白芍总苷对系统性红斑狼疮CD4+ T细胞ITGAL基因表达和启动子甲基化修饰的影响

目的: 探讨白芍总苷(total glucosides of peony, TGP)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD⁴⁺ T细胞甲基化敏感基因ITGAL(CD11a)表达及启动子甲基化修饰的影响。方法: 利用磁珠分选获得外周血CD⁴⁺ T细胞,用不同浓度TGP(0,62.5,312.5和1562.5 mg/L)处理SLE患者CD⁴⁺ T细胞,48 h后收集细胞。MTT法检测处理后CD⁴⁺ T细胞的活力。定量PCR检测ITGAL基因mRNA表达水平。流式细胞术检测CD⁴⁺ T细胞表面CD11a分子表达水平。亚硫酸盐测序法分析ITGAL基因启动子甲基化水平。结果: TGP处理48 h后,各浓度组CD⁴⁺ T细胞活力无明显差异。与对照组相比,高浓度组(1562.5 mg/L)ITGAL基因mRNA表达水平显著降低(P<0.01),CD⁴⁺ T细胞表面CD11a表达水平亦显著降低(P<0.01)。进一步DNA甲基化水平检测显示高浓度TGP处理组ITGAL基因启动子甲基化水平较对照组显著升高(P<0.01)。结论: TGP可通过升高ITGAL基因启动子甲基化水平降低SLE患者外周血CD⁴⁺ T细胞中CD11a表达水平,初步揭示了TGP抑制SLE自身免疫反应的分子机制。     

白芍总苷抑制小鼠T淋巴细胞体外增殖促进活化诱导细胞死亡

目的 研究白芍总苷（TGP）对小鼠T淋巴细胞体外增殖及活化诱导细胞死亡（AICD）的影响,并初探其免疫抑制机制。方 法 利用免疫磁珠分选技术,无菌分离小鼠脾脏T淋巴细胞,按照TGP溶液浓度（0、50、100、200 µg/mL）设为空白组、TGP低中高剂量组,anti-CD3/CD28刺激T淋巴细胞活化及增殖。流式细胞仪检测细胞早期活化标志、细胞活力及CFSE标记的T淋巴细胞增殖;RT-PCR检测Fas/FasL mRNA水平;流式细胞仪检测活化T淋巴细胞表面Fas/FasL蛋白表达量;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果（1）与空白组相比,TGP中高剂量组在用药48 h后活细胞数目显著减少,活细胞比例明显下降（P<0.001）;（2）TGP组给药处理48 h后,T淋巴细胞分裂代数及已分裂比例显著降低,且抑制作用具有药物浓度依赖性（P<0.001）;（3）TGP处理组T淋巴细胞24 h后Fas mRNA表达量显著上调,并伴随着T淋巴细胞表面Fas蛋白的表达上调及胞内Bcl-2表达下调（P<0.01）。结论 TGP显著抑制T淋巴细胞增殖,并可通过上调Fas、下调Bcl-2的表达促进活化诱导的T淋巴 细胞死亡（AICD）。     

白芍总苷辅助治疗SLE对患者外周血CD4＋CD25＋T细胞表达的影响

目的：探讨白芍总苷（TGP）辅助治疗系统性红斑狼疮（SLE）对患者外周血CD4＋CD25＋T细胞表达水平的影响。方法采用流式细胞术检测健康对照组、常规组、TGP组外周血CD4＋CD25＋T细胞比率。结果SLE患者CD4＋CD25＋T细胞表达率为（6．15±1．21）％,健康对照组CD4＋CD25＋T细胞表达率为（12．30±1．78）％。活动期SLE患者与健康对照组CD4＋CD25＋T细胞表达率比较,差异有统计学意义（t＝22．03,P＜0．05）;常规组治疗前后外周血CD4＋CD25＋T细胞的表达水平差异有统计学意义（t＝－12．30,P＜0．05）;TGP组治疗前后外周血CD4＋CD25＋T细胞的表达水平差异也有统计学意义（t＝－16．68,P＜0．05）。常规组外周血CD4＋CD25＋T细胞的表达水平为（9．34±1．37）％,TGP组外周血CD4＋CD25＋T细胞的表达水平为（11．49±1．14）％,两组差异有统计学意义（t＝－6．46,P＜0．05）。结论活动期SLE患者CD4＋CD25＋T细胞表达率水平显著低于健康对照组;SLE患者经过TGP辅助治疗后CD4＋CD25＋T细胞表达率显著提高。TGP治疗可能作用于CD4＋CD25＋T细胞。     

抗菌药物对淋巴细胞功能的影响

<正>在免疫系统中淋巴细胞执行特异性免疫,即效应功能表现为对靶细胞的杀伤作用。淋巴细胞包括B细胞和T细胞及其它淋巴细胞,B细胞分为产生分泌抗体的浆细胞和记忆细胞,T细胞分为调节细胞和效应细胞二个主要功能亚群。调节细胞中的辅助细胞(T_H)和抑制细胞(T_S)分别增强和抑制其它免疫细胞的反应活性,效应细胞介导迟发型变态反应(DTH)、移植排斥反应、肿瘤免疫和病毒细胞的杀伤等、T细胞还分泌许多细胞     

基于PI3K/HIF-1α通路探讨白芍总苷联合来氟米特对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞血管新生的影响

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)通路探讨白芍总苷(TGP)联合来氟米特(LF)对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)血管新生的影响.方法 将体外培养的HFLS-RA细胞分为空白组、LF组(10 mg/L LF)、TGP低剂量组(3 mg/L TGP)、TGP中剂量组...     

白芍总苷药理作用研究

综述近年来白芍总苷(TGP)在心血管、神经、内分泌代谢、消化、泌尿生殖、皮肤和骨骼系统病变等方面的药理研究,为治疗相关疾病提供依据.综括TGP治疗上述疾病的作用机制,仍以拮抗氧化应激反应和调整导致疾病产生及发展的炎症细胞因子及影响其相关的信号转导通路,以及调节相关的细胞凋亡等为主线.今后TGP研究层面,仍应从整体→组织...     

白芍总苷经活性氧-线粒体途径改善骨关节炎软骨细胞自噬性死亡

目的 探讨白芍总苷(TGP)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导小鼠关节软骨细胞(MACs)的保护作用及可能机制。方法 体外培养MACs细胞并通过甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定；CCK-8检测TGP对MACs细胞活性的影响，根据检测结果确定后续实验的TGP剂量范围；采用10 ng/mL的IL-1β构建MACs细胞OA模型，予以不同剂量TGP(10、20及50μmol/L)处理细胞48 h,分组为：空白组，模型组，低、中、高剂量TGP干预组，DCFH-DA荧光探针检测MACs细胞中ROS荧光强度；JC-1荧光探针观察MACs细胞线粒体电位变化；流式检测MACs细胞死亡率；RT-PCR检测Beclin 1、LC3、MMP-3和MMP-13基因表达水平。结果 与空白组细胞死亡率[(6.58±1.65)%]比较，模型组[(26.77±0.93)%]显著上升(P<0.05),TGP干预后，细胞死亡率显著下降；与空白组ROS荧光强度[(1.90±0.56)%]比较，模型组[(39.10±0.36)%]显著增强(P<0.05),应用TGP后ROS荧光强度显著下降(P<0.0...     

细胞毒性T细胞对免疫应答的抑制

能识别自己与非己的高等动物的免疫应答具特异性并能被调节。骨髓制造的B细胞能针对外来抗原产生抗体。T细胞由胸腺细胞产生,其功能之一是帮助B细胞对抗原的应答。Shinohara等在Nature杂志(336卷11月1日出版)481页上发表的文章中报道了他们对参与免疫系统调节的T细胞性质及其作用方式的研究结果。作者认为细胞毒性T细胞能杀伤感染的细胞或非己T淋巴细胞,也能杀伤抗原特异性B细胞,因而介导着抑制特异B细胞的免疫应答。识别自己与非己的能力是T细胞在胸腺中分化时被选择而介导的:那些与自身抗原产生高度亲和性反应的T细胞则被清除。在进入血     

白芍总苷对家兔慢性高脂血症的脂质调节及抗脂质过氧化作用

目的 观察白芍总苷(Total glucosides of paeong ，ICP)对家兔脂质调节及抗脂质过氧化作用。方法 将32只家兔随机分成4组：正常饲料对照组、高脂饲料对照组、20mg／kg TGP高脂饲料组、40mg／kg TGP高脂饲料组。在实验第24d去掉高脂饲料给普通饲料，第42d实验结束。结果 TGP能够调节血清脂质和丙二醛(MDA)的含量，降低总胆固醇与低密度脂蛋白胆固醇的比值，高剂量的TGP能升高血清高密度脂蛋白胆固醇的含量。结论 TGP对家兔慢性高脂血症有调节作用，能有效抑制脂质过氧化反应。     

类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞增殖特性的体外研究

探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）滑膜成纤维样细胞（fibroblast like synovial cells,FLS）体外培养时的增生特点,观察沙利度胺（thalidomide）、白芍总苷（total glucosides of peony,TGP）、艾拉莫德（iuratimod, T 614）在体外实验中对RA FLS细胞增殖分化特性的影响。方法:关节镜、关节活检针取RA患者滑膜组织或抽取膝关节积液分离滑膜细胞并培养和鉴定,MTT法和反转录 聚合酶链反应(RT PCR)法分别观察沙利度胺、TGP、T 614对FLS细胞存活分数（SF）的影响和RA FLS的c fos mRNA表达。结果: 体外培养传代的RA FLS为非恶性无限制增生。沙利度胺、TGP和T 614对RA FLS的细胞染色和表面标记等特征无明显影响,但对RA FLS的SF值均有不同程度的抑制（P<0.05）;3种制剂中沙利度胺对FLS的SF抑制率最强,T 614对FLS的作用最小（P<0.05）。生理剂量的沙利度胺和高剂量TGP干预时RA组药物浓度与FLS的SF值呈负相关（P<0.05）。RA FLS的c fos mRNA表达率高,加入沙利度胺、TGP和T 614共孵育3?d后c fos的表达率下降, 以沙利度胺作用最明显（P<0.05）。结论:在无炎症因子刺激时,体外培养的RA FLS呈良性增生方式。在实验剂量下沙利度胺、TGP和T 614均通过抑制c fos的表达、降低FLS增殖能力等不同途径发挥对RA滑膜细胞的免疫调节作用。     

白芍总苷对豚鼠降低血脂的实验研究

目的 :观察白芍总苷 (totalglucosidesofpaeong ,TGP)对豚鼠降低血脂的实验研究。方法 :将 32只豚鼠随机分成 4组 :正常饲料组、高脂饲料对照组、30mg/kgTGP高脂饲料组、6 0mg/kgTGP高脂饲料对照组。在实验2 4d去掉高脂饲料 ,给普通饲料 ,第 4 2d实验结束。结果 :TGP能调节血清脂质和丙二醛 (MDA)的含量 ,降低总胆固醇与低密度脂蛋白胆固醇比值 ,高剂量的TGP能升高血清高密度脂蛋白胆固醇比值 ,高剂量的TGP能升高血清高密度脂蛋白胆固醇的含量。结论 :TGP能调节豚鼠的高脂血症 ,能有效抑制脂质过氧化作用。     

白芍总苷对豚鼠降低血脂的实验研究

目的：观察白芍总苷(total glucosides of paeong，TGP)对豚鼠降低血脂的实验研究。方法：将32只豚鼠随机分成4组：正常饲料组、高脂饲料对照组、30mg／kgTGP高脂饲料组、60rag／kgTGP高脂饲料对照组。在实验24d去掉高脂饲料，给普通饲料，第42d实验结束。结果：TGP能调节血清脂质和丙二醛(MDA)的含量，降低总胆固醇与低密度脂蛋白胆固醇比值，高剂量的TGP能升高血清高密度脂蛋白胆固醇比值，高剂量的TGP能升高血清高密度脂蛋白胆固醇的含量。结论：TGP能调节豚鼠的高脂血症，能有效抑制脂质过氧化作用。     

Th9细胞在炎症性疾病及肿瘤中作用的研究进展

辅助性T细胞(helper T cell,Th)9细胞是近年新发现的一种CD4+T细胞亚群,特异性分泌白细胞介素9(IL-9)。Th9细胞的诱导分化受到多种细胞因子与转录因子的影响,且与其他T细胞亚群间存在相互影响。IL-4和转化生长因子β是诱导其分化的关键细胞因子,PU.1和干扰素调节因子4为调节其分化的重要转录因子。Th9细胞在炎症性疾病与肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用,其生物学效应具有双向性,研究Th9细胞的分化发育及其在相关疾病中的具体作用,将为疾病的诊断治疗等提供新的线索。     

抗原特异性抑制性T细胞因子的功能和分子结构

已知抑制性T细胞(Ts)在由各种抗原引起的体液与细胞介导免疫应答的调节中起到决定性的作用。许多实验系统已发现来自抑制性T细胞的因子(TsF)有抗原特异性,而且也有H-2复合体基因编码的抗原决定簇。但由于只获得有限数量的活性因子,因而抑制性T细胞及其因子所发挥的抑制作用的机制还不完全了解。为此目的,最近引进的免疫学细胞杂交瘤技术对由抑制性T细胞及其因子所介导的免     

白芍总甙免疫调节作用的研究

研究白芍总甙(TGP)的免疫调节作用,并在整体与细胞水平上初步探讨其免疫调节作用的机制。TGP(5 mg/kg~1p×5～7d)对Cy诱导的小鼠DTH反     

新生儿脐血单个核细胞ICOS与转录因子表达的观察

新生鼠及人脐血的研究均表明,新生儿T细胞有向Th2细胞发育的潜能.可诱导共刺激因子(inducible co-stimulate factor,ICOS)是近年来发现表达在活化T淋巴细胞表面的一种新型膜分子,转录因子T-bet、GATA-3和Foxp3分别是Th1、Th2和CD4 CD25 调节性T细胞的特异性转录因子,它们均可影响T细胞分化的上游调节.     

树突状细胞体外激活的CTL杀伤效应

目的 :研究树突状细胞 (dendriticcell,DC)激活的肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的特异性杀伤效应。方法 :从人外周血中分离出外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcell,PBMC) ,在GM -CSF和IL - 4的作用下培养 7天诱导出DC ,然后PBMC或DC为刺激细胞在体外诱导出HBsAg特异性CTL ;在调节好一定浓度靶细胞 (人肝癌细胞系HepG2及人肺腺癌细胞系A5 4 9)中加入效应细胞 (DC或PBMC) ,4 8h后瑞氏染色计数残存细胞数 ,计算杀伤率。结果 :DC激活的CTL对HepG2 杀伤率为 71.6 % ,而PBMC(APC ,非T细胞 )激活的CTL杀伤率为 4 3.8% ,两者有显著性差异 ,P <0 .0 1。此外 ,DC诱导的肝癌细胞抗原特异性CTL对肺癌细胞的杀伤率仅为 2 3%。结论 :DC诱导的CTL比PBMC高效 ,而且具有较高的特异性。     

HIV-1感染者全基因多肽特异性T细胞免疫应答的初步研究

目的 探讨HIV-1感染者人群分泌γ干扰素(IFN-γ)的HIV-1特异性T细胞反应的特征.方法 对HIV-1感染者进行6个月和12个月随访,采用ELISPOT试验检测HIV-1特异性T细胞反应,采用流式细胞术计数CD4+ T细胞.结果 6个月随访,CD4+T细胞计数与病毒载量呈负相关,具有统计学意义;分泌IFN-γ的HIV-1特异性T细胞反应最强的是Nef肽库;高强度特异性T细胞反应频度最高的是Nef(72%)肽库.12个月随访,CD4T细胞计数与病毒载量呈负相关,具有统计学意义;分泌IFN-γ的HIV-1特异性T细胞反应最强的是Nef肽库;高强度特异性T细胞反应频度最高的是Nef(74.1%)肽库.结论 HIV-1 B亚型的所有蛋白均可以诱导产生分泌IFN-γ的HIV-1特异性T细胞反应.6个月和12个月两次随访的研究结果均表明,针对Nef、Gag表位的HIV-1特异性T细胞反应最强、频度最高.     

Th1/Th2细胞与自身免疫性甲状腺疾病

正1 Th细胞概述T淋巴细胞简称T细胞,可分为CD4+T细胞和CD8+T细胞两大群。长期以来,人们将CD4+T细胞按照细胞分化和功能特征分为辅助性T细胞(T help cells,Th)和调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)[1],CD4+辅助性T细胞(Th)在特异性免疫应答中发挥重要的调节作用,人们根据其产生细胞因子的不同,把活化的抗原特异性CD4+T细胞主要分为两个亚群:     

经癌胚抗原重组痘苗病毒转染的树突状细胞体外诱导特异性T细胞免疫

目的研究人癌胚抗原重组痘苗病毒(rV-CEA)转染外周血树突状细胞(DC)后能否在体外诱导CEA特异性细胞毒性T淋巴细胞免疫。方法将rV-CEA转染外周血单核细胞来源的DC后用于激发同源的T细胞,检测其对T细胞的增殖作用以及对CEA分泌性肿瘤细胞的杀伤活性,并与未经rV-CEA转染的DC激发的T细胞进行比较。结果经rV-CEA转染的DC激活的T细胞对CEA分泌性肿瘤细胞具特异性杀伤作用。结论rV-CEA转染的DC可以诱导CEA特异性T细胞活性。