乳腺癌患者骨髓中MUC1 mRNA的检测及其临床意义

目的:探讨乳腺癌患者骨髓中MUC1mRNA的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR技术检测75例乳腺癌患者、15例乳腺良性病变患者和8位健康人骨髓中的MUC1mRNA表达,并分析MUC1mRNA表达与临床病理因素和相关分子指标(Ki67、p53和VEGF)的关系。结果:75例乳腺癌患者中,32例检测出MUC1mRNA阳性表达,阳性表达率为42·7%(32/75)。乳腺良性病变患者和健康人骨髓中未检测到MUC1mRNA表达。MUC1mRNA阳性表达与乳腺癌临床分期、腋窝淋巴结转移和ER状况有关,P<0.05;与年龄、肿瘤大小和PR表达状况差异无统计学意义,P>0.05;与乳腺癌组织中Ki67、p53和VEGF表达均无相关。结论:MUC1mRNA可作为检测乳腺癌患者骨髓微转移的分子指标之一。骨髓微转移的检测可为乳腺癌患者的治疗和预后判断提供帮助。     

食管癌患者骨髓CK19 mRNA的表达及其临床意义

目的:肿瘤患者骨髓中发现CK19等上皮成分提示发生微转移,本研究旨在探讨检测食管癌患者骨髓CK19mRNA的表达及其临床意义.方法:应用RT-PCR技术检测61例食管癌手术患者和15例肺及食管良性病变患者骨髓CK19mRNA的表达,评价RT-PCR方法的敏感性和特异性,分析食管癌患者骨髓CK19mRNA的表达与临床病理因素和预后的关系.结果:RT-PCR方法的敏感性为10-6,15例肺及食管良性病变患者骨髓中均未检测到CK19mRNA的表达.61例食管癌患者骨髓中,CK19mRNA阳性13例,阳性率为21.3%.骨髓CK19mRNA的表达与患者临床病理因素无关(P＞0.05).骨髓CK19mRNA阳性的食管癌患者术后转移和死亡风险高于CK19mRNA阴性的患者.多因素分析结果表明CK19 mRNA是独立的预后预测因子.结论:RT-PCR方法检测食管癌患者骨髓微转移具有良好的敏感性和特异性.CK19 mRNA可作为检测食管癌患者骨髓微转移的分子标志物,是患者术后的一个独立预后预测因子,有助于预测食管癌患者的预后.     

hMAM mRNA和CK19 mRNA联合检测乳腺癌骨髓微转移

目的：检测乳腺癌患者骨髓中的human mamglobin（hMAM）mRNA和CK19 mRNA表达,探讨乳腺癌患者早期骨髓微转移与临床病理学因素的关系.方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR一步法）法检测骨髓组织中hMAM mRNA和CK19 mRNA的表达.结果：102例乳腺癌患者骨髓hMAM mRNA、CK19 mRNA表达阳性者分别为37.3%和56.9%,均高于良性乳腺疾病患者骨髓组织中的表达（P=0.043,P=0.002）.两者的阳性表达率与肿瘤大小、临床分期和组织学分级呈显著相关,P值分别为0.000、0.001、0.020、0.003、0.031和0.001;与淋巴结转移状况、年龄和月经状况无关,P值分别为0.101、0.255、0.111、0.110、0.492和0.187.结论：乳腺癌微转移与肿瘤大小、临床分期和组织学分级有关,hMAM mRNA和CK19 mRNA均可作为检测乳腺癌骨髓微转移标志,且两者间存在一致性.     

检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的临床意义

目的探讨检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的特异性、敏感性及临床意义。方法应用巢式RT-PCR技术,检测59例肺癌患者、11例肺部良性病变患者和20例健康人外周血、骨髓中CK19 mRNA表达。结果巢式RT-PCR检测技术的敏感性达到10-6。59例肺癌患者中,20例检测出外周血微转移,13例检测出骨髓微转移,其阳性检出率分别为33.9％(20/59)和22.0％(13/59),二者有显著正相关(P<0.05)。肺癌患者外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及P-TNM分期均存在密切关系(P<0.05或P<0.01)。肺良性病变患者、健康人外周血和骨髓中均未检测出CK19 mRNA表达。结论肺癌患者外周血和骨髓中均存在用常规方法检测不出的微转移;应用巢式RT-PCR技术检测肺癌患者外周血和骨髓中CK19 mRNA表达,对肺癌微转移的分子诊断具有重要的理论意义和临床应用前景。     

外周血CK19 mRNA在乳腺癌治疗中的意义

目的 探讨乳腺癌患者外周静脉血CK19 mRNA检测对判断乳腺癌微转移的应用价值.方法 采用RT-PCR法检测110例乳腺癌及45例乳腺良性疾病患者外周血中CK19 mRNA,并比较乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性表达率与乳腺良性疾病患者的差异,以及不同分期及治疗前后乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性表达率的差异.结果 乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性表达率明显高于乳腺良性疾病者,Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌患者阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者;乳腺癌患者治疗前CK19 mRNA阳性表达率明显高于治疗后;有淋巴结转移者CK19 mRNA阳性表达率明显高于无淋巴结转移者,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 外周血CK19 mRNA检测可以预测乳腺癌发生的远处转移及微转移.     

乳腺癌患者骨髓中人乳腺珠蛋白mRNA的检测及其临床意义

目的探讨乳腺癌患者骨髓中人乳腺珠蛋白（hMAM）mRNA的表达及其临床意义。方法应用巢式RT—PCR技术,同时检测75例乳腺癌患者、15例乳腺良性病变患者和8例健康人骨髓中hMAMmRNA的表达,分析hMAMmRNA表达与临床病理因素、Ki67、p53和血管内皮生长因子（VEGF）的关系。结果RT—PCR检测的敏感度达到10^-6。75例乳腺癌患者中,21例检测出hMAMmRNA阳性表达,阳性表达率为28．0％。hMAMmRNA阳性表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移和PR状况有关（P〈0．05）,与年龄、肿瘤大小、临床分期和ER状况无关（P〉0．05）;与乳腺癌组织Ki67表达呈正相关（X^2=4．936,P=0．026）。乳腺良性病变患者和健康人骨髓中,未检测到hMAMmRNA表达。结论应用RT—PCR方法检测乳腺癌骨髓中hMAMmRNA的表达,敏感度高、特异性好。hMAMmRNA可作为检测乳腺癌患者骨髓中播散肿瘤细胞的分子指标之一,可为乳腺癌患者的治疗和预后判断提供帮助。     

乳腺癌骨髓微转移状况与ER PR VEGF 及Cath-D等因子的关系

目的:检测乳腺癌骨髓组织CK19 mRNA的表达,判断骨髓微转移状况,探讨其与各因子的关系.方法:采用RT-PCR法(一步法)检测骨髓组织中CK19 mRNA表达;用免疫组化SP法检测乳腺癌组织中ER、PR、Cath-D、C-erbB-2及VEGF的表达.结果:102例乳腺癌患者骨髓组织CK19 mRNA表达阳性率56.9%.骨髓CK19 mRNA表达随乳腺癌组织中ER及PR蛋白表达增强而降低(P＜0.05,P＜0.01);随Cath-D、VEGF蛋白表达增强而呈增高趋势(P＜0.005,P＜0.05);但与C-erbB-2表达状况无关.结论:乳腺癌骨髓微转移与癌组织中某些生物学因子表达有关;这些因子决定癌细胞的生物学行为.     

乳腺癌患者外周血CK19表达临床意义的分析

目的:探讨乳腺癌患者外周血CKl9的表达及其临床意义.方法:采用流式细胞术检测50例乳腺癌患者化疗前后外周血CK19的表达;22例乳腺良性病变患者及健康人20名作为正常对照.结果:乳腺癌患者外周血CK19的表达与正常对照组相比较,差异有统计学意义,P<0.05.肿瘤的大小、腋窝淋巴结及TNM分期与外周血CK19的表达有关(P<0.05).结论:应用流式细胞术检测外周血CK19的表达可作为-临床监测、指导辅助治疗和判断预后的参考指标.     

非小细胞肺癌患者骨髓CK19和LUNX mRNA的实时荧光定量检测和意义

目的：检测非小细胞肺癌患者CK19mRNA和LUNXmRNA的表达情况，探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性．方法：选择初治的非小细胞肺癌（NSCLC）患者62例，以肺部良性疾病10例作为对照组，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）和普通RT—PCR技术，检测肺癌、良性病变肺组织和骨髓的CK19mRNA和LUNXmRNA的表达。结果：肺癌和良性病变肺组织RT—PCR检测结果显示CK19mRNA和LUNXmRNA表达阳性率为100％：62例NSCLC患者骨髓标本FQ—RT—PCR检测结果显示，NSCLC患者中骨髓CK19mRNA表达阳性率45．2％（28／62），明显高于肺良性病变组10％（1／10）（P=0．037），NSCLC组骨髓LUNXmRNA表达阳性率38．7％（24／62）明显高于肺良性病变组0％（0／10）（P=0．017）；骨髓CK19mRNA表达阳性率随病理分期升高，接近统计学意义（P=0．06），而与病理类型、肿瘤分化程度无关；骨髓LUNXmRNA表达阳性率随分期升高且有统计学意义（P=0．02），而与病理类型、肿瘤分化程度无关：骨髓CK19mRNA和LUNXmRNA表达明显相关（P〈0．001）结论：CK19mRNA和LUNXmRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物，可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床分期和治疗、     

细胞角蛋白19基因扩增及过度表达的研究

目的: 建立荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测CK19基因表达水平,探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用.方法: 建立FQ-PCR法,并以β2-微球蛋白为内对照测定30名健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和91例乳腺癌患者外周血中CK19的表达.结果: CK19表达水平在正常对照组和良性乳殚腺疾病组间差异无显著性意义(P>0.05),乳腺癌组均高于前两组(P<0.05),B2-微球蛋白在三组间差异无显著性意义(P>0.05).91例乳腺癌患者阳性率为49.5%,良性乳腺疾病组为0.CK19表达与患者年龄和肿瘤大小和类型无关(P>0.05),与乳腺癌临床分期、组织学分级以及腋淋巴结转移相关(P<0.05).结论: .FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测CK19方法,可有效监测乳腺癌的诊断、疗效、转移和预后.     

胃癌患者外周血及骨髓微转移检测的临床意义

目的:探讨检测胃癌患者外周血和骨髓CK20 mRNA表达的敏感性、特异性及临床意义.方法:采用RTPCR技术,同时对照检测49例胃癌患者、5例胃良性病变患者及5例健康志愿者骨髓与外周血中的CK20 mRNA表达.结果:49例胃癌患者中,骨髓和外周血CK20阳性表达率分别为49.0%(24/49),32.7%(16/49),二者差异有统计学意义(P＜0.05).其中2例外周血CK20表达阳性,骨髓表达阴性.健康志愿者及良性病变患者外周血及骨髓中未检测到CK20表达.本实验中CK20 mRNA RT-PCR技术的灵敏度为10～-5.胃癌的微转移状况与组织分化程度和肿瘤TNM分期有关.结论:应用RT-PCR法以CK20为标志物检测胃癌微转移细胞特异性高.骨髓检测胃癌微转移较单次采血更敏感,但外周血检测仍能提供一些有价值的资料.     

早期乳腺癌血清VEGF水平与骨髓微转移的相关性及临床意义

目的 检测早期乳腺癌患者血清中VEGF及骨髓标本中CK19的表达水平,探讨二者的相互关系及临床意义.方法 应用ELISA法分别检测6例乳腺纤维腺瘤及64例乳腺癌患者血清中VEGF的水平,同时抽取相应的骨髓血标本,应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测标本中CK-19的表达水平,并进行相关性分析.结果 VEGF在乳腺癌患者血清中的表达水平明显高于乳腺纤维腺瘤患者,二者差异显著(P=0.012);在HER2阳性患者中,血清VEGF水平明显高于HER2阴性患者(P=0.016).CK19在乳腺纤维腺瘤患者骨髓标本中未见表达,在乳腺癌患者骨髓血中,阳性表达24例(37.5%),而骨髓中CK19阳性的乳腺癌患者血清VEGF水平显著高于CK19阴性的患者(110.46±90.65 vs 70.88±77.13,P=0.038),且二者的表达呈正相关.结论 早期乳腺癌患者血清VEGF水平与骨髓微转移密切相关,提示VEGF可能参与了肿瘤细胞的侵袭和播散,可作为早期乳腺癌微转移的血清学指标.     

检测CK19 mRNA和MUC1 mRNA诊断非小细胞肺癌淋巴结微转移

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴结微转移的基因诊断方法，并分析CK19mRNA、MUC1mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法应用巢式逆转录聚合酶链反应(nestedRT-PCR)，对31例NSCLC的119枚淋巴结中的粘蛋白1(MUC1)mRNA、角蛋白19(CK19)mRNA表达情况进行检测；对照组为10例肺良性病变患者的35枚淋巴结。结果 31例NSCLC患者的119枚淋巴结中，66枚(55.5％)淋巴结存在CK19mRNA阳性表达，65枚(54.5％)存在MUC1mRNA阳性表达；肺良性病变患者35枚淋巴结中CK19mRNA和MUC1mRNA表达均为阴性，与肺癌组比较均有显著性差异。结论 MUC1、CK19基因均可作为RT-PcR法检测NSCLC患者淋巴结微转移的分子标志物，两者联合检测可能有助于早期诊断肺癌转移。     

乳腺癌患者骨髓GalNAcT mRNA的检测及其临床意义

目的：研究乳腺癌患者骨髓β1，4-N-乙酰半乳糖胺转移酶（GalNAcT）mRNA的表达，探讨其作为乳腺癌骨髓微转移检测指标对临床的应用价值。方法：对40例乳腺癌患者的骨髓及外周血采用巢式RT—PCR方法检测GalNAcT mRNA表达，同时以免疫组化的方法检测骨髓标本中细胞角蛋白（cytokeratin，CK）的表达。结果：40例患者骨髓中GalNAcT mRNA阳性表达17例（42．5％），外周血阳性表达7例（17．5％）；10例血液系统良性疾病患者骨髓和15例健康志愿者外周血中GaINAcT mRNA均为阴性。免疫组化结果显示：40例乳腺癌骨髓中有11例（27．5％）CK阳性，其GalNAcT mRNA都阳性；有6例（15．0％）CK阴性而GalNAcT mRNA阳性。结论：RT—PCR和免疫组化都是检测乳腺癌患者骨髓微转移的可靠的方法，但前者的敏感性高于后者。GalNAcT mRNA可作为一种新的肿瘤标志物来检测乳腺癌患者骨髓微转移。     

早期乳腺癌血清VEGF水平与骨髓微转移的相关性及临床意义

目的：检测早期乳腺癌患者血清中VEGF及骨髓标本中CK19的表达水平,探讨二者的相互关系及临床意义。方法：应用ELISA法分别检测6例乳腺纤维腺瘤及64例乳腺癌患者血清中VEGF的水平,同时抽取相应的骨髓血标本,应用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测标本中CK-19的表达水平,并进行相关性分析。结果：VEGF在乳腺癌患者血清中的表达水平明显高于乳腺纤维腺瘤患者,二者差异显著（P=0.012）;在HER2阳性患者中,血清VEGF水平明显高于HER2阴性患者（P=0.016）。CK19在乳腺纤维腺瘤患者骨髓标本中未见表达,在乳腺癌患者骨髓血中,阳性表达24例（37.5%）,而骨髓中CK19阳性的乳腺癌患者血清VEGF水平显著高于CK19阴性的患者（110.46±90.65 vs 70.88±77.13,P=0.038）,且二者的表达呈正相关。结论：早期乳腺癌患者血清VEGF水平与骨髓微转移密切相关,提示VEGF可能参与了肿瘤细胞的侵袭和播散,可作为早期乳腺癌微转移的血清学指标。     

外周血CK19 mRNA检测在判断乳腺癌微转移中的应用

目的 探讨CKl9mRNA检测对判断乳腺癌微转移的价值。方法 应用RT—PCR法检测66例乳腺癌患者术前和综合治疗6个月、1年后外周血中CKl9mRNA表达状况，并以30例乳腺良性疾病患者和30例正常使康女性作为对照。结果 66例乳腺癌和30例乳腺良性疾病患者CKl9mRNA的阳性率分别为90．9％(60／66)和3．3％(1／90)，30正常使康女性均阴性，相互比较有非常显著性差异(P＜0．01)。有淋巴结转移者和无淋巴结转移者阳性率分别为97．7％(43／44)和77．3％(1742)，相互比较有显著性差异(P＜0．05)。综合治疗6个月和1年后阳性率分别为28．8％(19／66)和33．3％(22／66)，与术前(90．9％，60／66)比较有非常显著性差异(P＜0．01)。结论 CKl9mRNA检测可以早期预测乳腺癌发生的血道微转移。     

乳腺癌患者外周血SBEM mRNA的检测及其临床意义

背景与目的乳腺癌患者的死亡原因几乎均为肿瘤远处转移。目前乳腺癌诊断尚无公认的特异性标志物,本文旨在探讨特异性的乳腺癌标志物─乳腺小粘蛋白(smallbreastepithelialmucin,SBEM)在乳腺癌外周血的表达及其意义。方法用巢式逆转录聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)技术检测67例乳腺癌、16例乳腺良性肿瘤及20例健康志愿者外周静脉血中的SBEMmRNA的表达情况。结果SBEMmRNA在健康志愿者及乳腺良性肿瘤患者外周血中表达均为阴性;67例乳腺癌患者外周血中SBEMmRNA表达率为50.7%(34/67),在乳腺癌患者的临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期中SBEMmRNA表达率分别为25.0%(2/8)、45.8%(11/24)、43.8%(7/16)和73.7%(14/19),在Ⅳ期乳腺癌患者外周血中SBEMmRNA的检出率明显高于其他各期(P<0.05)。SBEMmRNA的表达与患者年龄、原发癌灶大小、病理类型、ER和PR的状态无关(P>0.05)。结论SBEMmRNA特异表达于乳腺癌患者的外周血,有可能作为判断乳腺癌血道微小转移的指标之一。