HPLC法同时测定葛根芩连片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量

目的:测定葛根芩连片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为PhenomenexC18柱,流动相为甲醇-0.1mol·L-1磷酸二氢钾溶液(45:55),检测波长为264nm。结果:盐酸小檗碱在10.05mg/l～40.20mg/l质量浓度内、黄芩苷在25.20mg/l～100.80mg/l内呈良好的线性关系。两者的平均回收率分别为100.1%和100.5%。结论本方法可用于葛根芩连片的质量控制。     

芩连片中连翘苷的含量测定

目的：研究芩连片中连翘苷的含量测定方法。方法：采用薄层扫描法进行测定。结果：连翘苷点样量在0．30μg～1．80μg之间线性关系良好，相关系数r=0．9993。回收率为98．06％，RSD为2．12％。结论：本法简便、准确，可用于本制剂中连翘的测定和质量控制。     

HPLC法测定芩夏止哮颗粒中黄芩苷含量

建立了用HPLC测定芩夏止哮颗粒中黄芩苷含量的方法 :色谱柱为YWG C1 8( 4 6mm× 2 50mm ;1 0 μm) ;流动相 :MeOH∶H2 O∶THF∶H3PO4( 2 0 0∶30 0∶50∶0 1 65) ;黄芩苷保留时间约 9min ;黄芩苷平均回收率为 1 0 0 65% ;RSD :2 0 3%。     

RP-HPLC测定葛根芩连汤有效部位中黄芩苷和葛根素的含量

目的　建立葛根芩连汤有效部位中黄芩苷和葛根素的RP HPLC含量测定方法。方法　采用YWG C18色谱柱 (2 5 0mm× 4 6mm ,10 μm) ,黄芩苷含量测定流动相为甲醇 -水 -磷酸 (47∶ 5 3∶0 2 ) ,流速 :1 0mL/min ,检测波长 :2 80nm ;葛根素含量测定流动相为甲醇 -水 (2 5∶ 75 ) ,流速 :1 0mL/min ,检测波长 :2 5 0nm。结果　黄芩苷平均回收率为 98 61% ,RSD =2 77% (n =5 ) ;葛根素平均回收率为 10 2 4 % ,RSD =2 70 % (n =5 )。结论　所建立的方法简便、准确 ,可作为葛根芩连汤有效部位的质量控制方法     

葛根芩连汤不同配伍对黄芩苷含量的影响

目的　建立 RP- HPL C法测定葛根芩连汤各配伍组合中的黄芩苷的含量测定方法 ,研究配伍对黄芩苷含量的影响。方法　采用 L8(2 7)正交设计及统计方法 (统计软件 SPSS10 .0 ) ,以 HPL C法测定黄芩苷的含量。结果　葛根、黄连对方中黄芩苷含量的影响差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ,甘草对黄芩苷含量的影响差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,葛根、黄连、甘草对黄芩苷含量的影响不存在两两交互作用。凡是黄连与黄芩的配伍组合皆有沉淀产生 ,并且沉淀中含有较多的黄芩苷。结论　葛根芩连汤配伍中葛根、黄连能降低黄芩苷的含量 ,甘草没有增加黄芩苷的溶出的作用。 p H值的改变可能是含黄连和黄芩配伍煎液产生沉淀的主要原因之一。     

HPLC法测葛根芩连微丸中黄芩苷含量

目的:测定葛根芩连微丸中的黄芩苷的含量。方法:HPLC色谱条件:C-18色谱柱(250×4 mm 10μm);柱温15℃;流速1.0 m l/m in;检测波长280 nm;流动相甲醇-磷酸-四氢呋喃(45:55:6)(磷酸为pH=2.7的磷酸水溶液)。结果:理论板数以黄芩苷计不低于4 500,平均回收率为99.81%,RSD=4.3%,标准曲线y=57 431x-31 331,r=0.999 9。结论:该方法能准确地测定黄芩的含量,可用于质量控制。     

反相高效液相色谱法测定葛根芩连片中盐酸小檗碱的含量

目的 建立RP-HPLC法测定葛根芩连片中盐酸小檗碱含量的方法.方法 采用反相高效液相色谱法,用AgilentZORBAX SB-C18拄(4.6×250mm,5μm),以乙腈-0.05mol/L三乙胺溶液(用磷酸调节pH至3.0)(25:75)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为347nm,柱温为室温.结果...     

HPLC法测定芩桑化痰颗粒中黄芩苷的含量

目的:建立HPLC测定芩桑化痰颗粒中黄芩苷含量的方法。方法:色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C_(18)(250mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸水溶液(47∶53);流速:1 mL/min;检测波长:280 nm。结果:黄芩苷在0.184μg~1.840μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.42%,RSD为0.02%。结论:该法简便、准确、重复性好,可用于芩桑化痰颗粒的质量控制。     

HPLC测定黛芩化痰丸中黄芩苷的含量

目的 建立HPLC测定黛芩化痰丸中黄芩苷的方法，作为该制剂的质控标准。方法 Kromasil C18色谱柱，甲醇：水：磷酸（45：55：0．3）为流动相，检测波长280nm，流速1.0mL/min，黄芩苷为对照品。结果 对照品标准曲线在0.0498-0.6225mg/mL范围内线性良好，r=0.9999,加样回收率为99．3％－104．1％，回收率、精密度和重现性实验的RSD分别为1．71％、1．20％和1．15％。结论 本法用于测定黛芩化痰丸中的黄芩苷，方法简便，结果准确，重现性好。     

芩连片中连翘苷的含量测定

目的 :研究芩连片中连翘苷的含量测定方法。方法 :采用薄层扫描法进行测定。结果 :连翘苷点样量在0 .30 μg～ 1 .80 μg之间线性关系良好 ,相关系数r =0 .9993。回收率为 98.0 6 % ,RSD为 2 .1 2 %。 结论 :本法简便、准确 ,可用于本制剂中连翘的测定和质量控制     

大观霉素酶联免疫吸附检测方法的建立

目的建立大观霉素直接竞争酶联免疫吸附（ELISA）分析方法。方法通过大观霉素与载体蛋白偶联,制备免疫原和检测抗原,用杂交瘤技术制备单克隆抗体（mAb）,鉴定mAb的特异性,并用于竞争ELISA检测。结果获得3株能稳定分泌抗大观霉素的单克隆抗体杂交瘤细胞株,大观霉素竞争ELISA检测的下限为1ng／mL。结论抗大观霉素的mAb具有抗原结合特异性,可用于大观霉素竞争ELISA免疫学检测。     

双抗体夹心酶联免疫法检测不同样品中的蓖麻毒素

目的 应用酶联免疫吸附分析方法（ELISA）检测待测样品中的蓖麻毒素。方法 用蛋白 G亲和层析柱纯化蓖麻毒素单克隆抗体（4C13,3D74,5E4和5H6）,以3D74及辣根过氧化物酶(HRP)标记的4C13建立的双抗体夹心ELISA对含有蓖麻毒素的多种样品进行检测。结果 抗蓖麻毒素的单克隆抗体经亲和层析纯化后具有较高的蛋白纯度,应用HRP标记的4C13与3D74建立双抗体夹心ELISA,对于溶解于磷酸缓冲液中的蓖麻毒素标准品的检测灵敏度可达2.5 μg·L^-1;对于土壤、面粉、牛奶、咸菜汁、雪碧、可乐和腐乳汁中的蓖麻毒素样品检测的灵敏度为2.5～5.0 μg·L^-1;与磷酸缓冲液样品相比较,含有相同浓度蓖麻毒素的小鼠和人血清样品ELISA的阳性结果明显减弱。结论 双抗体夹心酶联免疫法能够有效用于含有蓖麻毒素样品的检测分析。     

TP-ELISA诊断梅毒螺旋体感染的可行性评价

目的使用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法诊断梅毒螺旋体感染的可行性.方法用目前国内最常用的诊断梅毒螺旋体感染的TRUST试剂及ELISA试剂检测63例梅毒患者和22例自身免疫性疾病患者的血清样本,同时与梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)的检测结果进行比较,从而得到各试剂的假阴性率和假阳性率.结果对63份阳性和22份阴性样本的检测中,所用TRUST试剂的假阴性率和假阳性率分别为28.57%、18.18%;TP-ELISA试剂的假阴性率和假阳性率分别为0%和0%.结论使用灵敏特异的ELISA方法诊断梅毒螺旋体感染是可行的.     

酶联免疫吸附试验检测对大疱性皮肤病诊断的评价

目的：评价酶联免疫吸附试验（ELISA）用于大疱性皮肤病血清学诊断的临床应用及意义。方法用 ELISA 法检测34例天疱疮患者、32例大疱性类天疱疮患者和33例非大疱性皮肤病患者血清,分别检测血清中的 Dsg1、Dsg3和 BP180的表达。结果 ELISA法检测大疱性皮肤病抗体的特异度为93．94％,敏感度为87．88％。结论 ELISA法对大疱性疾病具有诊断价值,在疾病的分型上有重要意义。     

人血清中青霉素抗体的酶联免疫吸附测定

目的: 建立检测青霉素抗体的ELISA法,并探讨其临床意义。方法: 以氨苄西林用SPDP法与兔血清白蛋白交联,用此交联物为包被抗原,HRP-抗人IgG为酶标抗体,建立检测青霉素抗体的ELISA法,并对部分临床标本进行青霉素抗体检测。结果: 建立的方法其批内、批间变异系数分别为6.8%、8.4%。氨苄西林-兔白蛋白交联物免疫家兔获得兔抗氨苄西林的抗体,以此抗体作阻断试验,抑制HRP-抗人IgG的显色。临床标本检测结果表明,不同疾病患者青霉素抗体的阳性率不同。结论: ELISA可用于临床对青霉素抗体的检测,具有较好的特异性、敏感性和重复性。     

检测血清ATG浓度ELISA方法的建立

目的建立检测人血清中兔抗人胸腺免疫球蛋白(ATG)的检查方法并进行初步临床应用。方法用鼠抗兔IgG单克隆抗体做固相,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG多克隆抗体做二抗,建立双抗体夹心ELISA方法。并检测使用ATG的异基因造血干细胞移植患者血中ATG的浓度。结果ATG浓度最低检测值为31.25ng/ml,在40～1000ng/ml范围内呈线性关系,组内和组间的变异系数分别为7.91%和5.22%。用该法测定7例干细胞移植预处理方案中使用ATG患者的浓度,ATG随时间在体内浓度逐渐下降,但预处理后90天仍能测得ATG,表明ATG在体内作用时间比较久,可能会影响移植后免疫功能重建。结论双抗体夹心法具有灵敏性高、特异性强的特点,可用于人血清中ATG水平的定量测定。干细胞移植预处理方案中使用ATG后体内浓度进行性降低,ATG将会比较长时间在体内起作用。     

Effect of Puerarin on the Pharmacokinetics of Baicalin in Gegen Qinlian Decoction (葛根芩连汤) in Mice

Objective: To study the pharmacokinetics of puerarin(PUE) in Gegen Qinlian Decoction(葛根芩连汤, GQD), and the effects of PUE dosage variations on the pharmacokinetics of baicalin(BAL) in mice. Methods: GQD is composed of the concentrated granules of four Chinese herbs. Three dosages with different levels of PUE, including GQD, GQD co-administered with PUE, and GQD co-administration with two times the amount of PUE, were used to research the pharmacokinetics of PUE and BAL in mice. The indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay(ic ELISA) methods based on an anti PUE-monoclonal antibody(MAb) and BAL-MAb were employed to determine the concentration of PUE and BAL in mice blood. Results: After the co-administration of GQD with PUE, the area under the curves(AUC0-14 h) of PUE increased 2.8 times compared with GQD. At the dose of GQD co-administration at two times that of PUE, the AUC0-14 h of PUE was almost equal to that of GQD co-administration of PUE, showing non-linear pharmacokinetics. The AUC0-48 h of BAL showed a good dose-related increase of PUE(r=0.993) in the range from 100 to 300 mg/kg, indicating that PUE dramatically affects the absorption of BAL in mice. There was no significant difference in the other pharmacokinetic parameters, such as the first time of maximum concentration(Tmax), the second Tmax, or the mean residence time. Conclusions: The ic ELISA methods were successfully applied to pharmacokinetic studies of PUE and BAL in GQD in mice. The dosage variability of PUE of the main ingredient in GQD affects its own pharmacokinetic characteristics and the absorption characteristics of BAL.