蛋白酶激活受体2激动剂对肥大细胞释放组胺的影响

目的 研究PAR-2激动剂(tc-LIGRLO-NH2与SLIGKV-NH2)和胰蛋白酶对结肠肥大细胞释放组胺的影响。方法 结肠组织经酶消化后,细胞成份用全HBSS重新悬浮。激发过程在LP4试管中、37℃条件下完成。组胺水平用以玻璃纤维为基础的荧光方法测定。结果PAR-2激动剂tc-LIGRLO-NH2和SLIGKV-NH2均可诱导人结肠肥大细胞剂量依赖性组胺释放。浓度为100μmol／mL时,tc-LIGRLO-NH2和SLIGKV-NH2可分别引起比基础分泌量多出2．5倍和2倍的组胺释放,而反PAR-2激动剂tc-OLRGIL-NH2和VKGILS-NH2在实验浓度高至300μmol／mL时仍对组胺释放无影响。胰蛋白酶在1．0～100μg/mL间可引起剂量相关性组胺释放,胰蛋白酶抑制剂可抑制之。PAR-2激动剂tc-LIGRLO-NH2的作用从加样后1min开始,3min后完成。细胞经过百日咳毒素和代谢抑制剂预先处理后,几乎失去了对tc-LIGRLO-NH2、SLIGKV-NH2和胰蛋白酶刺激的反应性。结论 PAR-2激动剂和胰蛋白酶是高效的组胺释放刺激剂,其在人结肠炎症性疾病中起一定的作用。     

人淋巴细胞的组胺释放因子可诱导多种动物肥大细胞释放组胺

哮喘患者的淋巴细胞体外培养产生的组胺释放因子(HRF),可使人嗜碱性粒细胞、肺肥大细胞(MC)释放组胺。后来证实,人的HRF作用无种属特异性,可使小鼠腹腔MC释放组胺。作者研究了以特异性或非特异性哮喘患者淋巴细胞体外培养产生的HRF对各种动物MC的作用,如小鼠腹腔     

抗原及非特异触发剂诱发大鼠肥大细胞释放组胺的比较

<正> 不同的触发剂可通过不同的方式诱导肥大细胞释放组胺。特异性抗原与联结在细胞膜上的IgE抗体交联,导致细胞激活,快速分泌与颗粒有关的介质。除免疫触发外,肥大细胞释放组胺可由抗IgE、钙离子载体A23187、compound 48/80、ConA和碱性多肽等非特异触发剂介导。这些试剂表现出许     

寄生虫IgE依赖组胺释放因子抗体抑制致敏肥大细胞释放组胺作用的研究

目的 观察抗寄生虫IgE依赖组胺释放因子(HRF)抗体对重组大鼠IgE依赖组胺释放因子(rRHRF)诱导致敏吧大细胞释放组胺功能的影响.方法 用纯化的日本血吸虫和华支睾吸虫IgE依赖组胺释放因子重组蛋白rSjHRr和rCsHRF分别免疫大鼠,分离免疫血清并通过亲和层析纯化出总IgG.将rRHRF(终浓度为75 μg/mL)分别与2种纯化抗体(浓度梯度为3/5,2/5,1/5,0)37℃预先反应30 min后,再加入卵清蛋白变应原致敏的大鼠肺肥大细胞,利用荧光分光光度法测定rRHRF诱导吧大细胞组胺释放量.实验中采用未致敏大鼠血清纯化所得总IgG作为对照.结果 得到了纯化的抗rSjHRF IgG和抗rC-sHRF LgG,抗rCsHRF IgG和抗rSjHRF IgG可明显抑制大鼠内源性IgE依赖HRF诱导致敏肥大细胞释放组胺的功能,但抗体抑制作用的强弱与抗体浓度之间的剂量依赖关系还需进一步实验验证.结论 抗寄生虫IgE依赖组胺释放因子抗体具有抑制大鼠IgE依赖组胺释放因子诱导致敏肥大细胞释放组胺的作用,可能是参与寄生虫感染抑制宿主Ⅰ型超敏反应发生的免疫学机制之一,为预防和控制Ⅰ型超敏反应提供了新的思路.     

豚鼠肥大细胞过敏性组胺释放的钙闸门机制

过敏性的组胺释放需要钙。根据大鼠腹腔肥大细胞所作实验提出,抗原抗体交互作用很快地打开特异的“钙闸门”,亦即暂时提高了钙离子透过肥大细胞质膜的通透性,钙离子再转而触发释放组胺的过程。作者特就豚鼠作实验,检查过敏时豚鼠肥大细胞释放组胺是否依赖于钙,是否符合钙闸门学说。给雄性豚鼠腹腔内注射3ml含12.5mg的卵     

神经肽和内啡肽对肥大细胞组胺释放的调节

本文主要概述近十几年来研究神经、内分泌和免疫相互作用中,神经肽及内啡肽对肥大细胞功能的影响,揭示和补充了Ⅰ型变态反应疾病的发病机制。功能各异的神经肽和内啡肽与不同来源的肥大细胞之间作用具有明显的异质性。这一作用与传统IgE 介导的组胺释放不同,并受中性内肽酶(NEP)、血管紧张素转化酶(ACE)、胃促胰酶(Chyma-se)和类胰蛋白酶(Tryptase)的负调节。     

组胺对人结肠肥大细胞类胰蛋白酶释放的调节作用

探讨组胺对人结肠肥大细胞类胰蛋白酶释放的调节作用。经酶消化后获取人结肠组织肥大细胞,激发后行多种干预实验。用酶联免疫吸附试验法测定类胰蛋白酶。结果发现组胺可诱导人结肠肥大细胞释放类胰蛋白酶,浓度为100μg/L时组胺释放量最大,为基础值的3．5倍。浓度为10μg/L时对人肥大细胞的刺激强度与10mg/L的抗IgE抗体相似。组胺的作用从加样后10s开始,5min后完成。百日咳毒素和抗霉素A联合2．脱氧-D-葡萄糖可显著抑制组胺诱导人结肠肥大细胞释放类胰蛋白酶。100及1000μg/L的组胺与抗IgE抗体或离子载体钙同时加入细胞中,诱导类胰蛋白酶释放的能力低于组胺单独作用组。结论为组胺可激活人结肠肥大细胞,还以自身放大机制调节肥大细胞的脱颗粒过程。     

类胰蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞组胺释放的影响

目的 :研究类胰蛋白酶抑制剂 (TPI)对人大肠肥大细胞释放组胺的影响。方法 :大肠组织经胶原酶和透明质酸酶消化后 ,将细胞成分用全HBSS重新悬浮。肥大细胞在LP4试管中于37℃条件下与各种刺激剂反应 15min而完成激发过程。激发液中的组胺水平用以玻璃纤维为基础的荧光方法测定。结果 :4种TPI中 ,高浓度的亮抑酶肽素和鱼精蛋白可刺激人大肠肥大细胞释放组胺 ;而TLCK和乳铁蛋白则无明显的刺激作用。 4种TPI均可以剂量依赖的方式抑制抗IgE抗体诱导的大肠肥大细胞释放组胺。最大浓度的亮抑酶肽素(2 0 0mmol/L)、TLCK(10 0mmol/L)、乳铁蛋白 (30mmol/L)和鱼精蛋白 (10 0mg/L) ,可分别抑制 4 8.7%、36 .7%、4 0 .2 %和 34.1%的组胺释放。在 37℃条件下 ,将 4种TPI同大肠肥大细胞预培养 2 0min ,与未进行预培养相比较 ,它们对抗IgE抗体诱导的组胺释放无明显改变。 4种TPI还可抑制CI诱导的组胺释放 ,抑制范围在 2 5 %～ 32 %之间。与抗IgE抗体诱导的组胺释放则不同 ,与大肠肥大细胞预培养 2 0min ,与未进行预培养相比较 ,亮抑酶肽素和TLCK对CI诱导的组胺释放的抑制作用明显增强 ;而鱼精蛋白则无此作用。结论 :我们首次发现TPI可抑制人大肠肥大细胞IgE抗体依赖和非IgE抗体依赖的组胺释放 ,提示TPI可望成为炎症性肠     

中华眼镜蛇毒金属蛋白酶诱导人肥大细胞释放组胺的作用

目的：探索中华眼镜蛇毒金属蛋白酶(MT)对人肥大细胞释放组胺的诱导作用及其机制。方法：用肝素凝胶和Superdex75亲和力凝胶纯化MT。将手术切除的人肺、大肠和扁桃体组织在37℃用Ⅰ型胶原酶和Ⅰ型透明质酸酶消化,悬浮细胞均匀地加入含MT、刺激剂或缓冲液的试管中,进行激发实验并用荧光显色法测量上清液的组胺水平。结果：纯化后的MT在SDS-PAGE上呈1条带。MT能诱导人肺、大肠和扁桃体肥大细胞发生剂量依赖性组胺释放。浓度低至0.03mg/L时,MT就能诱导大肠肥大细胞显著性的组胺释放,但对于肺和扁桃体的肥大细胞,MT的最低有效浓度分别为0.3mg/L和30mg/L。MT诱导大肠和肺肥大细胞组胺释放,12min时达高峰,而扁桃体肥大细胞的组胺释放则在8min时达高峰。人大肠、肺和扁桃体肥大细胞经代谢抑制剂和百日咳毒素预处理后,MT诱导其释放组胺的作用明显减弱。缺乏外源性钙、镁离子时,MT诱导肥大细胞释放组胺的能力也明显减弱。结论：MT可能通过G蛋白偶联受体途径激活人肥大细胞,从而参与毒蛇咬伤人体后所发生的病理生理过程。     

毒蕈碱胆碱能受体3在小细胞肺癌增殖和迁移中的调节作用

目的:研究毒蕈碱胆碱能受体3(M3R)在人小细胞肺癌(SCLC)中的表达及其作用。方法:体外培养人SCLC细胞株SBC3和H82,RT-PCR和Westernblotting法检测M3R的表达,MTT法和Boydenchamber法分别检测胆碱受体激动剂碘化乙酰胆碱(ACh)及M3R拮抗剂4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidinemethiodide(4-DAMP)对SBC3细胞增殖和迁移的影响。结果:SBC3和H82细胞均表达M3R,SBC3细胞M3R蛋白相对表达强度是H82细胞的2.65倍。ACh浓度依赖性地刺激SBC3细胞增殖,10-4和10-3mol/LACh在48h和72h作用明显(P＜0.01)。4-DAMP浓度依赖性地阻断ACh对细胞增殖的刺激作用,48h时,10-5mol/L4-DAMP阻断ACh的作用(P＜0.05),至72h,10-7、10-6mol/L(P＜0.05)和10-5mol/L(P＜0.01)4-DAMP都能阻断ACh的作用。无外源性ACh的情况下,10-6、10-5mol/L4-DAMP在48h都能明显地抑制细胞增殖(P＜0.01),在72h,10-5mol/L4-DAMP的作用(P＜0.01)强于10-6mol/L4-DAMP(P＜0.05)。ACh浓度依赖性地增强SBC3细胞向人纤维结合蛋白(Fn)的迁移,10-4mol/LACh增加细胞迁移约3倍,10-6、10-5mol/L4-DAMP几乎完全阻断10-4mol/LACh刺激的SBC3细胞迁移(P＜0.01)。结论:人SCLC细胞表达M3R,M3R拮抗剂抑制SCLC细胞增殖和迁移。     

青霉素过敏反应中肥大细胞脱颗粒及组胺释放等的探讨

1、本文对青霉素过敏反应中肥大细胞脱颗粒及组胺释放等的相关性进行了探讨。 2、BPO—蛋白可致敏豚鼠,并可诱发过敏休克反应,动物的休克率与死亡率均为10/10;致敏组与对照组豚鼠肺组织经与BPO—HSA一起孵育攻击后,组胺释放百分率分别为12.8±3.5％和1.0±0.2％,不经抗原攻击者分别为0.7±0.2％和1.0±0.4％;PCA反应证明:致敏豚鼠血清中有抗BPO。     

血管活性肠多肽及降钙素基因相关肽对大鼠腹腔肥大细胞组胺释放的作用

目的:研究血管活性肠多肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)及降钙素基因相关肽(Calcitonin gene relatedpeptide,CGRP)对大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒的诱导作用;了解神经多肽与肥大细胞的相互关系。方法:分离、纯化SD大鼠腹腔肥大细胞;应用不同浓度的VIP和CGRP作用于大鼠腹腔肥大细胞后,同位素放射液态闪烁法检测肥大细胞的组胺释放、45Ca摄入的变化;同时观察大鼠腹腔肥大细胞经5×10-6mol/L VIP受体抑制剂L-8-K处理后,对VIP诱导脱颗粒作用的影响。结果:5×10-6mol/L的VIP作用后大鼠腹腔肥大细胞组胺释放及45Ca摄入明显增加,并且这种变化与VIP呈剂量效应关系;CGRP对大鼠腹腔肥大细胞组胺释放无诱导作用;L-8-K作用后,肥大细胞对VIP的诱导活化作用无改变。结论:VIP可引起肥大细胞钙内流增加,进一步诱导肥大细胞脱颗粒、释放组胺等生物活性物质,产生生物学效应;这种作用是受体非依赖性的,且与VIP的分子构型有关。     

组胺对肥大细胞激活的研究

组胺是肥大细胞和嗜碱性粒细胞内组氨酸脱羧基后产生的一种胺类物质 ,是肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒的标志物 ,本研究通过组胺对人大肠肥大细胞进行体外干预 ,探讨组胺对人肥大细胞类胰蛋白酶释放的调节和可能的机制。结果发现 :1.组胺可诱导人大肠肥大细胞以非剂量依赖性的方式释放类胰蛋白酶 ,引起最大释放量的组胺浓度为 10 0ng/ml,比基础分泌量多出 3.5倍。组胺浓度高至 10 0 0ng/ml和 10 0 0 0ng/ml时 ,其诱导类胰蛋白酶的释放量介于组胺浓度为 10ng/ml与 10 0ng/ml之间。浓度为 10ng/ml的组胺对人肥大细胞的刺激强度与 10 μg/ml的…     

山莨菪碱(654-2)等对肥大细胞中组胺释放的影响

肥大细胞是富含组胺的细胞,是开展组胺释放研究的理想细胞。我们选用体重为200-300克大白鼠,经腹腔注入Hank′s液,收集肥大细胞。并制成1～2×10~5个细胞/ml的细胞悬液备用。以荧光法测定组胺含量,以1ml细胞悬液中组胺释放总量/1ml细胞悬液中组胺总量×100％表示     

提纯的大鼠肥大细胞在吞噬作用时介质的释放

肥大细胞是具异染性的大的单个核细胞(mononuclear cells),存在于各种组织中。该细胞表面有高度亲和力的IgE受体,其胞浆颗粒中含有组织胺,故认为主要与过敏反应有关。对于其正常生理作用了解甚少。近年观察到成熟肥大细胞能吞噬大小不同的颗粒,但迄今尚无肥大细胞释放介质与酶的报道。     

去甲肾上腺素释放的毒蕈碱型抑制

外周肾上腺素能神经纤维上,除了赋有参与调节NE释放的兴奋性尼古丁受体外,还具有抑制性毒蕈碱型受体。这类抑制性毒蕈碱型受体的激活可抑制心血管系统及其它器官中的NE的胞吐过程(exocytosis)。     

绵羊肥大细胞中类胰蛋白酶的证实

用甲苯胺蓝和阿尔辛蓝常规组织化学方法及特异性酶底物鉴定人肥大细胞类胰蛋白酶的酶组织化学技术，采用小鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体，（ＡＡ１、ＡＡ３和ＡＡ５）通过间接免疫过的经物酶技术对绵羊肥大细胞的组织化学特性进行研究，酶组织化学技术及免疫组织化学技术均首次证实了绵羊肥大细胞颗粒中含有类胰蛋白酶，且该酶可作为绵羊肥大细胞的特异性标志，对于绵羊肥大细胞的常规组织化学染色，Ｃａｒｎｏｙ液及中性缓门