阿齐霉素对弓形虫形态影响的研究

为评价阿齐霉素对弓形虫的抑制、杀伤效应,体外培养的猴肾细胞经弓形虫感染后,给予不同浓度阿齐霉素(0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml),然后以电镜观察药物作用后的弓形虫形态、体积、超微结构的改变。结果经透射电镜观察发现:虫体在药物作用下发生崩解,细胞内留下空泡,有的呈团块,没有明显的细胞器可见。通过扫描电镜观察,由于阿齐霉素的影响,使附着于猴肾细胞表面的虫体与未加药组相比明显皱缩,从而充分反映阿齐霉素的抑制、杀伤虫体作用。     

徐长卿6个提取部位体外抗水痘带状疱疹病毒作用研究

目的:研究徐长卿6个提取部位体外抗水痘带状疱疹病毒(VZV)的作用。方法:以MTT法测定312.5¹0 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位对非洲绿猴肾(Vero)细胞的毒性;倒置显微镜下观察187.510 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位对非洲绿猴肾(Vero)细胞的毒性;倒置显微镜下观察187.5³ 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位抗VZV吸附的作用;计算半数有效浓度(EC50),以评价187.53 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位抗VZV吸附的作用;计算半数有效浓度(EC50),以评价187.5³ 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位对VZV的杀伤作用与抑制VZV在Vero细胞中的增殖作用。结果:徐长卿提取物6个部位药物质量浓度与细胞存活率之间存在线性关系;除200μg/ml徐长卿石油醚部位对VZV无吸附作用外,其余各提取部位均在相应质量浓度下对VZV吸附有一定抑制作用;徐长卿6个提取部位在相应质量浓度下对VZV有一定杀伤作用与抑制VZV在Vero细胞中的增殖作用。结论:徐长卿超临界萃取部位具有较强的体外抗VZV活性。     

阿齐霉素对细胞内弓形虫疗效的实验研究

作者运用ＭＴＴ比色法检测弓形虫侵入的猴肾细胞在阿齐霉素作用下的增殖情况。为阻断孕妇感染弓形虫宫内垂直感染胎儿制定预防治疗措施时提供科学的实验依据。材料与方法一、弓形虫与细胞　弓形虫悬液 10 7/ｍｌ(由省农科院畜牧兽医研究所提供 ) ,0 1ｍｌ/只腹腔注射接种 18± 2 ｇ昆明种雌性小鼠 ,第 4天断颈取腹水 ,10 0 0转 /分离心 5分钟 ,使腹腔细胞沉淀 ,取上清液 ,30 0 0转 /分离心 2 0分钟 ,取沉淀 ,将弓形虫数调整至 10 7/ｍｌ,猴肾细胞 (由省农科院畜牧兽医研究所提供 )铺满培养瓶底面后 ,用 0 2 5%胰蛋白酶消化 1分钟后 ,倒去…     

阿克拉霉素B、阿霉素和小檗碱对人外周血NK细胞活性影响的初步研究

本文研究了阿克拉霉素B、阿霉素和小檗碱对人外周血NK细胞活性的影响.NK细胞活性由测定~(51)Cr从NK细胞作用的标记K562细胞的释放率来决定.阿克拉霉素B(0.5和1.Oμg/ml),阿霉素(0.5和1.0μg/ml)和小檗碱(1.0和10μg/ml)作用1小时后,未见对NK细胞活性有显著影响,提示三个药物可能即不明显抑制也不促进NK细胞的细胞毒作用.阿克拉霉素B和小檗碱在高浓度时表现轻微的促进作用,但阿霉素有轻微抑制作用.三个药物均有不同程度地增加靶细胞~(51)Cr的自然释放率,以阿霉素最强,提示有细胞膜毒性产生.因而尚难肯定阿克拉霉素B和小檗碱的NK细胞活性促进作用.     

姜黄素抑制子宫颈癌HeLa细胞的作用

目的：探讨姜黄素抑制子宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制。方法以细胞培养，镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线；用3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响，以MTT比色法检测给药后HeLa细胞的增殖抑制情况。结果姜黄素作用HeLa细胞后，癌细胞生长延缓并萎缩，胞质粗糙，有大量颗粒状物堆积，而且药物浓度越大，形态学改变越明显；生长曲线测定、3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示，姜黄素对HeLa细胞的增殖和生长有显著的抑制作用并呈明显的时间一剂量依赖关系，当姜黄素浓度为20μg／ml以上时，其对HeLa细胞的掺入抑制率高于5一Fu20μg／ml对该细胞的掺入抑制率。结论姜黄素对HeLa细胞具有直接杀伤作用，其机制可能通过干扰细胞代谢，改变细胞外暌的性质抑制肿瘤细胞增值。     

大蒜素对人视网膜母细胞瘤Rb细胞中Bcl-2表达影响的研究

目的探讨大蒜素对人视网膜母细胞瘤Rb细胞的抑制作用，及其对Bcl-2表达的影响。方法人视网膜母细胞瘤Rb细胞株，经复苏，孵育，传代分为10个实验组。分别用不同浓度大蒜素（5μg／ml、10μg／ml、15μg／ml、20μg／ml、25μg／ml、30μg／ml）、顺铂（3μg／ml）及大蒜素（15μg／ml）和顺铂（3μg／ml）联合处理人视网膜母细胞瘤Rb细胞，在不同时间（24h、48h、72h）观察Rb细胞的形态，并应用免疫细胞化学SP法检测不同处理条件下和各时间点Bcl-2的表达情况。结果人视网膜母细胞瘤Rb细胞在不同浓度大蒜素、顺铂以及大蒜素和顺铂联合作用下，细胞生长增殖受到抑制，与大蒜素空白液、培养液对照组的Rb细胞相比形态学变化明显。不同浓度的大蒜素均可以下调人视网膜母细胞瘤Rb细胞中Bcl-2的表达，大蒜素作用组与对照组两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。大蒜素下调Bcl-2的表达具有时间和剂量依赖性，随着大蒜素作用时间的延长，Bcl-2的表达依次下降。大蒜素（15μg／ml）和顺铂（3μg／ml）联合用药可增强对人视网膜母细胞瘤Rb细胞的生长抑制，与大蒜素（15μg／ml）、顺铂（3μg／ml）单独处理Rb细胞比较，下调Bcl-2的表达作用具有显著性差异（P〈0．05）。结论人视网膜母细胞瘤Rb细胞中存在与细胞凋亡有关的Bcl-2蛋白低表达。大蒜素可抑制人视网膜母细胞瘤Rb细胞的生长，且抑制作用随药物作用浓度的增高和作用时间的延长而增强，具有时间和浓度依赖性。采用免疫细胞化学的方法检测人视网膜母细胞瘤Rb细胞中Bcl-2的表达，发现大蒜素作用组Bcl-2的表达较空白和溶剂对照组低，提示大蒜素抑制人视网膜母细胞瘤Rb细胞的生长与Bcl-2介导的细胞凋亡有关，大赫素和顺铂联合用药作用强于单独用药，可进一步提高药物对肿瘤细胞的生长抑制。     

博莱霉素A_2B_2和A_5对人癌细胞脱氧核糖核酸的断链效应

本文观察比较了博莱霉素A_5(国产)、博莱霉素A_2B_2(日本)和博莱霉素A_2B_2国际标准品对于人体胃癌细胞的总脱氧核糖核酸和其50kb部分,以及人舌癌细胞的总脱氧核糖核酸的体外断链效应。作用后脱氧核糖核酸经琼脂糖微型快速电泳和溴化乙锭染色后,紫外荧光摄影。显示三种博莱霉素产品对人癌细胞双链脱氧核糖核酸的作用模型电泳图。并观察了作用时间及药物浓度的效应。人体DNA10μg在博莱霉素400μg/ml(～0.27mM)浓度下,37℃作用30分钟后,即可观察到人体DNA的断裂效应;37℃作用120分钟后,几乎全部人体DNA分子均被切割断链。人体DNA20μg在系列浓度的博莱霉素存在下,37℃作用120分钟,观察到博莱霉素断链的最低有效浓度为1μg/ml(～0.67μM)左右。没有发现博莱霉素-人胃癌细胞脱氧核糖核酸与博莱霉素-人舌癌细胞脱氧核糖核酸的作用模型之间有何明显差别。 本文还讨论了以人体细胞脱氧核糖核酸为对象,研究抗癌药物作用模式的实践意义,和本实验系统正被应用于人体“癌基因”(Oncogenes)有关研究的价值。     

半边旗多糖对肺腺癌SPCA-1细胞的诱导凋亡作用

目的研究蕨类植物半边旗多糖对人肺腺癌SPCA-1细胞的体外杀伤及诱导凋亡作用。方法用MTT法测定细胞成活率：用流式细胞术测定细胞周期时相分布和凋亡率，并进行形态学观察。结果半边旗多糖对肺腺癌SPCA-1细胞有强烈的杀伤作用，具明显的时间和剂量效应(0.09375-3μg／ml，24h-72h)；作用肺腺癌SPCA-1细胞24h后，G0／G1期细胞比例明显升高，S期、G2/M期细胞比例下降明显。细胞凋亡形态明显。结论半边旗提取物对肺腺癌SPCA-1细胞有强烈的杀伤作用，明显影响细胞周期时相分布，可引起SPCA-1凋亡。     

姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的：探讨姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其机制。方法：以细胞培养，镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线；用^3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响，以MTT比色法检测给药后HeLa细胞的增殖抑制情况。结果：姜黄素作用HeLa细胞后，癌细胞生长延缓并萎缩，胞质粗糙，有大量颗粒状物堆积，而且药物浓度越大，形态学改变越明显；生长曲线测定、^3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示，姜黄素对HeLa细胞的增殖和生长有显著的抑制作用并呈明显的时间一剂量依赖关系，当姜黄素浓度为20μg／ml以上时，其对HeLa细胞的掺入抑制率高于5-Fu 20μg/ml对该细胞的掺入抑制率。结论：姜黄素对HeLa细胞具有直接杀伤作用，其机制可能通过干扰细胞代谢，改变细胞外膜的性质抑制肿瘤细胞增殖。     

三氧化二砷与顺铂联用对人乳腺癌细胞杀伤作用的研究

目的探讨三氧化二砷与顺铂联合应用对人乳腺癌细胞的杀伤作用。方法将三氧化二砷与顺铂单独及联合应用于体外培养的乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法测定细胞抑制率,于透射电镜下观察细胞超微结构变化;用流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果1μg/ml三氧化二砷与1μg/ml顺铂联合应用于乳腺癌MCF-7细胞48h后,细胞抑制率为27.01%,明显高于单用三氧化二砷（1μg/ml）时的12.12%及单用顺铂（1μg/ml）时的10.93%。细胞超微结构及流式细胞仪观察均显示,联合应用比单用促凋亡效应更显著（P〈0.01）。结论三氧化二砷与顺铂联合应用,可高效杀伤人乳腺癌细胞,此协同作用主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的。     

弓形虫SAG1基因在HeLa细胞表达的研究

目的 :研究弓形虫 SAG1基因在 He L a细胞中的表达 ,为研制弓形虫疫苗奠定基础。方法 :采用磷酸钙 -DNA共沉淀转化法将重组质粒 pc DNA3- SAG1导入 He L a细胞 ,用 G418进行选择培养 ,筛选出表达阳性的细胞克隆 ,再通过培养和加压 ,建立稳定分泌 SAG1抗原的阳性 He L a细胞克隆株 ,分离表达产物 ,进行 SDS- PAGE、Western blot分析。结果 :采用钙沉淀法成功地将重组质粒 SAG1导入 He L a细胞 ,通过 G418选择和加压培养 ,获得稳定分泌 SAG1抗原的阳性 He L a细胞 ,表达的蛋白经 SDS- PAGE、Western blot分析 ,显示其分子量 30 k Da蛋白 ,与理论值相符。结论 :成功构建重组质粒 pc DNA3- SAG1,建立稳定分泌 SAG1抗原的阳性 He L a细胞克隆株     

香菇多糖促BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫感染的研究

目的:研究香菇多糖预处理对弓形虫感染后BALB/c小鼠巨噬细胞免疫功能的影响.方法:将45只周龄、体重相近的雌性BALB/c小鼠随机均分为3组,即空白对照(无菌生理盐水)、模型(无菌生理盐水)和香菇多糖组(0.5g·L-1).各组小鼠以每次1mL、每天1次腹腔注射给药,连续给药5 d后,第6天模型与香菇多糖组各用3×1...     

生育期妇女与弓形虫感染关系的探讨

目的:了解孝感市孝南区孕妇弓形虫感染的情况,探讨弓形虫感染与异常孕产的关系。方法:采用酶联免疫吸附测定(EL ISA)方法对843例孕妇(有异常孕产史孕妇189例和无异常孕产史孕妇654例)进行血清弓形虫抗体检测,并对检测结果采用χ2检验进行统计学分析。结果:弓形虫抗体阳性率为2.85%,有异常孕产史孕妇阳性率为7.94%(15/189),明显高于无异常孕产史孕妇的1.38%(9/654)(P<0.05)。结论:孝感市孝南区孕妇弓形虫抗体阳性率低于全国平均水平,弓形虫感染可能是异常孕产的重要原因。     

P43基因在白血病患者弓形虫感染诊断中的应用

目的建立快速、特异、敏感诊断白血病患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并分析其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对46例白血病及20名正常人同时进行检测。结果检测白血病40例,PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原,阳性各为8例及6例,其阳性率分别为17.4%和13.1%。作为阴性对照的20名正常者同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫P43基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为白血病患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。     

黄芪多种成分抗人疱疹病毒的初步实验研究

目的：为了开发利用黄芪的抗病毒性质，我们进行了此项研究。方法：我们以阿普洛韦（ACV)为阳性对照，采用对病毒所致细胞病变的抑制及空斑减数实验，观察了黄芪总皂苷、总多糖、总黄酮抗HSV药效。结果：在Hep-2细胞系统中，ACV对HSV－1 HS－1株直接杀灭、感染阻断、增殖抑制的ED50为30．83ug/ml,16.04ug/ml,20.04ug/ml；对HSV－2333株的相应ED50为16.45ug/ml,18.62ug/ml,10.85ug/ml,黄芪总皂苷对HSV－1 HS－1株相应ED50为1．68ug/ml，1．72ug/ml，1．95ug/ml；对HSV－2333株相应ED50为1．73ug/ml，2．70ug/ml，2．74ug/ml，黄芪总多糖对HSV－1 HS－1株的相应ED50为4．03ug/ml，5．33ug/ml，4．90ug/ml；对HSV－2333株相应ED50为6．04ug/ml，5．43ug/ml，7．50ug/ml，黄芪总黄酮对HSV－1 HS－1株的相应ED50为4．95ug/ml，2．75ug/ml，3．49ug/ml；对HSV－2333株的相应ED50为3．56ug/ml，3．93ug/ml，6．27ug/ml。结论：黄芪对HSV－1的治疗指数为ACV的10．3，4．1，5．5倍；对HSV－2的治疗指数为ACV的3．7，2．7，1．0，1．6倍。总多糖对HSV－1的治疗指数为ACV的10．3，4．1，5．5倍；对HSV－2的治疗指数为ACV的3．7，2．7，3．3倍。总黄酮的治疗指数为ACV相近，值得开发利用。     

顺铂对人肺腺癌细胞作用与ERCC1、Bcl-2表达的相关性研究

目的:探讨ERCC1、Bcl-2表达与顺铂作用的关系,进而推测ERCC1、Bcl-2在顺铂耐药中的作用.方法:选择人肺腺癌细胞A549及其耐DDP细胞株A549/DDP作为研究对象,采用MTT法检测A549/DDP细胞耐药指数;免疫细胞化学方法、RT-PCR方法检测不同浓度、不同作用时间干预后细胞中ERCC1、Bcl-2的表达.结果:10μg/mL DDP作用12 h,A549细胞中ER-CC1、Bcl-2 mRNA表达开始增高,随着作用时间的延长,ERCC1、Bcl-2 mRNA的表达逐渐增高,在72 h表达最强.浓度为5μg/mL的DDP即可刺激A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA表达水平上升,随着DDP浓度的增加,其表达水平逐渐上升,ERCC1民mRNA表达水平在20μg/mL组达到高峰.与亲本细胞相比,A549/DDP中ERCC1、Bcl-2表达明显增高.结论:随着顺铂作用时间的延长和浓度的增加,A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达量增加,推测ERCC1、Bcl-2可能参与了顺铂继发耐药的形成.     

弓形虫抗体阳性精神分裂症一级亲属免疫球蛋白研究

目的:了解弓形虫抗体阳性精神分裂症一级亲属免疫球蛋白的水平与正常人有无差异。方法:用速率散射比浊法检测弓形虫抗体阳性精神分裂症一级亲属免疫球蛋白(IgG、IgM)指标,并与弓形虫抗体阴性精神分裂症一级亲属、正常对照组进行比较。结果:弓形虫抗体阳性精神分裂症一级亲属免疫球蛋白明显高于两个对照组。结论:弓形虫感染可能是一种独立的发病因素,至少是一种诱发因素。     

大环内酯类药物对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响

采用聚碳酸酯过滤膜或聚丙烯酰胺膜制备铜绿假单胞菌生物膜,计数滤膜菌落并用扫描电镜观察,研究大环内酯类及抗铜绿假单胞菌药物对铜绿假单胞菌生物形成的影响。结果表明与未经药物作用的滤膜菌落计数比较,阿尔霉素2mg/L和红霉素2mg/L可使生物膜内细菌由10^10CFU/cm^2降至10^3.3和10^3.7CFU/cm^2;阿奇霉素（2mg/L)分别与头孢他啶（0．0625mg/L)、亚胺培南（0．5mg/L）、美洛培南（0．25mg/L）、阿米卡星（0．0625mg/L )、环丙沙星（0．004mg/L）合用后,生物膜内细菌降至10^1.5-10^3.8CFU/cm^2;红霉素与上述药物合用后,生物膜内细菌降至10^2.8-10^5.5CFU/cm^2;麦迪霉素32mg/L、抗铜绿假单胞菌药物单用或两者联合应用,菌量为10^8.1-10^11.5CFU/cm^2。扫描电镜观察与菌落计数结果一致。表明红霉素、阿奇霉素能抑制铜绿假单胞菌生物膜的生成;麦迪霉素及五种抗铜绿假单胞菌药物对生物膜的形成无抑制作用。     

婴幼儿骶管注用咪唑安定术后镇痛的研究

目的 评价骶管注入咪唑安定用于婴幼儿下腹部手术后镇痛的临床效果。方法 选择婴幼儿下腹部手术患儿120例。随机分为4组。A组为1％利多卡因（1ml／kg）行骶管阻滞,B组为1％利多卡因＋0．25%罗哌卡因（1ml／kg）,C组为1%利多卡因＋50ug／kg咪唑安定（1ml／kg）,D组1％利多卡因＋0．25oA罗哌卡因＋50ug／kg咪唑安定（1ml／kg）。观察术后24小时各时点镇痛、镇静效果度副作用。结果术后6小时B,C,D组疼痛减轻度明显优于A组（P〈0．05）。两组苯后疼痛客观评价B,C,D组明显优于A组（P〈0．05）。镇静效果C、D组明显优于A,B组,4组不良反应无明显差异。结论骶管注入50ug／kg咪唑安定在婴幼儿下腹部手术时可产生良好的术后镇痛效果。