生后发育过程中睾丸神经生长因子基因的表达

为了通过观察小鼠生后发育过程中睾丸组织神经生长因子 ( NGF)基因表达的变化藉以探讨 NGF在睾丸发育、精子发生过程中的生物学作用 ,本研究采用 RT-PCR方法 ,半定量分析生后 1d、1周、2周、4周及 8周小鼠睾丸组织中 NGF m RNA的表达变化 ;以地高辛标记的βNGF c DNA为探针 ,采用原位杂交法观察 NGF m RNA在幼年及成年小鼠睾丸组织中的分布。 RT-PCR结果显示 ,小鼠生后 1d、1周、2周、4周、8周睾丸组织中均有 NGF m RNA的表达 ,以生后 1周时的表达量为最高。原位杂交结果表明 ,幼年鼠 NGF m RNA杂交信号位于睾丸的间质之中 ,而成年鼠 NGF m RNA杂交信号则主要位于睾丸生精小管管壁和管腔中。结果提示 :NGF m RNA在小鼠出生时即有表达 ,其表达量及在睾丸组织中的分布 ,随小鼠的发育而有变化     

小鼠下颌下腺NGF基因表达的性别差异研究

实验应用地高辛标记人β神经生长因子ＤＮＡ探针原位杂交组化技术，研究小鼠下颌下腺神经生长因子（ＮＧＦ）表达的性别差异。实验结果显示，雄性和雌性小鼠下颌下腺ＮＧＦ基因表达的部位基本相同，原位杂交反应产物都选择性分布于纹状管和颗粒曲管上皮细胞中，但雄性小鼠原位杂交信号强，雌性小鼠杂交信号较弱，原位杂交阳性小管在雄性小鼠以粗大的颗粒曲管为主，在雌性小鼠以细小的纹状管为主，颗粒曲管较少，而且在单位面积中雄性     

Nbn基因神经特异性敲除生后小鼠海马发育的形态学变化

目的:观察Nbn基因神经特异性敲除 (Nbn-CNS-del) 小鼠生后海马的形态学变化,探讨Nbn基因在小鼠海马发育中的作用.方法:应用H-E染色、免疫组织化学技术结合体视学方法对生后(P) 7、 14、 21d的Nbn-CNS-del小鼠海马进行系统观察和定量分析,以非基因敲除 (Nbn-CNS-ctr) 仔鼠为对照组.结果:P7～21 d,与对照组相比,Nbn-CNS-del小鼠海马发育迟缓;CA区分子层、锥体细胞层及多形层的截面积均减小;NeuN及神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 阳性细胞面数密度也均明显减少.结论:Nbn-CNS-del小鼠海马CA区发育迟缓,Nbn基因可能是海马发育中的重要基因.     

小鼠肝生后发育的形态学

目的:探讨小鼠肝生后发育的形态学变化。方法:H-E染色观察小鼠生后肝的形态学变化、Giemsa染色观察造血细胞的变化、免疫组织化学检测血小板内皮细胞黏附分子(CD31)和基质细胞衍生因子(SDF-1)在肝中的表达及变化。结果:肝小叶生后1周开始出现,2周末分化完成。肝板间可见圆形或椭圆形的巨核细胞,胞质嗜酸性、多核;血窦内幼稚血细胞成簇,形态似小淋巴细胞,核呈深蓝色。肝内造血细胞数量自P1~P7逐渐增加,P7达到顶峰,与P1、P5、P13、P15相比差异具有统计学意义,P15几乎消失。巨核细胞在P1数量最多,随发育逐渐减少,至P15消失;棕黄色SDF-1颗粒分布于肝细胞细胞质,P1~P7平均光密度值(AOD值)逐渐降低,与P14~P28相比差异有统计学意义。CD31阳性信号位于血窦内皮细胞胞质,P1~P14AOD值逐渐增大,P28最高,与P1~P7相比明显增高。结论:小鼠肝生后2周内还有造血能力,肝小叶和血窦则在2周后发育完善。     

小鼠松果体生后生长发育的形态变化

目的：观察小鼠松果体形态结构的年龄变化特征。材料和方法：取幼年、青年、老年期小鼠各１１只，用计算机图像分析和电镱观察。结果：（１）松果体组织内细胞数以幼年期最多，青年期以后细胞逐渐减少、细胞间质逐渐增多；（２）松果体细胞以青年期最大，高尔基器、线粒体、内质网等以幼年期最丰富，至老年期细胞变小、细胞器减少；（３）松果体细胞核随年龄增加而逐渐变小，异染色质增多。结论：小鼠松果体幼年时生长发育最旺盛、代     

雄激素对发育中小鼠下颌下腺神经生长因子合成的影响

光镜下观察了发育中小鼠下颌下腺内神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的免疫反应定位及雄激素对它的影响.在生后发育阶段NGF阳性染色定位于颗粒纡曲导管(granular convoluted tubule,GCT)细胞,并且随着该导管发育的进展而增加;已经证明的成年小鼠下颌下腺NGF表达的性差异在性成熟前已可见到.给发育中小鼠雄性激素促进下颌下腺中GCT的发育和NGF的合成.这些结果表明在小鼠下颌下腺发育过程中雄激素可能对NGF合成起过重要作用.     

实验性铅中毒对睾丸神经生长因子基因表达的影响

目的 探讨实验性铅中毒对睾丸组织神经生长因子（ＮＧＦ）基因表达的影响。方法 小鼠以０．５％醋酸铅自由饮服８周,测定血铅和睾丸铅含量。采用原位杂交法（以地高辛标记ＮＦＧ ＤＮＡ为探针）和ＲＴ－ＰＣＲ方法,观察睾丸组织ＮＧＦ ｍＲＮＡ含量的变化。结果 铅染毒小鼠血铅和睾丸组织铅含量明显升高;原位杂交结果显示,铅染毒小鼠睾丸杂交信号明显减少,ＲＴ－ＰＣＲ结果表明,铅染毒小鼠睾丸组织ＮＧＦ ｍＲＮＡ表达量     

小鼠雄性生殖细胞生后发育中的程序性死亡

为了观察小鼠睾丸生后发育过程中生殖细胞自发死亡的方式与规律。用生后０、１、４、７、１０、１３、１８和５０ｄＡ／Ｊ系不鼠，一侧睾丸用２．５％戊二醛，另一侧睾丸用４％多聚甲醛固定１８ｈ后，分别用树脂或石蜡包埋，年鉴备超薄和连续石蜡切片，进行电镜观察和ＴＵＮＥＬ染色光镜观察。电镜观察显示，在出生当日，可见个别呈死特征的变性生殖细胞，核质溶解，但无染色质聚集。核周间隙扩大，线粒体和内质网等细胞器肿胀，有空     

小鼠下颌下腺内ncNOS的表达

目的对小鼠下颌下腺内ncNOS进行定性和定位研究。方法取8只昆明种小鼠下颌下腺,进行HE染色和免疫组织化学染色。结果小鼠下颌下腺纹状管及小叶间导管上皮细胞呈ncNOS免疫反应阳性,而腺泡细胞则为阳性。结论小鼠下颌下腺导管上皮中有ncNOS的表达,提示下颌下腺具有复杂的分泌功能。     

实验性铅中毒对大鼠海马神经生长因子基因表达的影响

目的观察实验性铅中毒对大鼠海马神经生长因子(NGF)基因表达的影响,探讨铅致学习记忆损害的分子毒理学机制。方法逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和原位杂交法。结果正常大鼠海马组织可表达NGF mRNA,铅染毒后海马NGF mRNA含量显著下降。海马组织中神经生长因子mRNA表达量与铅染毒时间呈负相关。结论铅可使海马组织神经生长因子基因表达下降。     

人骨髓巨核细胞分化发育过程中神经生长因子基因表达

实验通过原位分子杂交技术,检测人骨髓巨核细胞分化发育过程中神经生长因子（ＮＧＦ）基因表达情况。结果显示β神经生长因子ＤＮＡ探针与其互补的ｍＲＮＡ杂交后应信号存在于各级不同发育的巨核细胞胞浆中。原巨核数量很少,较难发现,杂交后反应阳性的胞浆很少,呈线状。幼巨核细胞阳性胸浆较少,杂交反应产物分布较为均匀。颗粒型巨核细胞胞浆丰富,杂交反应产物深浅不一,常见较为细小的阳性颗粒,成就型巨核细胞体积很大,胞浆     

孕期四氯二苯对二噁英处理对子鼠颌下腺表皮生长因子和表皮生长因子受体的影响

目的 研究孕期四氯二苯对二噁英(TCDD)处理对子鼠颌下腺表皮生长因子(EGF)和表皮生长因子受体(EGFR)的影响。方法 孕15d大鼠给予TCDD(5μg／kg)灌胃1次，采用免疫组织化学方法，对不同发育阶段的子鼠颌下腺进行了观察。结果 在PND32，PND49d，TCDD组颌下腺EGF和EGFR的免疫反应阳性产物比对照组丰富，有显著性差异。结论 孕期TCDD暴露促进了青春期和青春前期子鼠颌下腺EGF的生成和EGFR的表达。     

NGF在db/db自发性糖尿病小鼠颌下腺的表达

目的　观察转基因糖尿病小鼠颌下腺的形态学改变以及神经生长因子 (NGF)在颌下腺表达的变化。　方法　引进日本C5 7BL ksj db m表型正常隐性基因小鼠 ,近亲交配 ,其纯合子后代 ,即为db db(单基因遗传自然发病型 )糖尿病小鼠。取 3、4、6、8、10月龄db db糖尿病小鼠及相应月龄的db m正常小鼠颌下腺。HE染色及SP免疫组织化学染色后行图像分析 ,统计NGF阳性表达的细胞数。　结果　随着糖尿病发展 ,颌下腺组织萎缩 ,细胞缩小 ,形态不规则 ,排列不整齐。不同月龄糖尿病小鼠NGF阳性细胞明显低于相应对照组 (P <0 0 1) ,且逐渐减少 ,呈下降趋势。　结论　NGF阳性细胞数的减少说明颌下腺颗粒曲管细胞合成和分泌NGF功能降低 ,而NGF缺乏与糖尿病性神经病变的发生与发展密切相关。     

水通道蛋白1在生后小鼠精囊腺与前列腺发育过程中的表达与分布

目的 探讨水通道蛋白1(AQP1)在雄性小鼠出生后不同发育阶段精囊腺和前列腺的表达与分布.方法 应用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色方法,检测出生后15d、35d、70d 小鼠精囊腺、前列腺AQP1 mRNA、蛋白表达水平及细胞定位.结果 RT-PCR与免疫印迹结果均显示,出生后70d小鼠精囊腺、前列腺AQP1 mRNA及蛋白表达量较出生后15d显著增强(P<0.05);免疫组织化学染色显示,AQP1蛋白仅表达于出生后15d、35d小鼠精囊腺平滑肌细胞、前列腺腺泡上皮细胞基膜及间质细胞,而此时期精囊腺上皮细胞AQP1蛋白表达呈阴性;出生后70d,AQP1蛋白强烈表达于精囊腺和前列腺上皮细胞.结论 AQP1 mRNA及蛋白在雄性小鼠精囊腺、前列腺的表达与分布随年龄增长而改变,此变化可能与雄性附属性腺发育相关.     

瘦素及其受体在大鼠下颌下腺的定位研究

目的研究大鼠下颌下腺内瘦素和瘦素受体的表达及意义。方法取SD大鼠下颌下腺,分别进行HE染色和瘦素与瘦素受体的免疫组织化学染色。结果大鼠下颌下腺颗粒曲管和纹状管上皮细胞呈瘦素及其受体免疫反应阳性,其中颗粒曲管为强阳性反应,而纹状管为中等阳性反应,腺泡细胞为阴性。结论大鼠下颌下腺导管上皮细胞有瘦素及瘦素受体表达,提示下颌下腺也可能参与机体能量代谢与平衡的调节。     

CNTF基因在大鼠脊髓中的表达及生后发育的变化

目的 观察CNTF基因在大鼠脊髓中的表达以及生后发育过程中的变化。方法 以地高辛标记（dig）－CNTF cDNA为探针,采用原位杂交法,观察CNTF mRNA在大鼠脊髓中的分布;采用TR－PCR法,半定量分析大鼠生后发育过程中,脊髓CNTF mRNA表达水平的变化。结果 CNTF mRNA原位杂交阳性信号存在于正常大鼠脊髓白质的腹索、外侧索周边的部分胶质细胞中;灰质中未能发现阳性杂交信号。RT－PCR结果显示,大鼠生后1d脊髓细胞中即可见CNTF mRNA表达,但表达量较低;出生15d表达量迅速增加;30d时最高;60d时的表达量有下降的趋势。结论 大鼠脊髓白质的部分胶质细胞可表达CNTF mRNA;大鼠出生后1d CNTF mRNA即有表达,之后随脊髓的发育而呈动态变化的趋势。     

降钙素基因相关肽和神经生长因子对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨外源性降钙素基因相关肽（CGRP）和神经生长因子（NGF）对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达的影响。方法原位杂交和免疫组织化学结合显微图像分析方法。结果假手术组大鼠纹皮质c-jun mRNA表达弱；缺血组较假手术组c-jun mRNA表达显著强（P〈0．01）；CGRP组和NGF组c-jun mRNA表达弱于缺血组（P〈0．05）；CGRP和NGF合用组c-jun mRNA表达明显弱于缺血组（P〈0．01），分别弱于CGRP组和NGF组（P〈0．05）。假手术组大鼠纹皮质未见c-Jun蛋白表达；缺血组较假手术组c-Jun蛋白表达明显强（P〈0．01），缺血后再灌注3h强，1d、3d时弱；CGRP组和NGF组c-Jun蛋白表达较缺血组弱（P〈0．05）；CGRP和NGF合用组较缺血组c-Jun蛋白表达明显弱（P〈0．01），分别弱于CGRP组和NGF组（P〈0．05）；CGRP和NGF合用组缺血后再灌注3h时强，1d、3d时弱。结论CGRP和NGF分别抑制全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达，联合应用显著抑制全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达，两者对保护缺血神经元可能有协同作用。