食管癌患者外周血CK20-mRNA的表达及意义

目的 探讨逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血中细胞角蛋白20mRNA(CK20-mRNA)的表达对诊断食管癌微转移的意义.方法 采用RT-PCR方法 检测53例食管癌患者、10例食管良性病变及20例健康体检者外周血CK20-mRNA,并进行比较.结果 食管良性病变对照组和健康对照组的外周血中均未检测出CK20-mRNA阳性表达;42例无远处转移食管癌患者外周血CK20-mRNA表达阳性率为40.48%(17/42),11例远处转移者CK20-mRNA表达阳性率为81.82%(9/11),两者差异有显著性意义(P<0.05).结论 CK20-mRNA是检测食管癌外周血微转移的良好的分子标志物,其表达与食管癌TNM分期关系密切.     

荧光定量RT—PCR检测肺癌外周血CK19、CK20mRNA表达

目的 应用荧光定量RT-PCR（Fluorogenic quantitative reverse trailsctiptase po1ymerase chain reaction，RT-PCR）检测肺癌外周血中微转移情况。方法 用荧光定量RT-PGR方法检测103例肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达。结果 103例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性35例，阳性率33．98％；CK20mRNA检测阳性17例，阳性率16．50％，其中6例患者CK19、CK20mRNA均阳性。统计结果显示外周血CK19、CK20mRNA的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关，与性别、年龄、病理类别无关。结论 用荧光定量RT-PCR法检测肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA具有较高的灵敏度和特异性，有助于早期筛选亚临床转移。     

子宫内膜癌患者外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

目的：探讨子宫内膜癌患者外周血CK20 mRNA的表达对子宫内膜癌微转移诊断的价值。方法：采用RT-PCR方法对40例子宫内膜癌患者及20例子宫良性病变患者外周血CK20 mRNA的表达进行检测。并以子宫内膜癌组织和健康女性外周血为对照。结果：子宫良性病变患者及健康女性外周血中均无CK20 mRNA表达；子宫内膜癌组织均有CK20 mRNA表达。40例子宫内膜癌患者术前外周血中，11例检出CK20 mRNA阳性表达，阳性率27．5％。CK20 mRNA阳性检出与临床分期存在显著性相关（P〈0．05），随着临床分期的进展，CK20 mRNA阳性率明显增加。CK20mRNA阳性表达与病理分级无关（P〉0．05）。结论，子宫内膜癌早船可能已出现微量癌细胞的血行播散，CK20可作为子宫内膜癌血行转移的分子标志之一，检测子宫内膜癌患者外周血癌细胞可能成为改进分期、评估预后、提供治疗的参考指标。     

大肠恶性肿瘤外周血微转移检测的意义

目的研究大肠癌患者外周血CK19mRNA的表达，并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测41例大肠癌患者和8例肠道非恶性病变手术患者的外周血CK19mRNA的表达。结果8例胃肠道非恶性病变手术患者、8例健康志愿者的外周血CK19mRNA无阳性表达；41例大肠癌患者外周血CK19mRNA阳性表达率分别：单次外周血采样CK19mRNA阳性表达率为41．5％；两次采样总阳性率大肠癌患者为65．9％，外周血重复采样阳性率高于单次采样（P〈0．01）。DukeC、D期患者CK19mRNA阳性表达率高于Duke B期（P〈0．05）。结论大肠癌患者外周血CK19mRNA是一种敏感、特异的检测方法，可以作为检测大肠癌微转移的指标并指导其治疗和预后。     

应用套式RT—PCR方法检测大肠癌患者外周血中的肿瘤细胞

目的：探讨应用套式RT－PCR检测在肠癌患者外周血中的肿瘤细胞的可行性及其临床意义。方法：以CK－20mRNA为靶基因,应用套式RT－PCR方法检测10名健康人,17名非恶性消化系疾病患者,32名大肠癌患者手术前、后3天外周血中的肿瘤细胞,结果：CK－20mRNA在空白对照组中均呈阴性表达,大肠癌患者CK－20表达情况为：2名Duke'sA期患者外周血中未检出CK－20阳性细胞,15名Duke'sB期患者外周血中CK－20mRNA阳性表达4例,10名Duke'sC患者外周血CK－20mRNA阳性表达6例,5名Duke'sD期患者外周血中CK－20mRNA阳性率达4例。32名大肠癌患者术,术前CK－20mRNA阳性总检出率为43．8％;A、B期阳性率为23．5％;C、D期阳性率为66．7％。结论：以CK－20为靶基因,应用套式RT－PCR检测大肠癌患者外周血中的肿瘤细胞是一非损伤性且特异性、敏感性较高的检测方法。它将有助于肿瘤经血液微转移的早期诊断,并将有助于指导辅助化疗和监测其疗效。．     

细胞角蛋白19、20 mRNA定量在检测结肠癌患者外周血微转移中的应用

目的探讨细胞角蛋白19、20（CK19、20）mRNA表达在诊断结肠癌患者外周血微转移中的作用。方法随机选择和收集36例结肠癌患者、34例结肠良性疾病患者及32名健康献血员外周血,用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（FQ—RT-PCR）测定CK19、20mRNA含量。结果CK19、20mRNA在结肠良性疾病组外周血均未见表达。在健康献血员组只有1例CK19表达阳性,CK20均为阴性。在结肠癌组,CK19检测阳性率为58．3％（21／36）;CK20阳性率为36．1％（13／36）;CK19、20联合检测阳性率为77．8％（28／36）。结肠癌组与结肠良性疾病组或献血员组之间比较,CK19、CK20在外周血表达差异均有显著性（P〈0．05）。结合临床资料分析,结肠癌患者外周血CK19、CK20mRNA阳性表达和淋巴结转移、Dukes分期关系密切（P〈0．05）,而与肿瘤类型及分化程度无关（P〉0．05）。结论CK19、20mRNA可作为检测结肠癌外周血微转移的标志物,两者联合检测可提高检出率。     

大肠恶性肿瘤外周血微转移的检测及其临床意义

目的　研究大肠癌患者外周血CK19mRNA的表达 ,并探讨其临床意义。方法　采用RT PCR方法检测 4 1例大肠癌患者和 8例胃肠道非恶性病变手术患者的外周血CK19mRNA的表达。结果　 8例胃肠道非恶性病变手术患者、8例健康志愿者的外周血CK19mRNA无阳性表达 ;4 1例大肠癌患者外周血CK19mRNA阳性表达率分别 :单次外周血采样CK19mRNA阳性表达率为 4 1 5 % ;两次采样总阳性率大肠癌患者为 6 5 9% ,外周血重复采样阳性率高于单次采样 (P <0 0 1)。DukeC、D期患者CK19mRNA阳性表达率高于DukeB期 (P <0 0 5 )。结论　大肠癌患者外周血CK 19mRNA是一种敏感、特异的检测方法 ,可以作为检测大肠癌微转移的指标并指导其治疗和预后。     

RT-PCR检测胃癌无转移淋巴结(PN0)微转移的临床意义

目的 从分子水平对胃癌淋巴结微转移进行诊断分级，评价胃癌临床分期及预后。方法 应用RT-PCR方法，以细胞角蛋白18(CK18)为标志基因，检测对照组良性病变淋巴结20枚，胃癌组无转移淋巴结(PN0)199枚。结果 ①对照组良性病变淋巴结中无CK18mRNA表达，与病理符合率100％。胃癌组病理检查为阴性的199枚淋巴结中有CK18mRNA阳性表达34枚，阳性率17．1％。②胃癌淋巴结微转移(LMM)与肿瘤临床病理参数浸润(T)呈正相关。结论 用RT-PCR法检测胃癌无转移淋巴结CK18mRNA是发现胃癌淋巴结微转移敏感而特异的方法，对胃癌临床分期及指导治疗有较大的临床意义。     

肺癌患者外周血微转移检测的意义

目的研究肺癌患者外周血中CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA的表达及联合检测的临床意义。方法采用荧光定量PCR技术,检测48例肺癌患者、8例肺良性病变和30名健康志愿者外周血CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA水平。结果48例肺癌患者外周血CEAmRNA的水平为(16264±28765)copies/ml,其中26例阳性,阳性率为54.2%;CK19mRNA的水平为(14891±27244)copies/ml,其中27例阳性,阳性率为56.3%;CK20mRNA的水平为(10924±21678)copies/ml,其中20例阳性,阳性率为41.7%。8例肺良性病变中CK20mRNA阳性1例(12.5%),CEAmRNA和CK19mRNA均为阴性,健康志愿者30例未见表达。单项检测敏感度和准确性较低,联合其中二项检测敏感度和准确性较高,联合三项敏感度达77.1%、准确性可达87.2%。CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA水平和阳性率与肺癌类型和不同临床分期有关。结论CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA可作为标志物检测肺癌患者外周血微转移,联合二至三项指标有较高的检出率,定量检测有助于肺癌微转移的监测。     

NSCLC术后病人外周血MUC1 mRNA和CK19 mRNA表达及其意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）术后外周血微转移的基因诊断方法，并分析黏蛋白1（MUC1）mRNA、角蛋白19（CK19）mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR），对60例NSCLC病人（肺癌组）的外周血MUC1 mRNA、CK19 mRNA表达情况进行检测；以10例肺良性病变病人及15例健康人的外周血标本作对照。结果肺癌组外周血MUC1 mRNA阳性表达21例（35%），CK19 mRNA阳性表达18例（30％）；对照组MUC1 mRNA和CK19 mRNA表达均为阴性，两组比较差异均有显著性（x^2=7．292、5．921，P〈0．01、0．05）。结论MUC1、CK19基因均可作为RT—PCR法检测NSCLC病人淋巴结微转移的分子标志物，两者联合检测可能有助于肺癌转移早期诊断。     

胃癌患者外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

目的探讨胃癌患者外周血中CK20 mRNA的表达水平及与临床病理因素的相关性,评价其在微转移中的诊断意义。方法运用巢式逆转录-聚合酶链反应检测46例胃癌患者外周血CK20 mRNA的表达情况,并以20例慢性胃炎患者和20例健康志愿者作对照。结果胃癌组外周血CK20 mRNA阳性表达率为60．8％（29／46）,而慢性胃炎组和健康志愿者组均表达阴性,差异均有统计学意义（P〈0.0001）;胃癌组CK20 mRNA的阳性表达率与胃癌分化状态、TNM分期和有无淋巴结转移相关（均P〈0．05）,而与年龄、性别、肿瘤大小和浸润深度无关。结论胃癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为胃癌早期诊断及微转移的判断指标,可对临床分期、预后判断和治疗起指导作用。     

结直肠癌MMP-2的表达与血液微转移的关系

目的从肿瘤的临床病理学和分子病理学角度对结直肠癌组织中MMP-2的表达与肿瘤外周血微转移的关系进行探讨。方法收集了2003年6～12月行根治手术的结直肠癌患者中的30例，行MMP-2免疫组化染色并应用RT-PCR方法检测外周血的转移肿瘤细胞，比较不同MMP-2表达量与血液微转移的关系。结果76．67％结直肠癌患者的肿瘤细胞表达MMP-2（23／30），定位于胞浆，其中弱阳性13例，阳性4例，强阳性6例；MMP-2的表达与肿瘤分期、淋巴转移相关（P〈0．05）。外周血CK20 mRNA表达率为36．7％，外周血CK20 mRNA与结直肠癌分期相关（P=0．004），与肿瘤部位，大体类型，恶性程度无关。结直肠癌组织中MMP-2的表达与结直肠癌患者外周血CK20 mRNA密切相关，随着MMP-2表达的增强外周血CK20 mRNA的阳性率也增加（P=0．002）。结论结直肠癌组织中MMP-2表达的程度不仅能够反映肿瘤的分期，而且能够反映肿瘤血液中微转移的情况。     

CK20 mRNA和hTERT mRNA在大肠癌围手术期血行微转移中的转录特征

目的 探讨细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA作为大肠癌围手术期血行微转移标志物的价值.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例大肠癌患者术前、术中及术后外周血CK20 mRNA和hTERTmRNA的表达,并对不同分化程度、不同Dukes分期的大肠癌患者CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达进行比较.结果 40例大肠癌患者外周血CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达率,术前分别为47.5%(19/40)和45.0%(18/40),术中为70.0%(28/40)和70.0%(28/40),术后为10.0%(4/40)和32.5%(13/40).除术后hTERT mRNA阳性率与术前无显著差异(P＞0.05)外,术中外周血CK20 mRNA、hTERT mRNA阳性率和表达强度(与内参照β-actin比值)均显著高于术前(P＜0.01,P＜0.05),术后明显低于术前和术中(P＜0.01).hTERT mRNA在低分化肿瘤的表达明显高于高、中分化组(P＜0.05),而CK20mRNA在低分化肿瘤的表达强度低于高、中分化组(P＜0.01).大肠癌围手术期Dukes B期和C D期之间CK20 mRNA和hTERT mRNA均无显著性差异(P＞0.05).结论 大肠癌患者围手术期血行微转移的发生几率较高,病理分化程度低者更易发生,但与Dukes分期无明显相关,CK20 mRNA和hTERT mRNA联合检测对大肠癌血液微转移具有较高的敏感性和特异性,是判断围手术期血行微转移的良好标志物.     

鸟苷酸环化酶C在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的：探讨鸟甘酸环化酶 C （ GCC ）在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR法对32例大肠癌患者、25例大肠良性病变患者、30例健康体检者外周血中GCC表达情况进行检测,并对大肠癌病理指标与GCC mRNA 表达阳性率之间关系进行研究。结果32例大肠癌患者中,GCC mRNA 的阳性检出率为65.63％（21／32）,良性组中 GCC mRNA 的阳性检出率为20.00％（5／25）,而对照组中未见 GCC mRNA 表达;三组外周血中表达阳性率差异具有统计学意义（P〈0.05）。大肠癌患者 GCC mRNA 表达水平与Duke 分期、淋巴结转移和肝转移密切相关（P〈0.05）,与年龄、性别、肿瘤大小等无关（P〉0.05）。结论 GCC mRNA 在大肠癌患者外周血中阳性表达率较高,特别是复发或转移病例,可作为大肠癌术后复发、转移的早期检测指标之一。     

手术操作与胃癌微转移的关系

目的探讨手术操作与胃癌微转移的关系。方法采用巢式逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）技术检测70例胃癌病人手术前、后外周血细胞角蛋白（CK20）mRNA及癌胚抗原（CEA）mRNA的表达情况，并以20例健康志愿者作为阴性对照组，以10例胃癌组织作为阳性对照组。结果CK20mRNA及CEAmRNA在术前阳性表达率分别为32．9％和51．4％，而术后二者的阳性表达率分别为62．9％和70．0％，术后阳性率明显高于术前（X^2=12．62、5．06，P〈0．05）。20例健康志愿者无1例阳性表达。结论手术操作可以促使胃癌发生微转移。     

前列腺癌患者外周血PSA mRNA的意义

目的 探讨前列腺特异抗原（PSA） mRNA在前列腺癌（PCa)患者外周血表达的意义。方法 运用巢式RT－PCR检测36例PCa患者,28例良性前列腺组织增生（BPH）患者和15例健康志愿者外周血。结果 BPH患者和志愿者外周血PSA mRNA均阴性,36例PCa外周血PSA mRNA阳性率38．9％（14／36）。PSA mRNA表达阳性率随肿瘤分期进展而增高,各期阳性率有显著差异（P＜0．05）。结论 PSA mRNA特异表达于PCa外周血,可用作PCa微转移的指标。     

肺癌患者血中癌细胞角蛋白20的检测

目的 以逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测外周血肺癌细胞,以监测其血路转移情况。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测２５例肺癌手术患者和３５例肺癌化疗前患者外周血中细胞有蛋白２０（＊ＣＫ２０）,并以肺癌组织和非肿瘤患者外周血为对照。结果 非肿瘤患者在中基本上无ＣＫ２０检出,肺癌手术时肺动脉血中ＣＫ２０检出明显升高,阳性率达５４％。晚期肺癌２ＣＫ２０亦较高,阳性率达４０％。结论ＣＫ２０可能作为肿瘤标志