肝癌组织SOD、PCNA免疫组化定位观察

目的：探讨肝细胞癌与超氧化物歧化酶（SOD）及增殖细胞核抗原（PCNA）的关系。方法：对23例发性肝细胞性肝癌组织进行SOD及PCNA免疫组织化学研究（SP法）。结果：肝癌细胞的SOD标记阳性率和阳性程度高于癌旁肝组织及正常肝组织（P＜0．05）；PCNA标记阳性率和阳性程度明显高于癌旁肝组织及正常肝组织（P＜0．01），并且随癌细胞分化程度的降低而增强（P＜0．05）。结论 降低肝癌细胞中SOD的活性是抑制肝癌细胞生长的有效方法。     

突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性研究

目的：探讨突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性。方法：随机选择41例肝细胞肝癌患者的癌和癌旁肝组织标本，SP法检测其p53蛋白表达，分析突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性。结果．p53在癌和癌旁肝组织中阳性表达率分别为43．9％和6．67％，两者比较，差异显著（P〈0．01）；p53蛋白阳性表达率，Ⅲ-Ⅳ级肝癌明显高于Ⅰ～Ⅱ级肝癌，发生转移（血道或淋巴道转移）肝癌明显高于未发生转移（血道或淋巴道转移）肝癌，两者之间比较，差异有显著性意义（P〈0．05）；但p53蛋白阳性表达率与肝癌组织大小和其是否有包膜无关（P〉0．05）。结论：突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移密切相关，但与肝癌组织大小和包膜形成无关。     

突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性研究

目的:探讨突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性.方法:随机选择41例肝细胞肝癌患者的癌和癌旁肝组织标本,SP法检测其p53蛋白表达,分析突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性. 结果:p53在癌和癌旁肝组织中阳性表达率分别为43.9%和6.67%, 两者比较,差异显著(P＜0.01);p53蛋白阳性表达率,Ⅲ～Ⅳ级肝癌明显高于Ⅰ～Ⅱ级肝癌,发生转移(血道或淋巴道转移)肝癌明显高于未发生转移(血道或淋巴道转移)肝癌,两者之间比较,差异有显著性意义(P＜0.05);但p53蛋白阳性表达率与肝癌组织大小和其是否有包膜无关(P＞0.05).结论: 突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移密切相关, 但与肝癌组织大小和包膜形成无关.     

肝细胞肝癌和慢性肝病P53蛋白表达与乙型肝炎病毒感染的关系

目的：探讨肝细胞肝癌和慢性肝病P53蛋白表达与乙型肝炎病毒（HBV）感染的关系。方法：对慢性肝炎、肝硬化、癌旁肝硬化、肝细胞肝癌和正常肝组织共98例用免疫组化方法检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎核心抗原（HBcAg）和P53蛋白，用原位分子杂交方法检测HBV DNA。结果：慢性肝炎HBsAg阳性率为61.9%（13／21），HBcAg42.9%(9/21)，HBV DNA75.0%（12／16）；肝硬化HBsAg64.0%（16／25），HBcAg36.0%（9／25），HBV DNA83.3%（15／18）；癌旁肝硬化HBsAg72.7%（16／22），HBcAg61.1%（11／18），HBV DNA85.7%（12／14）；肝细胞肝癌HBsAg45.2%（14／31），HBcAg50.0%(14/28)，HBV DNA64.3%（9／14）。P53蛋白只在肝细胞肝癌组表达（27.9%,12/43)，其他组均不表达。结论：P53蛋白表达于肝细胞肝癌相对较晚的演进阶段，P53蛋白表达阳性率与HBV感染无相关性。     

肝细胞癌中PTEN、p73蛋白表达及临床意义

[目的]研究肝细胞癌中PTEN、p73蛋白的表达及相互关系,探讨它们在肝细胞癌的发生发展中的生物学意义.[方法]应用Elivision免疫组化方法检测53例肝细胞癌及癌旁肝组织中PTEN、p73蛋白表达.[结果]53例肝细胞癌组织中PTEN蛋白表达的阳性率(56.6%)明显低于癌旁肝组织(96.2%)(x2=20.94,P＜0.01),p73蛋白表达的阳性率(54.7%)高于癌旁肝组织(5.7%)(x2=26.33,P＜0.01).PTEN蛋白表达与肿瘤大小、TNM分期、伴肝硬化无相关性(P＞0.05),与组织分化程度、有无侵袭性显著相关(P＜0.01).p73蛋白表达与肿瘤大小、组织分化程度、TNM分期、伴肝硬化无相关性(P＞0.05),与肝细胞癌有无侵袭性显著相关(P＜0.05).PTEN蛋白表达与p73蛋白表达无相关性.[结论]PTEN、p73蛋白在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用.联合检测PTEN、p73蛋白对判断肝细胞癌预后有参考价值.     

吲哚胺2，3 双加氧酶在肝癌组织的表达及其临床意义

目的: 探讨吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3dioxygenase，IDO)在原发性肝癌细胞、癌旁肝细胞及肿瘤浸润淋巴细胞中的表达及其临床意义。方法：选择经临床确诊的21例原发性肝癌患者的手术切除和（或）肝穿刺所取肝癌组织及癌旁组织标本，通过免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织IDO的表达, 并分析其与临床病理特征的关系。结果：IDO在原发性肝癌细胞与肿瘤浸润淋巴细胞的表达水平相对较低，在癌旁肝硬变细胞中表达明显增高（P<0.01）。IDO表达强度与患者的年龄、性别、TNM分期无关（P＞0.05）；与患者大体病理分型有一定的相关性，浸润型IDO表达强度较块状型明显增高（P<0.05）；有血管浸润及癌栓形成患者IDO也呈高表达状态（P<0.05）；IDO的表达还与病理组织学分化情况相关，低分化肿瘤组织IDO的表达强度明显增高（P<0.05）。结论：IDO的表达与肝细胞癌恶性有一定的相关，故IDO拟可以作肝癌预后差的一个参考指标。     

乳腺癌及乳腺良性病变的流式细胞术检测对比分析

目的：探究乳腺癌与癌旁组织、乳腺增生症（乳增症）及正常乳腺组织的异位体率、细胞增殖活性（SPF）和p53、bcl-2表达与乳腺癌的发生、发展的关系。方法：用流式细胞术（FCM）对38例乳腺癌、33例癌旁组织、20例乳增症和19例正常乳腺组织，进行DNA倍体和SPF及bcl-2和p53的表达阳性细胞率检测。结果：癌组织与癌旁组织、乳增症及正常组织三组间异倍体阳性率及DNA指数（DI）各有显著性差异（P＜0.01)；癌组织与癌旁组织、乳增症及正常组织间SPF各有显著性差异（P＜0.01)，癌旁组织与正常组织间有显著性差异（P＜0.01)；癌组织与癌旁组织、乳增症各组间bcl-2表达无显著性差异（P＞0.05)，仅癌组织与正常组织间有显著性差异（P＜0.01)；癌组织与癌旁组织、乳增症各组间bcl-2表达无显著性差异（P＞0.05)，仅癌组织与正常组织间有显著性差异（P＜0.01)；癌组织与癌旁组织、乳增症及正常三组间P53表达各有显著性差异（P＜0.01)；DI分别与SPF和P53显著相关（P＜0.01)，SPF和P53显著相关（P＜0.01)。结论：P53和bcl-2与乳腺癌的发生有一定关系；异倍体率与P53可以起到肿瘤标志物的作用；FCM可以作为病理诊断的补充；SPF与异倍体率联合分析乳腺良、恶性病变的分子生物学行为更有意义；尚不足以证明乳增症为癌前期病变。     

p53和p21WAF1蛋白在肝细胞肝癌中表达的意义

 【摘要】　目的　探讨p53和p21WAF1蛋白在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及其意义。方法　应用免疫组织化学SP法检测41例HCC及相应30例癌旁肝组织中p53和p21WAF1蛋白的表达。结果　p53和p21WAF1蛋白在HCC中阳性表达率分别为43.9 ％和75.6 ％，明显高于癌旁组织，差异有统计学意义（P＜0.01）。HCC中p53蛋白表达与p21WAF1蛋白表达无明显相关性（P＞0.05）。p53蛋白表达在不同组织学分级、有无肝内或门静脉转移之间差异有统计学意义，而p21WAF1蛋白表达在不同临床病理特征间差异无统计学意义。结论　p53和p21WAF1蛋白高表达均在HCC发生、发展中起作用，但两者间并无相关性。p21WAF1的诱导存在着不依赖p53的途径。     

肝细胞癌临床病理学特征与p53蛋白表达的关系

应用免疫组织化学技术检测29例肝细胞癌（肝癌）和23例肝硬化标本中突变型p53蛋白的表达，并探讨后者与肝癌临床病理学特征之间的关系。结果：肝癌突变型p53蛋白表达阳性率为70％（20／29），癌旁组织阳性率为60％（18／29），肝硬化组织阳性率为30％（7／23），有血管侵犯的12例肝癌变变型p53蛋白表达均为阳性，而无血管侵犯的17例中仅8例为阳性（P＜0．05）；突变型p53蛋白阳性组血清甲胎蛋白（AFP）明显高于阴性组（8370±4764ng／ml比98．7±64．3ng／ml，P＜0．05）。提示：P53蛋白表达在肝硬化时即发生了异常；p53蛋白异常可能是AFP基因被激活的原因之一；p53蛋白异常有利于肝癌向门静脉转移。     

肿瘤相关粘蛋白 MUC1 和抑癌基因 p53 在原发性肝癌中的表达

目的：通过测定MUC1和p53在肝脏不同组织中的表达差异，探讨MUC1和p53在肿瘤诊断和免疫治疗中的意义。方法：采用免疫组化方法检测35例肝癌（28例肝细胞癌，7例胆管细胞癌），8例肝硬化，8例肝血管瘤和10例正常肝组织中MUC1和p53的表达。结果：MUC1和p53基因均阳性表达于肝癌组织，它们在肝癌组织中的阳性表达率明显高于其它肝脏组织（P〈0．01），MUC1主要表达于细胞膜，其表达与肝癌的病理分型和组织学分化无相关性（P〉0．05），但肝癌伴有门静脉癌栓组与不伴有门静脉癌栓组之间MUC1表达率具有显著差异性（P〈0．05）；p53表达于细胞核，在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肝癌组织中的表达呈现递增趋势。结论：p53与肝癌的发生发展密切相关，MUC1在肝癌组织中的表达与分布特点可以作为肝癌诊断、判断预后的指标，同时，MUC1作为一种靶抗原，为今后的肝癌免疫治疗提供新的线索。     

肿瘤相关粘蛋白MUC1和抑癌基因p53在原发性肝癌中的表达

目的：通过测定MUC1和p53在肝脏不同组织中的表达差异，探讨MUC1和p53在肿瘤诊断和免疫治疗中的意义。方法：采用免疫组化方法检测35例肝癌（28例肝细胞癌，7例胆管细胞癌），8例肝硬化，8例肝血管瘤和10例正常肝组织中MUC1和p53的表达。结果：MUC1和p53基因均阳性表达于肝癌组织，它们在肝癌组织中的阳性表达率明显高于其它肝脏组织（P〈0．01），MUC1主要表达于细胞膜，其表达与肝癌的病理分型和组织学分化无相关性（P〉0．05），但肝癌伴有门静脉癌栓组与不伴有门静脉癌栓组之间MUC1表达率具有显著差异性（P〈0．05）；p53表达于细胞核，在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肝癌组织中的表达呈现递增趋势。结论：p53与肝癌的发生发展密切相关，MUC1在肝癌组织中的表达与分布特点可以作为肝癌诊断、判断预后的指标，同时，MUC1作为一种靶抗原，为今后的肝癌免疫治疗提供新的线索。     

吲哚胺2,3-双加氧酶在肝癌组织的表达及其临床意义

目的：探讨吲哚胺2，3-双加氧酶（indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO）在原发性肝癌细胞、癌旁肝细胞及肿瘤浸润淋巴细胞中的表达及其临床意义。方法：选择经临床确诊的21例原发性肝癌患者的手术切除和（或）肝穿刺所取肝癌组织及癌旁组织标本，通过免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织IDO的表达，并分析其与临床病理特征的关系。结果：IDO在原发性肝癌细胞与肿瘤浸润淋巴细胞的表达水平相对较低，在癌旁肝硬变细胞中表达明显增高（P〈0．01）。IDO表达强度与患者的年龄、性别、TNM分期无关（P〉0．05）；与患者大体病理分型有一定的相关性，浸润型IDO表达强度较块状型明显增高（P〈0．05）；有血管浸润及癌栓形成患者IDO也呈高表达状态（P〈0．05）；IDO的表达还与病理组织学分化情况相关，低分化肿瘤组织IDO的表达强度明显增高（P〈0．05）。结论：IDO的表达与肝细胞癌恶性有一定的相关，故IDO拟可以作肝癌预后差的一个参考指标。     

Pokemon和p53蛋白在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨Pokemon和p53蛋白在人肝细胞癌组织中的表达,分析其与肝细胞癌转移复发的关系。方法：应用免疫组织化学法检测60例肝细胞癌组织和癌旁组织中Pokemon和p53蛋白的表达情况。结果：60例肝细胞癌组织中Pokemon和p53表达率显著高于癌旁组织（P〈0.05）。Pokemon的表达与临床分期、肿瘤直径、肿瘤分化程度密切相关（P〈0.05）;p53的表达与脉管癌栓、术后复发、肝外转移及肿瘤分化程度密切相关（P〈0.05）。Pokemon和p53的表达呈显著正相关（γ=-0.275,P=0.033）。结论：Pokemon和p53蛋白的高表达可能在肝细胞癌的发生及进展中起着重要作用。     

miR-122在肝癌细胞中的表达及其与细胞周期调控的关系

目的 探讨miR-122在肝癌细胞中的表达及其与细胞周期调控间的关系。方法 应用荧光定量PCR和原位杂交法分别检测50例肝癌及相应癌旁组织中miR-122的表达水平;用流式细胞术检测肝癌细胞的细胞周期;分析miR-122的表达水平与细胞周期的关系。结果 50例肝癌组织中miR-122的相对表达量为癌旁正常组织的（17.74±9.20）％。其中,40例高中分化肝癌组织中miR-122的相对表达量为癌旁组织的（19.89±8.80）％,而在10例低分化肝癌中仅为癌旁组织的（9.16±4.77）％。肝癌组织中miR-122的阳性表达率为30.0％（15／50）,癌旁组织为80.0％（40／50）,组间差异有统计学意义（P＜0.05）。与癌旁组织相比,肝癌细胞G1／G0期比例降低（P＜0.05）,S期比例增加;与miR-122阳性表达组比较,miR-122阴性表达组的肝癌细胞S期比例增加,而G1／G0期细胞比例降低（P＜0.05）。结论 miR-122在肝癌组织中低表达,且表达水平随着肿瘤分化程度的降低而下调,这种改变促进肝癌细胞的分裂和增殖。     

微小RNA 933靶向调控BDNF表达及对肝癌细胞迁移侵袭的影响#br#

目的探讨微小RNA 933（miR 933）对脑源性神经营养因子（BDNF）的靶向调控作用及肝癌细胞迁移侵袭的影响。 方法收集本院2017年1月至2017年12月经手术切除的30例肝癌组织及对应癌旁组织，采用实时定量PCR（QPCR）检测以上组织和肝癌细胞（Huh7、HepG2和SK Hep 1）中的miR 933水平；采用脂质体法向SK Hep 1细胞分别转染miR 933模拟物（过表达组）和miR 933阴性对照（对照组），采用QPCR法检测转染48 h后各组的miR 933水平以评价转染效率；分别采用Transwell和划痕实验检测各组的侵袭和迁移情况；QPCR和Western blotting分别检测各组的BDNF mRNA和蛋白水平；双荧光素酶报告基因实验验证miR 933与BDNF之间靶向关系和结合位点。 结果肝癌组织中的miR 933水平为0351±0026，低于癌旁组织的1124±0054，差异有统计学意义（P＜005）；Huh7、HepG2和SK Hep 1细胞系中miR 933水平分别为0751±0062、0453±0057和0017±0006，均低于健康肝细胞系L02，差异有统计学意义（P＜005）；过表达组转染48 h后SK Hep 1细胞的miR 933水平为3197±0354，高于对照组的1019±0079，差异有统计学意义（P＜005）。过表达组的愈合率和穿膜细胞数分别为（244±39）％和（576±68）个，均低于对照组的（625±47）％和（1026±95）个（P＜005）。过表达组的BDNF mRNA和蛋白水平均低于对照组（P＜005）。双荧光素酶报告实验结果显示，miR 933显著抑制野生型BDNF 3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性（P＜005），但对突变型BDNF 3’UTR荧光素酶活性无影响（P＞005）。 结论miR 933在肝癌组织和细胞中水平下调，且可抑制肝癌细胞的侵袭迁移，可能是通过靶向调控BDNF来实现，可作为肝癌的潜在治疗靶点。     

肝癌及癌旁组织中端粒酶检测的临床意义

目的研究端粒酶作为原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）肿瘤标志物的可能性。方法采用ＴＲＡＰ方法检测了３３例原发性肝细胞癌及其３３例癌旁组织、４例肝转移癌及其４例癌旁组织、６例肝良性肿瘤和６例正常肝组织中的端粒酶活性。结果３３例原发性肝细胞癌组织中，有３０例端粒酶表达阳性，其阳性率为９０．９％。３３例癌旁组织中，有９例端粒酶表达阳性，其阳性率为２７．３％。４例肝转移癌端粒酶活性均阳性，４例癌旁组织中，２例端粒酶表达阳性。６例肝良性肿瘤中，仅１例端粒酶表达阳性。６例正常肝组织端粒酶表达均阴性。肝癌组织端粒酶表达与肿瘤临床病理特征无关。结论肝癌组织中普遍存在端粒酶活性表达，而良性和正常肝组织中端粒酶活性较少表达。端粒酶有可能成为诊断原发性肝细胞癌的肿瘤标志物     

肝癌及癌旁组织中p53基因及AFP、CEA等表达异常及相关性研究

目的：从分子生物学及病理学角度对肝癌中抑癌基因p53和肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP)、癌胚抗原（CEA）的表达及相关性进行研究。方法：收集40例肝细胞癌（HCC)患者癌组织连带部分癌旁组织，用免疫组织化学法检测p53基因、AFP、CEA等。结果：p53基因癌内表达率为80％，癌旁组织为50％；AFP癌内表达率为87．5％，癌旁组织为80％；CEA癌内表达率为55％，癌旁组织表达不明显。结论：检测p53基因表达，并与AFP、CEA一起，对诊断肝癌、估计预后及制定术后治疗方案等有重要作用。     

长链非编码RNA CCAT1在肝细胞癌组织及细胞株中的表达及临床意义

目的 探讨长链非编RNA 结肠癌相关转录子1（LncRNA-CCAT1）在肝细胞癌（HCC）组织及细胞株中的表达及临床意义。方法 采用QPCR法检测CCAT1在4种肝癌细胞株（SMMC-7721、Hep3B、Hub7和HepG2）、正常肝细胞株LO2和42例HCC组织及其癌旁组织中的差异性表达,分析CCAT1表达与HCC临床病理特征的关系（性别、年龄、甲胎蛋白、肿瘤大小、肿瘤数量、淋巴结转移、分化程度和TNM分期）。结果 与正常肝细胞株LO2相比,CCAT1在SMMC-7721、Hep3B、Hub7和HepG2细胞株中均呈高表达（P＜0.05）,其中在HepG2细胞中表达水平最高。CCAT1在HCC组织中的表达水平高于其癌旁组织,差异有统计学意义（P=0.016）;CCAT1在肝癌组织中的表达水平与肿瘤大小、甲胎蛋白、分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关（P＜0.05）,而与性别、年龄、肿瘤数量无关（P＞0.05）。结论 LncRNA-CCAT1与HCC发生、发展及预后有关,其作用机制值得进一步研究。     

DNA甲基化导致肝细胞癌SYK基因失表达

目的：探讨SYK（Spleen tyrosine kinase，脾酪氨酸激酶）在肝细胞癌中的表达和不表达的机制。方法：分别用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法和甲基化特异性聚合酶链反应（Methylation—specific PCR，MSP）检测SYK基因在肝癌细胞系（HepG2和Hep3B）和34例肝细胞癌组织、癌旁非瘤组织中的表达和甲基化情况。结果：肝癌细胞系Hep3B表达SYKmRNA，而HepG2不表达SYK mRNA、DNA甲基化转移酶抑制剂5-aza-2’-deoxyeytidine处理HepG2后，SYK重新表达．Hep3B细胞SYK甲基化阴性，HepG2细胞SYK甲基化阳性；34例肝细胞癌组织标本中，5例SYKmRNA表达阴性，SYK基因甲基化均阳性；29例SYK mRNA表达阳性，其中3例SYK甲基化阳性．其余26例SYK甲基化阴性。肿瘤组织SYK基因的甲基化率为23．5％（8／34），而瘤旁肝组织中为8．8％（3／34）。结论：SYK基因启动子甲基化导致肝细胞癌SYK mRNA失表达、可能是肝癌发病的机制之一。     

VEGF-C 及VEGFR-3 在肝细胞癌中的表达

 目的　探讨VEGF-C、VEGFR-3、微血管密度（MVD）、微淋巴管密度（LVD）及肝细胞癌临床病理特征之间的关系。方法　取肝细胞癌组织标本60例，正常肝组织标本20例。采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法分析其中VEGF-C及VEGFR-3 mRNA 的表达，以免疫组织化学法检测肝癌MVD及LVD，并分析四者与肝癌临床病理特点之间的关系。结果　肝癌组织VEGF-C、VEGFR-3 mRNA表达、MVD及LVD高于正常肝组织（P＜0.01）；肝癌组织中，VEGF-C与VEGFR-3表达、MVD及LVD均呈正相关（P＜0.01），VEGF-C及VEGFR-3表达与肝癌肝内转移、门静脉癌栓形成及淋巴转移相关（P＜0.01），MVD与肝癌肝内转移、门静脉癌栓形成相关（P＜0.01），LVD与淋巴转移相关（P＜0.01）。结论　肝细胞癌组织中VEGF-C及VEGFR-3表达增多，可能通过参与血管、淋巴管生成促进肿瘤的侵袭、转移。