酶解有效部位HPLC指纹图谱的鉴定标准。方法:采用依利特SinoChrom ODS-BP色谱柱;0～25min,甲醇(1%～10%)～水梯度洗脱;柱温35℃;流速0.8 mL.min-1;检测波长254nm。结果:在相同色谱条件下获得6批水蛭仿生酶解有效部位的指纹色谱图,其中8个色谱峰分离较好,均达到指纹图谱的技术要求。结论:HPLC指纹图谱中8个共有峰的相对保留时间比值(RRT)和相对峰面积比值(RPA)可用于水蛭仿生酶解有效部位的质量控制。     

复方水蛭注射液HPLC指纹图谱研究

目的：用高效液相色谱法测定复方水蛭注射液中次黄嘌呤的含量，并建立注射液指纹图谱，全面评价其内在质量。方法：采用Kromasil C₁₈(4.6 mm×250 mm，5 μm)色谱柱，流动相A-0.01 mol·L^-1 KH₂PO₄，B-50%甲醇，梯度洗脱的方式；流速0.8 mL·min^-1，检测波长254 nm；柱温为室温。结果：以次黄嘌呤为参照物,建立了复方水蛭注射液指纹图谱，标示出15个共有峰,共有峰相似度大于0.97。结论：该方法准确、重复性好，可作为控制复方水蛭注射液的质量依据。     

复方板蓝根颗粒HPLC指纹图谱研究

目的：建立复方板蓝根颗粒的HPLC指纹图谱的分析方法,用于复方板蓝根颗粒的质量控制。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温为25℃,对指纹图谱进行共有峰标定,以R, S-告依春为参照峰计算各共有峰的相对保留时间和峰面积比值,采用2012年版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件对10批复方板蓝根颗粒进行相似度评价。结果：复方板蓝根颗粒HPLC指纹图谱分析方法的专属性、精密度、重现性和稳定性均良好;10批复方板蓝根颗粒指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值均> 0.90,相似度良好。结论：所建立的HPLC指纹图谱能够表达复方板蓝根颗粒中多组分的整体特征,为复方板蓝根颗粒的质量控制提供了方法依据。     

檀香不同部位HPLC指纹图谱初步比较

目的:比较檀香不同部位HPLC指纹图谱,为檀香的综合利用提供科学依据。方法:定期采集檀香不同部位样品,按高效液相色谱法建立其指纹图谱,用指纹谱图相似度软件进行评价分析。结果:檀香叶、嫩枝、树干指纹图谱相似度分别为0.6372,0.9998,0.9978。结论:檀香叶指纹图谱相似度较嫩枝、树干低。     

广藿香不同部位HPLC指纹图谱的比较研究

目的：建立广藿香HPLC指纹图谱的分析方法，对广藿香及其茎、叶不同部位的指纹图谱进行比较，为广藿香药材内在质量评价积累数据。方法：色谱柱：Hypersil ODS；流动相：乙腈。0．05％磷酸（梯度洗脱）；检测波长：320nm；柱温：30℃；流速：1．0mL／min。结果：广藿香及其茎、叶均具有16个指纹特征峰，但茎、叶指纹特征峰相对含量有显著差异，叶所含特征峰组分含量高于茎。结论：方法准确可靠，重复性好，为广藿香药材质量控制提供了参考。     

基于指纹图谱与主成分分析相结合的复方虎杖方提取工艺研究

目的建立指纹图谱与主成分分析(PCA)相结合的提取工艺优化方法,并将其应用于复方虎杖方乙醇提取工艺优化。方法以复方虎杖方为模型药物,采用HPLC法建立指纹图谱,对共有峰峰面积进行PCA,以总因子得分为评价指标,采用U9(93×31)均匀设计法考察提取次数(X1)、乙醇用量(X2)、乙醇体积分数(X3)和提取时间(X4)对提取效果的影响,建立回归模型,确定最佳工艺参数。结果建立的数学模型能够较好地描述效应指标与各因素之间的关系(r=0.997),应用建立的方法优化得到复方虎杖方最适宜醇提工艺为6倍量90%乙醇提取3次,每次1 h。结论所建立的方法简便有效,适合复方虎杖方提取,可以为复方中药提取工艺优化提供参考。     

高效液相色谱指纹图谱在中药知母上的应用

目的:建立知母高效液相色谱指纹图谱.方法:利用高效液相色谱对7个产地的知母进行分析比较.色谱条件:色谱柱为Hypersil ODS C18柱(5 μm,150 mm×4.6 mm);流动相为水:甲醇(V:V=96:4);检测波长λ=270 nm;流速为1.0mL·min-1.结果:根据相对保留值α定性、相对峰面积Sr定量,5个色谱特征峰为10批样品共有.结论:本研究为中药样品的鉴定提供了较为全面的信息,能用于中药知母的质量控制.     

基于调脂抗氧化有效部位的降脂宁HPLC指纹图谱研究

目的:建立基于调脂抗氧化有效部位的降脂宁颗粒(山楂、制首乌、决明子和荷叶)HPLC指纹图谱.方法:HPLC方法采用Agilent Te-C18色谱柱,流动相为0.01%甲酸水溶液-乙腈.梯度洗脱模式,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm,参照物2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D葡萄糖苷,并对指纹峰进行归属.结果:降脂宁调脂抗氧化有效部位指纹图谱有29个共有色谱峰,其中峰1～4,8,9来自山楂;峰20～29来自决明子;峰5,6,11～13,15,17～19来自荷叶;峰7,10,14,16来自制首乌.同批次药材和不同批次药材制备的降脂宁调脂抗氧化有效部位指纹图谱相似度分别均在0.99和0.90以上.结论:建立基于调脂抗氧化有效部位的降脂宁HPLC指纹图谱是可行的,该方法准确,稳定,重复性好,能够以调脂抗氧化活性为基础,有效控制降脂宁质量.     

土茯苓药材HPLC指纹图谱研究

目的：采用反相高效液相色谱法（HPLC）,研究并建立土茯苓药材的指纹图谱。方法：采用YMC-Pack ODS-A（5μm,4.6mm×250 mm）色谱柱,乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱;流速0.8 ml/min;检测波长290nm。结果：方法学考察表明,本研究建立的分析方法有较好的重现性。不同来源土茯苓药材的指纹图谱相似度较好,土茯苓与其3种混淆品的指纹图谱有明显区别。结论：HPLC指纹图谱分析法可作为土茯苓药材的质量控制方法。     

山茱萸饮片的高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的 建立山茱萸饮片高效毛细管电泳指纹图谱分析方法.方法 应用未涂渍标准熔融石英毛细管(64.5 cm×75μm,有效长度56cm),以50mmol/L硼砂-40mmol/L十二烷基硫酸钠-5%乙腈(pH9.5)为缓冲液,检测波长240nm,运行电压10kV,柱温18℃;以马钱苷为参照物(IS),测定指纹图谱,并做聚类分析和相似度评价.结果 初步建立了以9个共有峰为特征指纹信息的山茱萸饮片高效毛细管电泳指纹图谱,且方法学考察符合规定的标准.结论 该法准确简便,可作为控制山茱萸饮片内在质量的有效手段.     

黄连HPLC数字化指纹图谱研究及7种生物碱含量测定

该文建立了峨眉地区道地药材黄连的HPLC数字化指纹图谱,并将其在全国不同主产区的黄连测定中进行了应用,同时测定黄连中7种季胺型生物碱的含量,为科学评价与有效控制黄连质量提供依据。采用Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-0.025mol·L^-1KH₂PO₄溶液(磷酸调pH 3.0)(40:60),内含SDS 1.7 g·L^-1,流速1.2 mL·min^-1,检测波长345 nm,柱温40 ℃。运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(国家药典委员会)进行分析,10批次峨眉产黄连样品得到的指纹图谱相似度均大于0.99,标定共有峰10个,并对其中8个色谱峰进行了归属。全国5个黄连主产区样品与峨眉产黄连进行相似度分析比较,整体相似度高。同时对黄连药材中groenlandicine,非洲防己碱,药根碱,表小檗碱,黄连碱,巴马汀,小檗碱7种主要生物碱进行了含量测定。该方法灵敏度高、专属性强,HPLC指纹图谱结合生物碱含量测定能全面反应其内在质量,为黄连的质量控制提供科学依据。     

二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群指纹图谱比较研究

目的：为探索类方方剂配伍物质基础变化特征，研究二妙丸类方(二妙丸、三妙丸、四妙丸及加味四妙丸)配伍物质基础的关联。方法：建立加味四妙丸抗湿热证痛风有效部位群HPLC指纹图谱，利用对照品确定指纹图谱共有峰成分、组方药有效部位色谱峰归属以及有效部位群共有峰的组方药有效部位来源，测定二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群指纹图谱，比较指纹图谱共有峰成分特征及配伍变化。结果：加味四妙丸有效部位群有60个共有峰，分别来源于组方药生物碱、黄酮、有机酸部位。基础方与类方间有效部位群指纹图谱共有峰在数目及相对峰面积比值方面呈现一定的变化规律。结论：二妙丸及其类方有共同的物质基础，从基础方到各类方，抗湿热证痛风物质基础的配伍变化具有相关性。     

3种市售中药复方制剂消炎利胆片的HPLC指纹图谱研究

 目的 建立3种市售中药复方制剂消炎利胆片的HPLC指纹图谱,并对多批次产品的质量进行初步评价。方法 采用C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-水（分别含体积分数0.1%的甲酸）为流动相进行梯度洗脱,流速1.00 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温25 ℃;建立消炎利胆片的HPLC指纹图谱,通过比对各组方中药提取物的HPLC图谱,确定消炎利胆片HPLC指纹图谱中主要色谱峰的组方中药来源;通过比对化学分离制得的对照品的保留时间,对部分主要色谱峰进行明确化学指认;利用中药指纹图谱相似度评价系统对3个厂家的24批市售产品进行相似度评价。结果 所建立的消炎利胆片指纹图谱具有较好的精密度、重现性和稳定性,在可检出的40个色谱峰中,31个色谱峰的组方中药来源得到明确,7个色谱峰得到化学指认。相同厂家不同批次市售消炎利胆片指纹图谱的相似度不低于0.954;3个厂家的24批市售消炎利胆片指纹图谱的相似度为0.845~0.987,然而,剪切图谱（脱水穿心莲内酯出峰前的指纹图谱,即0~69 min）的相似度仅为0.478~0.896。结论 所建立的HPLC指纹图谱表达了上述3种市售消炎利胆片中多组分的整体特征,为评价市售消炎利胆片的质量提供了可靠的实验数据。     

高效液相色谱法测定复方氢化可的松霜中氢化可的松的含量

目的:测定复方氢化可的松霜中氢化可的松的含量。方法:用高效液相色谱法,采用Shim-pack CLC-ODS(5μm,4.6×150 mm),以乙腈-水(50:50)为流动相,流速为1 ml／min,检查波长为240 nm,柱温为35℃。结果:氢化可的松在0.048 27~0.386 1 mg／ml内呈良好的线性关系(r=0.999 4),回收率为94.80％,RSD为1.57％。结论:高效液相色谱法在测定复方氢化可的松霜中氢化可的松的含量时灵敏、快速、准确。