内皮素－1在支气管哮喘发病机制中的作用

本文应用特异性放射免疫分析法测定了２０名健康儿童及４３例支气管哮喘患儿血浆内皮素－１（ＥＴ－１）水平，用过敏性哮喘豚鼠进行验证。结果显示：轻中度哮喘患儿血浆ＥＴ－１与健康儿童组比较差异无显著性，而重症哮喘患儿血浆ＥＴ－１则明显增高，与健康对照组比较差异显著（Ｐ＜０．００１）；过敏性哮喘豚鼠血浆ＥＴ－１水平无明显变化，而其支气管肺泡灌洗液中却明显升高，与正常对照组有非常显著的差异（Ｐ＜０．０１），糖皮质激素及ＥＴ－１抗血清可降低ＥＴ－１水平，减轻哮喘发作。提示ＥＴ－１参与了支气管哮喘的发病机制，糖皮质激素和ＥＴ－１抗血清具有治疗作用     

一氧化氮、内皮素和循环内皮细胞在支气管哮喘中的作用研究

目的：探讨一氧化氮、内皮素和循环内皮细胞在支气管哮喘中的作用。方法：哮喘患儿６１例,４０名健康儿童为对照,测定其血浆ＮＯ－２／ＮＯ－３、ＥＴ、ｃＧＭＰ和循环内皮细胞（ＣＥＣ）水平,用过敏性哮喘豚鼠进行验证。结果：哮喘患儿血浆ＮＯ－２／ＮＯ－３、ｃＧＭＰ和ＣＥＣ水平均明显升高（Ｐ＜０．０５～００１）,其中重度哮喘患儿血浆ＮＯ－２／ＮＯ－３和ＣＥＣ水平较轻中度哮喘患儿更高（Ｐ均＜００１）;重度哮喘患儿血浆ＥＴ水平明显升高（Ｐ＜００１）;哮喘患儿血浆ＮＯ－２／ＮＯ－３与ｃＧＭＰ和ＣＥＣ水平呈显著正相关（Ｐ＜００５～００１）。过敏性哮喘豚鼠ＢＡＬＦ中ＮＯ－２／ＮＯ－３、ＥＴ及ｃＧＭＰ水平均明显升高（Ｐ均＜００１）;血浆中ｃＧＭＰ和ＣＥＣ水平亦升高（Ｐ均＜００５）;糖皮质激素可降低ＮＯ－２／ＮＯ－３、ＥＴ、ｃＧＭＰ和ＣＥＣ水平。结论：哮喘时ＮＯ－２／ＮＯ－３、ＥＴ和ＣＥＣ产生过多,它们在哮喘发病机制中占有重要地位,而且血浆ＥＴ和ＣＥＣ水平可能与哮喘病情相关。     

吸入地塞米松对哮喘豚鼠内皮素-1的影响

建立豚鼠哮喘模型,检测肺活组织、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）、血浆内皮素－１（ＥＴ－１）水平有地塞米松干预后的变化以探讨ＥＴ－１在支气管的作用。结果显示哮喘组肺活组织、ＢＡＬＦ、血浆ＥＴ－１显著升高：吸入地塞米松后ＥＴ－１均显著下降。提示：ＥＴ－１可能参与支气管哮喘的发生和 ,吸入糖皮质激素可以抑制体内ＥＴ－１的生成和释放,这可能是糖皮质激素治疗支气管哮喘的重要机制之一。     

卵蛋白致敏哮喘豚鼠淋巴细胞白介素—2活性增强及其机制

建立了卵蛋白致敏的哮喘豚鼠动物模型，并对其淋巴细胞白介素－２诱生能力的白介素－２ｍＲＮＡ的表达进行观察。结果显示致敏哮喘豚鼠腹腔灌洗细胞的支气管肺泡灌洗细胞主要是酸性粒细胞和淋巴细胞，致敏哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液和腹腔灌洗液的淋巴细胞白介素－２分泌水平均明显高于生理盐水对照组支气管肺泡灌洗液和腹腔灌洗液的淋巴细胞白介素－２分泌水平。     

哮喘豚鼠气道上皮细胞原癌基因c-fos活化与ET-1释放相关性的研究

目的：探讨哮喘豚鼠发作时气道上皮细胞原癌基因c-fos的活化与上皮细胞释放内皮素－1（ET－1）的相关性。方法：将豚鼠随机分为哮喘组，地塞米松组和正常对照组。以卵蛋白致敏建立哮喘动物组模型；再给予肌注地塞米松（0．5mg/kg)治疗则为地塞米松组。利用Dot blot与Northern blot及免疫组化染色法，研究c-fos在气道上皮细胞中的表达；利用放射免疫法测定各组支气管－肺泡灌洗液（BALF）中ET－1的含量。结果：正常对照组有低水平的c-fos基因表达和ET－1合成。哮喘组豚鼠在激发30min后，气道上皮细胞c-fos mRNA表达及Fos蛋白染色阳性颗粒都达到高峰，持续2h左右。同时，BALF中ET－1的含量在30min 后也达到高峰，持续2－3h。地塞米松组的c-fos mRNA及蛋白表达水平均明显低于哮喘组（P＜0．01），但高于正常对照组；并且该组BALF中ET－1的含量也低于哮喘组（P＜0．01）。结论：c-fos基因活化与ET－1释放在哮喘豚鼠发病中都具有重要作用，两者密切相关。ET－1的释放可能受控于c-fos基因的活化。     

哮喘发作时支气管肺泡灌洗液中一氧化氮、内皮素-1和肿瘤坏死因子含量的变化

<正>本文旨在通过哮喘豚鼠模型,观察哮喘发作时,支气管肺泡灌洗液内一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）和TNF水平的变化,以期从免疫学角度探讨哮喘发病机理。     

雷公藤甲素对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞IL-5等受体表达的影响

目的 观察哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中不同密度嗜酸细胞（Eos)上白介素－5受体α（IL－5Rα）、IL－3Rα、粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子受体α（GM－CSFRα）及共同β链受体（βcR)mRNA表达及雷公藤甲素（TP）对它们的影响，探讨TP促进哮喘Eos凋亡的机制。方法 健康豚鼠18只随机分为正常组、哮喘组、TP组。以卵蛋白致敏激发制作豚鼠哮喘模型，分离BALF中的低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos)，TUNEL法检测细胞凋亡，原位杂交检测各受体mRNA表达，RT－PCR法检测Eos IL-5Rα、IL－3Rα相对含量。结果 哮喘豚鼠Eos凋亡明显减少，而细胞数明显高于正常组。用TP 24h后不同密度Eos数量明显低于哮喘组（P＜0．01），以HEos下降为明显（P＜0．05）；TP组Eos凋亡明显高于哮喘组（P＜0．01）。哮喘豚鼠Eos表达α受体mRNA明显低于正常组，而βcR表达明显增高；TP处理组Eos各α受体mRNA表达均明显增加，βcR表达明显下降。RT－PCR检测显示，TP组IL－5Rα、IL－3RαmRNA显著增加。结论 哮喘Eos存在凋亡抑制；TP可通过促进IL－5、IL－3、GMPCSF受体各自α链表达，抑制这3种受体的共同β链表达，减少其生物学功能，促进Eos凋亡。     

地塞米松对哮喘豚鼠肺组织嗜酸细胞bcl-2表达的影响及意义

目的 研究哮喘豚鼠肺内不同密度嗜酸细胞（Eos）凋亡与bcl-2 mRNA表达的关系及地塞米松（DM）对它们的影响。方法 应用DM干预哮喘豚鼠,分离哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中不同密度Eos,以TUNEL法检测细胞凋亡,以原位杂交检测bcl-2 mRNA表达。结果 哮喘组Eos凋亡率较正常组明显降低（P〈0．01）,应用DM后均显著增加（P〈0．01）。正常豚鼠Eos可检测到bcl-2 mRNA表达,不同密度Eos表达无显著差异（P〉0．05）。哮喘组bcl-2mRNA明显增加,应用DM后其表达明显减少。结论凋亡调节的缺失是导致组织及血中Eos增多的重要原因,bcl-2参预了哮喘Eos凋亡的调节。DM可促进哮喘肺组织中的Eos细胞凋亡,bcl-2可能是DM调节Eos细胞凋亡的重要途径之一。     

过敏性哮喘豚鼠血小板激活因子的变化及川芎嗪的影响

本研究采用生物定量测定方法观察了豚鼠实验性哮喘时血浆ｌｙｓｏ－ＰＡＦ和肺泡灌洗（ＢＡＬＦ）中ＰＡＦ的变化。结果显示：致敏级豚鼠哮喘发作时血浆ｌｙｓｏ－ＰＡＦ水平显著高于对照组（Ｐ〈０．０１），ＢＡＬＦ中ＰＡＦ水平也明显高于对照组（Ｐ〈０．０５），同时伴有血浆及ＢＡＬＦ中ＴＸＢ２、ＴＸＢ２／６－酮－ＰＧＦ１α水平的升高（Ｐ〈０．０１）。致敏＋川芎嗪组豚鼠血浆ｌｙｓｏ－ＰＡＦ明显低于致敏组豚鼠（Ｐ〈０     

哮喘豚鼠内皮素、心钠素含量的变化及心钠素对内皮素含量的影响

目的:探讨内皮素-1(ET-1)在哮喘发病中的可能作用及心钠素(ANF)对ET-1水平的影响。方法:采用放免法测定各组豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)和血浆ET-1、ANF、cGMP含量。结果:哮喘组豚鼠血浆及BALF中ET-1、ANF、cGMP均显著高于对照组;哮喘组豚鼠血浆中ANF与ET-1含量呈显著负相关(r=-0.638,P<0.05);BALF中ET-1与ANF含量呈高度负相关(r=-0.921,P<0.01)。哮喘组豚鼠血浆中ANF与cGMP含量呈显著正相关(r=0.848,P<0.01),BALF中ANF与cGMP含量呈显著正相关(r=0.831,P<0.01)。哮喘+重组大鼠ANF(rANF)组豚鼠停止输注rANF后30min,血浆及BALF中ET-1水平均明显低于哮喘组。cGMP水平显著高于哮喘组。结论:ET-1在哮喘的发病中可能有重要作用,ANF抑制ET-1合成及分泌。     

Failure of L-NAME to cause inhibition of nitric oxide synthesis: Role of inducible nitric oxide synthase

We addressed the hypothesis that administration of nitric oxide synthase inhibitor, N^G-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) does not result in a sustained suppression of nitric oxide (NO) synthesis, because of a compensatory expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS). L-NAME was administered in the drinking water (0.1–1.0 mg/ml) for 7 days to guinea pigs and rats. Nitric oxide synthesis was assessed by [1] ex vivo formation of nitrite in blood vessels and intestine [2] tissue levels of cGMP [3] iNOS gene expression by RT-PCR [4] NADPH diaphorase staining [5] direct assessment of NO release in tissue explants using a microelectrode/electrochemical detection system. Chronic L-NAME administration elevated intestinal cGMP and nitrite levels in guinea pigs (p<0.05). In rats, intestinal nitrite levels were comparable in control and L-NAME treatment groups, whereas direct assessment of NO release defined a marked increase in the L-NAME group. Chronic L-NAME resulted in an induction of iNOS gene expression in rats and guinea pigs and novel sites of NADPH diaphorase staining in the intestine. We conclude that iNOS expression is responsible for a compensatory increase or normalization of NO synthesis during sustained administration of L-NAME.accepted by G. Letts     

大鼠低纤维连接蛋白血症时循环内皮细胞变化的研究

用静脉注射明胶的方法复制大鼠低纤维连接蛋白血症模型，结果发现，低Ｆｎ血症大鼠循环内皮细胞明显多于对照组，且与血浆Ｆｎ减少呈正相关。低Ｆｎ血症时，ＣＥＣ表面的Ｆｎ免疫荧光明显减弱，主动脉壁管腔面内皮Ｆｎ免疫荧光也明显减弱。作者提出，血浆Ｆｎ减少引起内皮细胞表面Ｆｎ减少，使内皮细胞间的链链作用和伸展作用削弱，从而引起ＣＥＣ在形态上的皱缩、折叠并成为ＣＥＣ增加的一个重要原因。     

组胺受体拮抗剂可防治哮喘豚鼠气道重塑和酸碱平衡紊乱

目的:探讨组胺受体拮抗剂对哮喘豚鼠气道重塑和酸碱平衡紊乱的防治作用。方法:将豚鼠分为正常对照组、哮喘模型组、哮喘模型延续组、组胺组、组胺受体拮抗剂组。用高效液相色谱法检测血清组胺浓度；生化分析仪测血清Na+、Cl-浓度；血气分析仪测血pH、PaO2、PaCO2、AB、SB；图像分析系统测定气道黏膜层、平滑肌层厚度。结果:（1）哮喘模型组血清组胺浓度、气道壁黏膜层和平滑肌层厚度均明显高于正常对照组 （P<0.01）；哮喘模型延续组明显高于哮喘模型组（P<0.01）；组胺组明显高于哮喘模型延续组（P<0.01）；而组胺受体拮抗剂组低于哮喘模型延续组（P<0.05，P<0.01）；（2）哮喘模型组的PaO2低于正常对照组（P<0.01）；哮喘模型延续组的PaO2、pH、AB、SB低于、PaCO2高于哮喘模型组（P<0.01）；组胺组PaO2、pH、AB、SB低于、PaCO2高于哮喘模型延续组（P<0.01）；而组胺受体拮抗剂组PaO2、pH、AB、SB高于哮喘模型延续组（P<0.01），PaCO2则低于哮喘模型延续组（P<0.01）。示豚鼠哮喘时存在气道重塑和血清组胺浓度升高以及代谢性酸中毒与呼吸性酸中毒，外源性组胺可加重这些变化，组胺受体拮抗剂可缓解之。结论:组胺在哮喘气道重塑中起介导作用，组胺受体拮抗剂对防治哮喘气道重塑及酸碱平衡紊乱有一定作用。     

糖尿病视网膜病变患者血浆Hcy、CEC和ET水平的检测分析

目的:分析糖尿病视网膜病变患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)、外周血循环内皮细胞(CEC)和血浆内皮素(ET)水平及其相互关系。方法:将80例2型糖尿病(T2DM)患者分为2组:无糖尿病视网膜病变(NDR)组50例,糖尿病视网膜病变(DR)组30例,以我院健康体检正常者30例为对照(NC)组。分别测定Hcy、CEC、ET水平。结果:T2DM患者Hcy、CEC和ET水平均明显高于对照组(P<0.01);DR组Hcy、CEC、ET明显高于NDR组(P<0.01)。DR组血浆CEC计数和ET浓度呈正相关(r=0.839,P<0.05),Hcy浓度与CEC计数呈正相关(r=0.615,P<0.05),Hcy与ET浓度亦呈正相关(r=0.642,P<0.05)。结论:T2DM患者血浆Hcy、CEC、ET水平升高与DR有密切关系,血浆Hcy升高及内皮损伤可能在糖尿病患者视网膜病变的发生和发展中起重要作用。     

肺动脉高压大鼠一氧化氮及过氧化氢依赖的可溶性鸟苷酸环化酶通路的变化

目的：观察低O2高CO2对血浆一氧化氮（NO）、肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)活性以及cGMP含量的变化，探讨NO-sGC和H2O2-sGC通路于肺动脉高压中的作用。 方法： 复制低O2高CO2 1、2、4周组及对照组大鼠模型。测定平均肺动脉压（mPAP）。比色法测定血浆一氧化氮（NO）、肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性，酶动力学分析基础及过氧化氢（H2O2）及硝普钠（SNP）激活的肺组织sGC酶活性，［125I］-放射免疫法检测肺组织cGMP含量。 结果： 低O2高CO2 1、2、4周组mPAP均明显高于对照组（均P<0.01）；血浆NO、肺组织SOD、CAT活性、基础sGC活性、过氧化氢（H2O2）及硝普钠（SNP）激活的sGC活性和肺组织cGMP含量均显著低于对照组（分别P<0.05, P<0.01）。 结论： 低O2高CO2抑制NO-sGC和H2O2-sGC通路参与肺动脉高压的形成与发展。     

雷公藤抑制哮喘豚鼠模型IL-5、GM-CSF 表达以及核因子-κB的作用

目的 探讨雷公藤对哮喘豚鼠模型IL－5、GM－CSF表达的影响及其机制。方法 采用卵蛋白（OA）致敏复制哮喘豚鼠模型,用原位杂交（ISH）就雷公藤甲素（TP）对其肺组织和外周血单个核细胞（PBMC）IL－5、GM－CSF mRNA表达的影响进行检测。并通过凝胶电泳迁移试验（EMSA）检测TP对伴刀豆蛋白（ConA)或佛波脂（PMA）刺激的人T细胞核因子－κB（NF-κB）的DNA结合活性的影响。结果 哮喘豚鼠肺组织和PBMC IL－5、GM－CSF mRNA表达显著高于正常组（P＜0．01）和TP处理组（P＜0．05或0．01）。ConA或PMA刺激可使T细胞NF－κB的DNA结合活性增强,活性增强的NF－κB为多克隆抗体P65和P50的异源二聚体,TP可以降低该NF－κB的DNA结合活性。结论 雷公藤通过抑制NF－κB的DNA结合活性,进而抑制IL－5、GM－CSF mRNA的转录,可能是其治疗哮喘的机制之一。     

哮喘儿童发病与血液一氧化氮、肿瘤坏死因子变化的研究

目的 研究哮喘儿童发病与血液一氧化氮、肿瘤坏死因子变化。方法 选择2018年1月~2019年1月在我院诊治的哮喘儿童70例作为研究对象,依据病情分为缓解组和发作组,各35例,另选取同期在我院在体检健康儿童35例作为对照组。分别检测各组血液一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子水平,并分析NO、肿瘤坏死因子与哮喘儿童发病的关系。结果 发作组NO水平为（46.67±18.92）μmol/L、肿瘤坏死因子水平为（198.77±42.29）ng/L,均高于缓解组的（32.41±14.22）μmol/L、（192.42±37.83）ng/L和对照组（29.54±14.34）μmol/L、（164.51±31.11）ng/L,差异有统计学意义（P＜0.05）;缓解组NO、肿瘤坏死因子水平高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;哮喘组肿瘤坏死因子水平与NO水平呈正相关（r=0.36、0.48,P＜0.05）。结论 NO、肿瘤坏死因子参与哮喘发作期气道炎症的形成,肿瘤坏死因子水平与NO水平密切相关,肿瘤坏死因子可作为哮喘缓解期患儿炎症持续的重要指标,具有重要的临床研究意义。     

补肾益气活血方对宫内生长迟缓胎儿一氧化氮及脂质过氧化水平的影响

探讨补肾益气活血方对胎儿宫内生长迟缓（ＩＵＧＲ）胎盘微循环障碍的影响。方法：应用ＮＡＤＰＨ一黄递酶组织化学方法检测胎盘组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性,采用镇铜镉还原法及硫代巴比妥酸比色法（ＴＢＡ法）测定了新生儿脐血血浆亚硝酸盐／硝酸盐（ＮＯ２－／ＮＯ３－）和丙二醛（ＭＤＡ）浓度。结果：ＩＵＧＲ孕妇胎盘组织ＮＯＳ活性较正常足月妊娠明显下降,新生儿脐血ＮＯ２－／ＮＯ３－低于正常新生儿（<０．０１）,而ＭＤＡ水平高于正常（Ｐ<０．０１）,中药治疗后与正常对照组差异无显著性（Ｐ均＞０．０５）,相关性分析表明ＮＯ２－／ＮＯ３－与ＭＤＡ呈明显负相关（ｒ＝－０．６１２４,Ｐ<０．０５）。结论：脂质过氧化可能是引起ＩＵＧＲ胎盘微循环障碍的中介因子之一,补肾益气活血方促进胎儿宫内生长发育与其抗自由基损伤,增强胎盘组织一氧化氮（ＮＯ）合成和分泌有关。