先天性HCMV感染胎鼠大脑皮层ET-1 mRNA的研究

目的　对先天性人巨细胞病毒 (HCMV)感染的胎鼠大脑皮层内皮素 1(ET 1)mRNA进行定性及定量分析 ,探讨先天性HCMV感染致脑损害的机制 ,为临床防治提供一种有价值的手段。方法　在建立HCMV先天性中枢神经系统 (CNS)感染胎鼠模型的基础上 ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测定受不同病毒剂量感染的胎鼠大脑皮质ET 1mR NA ,并用地高辛标记的ET 1寡核苷酸探针对大脑皮层细胞印片进行原位杂交以检测相应mRNA及胞内定位 ,并同步进行病毒分离和病理学检查。结果　病毒分离结果显示 ,在脑组织的上清液中HCMV分离阳性 ;病理学研究证实受染胎鼠大脑皮层表现为侵袭性脑膜炎性改变 ,并在神经细胞内发现特征性核内嗜碱性包涵体 ;受染胎鼠大脑皮层内ET mRNA增加 ,以 1 0ml和 0 5ml组为显著 (P<0 0 0 1) ,而 0 2 5ml组与正常对照组比较差别无显著性。原位杂交结果证实 ,ET 1mRNA主要存在于大脑皮层的胶质细胞中。结论　HCMV可经小鼠胎盘垂直传播至胎鼠脑组织。受染胎鼠大脑皮层ET 1mRNA明显增加 ,且这种结果与所接种的病毒量存在量效关系。ET 1mRNA主要存在于大脑皮层的胶质细胞中可能表明ET 1可作为一种神经调节肽以旁分泌和自分泌方式影响神经组织的功能 ,参与HCMV先天性感染脑损害的过程     

HCMV先天性感染胎鼠脑组织中iNOS基因的表达

目的　研究人巨细胞病毒 (HCMV)先天性感染小鼠及在不同剂量诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)抑制剂和促进剂的干预下脑组织中的iNOS基因表达情况。方法　将 6～ 8周龄BALB/c小鼠分为 6组 ,每组 6只 ,♀♂各半。A组腹腔注射HCMV 1 0ml,B组、C组腹腔注射HCMV 1 0ml后2d ,分别每天腹腔注射氨基胍 (AG) 2 0 0mg/kg、2 0mg/kg ,D组、E组腹腔注射HCMV 1 0ml后 2d ,分别每天腹腔注射左旋精氨酸 (L Arg) 30 0mg/kg、30mg/kg ,F组为DMEM对照组 ,每天每只 0 2ml。持续 17d。以上各组在孕鼠受孕第19天 ,剖腹取胎鼠 ,观察各组胎鼠生长发育及体重 ,有无皮下出血、淤血等情况 ,同时取胎鼠脑组织 ,作以下检测 :①硝酸还原酶法测定脑组织匀浆中NO代谢产物亚硝酸盐的含量。②RT PCR测iNOSmRNA的转录。结果　HCMV感染各组孕鼠在孕 19d ,其体重明显低于对照组 ,有部分胎鼠发育迟缓并可见明显的出血现象。感染各组胎鼠脑组织匀浆NO代谢产物明显高于DMEM对照组 (P <0 0 0 1) ,以B组尤为明显 ,A、C、E组间无差异显著性。RT PCR在感染各组均扩增出iNOSmRNA特异性条带表达 ,B组信号量最高 ,D组信号最弱。DMEM对照组未检测到iNOS特异性条带。结论　HCMV先天性感染可刺激胎鼠脑组织iNOS的表达 ,其表达产物NO可能参与了脑组织病理损伤     

人巨细胞病毒增殖性感染新生乳鼠大脑皮质神经细胞

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)AD169株在体外增殖性感染新生乳鼠大脑皮质神经细胞。方法在长成单层的Balb/c新生乳鼠的大脑皮质神经细胞培养物上,接种TCID50为5×103/3ml的HCMVAD169株感染的HF细胞上清液。通过相差显微镜、PCR、RT-PCR、间接免疫荧光、TCID50、透射电镜等方法观察和鉴定HCMV在神经细胞内的感染状况。结果接种病毒的大脑皮质神经细胞在感染后第1天即可观察到特征性细胞病变效应,且随着感染时间的延长病变逐渐加重;HCMVIE和UL83DNA及mRNA检测均可见阳性条带;HCMVpp65蛋白免疫荧光检测亦为阳性,蛋白质表达量随着培养时间的延长明显提高;TCID50检测随着感染时间的延长病毒滴度逐渐上升;在神经元胞浆内通过透射电镜观察到病毒颗粒。结论HCMVAD169株可能具有增殖性感染乳鼠大脑皮质神经细胞的能力。     

人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立

将人巨细胞病毒 (HCMV)接种至 8～ 12周龄 BAL -B/ c雌雄小鼠腹腔后合笼交配。待雌鼠临床产时剖宫取出胎鼠脑双侧大脑皮层 ,进行病毒分离、病理学检测及用地高辛标记的 HCMV寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。病理学研究结果证实 ,鼠脑为侵袭性脑膜炎性病理改变 ,并在神经细胞内发现病毒特征性的大的核内嗜碱性包涵体 ;原位杂交结果显示 ,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内 ;在鼠脑组织上清液中分离出HCMV。且感染组雌鼠血清特异性 Ig M抗体阳性率为73.9% ,Ig G抗体阳性率为 95 .7% ;而对…     

巨细胞病毒先天性感染对ICR鼠胚胎生长及脑组织发育的影响

目的探索人巨细胞病毒（HCMV ）先天性感染对胎鼠胚胎生长及脑组织发育的影响。方法 10周龄的ICR ♀♂鼠按1∶1配对,实验组于交配前及妊娠3天（E3）、7天（E7）、15天（E15）腹腔内接种HCMV悬液,对照组接种HF细胞上清液。于E0、E3、E6、E9、E12、E15、E19称取孕鼠体重。临产时剖腹取胚胎的大脑皮质,用常规组织切片及HE染色,检测组织的病理变化,同时取部分组织进行病毒分离。结果各实验组（除E15组）孕鼠自E15后体重较对照组明显降低。组织病理学检查发现,各实验组ICR胎鼠大脑皮质血管扩张、充血、出血,脑实质有单核细胞浸润,部分神经细胞变性坏死或凋亡及噬神经细胞现象,软化灶形成;受染的神经细胞核内出现HCMV特征性包涵体。E0、E3、E7、E15实验组大脑皮质病毒分离阳性率分别为60%、62%、67%、25%,组间差异显著（χ2=13.475,P＜0.05）,E15组低于其他3组。结论不同孕期ICR胎鼠大脑皮质均可先天性实验感染HCMV且大脑皮质损伤明显,胚胎发育迟缓。     

人巨细胞病毒先天性感染对ICR鼠胚胎生长及脑组织发育的影响

目的　探索人巨细胞病毒 (HCMV )先天性感染对胎鼠胚胎生长及脑组织发育的影响。方法　 10周龄的ICR♀♂鼠按 1∶1配对 ,实验组于交配前及妊娠 3天 (E3 )、7天(E7)、15天 (E15)腹腔内接种HCMV悬液 ,对照组接种HF细胞上清液。于E0 、E3 、E6、E9、E12 、E15、E19称取孕鼠体重。临产时剖腹取胚胎的大脑皮质 ,用常规组织切片及HE染色 ,检测组织的病理变化 ,同时取部分组织进行病毒分离。结果　各实验组 (除E15组 )孕鼠自E15后体重较对照组明显降低。组织病理学检查发现 ,各实验组ICR胎鼠大脑皮质血管扩张、充血、出血 ,脑实质有单核细胞浸润 ,部分神经细胞变性坏死或凋亡及噬神经细胞现象 ,软化灶形成 ;受染的神经细胞核内出现HCMV特征性包涵体。E0 、E3 、E7、E15实验组大脑皮质病毒分离阳性率分别为 6 0 %、6 2 %、6 7%、2 5 % ,组间差异显著 (χ2 =13 475 ,P <0 0 5 ) ,E15组低于其他3组。结论　不同孕期ICR胎鼠大脑皮质均可先天性实验感染HCMV且大脑皮质损伤明显 ,胚胎发育迟缓     

3种方法检测HCMV先天性感染对老年小鼠大脑皮质细胞凋亡的比较

目的分析TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)、流式细胞术和透射电镜3种细胞凋亡检测方法的优缺点。方法在已建立的HCMV先天性感染小鼠中枢神经系统模型基础上,选用鼠龄为24个月模型鼠进行试验。试验分为3组(每组6只)HCMV先天性潜伏感染老年小鼠组(A组)、HCMV先天性潜伏再激活感染老年小鼠组(B组)和正常对照老年小鼠组(C组)。采用TUNEL法和流式细胞仪检测各组小鼠大脑皮质细胞凋亡情况,采用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化。结果TUNEL法和流式细胞术检测发现C组凋亡细胞最少,A组凋亡细胞比率较C组有所升高,而B组凋亡细胞最多;检测结果经T检验分析发现A组、B组与C组各组间凋亡率差异均有显著性。透射电镜检测发现,同C组比较,A组和B组部分神经元细胞核染色体固缩,核物质碎片化,凋亡小体形成等特征性凋亡改变。结论HCMV先天性感染可致老年小鼠大脑皮质细胞凋亡。TUNEL法和流式细胞术可用于凋亡的定量检测,但TUNEL法易受主观因素的影响,而透射电镜是凋亡定性检测的可靠方法。     

被动免疫重症肌无力模型中枢神经系统损害的探讨

目的：探讨乙酰胆碱受体抗体（AchRab）与重症肌无力（MG）中枢神经系统（CNS）损害之间关系。方法：将MG患者血中提取的IgG注入大量鼠尾静脉，建立大鼠被动免疫重症肌无力模型，应用免疫细胞化学技术观察Fas在脑组织中的表达，结果：模型大鼠表现出类MG症状，在MG大鼠脑内Fas抗原主要表达于大脑皮质区和海马的神经元胞膜和突起上，而在正常和空白对照组脑内没有神经细胞呈Fas抗原阳性。结论：外周注入的AchRab可能造成模型处于免疫应激状态，改变血脑屏障通透性而入脑诱发CNS损害，Fas介导的细胞凋亡可能参与MG CNS损害。     

甲状腺素对胎鼠脑bcl—2和bax基因表达的影响

目的　研究甲状腺素对胎鼠脑bcl 2和bax基因表达的影响。方法　采用丙基硫氧嘧啶灌胃制备甲减孕鼠模型 ,出生后小鼠即为先天性甲减鼠 ,另一组出生后即日起用腹腔注射T4,剂量为 2 μg/ 10 0g·d-1(替代组 ) ,采用逆转录 -聚合酶链反应检测胎鼠出生后 1、5、10d胎鼠bcl 2和bax基因的表达。结果　bax基因在甲减胎鼠脑第 1天表达最高 ,随着鼠龄增长 ,表达降低 ;正常第 1天胎鼠及替代组胎鼠脑未检测到bax表达 ;bcl 2基因在第 1天甲减胎鼠表达高于正常对照组 ;第 5天、第 10天降低 ;bcl 2在替代组鼠脑中表达较甲减组高。结论　甲状腺激素对bcl 2和bax基因表达的不同影响 ,在脑细胞凋亡中有重要的作用。     

孕期小鼠腹腔注射缬草提取物对胎鼠脑皮质体积及脑组织内锌和铜水平的影响

目的:探讨孕期小鼠腹腔注射缬草提取物对胎鼠脑皮质容量及脑组织内锌和铜水平的影响.方法:孕期雌性小鼠于怀孕第7～17天每日腹腔注射生理盐水或1.2 g/kg体质量的缬草提取物,分别作为对照组和实验组.怀孕第20天,处死母鼠并取出胚胎.对胎鼠的脑组织解剖、称取质量并进行形态学观察.根据卡瓦列里原理测量胎鼠脑皮质的体积,并使用原子吸收光谱测试法测量胎鼠脑组织中的锌和铜的水平.结果:孕期小鼠腹腔注射缬草提取物对胎鼠的大脑质量、脑皮质的体积及脑组织中铜的水平没有影响;然而实验组与对照组相比,胎鼠脑组织中锌的水平明显降低(P＜0.05).结论:虽然孕中期小鼠腹腔注射缬草提取物对胎鼠没有明显影响,只是降低了胎鼠脑组织中锌的水平,但孕期使用缬草仍应引起注意.     

小鼠脑发育中CDK5 mRNA表达变化的研究

目的观察周期素依赖性蛋白激酶5 (CDK5)mRNA在脑发育中的表达与分布.方法采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色.结果①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5 mRNA从胚胎10.5 d(E10.5)开始表达,主要分布于神经上皮的套层细胞内; ②脑切片的原位杂交染色观察到从E14到成年期脑内均见CDK5 mRNA阳性信号,主要定位于神经元的胞浆与核周,于新生期前后表达达高峰;分布于包括大脑皮层、海马、丘脑、下丘脑、小脑及许多神经核团.在老年期上述区域CDK5表达均有减弱,部分区域呈阴性.结论表明脑内CDK5作用贯穿了整个脑的发育阶段,且主要参与了神经系统的早期发育;成年后CDK5可能继续保持对某些区域中神经元的功能调节.     

免疫相关GTP酶M1在脓毒症诱导脑损伤小鼠皮质神经元细胞自噬中的作用

目的：探讨免疫相关GTP酶M1(immune-related GTPase M1,IRGM1)在脓毒症诱导脑损伤(sepsis-induced brain injury,SIBI)小鼠皮质神经元细胞自噬中的作用。方法：将野生型和IRGM1基因敲除小鼠各60只分为野生型假手术 (sham-operated wild-type,SWT)组、野生型模型(model wild-type ,MWT)组、基因敲除假手术(sham-operated knockout, SKO)组和基因敲除模型(model knockout,MKO)组。模型组行小鼠盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP), CLP后6 h行神经行为学评分,如神经生物学低于6分,诊断为SIBI;假手术组只打开腹腔,未行CLP。采用HE染 色观察小鼠大脑皮质区病理学改变;电子显微镜下观察小鼠皮质神经元细胞自噬的超微结构;实时定量PCR检 测IRGM1和INF-γ mRNA在小鼠大脑皮质组织中的表达;Western印迹检测小鼠大脑皮质组织微管相关蛋白1轻链 3(LC3)-II,LC3-I,SQSTM1,IRGM1的蛋白相对表达量;免疫荧光法观察IRGM1在小鼠大脑皮质神经元中的表达。 结果：电子显微镜显示,与SWT组比较,MWT组在CLP后12或24 h小鼠皮质神经元内质网扩张、线粒体肿胀、 自噬体数量增加。Western印迹结果显示,CLP后6 h小鼠大脑皮质组织LC3-II表达开始增加,高表达维持至CLP后 96 h,相反,SQSTM1在CLP后6 h开始下降。与SWT组比较,MWT组在CLP后12 h小鼠大脑皮质组织中IRGM1的mRNA 和蛋白表达水平明显上调,同时,IFN-γ的mRNA表达也明显增加(P<0.05)。双色免疫荧光检测结果显示,CLP后 24 h,与SWT组比较,MWT组小鼠皮质神经元中IRGM1表达明显上调。SWT组和SKO组小鼠大脑皮质细胞中自噬活 性的基线水平相当低,几乎无LC3-II的表达,而SQSTM1表达均很高。但是,CLP后12 h,MWT组LC3-II表达明显升 高,SQSTM1表达下调(P<0.05),而IRGM1基因敲除的MKO组小鼠大脑皮质组织中几乎无LC3-II,SQSTM1的表达明显 上调。CLP后6 h,MWT组SIBI发生率90%(27/30),MKO组发生率96.67%(29/30)。CLP后12 h,MKO组小鼠神经生物学 评分明显低于MWT组(4.97±0.71 vs 5.43±0.86;t=2.284,P=0.026)。小鼠大脑皮质HE染色显示,与MWT比较,MKO组 小鼠脑皮质损伤严重,神经细胞数量明显减少。结论：SIBI时IRGM1表达对小鼠大脑皮质神经元损伤具有一定的保护 作用,其机制可能与其调节小鼠大脑皮质神经元细胞自噬有关。     

孕期小鼠腹腔注射缬草提取物对胎鼠脑皮质体积及脑组织内锌和铜水平的影响

目的：探讨孕期小鼠腹腔注射缬草提取物对胎鼠脑皮质容量及脑组织内锌和铜水平的影响。方法：孕期雌性小鼠于怀孕第7～17天每日腹腔注射生理盐水或1．2g／kg体质量的缬草提取物,分别作为对照组和实验组。怀孕第20天,处死母鼠并取出胚胎。对胎鼠的脑组织解剖、称取质量并进行形态学观察。根据卡瓦列里原理测量胎鼠脑皮质的体积,并使用原子吸收光谱测试法测量胎鼠脑组织中的锌和铜的水平。结果：孕期小鼠腹腔注射缬草提取物对胎鼠的大脑质量、脑皮质的体积及脑组织中铜的水平没有影响;然而实验组与对照组相比,胎鼠脑组织中锌的水平明显降低（P〈0．05）。结论：虽然孕中期小鼠腹腔注射缬草提取物对胎鼠没有明显影响,只是降低了胎鼠脑组织中锌的水平,但孕期使用缬草仍应引起注意。     

人巨细胞病毒原发感染BALB/c小鼠大脑皮质模型的建立

目的建立人巨细胞病毒(HCMV)原发感染BALB/c小鼠大脑皮质的模型,为进一步研究其发病机制奠定实验基础。方法分别用2×106、2×105、2×104、2×103、2×102PFU/ml的HCMV AD169株腹腔注射6~8周SPF级BALB/c小鼠雌雄各6只作为实验组,同时设立灭活病毒对照组和细胞对照组。1个月后取各组小鼠大脑皮质组织进行病毒分离与鉴定、PCR和RT-PCR分别检测各标本中HCMVUL83基因及UL54的转录、HE染色。结果2×106、2×105PFU/ml实验组的雌性小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性;HE染色可见海马区出现了明显的病理变化。雄性小鼠、低剂量(2×104、2×103、2×102PFU/ml)实验组、灭活病毒组和HF对照组均为阴性。结论HCMV AD169株腹腔注射6~8周龄SPF级雌性小鼠1个月可测出大脑皮质发生急性炎症反应,为HCMV所致的原发感染状态,且小鼠性别及病毒的接种量可能与感染发生存在密切关系。     

人巨细胞病毒感染老龄小鼠的外周血T细胞亚群检测与分析

目的 在人巨细胞病毒(HCMV) 感染的BALB/c小鼠模型基础上,研究小鼠细胞免疫应答状态.方法 建立先天性潜伏感染的老龄小鼠(平均月龄≥18个月)模型,分别为HCMV先天性潜伏感染组(A)、先天性潜伏感染再激活组(B)及正常对照组(C),每组小鼠数均为6只.分别取各组小鼠外周血白细胞进行病毒分离、PCR和RT-PCR检测HCMV UL83基因DNA和相应mRNA来验证模型小鼠感染状态.采用流式细胞术对小鼠外周血T细胞亚群进行检测.结果 A组和B组小鼠病毒分离出HCMV,C组为阴性.A组小鼠可以用PCR检测出HCMV UL83 DNA,但RT-PCR检测不出相应的mRNA;B组小鼠用PCR、RT-PCR均可检测出相应产物;而C组均为阴性.A、B、C三组小鼠外周血中CD3+细胞构成比值分别为0.3305、0.0658和0.4318,组间差异有显著性(P<0.01);A、B、C三组中CD4+细胞的构成比值依次为0.6608、0.5998、0.6578,B组与A组及C组差异均有显著性(P<0.01),而在A组和C组间差异无显著意义(P>0.05);CD8+细胞比在A、B、C三组中的构成比值依次为0.2327、0.1150、0.1862,组间差异均有显著性(P<0.01);CD4+CD8+细胞在A、B、C三组中的比值依次为0.0990、0.1682、0.1192,组间差异有显著性(P<0.05).结论 HCMV先天性潜伏感染及 HCMV先天性潜伏感染再激活均可使老龄小鼠的细胞免疫功能降低,尤以后者显著.表明HCMV对先天性潜伏感染再激活老龄小鼠的细胞免疫状态有明显的抑制作用.     

脂多糖结合蛋白mRNA在大鼠烧伤复合内毒素血症早期肝组织中的表达及意义

目的探讨烧伤复合内毒素血症早期肝脏损害的发病机制.方法健康Wistar大鼠156只 ,随机分为烧伤复合内毒素注射组(BCEG)、单纯烧伤组(SBG)、单纯内毒素注射组(SEG)和正常对照组(NCG),采用光、电镜观察、血清肝功能ALT,ALB测定、肝组织LBP mRNA分子原位杂交等方法.结果大鼠20%体表面积Ⅲ度烧伤复合内毒素注射较单纯烧伤和单纯内毒素注射后,光、电镜可见较为严重的肝组织损害.烧注组在伤后0.5 h ALT已明显升高(P<0.01),峰值见于12, 72 h则降至正常,烧注组在伤后12～24 h ALB 明显下降(P<0.05).烧注组LBP mRNA在3～6 h表达较强,主要定位于肝细胞胞浆,呈全胞浆和部分胞浆型表达,且阳性表达细胞较为散在.结论烧伤复合内毒素血症早期肝脏损害具有协同损害效应,急性期反应调节蛋白 LBP在早期损害中即在肝脏合成表达.     

孕鼠腹腔注射脂多糖致新生鼠肺损伤模型的构建

目的:探讨孕鼠腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致新生鼠肺损伤模型的构建方法?方法: 孕18 d SD大鼠随机分为生理盐水对照组(control组)和LPS组,观察腹腔注射不同剂量LPS(2.5?2.0?1.5?1.0?0.5 mg/kg)与等量灭菌生理盐水后的孕鼠反应并统计孕鼠死亡率及流产率,依上述实验结果选定较低死亡率的LPS剂量?分别予孕鼠腹腔注射LPS(0.9?0.8?0.7?0.6?0.5 mg/kg)及等量灭菌生理盐水后记录各组新生鼠肺的病理评分?湿/干重比值(W/D)及肺组织中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α mRNA?白细胞介素(interleukin,IL)-1β mRNA和TNF-α蛋白的表达量?进一步研究LPS 0.7 mg/kg组中孕19 d胎盘?胎肺及新生鼠生后第1?4?7 d肺组织中炎症因子(TNF-α?IL-1β)mRNA表达量变化与组织病理改变?结果:①LPS组中随着药物剂量递减,孕鼠死亡率及流产率逐渐降低,当LPS剂量小于1.0 mg/kg时孕鼠死亡率及流产率降低至25%以下;②LPS 0.5~1.0 mg/kg时,与对照组比较,LPS< 0.7 mg/kg时新生鼠肺病理评分?W/D?组织TNF-α及IL-1β mRNA表达差异无统计学意义(P均> 0.05),LPS≥0.7 mg/kg时上述指标均显著升高,且差异有统计学意义(P均< 0.05);③孕鼠腹腔注射LPS 0.7 mg/kg时,胎盘?胎肺炎症因子较对照组显著升高,且LPS组新生鼠生后第1?4?7天肺组织中TNF-α?IL-1β mRNA表达水平均显著高于对照组(P均< 0.05)?结论: SD大鼠孕18 d腹腔注射0.7 mg/kg LPS可导致新生鼠肺病理损害?肺水肿,炎症因子TNF-α?IL-1β增高,并延续到生后7 d,是制备宫内感染新生鼠肺损伤模型稳定?可靠的方法?     

甲醛暴露对胎鼠心肌组织基因表达的影响

目的通过对胎鼠心肌组织基因表达谱的检测,探讨大鼠孕前及孕早期甲醛暴露对胎鼠心肌组织基因表达的影响。方法将性成熟的雌性SD大鼠随机分为实验组(甲醛吸入组)和对照组。甲醛吸入组母鼠在受孕前13 d给予甲醛吸入至怀孕第14天,对照组母鼠不进行甲醛吸入,两组母鼠喂养方式无差异。在SD大鼠怀孕第14天时取出胎鼠,对胎鼠心肌组织进行基因芯片检测分析。结果母鼠甲醛吸入组的胎鼠心肌样本与母鼠未吸入甲醛的胎鼠心肌样本相比,有25种与心脏发育相关基因的表达出现上调,且其上调倍数均大于3倍。结论雌性SD大鼠甲醛暴露对其胎鼠心肌中与心脏发育相关的基因表达有影响,为进一步进行先天性心脏病发病机制的研究提供了依据。     

不同浓度异氟醚长时间吸入致妊娠中期胎鼠大脑异常凋亡

目的:模拟妊娠中期妇女非产科手术的临床麻醉,对妊娠第14天母鼠进行长时间吸入异氟醚麻醉,观察不同浓度的异氟醚对其胎鼠大脑的影响。方法:选取50只SD雌性大鼠,定时受孕至妊娠第14天,随机分为5组:Iso1.0组、Iso1.5组、Iso2.0组,Oxy组和Control组,每组10只。各组母鼠分别吸入不同浓度异氟醚及100%氧气混合气体4 h,Control组不作任何处置。吸入气体结束4 h后行剖宫取胎术。每只母鼠随机选择2只胎鼠,取其大脑组织切片。TUNEL法检测胎鼠神经细胞凋亡量,计算凋亡细胞数与总细胞数的比率。结果:各组胎鼠大脑凋亡细胞比率存在显著性差异(P<0.05)。与Control组比较,吸入异氟醚的各组,即Iso1.0组、Iso1.5组和Iso2.0组,凋亡细胞比率均呈升高(P<0.05);Oxy组与Control组相似(P>0.05)。Iso1.5组与Iso2.0组相似(P>0.05);Iso1.0组显著低于Iso1.5组及Iso2.0组(P<0.05)。结论:妊娠第14天母鼠持续吸入异氟醚4 h可致胎鼠大脑神经元凋亡显著增加;异氟醚致胎鼠大脑神经元凋亡增加可能存在剂量依赖性。     

缺氧对小鼠中枢神经系统3型脱碘酶mRNA水平的影响

目的　探讨小鼠中枢神经系统（CNS）3型脱碘酶（D3）mRNA表达水平的空间特异性及缺氧对其影响。方法　成年小鼠16只,随机分为对照组和缺氧组。将缺氧组小鼠移入底部盛有新鲜钠石灰的磨口瓶中,密封6 h后与正常喂养的对照组小鼠一起断头处死,分别取大脑、小脑、海马、下丘脑、垂体、延髓和脊髓,提取总RNA,逆转录后进行实时荧光定量PCR扩增,产物行琼脂糖凝胶电泳鉴定特异性。结果 对照组小鼠CNS不同部位D3 mRNA表达水平不同（P<0.01）,小脑D3 mRNA表达水平最高,大脑、脊髓、海马、下丘脑与延髓依次减少;缺氧组小鼠CNS不同部位D3 mRNA表达水平亦不同（P<0.01）,大脑D3 mRNA表达水平最高,小脑、脊髓、海马、下丘脑与延髓依次减少。缺氧致小鼠CNS不同部位D3 mRNA表达水平的改变不同,大脑D3 mRNA表达水平升高（P<0.01）,延髓D3 mRNA表达水平的改变差异无统计学意义（P=0.09）,而小脑、海马、下丘脑与脊髓D3 mRNA表达水平降低（P<0.01）。结论 CNS D3 mRNA表达水平具有空间特异性,缺氧所致CNS D3 mRNA表达水平改变也具有空间特异性。