大蒜素协同抗癌药对肿瘤细胞杀伤作用的研究

目的:探讨大蒜素对人胃癌细胞系MGC-803和SGC-7901细胞周期的影响及其与周期特异性药物联合使用,增强抗癌药物对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:苔盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制率以观察大蒜素对胃癌细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪及瑞士-姬姆萨染色光镜观察检测细胞周期的改变;3μg/ml大蒜素与周期特异性抗癌药物博莱霉素A5和长春新碱联合使用,观察药物细胞毒活性的改变。结果:大蒜素可抑制MGC-803细胞生长,24hIC₅₀为6.4μg/ml,也可抑制SGC-7901细胞的生长,24hIC50为7.3μg/ml;以3μg/ml、6μg/ml、9μg/ml终浓度大蒜素分别作用两种胃癌细胞系24h后,与对照组比较,G₀/G₁细胞周期百分率明显减少,而G₂/M期明显增加(P<0.01);6μg/ml大蒜素作用培养细胞24h后,与对照组比较细胞分裂指数明显增加。提示两种细胞系经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于M期;大蒜素与两种抗癌药物联合使用,作用于MGC-803细胞,BLMA5和VCR的24hIC₅₀值分别由单独应用的1.210μg/ml和0.125μg/ml下降到0.370μg/ml和0.031μg/ml,作用于SGC-7901细胞,BLMA₅和VCR的24hIC₅₀值分别由单独应用的1.760μg/ml和0.287μg/ml下降到0.680μg/ml和0.074μg/ml,显示低剂量大蒜素增强了抗癌药物对肿瘤细胞的杀伤作用。结论:大蒜素可使MGC-803及SGC-7901两种细胞?     

P53基因与大肠癌化疗药敏的实验研究

ｐ５３基因与大肠癌化疗药敏的实验研究王灏郁宝铭郑民华张浩波作者单位：上海第二医科大学附属瑞金医院外科（上海２０００２５）关键词大肠肿瘤ｐ５３基因细胞凋亡化疗药敏大肠癌是一种常见的消化道肿瘤，虽然其发病率呈逐年上升的趋势，但若选用合理的治疗手段，其预后...     

诱导分化剂与细胞毒化疗药联合治疗可移植性人脑胶质瘤的实验研究

背景与目的：细胞毒化疗药物是治疗胶质瘤的主要药物,但有诸多限制,联合诱导分化剂治疗胶质瘤能否增加其疗效尚不知,本研究旨在探讨诱导分化剂与细胞毒化疗药抗胶质瘤的联合效应。方法：卡氮芥（BCNU）与苯丁酸钠（SPB）联合治疗移植于裸小鼠皮下的低分化人脑胶质瘤,观察移植瘤体积变化,病理学形态,细胞增殖周期时相,分化抗原表达和细胞凋亡情况等指标。结果：BCNU与SPB联合给药组的疗效明显优于任何一种单独给药组,表现为肿瘤体积增加缓慢,光镜下细胞密集程度降低。间质增加,出现类星形的多角形细胞,G0/G1期细胞比例增加,胶质纤维酸性蛋白表达上调,凋亡细胞增多。结论：BCNU与SPB联合使用可显著抑制胶质瘤细胞的增殖,并促进其向良性方向分化。     

大蒜素对结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖的影响

目的：观察大蒜素对结肠癌细胞ＬｏＶｏ生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法：不同浓度的大蒜素作用于体外培养的ＬｏＶｏ细胞,倒置显微镜下观察ＬｏＶｏ细胞的形态学变化,采用ＭＴＴ法检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞增殖抑制能力,Ａｎ ｎｅｘｉｎＶ ＦＩＴＣ标记流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞周期影响。结果：大蒜素可抑制人结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,２４、４８和７２ｈ大蒜素抑制ＬｏＶｏ细胞的ＩＣ５０分别为３２.２３、１０.７４和６.５８μｇ／ｍｌ;大蒜素能够诱导ＬｏＶｏ细胞凋亡,作用２４ｈ其诱导凋亡率随着药物浓度的递增具有增高趋势,作用４８ｈ其诱导凋亡作用峰值浓度为８μｇ／ｍｌ,后再继续增加浓度凋亡率反而下降;大蒜素作用ＬｏＶｏ细胞２４ｈ后,大蒜素浓度低于４μｇ／ｍｌ时,ＬｏＶｏ细胞周期被阻滞于Ｇ２／Ｍ;     

健择联合常用化疗药物对胃癌细胞株的作用

目的 探讨健择(GEM)与常用化疗药物合用对胃癌细胞株的作用。方法 应用MTT法测定GEM与其它五种化疗药的单药和联合用药对胃癌细胞株的抑制率。结果 单独用药化疗敏感性顺序：GEM＞OXA＞MMC＞5FU＞FUDR＞CDDP；联合用药的敏感性顺序：MMC GEM＞CDDP GEM＞OXA GEM＞FUDR GEM＞5FU GEM。联合用药协同作用大小为：OXA GEM＞CDDP GEM；GEM与MMC、5FU或FUDR无明显协同作用。除MMC GEM外，其他各组剂量减少指数(DRI)均＞1。FUDR MMC GEM组和5FU MMC GEM组三种药物联合用药的敏感性相同，协同作用前者大于后者，两组DRI也明显优于两种药物的联合用药。结论 GEM与MMC或铂类化疗药联用，对胃癌细胞株有显著的抑制作用，与OXA联用十分理想。提示在胃癌病人化疗中GEM与MMC或铂类化疗药联用，可能有一定的疗效。     

大蒜素改善GJIC功能及抗氧化作用的实验研究

本文从氧自由基，ＧＪＩＣ及ＤＮＡ含量三个不同角度观察了大蒜素可显著减轻氧自由基对细胞的毒害，并能解除苯巴比妥对ＧＪＩＣ的抑制，提示大蒜素有明显的预防苯巴比妥的动物促癌作用对氧自由基损害的功效。     

应用流式细胞术研究大蒜素对肿瘤细胞周期的影响

运用流式细胞术手段，选择了两类增殖周期相差较大的肿瘤株进行了大蒜素对肿瘤细胞增殖周期影响的研究。首先，我们用ＭＴＴ比色测定了不同剂量的大蒜素对Ｋ５６２细胞的报制率，并用计数法测定了不同剂量的大蒜素对Ｋ５６２细胞生长的曲线的影响。     

大蒜素对重组质粒转染后Jurkat细胞周期和凋亡的影响

目的:探讨大蒜素转染后下调CXCR4表达对Jurkat细胞周期和凋亡的影响及大蒜素的作用机制.方法:克隆人CXCR4启动子序列,构建报告载体PgL4.17-CXCR4,转染Jurkat细胞,用不同浓度的大蒜素处理对数生长期的Jurkat细胞,PT-PCR检测CXCR4 mRNA的变化水平,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:不同浓度剂量组与空白对照组相比,转染Jurkat细胞CXCR4 mRNA表达水平明显下降,G0/G1期细胞比例增加,G2/M期和S期细胞比例相应下降,凋亡细胞明显增加.结论:重组报告载体PgL4.17-CXCR4转染Jurkat细胞,能够有效下调CXCR4基因,诱导Jurkat细胞发生凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制细胞增殖.     

亚砷酸钠对人胃癌细胞株SGC-7901作用机制的研究

 目的 探讨亚砷酸钠对人胃癌细胞株SGC-7901生物学行为的影响及其作用机制。方法采用MTT法、光镜、电镜、流式细胞仪检测和免疫细胞化学方法研究亚砷酸钠对人胃癌细胞株SGC-7901生物学行为的影响。结果 不同浓度（2.50～40.00 μmol／L）的亚砷酸钠均能抑制SGC-7901细胞生长，且具有浓度和时间依赖性，其作用72 h的中效浓度为8.69 μmol／L。流式细胞仪检测发现亚砷酸钠作用48 h，72 h后， SGC-7901细胞出现G2／M期阻滞。形态学观察显示亚砷酸钠作用72 h后，细胞出现典型的凋亡和坏死形态学改变。免疫细胞化学法发现亚砷酸钠能显著上调细胞Caspase-3蛋白的表达。结论 亚砷酸钠对SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用，并可诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡和坏死，其机制可能与其抑制ROS的清除上调Caspase-3蛋白的表达有关。     

大蒜素诱导人胃癌细胞M期阻滞的研究

目的探讨大蒜素对人胃癌细胞系MGC803和SGC7901细胞周期的影响及其作用机制。方法以台盼蓝拒染法检测人胃癌细胞系MGC803和SGC7901细胞的增殖抑制率;以透射电镜观察两种胃癌细胞的直接损伤改变;以流式细胞仪及瑞士姬姆萨染色光镜观察两种胃癌细胞周期的改变;以SP免疫组化及RTPCR方法检测两种胃癌细胞的p21WAF1和p16INK4基因及蛋白表达的变化。结果大蒜素可抑制MGC803细胞生长,24h药物半数抑制浓度(IC50)为6.4μg/ml;也可抑制SGC7901细胞的生长,24hIC50为7.3μg/ml。12μg/ml的大蒜素作用两种胃癌细胞24h后,细胞出现急性直接损伤,膜系统改变明显。以3μg/ml、6μg/ml、9μg/ml终浓度大蒜素分别作用于两种胃癌细胞系24h后,与对照组比较,G0和G1期细胞周期百分比(%)明显减少,而G2和M期明显增加(P<0.01);6μg/ml大蒜素作用培养两种胃癌细胞24h后,与对照组比较,细胞分裂指数明显增加,提示两种细胞系经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于M期。经大蒜素处理后,MGC803细胞的p21WAF1和p16INK4基因及蛋白表达均明显增加;SGC7901细胞的p21WAF1基因及蛋白表达明显增加。结论大蒜素可使MGC803及SGC7901两种细胞周期阻滞于M期;大蒜素的M期阻滞作用可能与其上调细胞的p21WAF1和p16INK4基因表达有关。     

顺铂等化疗药物对胃癌细胞端粒酶活性的影响

目的：探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法：选择IC50剂量的顺铂，丝裂霉素C，阿霉素及5－氟脲嘧啶和甲酰四氢叶酸处理胃癌细胞，采用半定量TRAP－银染法检测药物处理前后胃癌细胞端粒酶活性。并应用流式细胞学检测细胞周期和细胞凋亡率。结果：顺铂，丝裂霉素C和阿霉素在诱导两细胞凋亡的同时，下调端粒酶活性，且其抑制作用呈时间依赖关系；5－氟脲嘧啶和甲酰四氢叶酸对胃癌细胞端粒酶活性无明显抑制作用，结论：化疗前后细胞端粒酶活性的变化，可作为化疗敏感性指标。     

化疗药物与LAK细胞联合抗癌的可行性

 采用3H-TDR释放法检测6种常用化疗药物对LAK细胞杀瘤活性的影响。结果显示：不同化疗药物对IL-2诱导LAK细胞活性及对培养好的LAK细胞活性的影响各不相同，同种化疗药物不同浓度时的影响也有差异。卡铂(CARBO)和顺铂(CDDP)对IL-2诱导LAK细胞活性无抑制作用，且可增强培养好的LAK细胞的杀瘤活性；环磷酰胺(CTX)和5-氟尿嘧啶(5-Fu)对诱导及培养好的LAK细胞活性均无抑制作用；阿霉素(ADM)和丝裂霉素(MMC)对诱导及培养好的LAK细胞活性均有抑制作用。由此推论CARBO和CDDP与IL-2/LAK细胞联合抗癌可望产生协同效应；CTX和5-Fｕ与IL-2/LAK细胞联合抗癌可能有相加作用；而ADM和MMC则可能削弱LAK细胞的杀瘤效应。     

人肺腺癌细胞经化疗药物作用后对LAK细胞的敏感性

在体外实验中研究了８种化疗药物作用后的个旧人肺腺癌细胞（ＧＬＣ－８２）对ＬＡＫ细胞的敏感性。ＧＬＣ－８２细胞本身对化疗药物不敏感，经药物作用２４小时后用３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测ＬＡＫ细胞对其杀伤率。结果表明：顺铂（ＣＤＤＰ）、卡铂（Ｃａｒｂｏ）、阿霉素（ＡＤＭ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）及长春新硷（ＶＣＲ）处理后的ＧＬＣ－８２细胞对ＬＡＫ细胞的敏感性增强；环磷酰胺（ＣＴＸ）、足叶乙甙（ＶＰ１６）及５－氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）则无明显影响。实验提示：对化疗不敏感的肺腺癌用ＣＤＤＰ、Ｃａｒｂｏ、ＡＤＭ、ＭＭＣ及ＶＣＲ后加用ＬＡＫ细胞可提高肺癌治疗的有效率。     

Cytotoxic and Apoptotic-inducing Effects of Purple Rice Extracts and Chemotherapeutic Drugs on Human Cancer Cell Lines

Pigmented rice is mainly black, red, and dark purple, and contains a variety of flavones, tannin, polyphenols,sterols, tocopherols, γ-oryzanols, amino acids, and essential oils. The present study evaluated the cytotoxic effectsof purple rice extracts (PREs) combined with chemotherapeutic drugs on human cancer cells and mechanismsof cell death. Methanolic (MeOH) and dichloromethane (DCM) extracts of three cultivars of purple rice inThailand: Doisaket (DSK), Nan and Payao (PYO), were tested and compared with white rice (KK6). Cytotoxicitywas determined by 3-(4, 5-dimethyl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay in human hepatocellularcarcinoma HepG2, prostate cancer LNCaP and murine normal fibroblast NIH3T3 cells. MeOH-PYO-PRE wasthe most cytotoxic and inhibited HepG2 cell growth more than that of LNCaP cells but was not toxic to NIH3T3cells. When PREs were combined with paclitaxel or vinblastine, they showed additive cytotoxic effects on HepG2and LNCaP cells, except for MeOH-PYO-PRE which showed synergistic effects on HepG2 cells when combinedwith vinblastine. MeOH-PYO-PRE plus vinblastine induced HepG2 cell apoptosis with loss of mitochondrialtransmembrane potential (MTP) but no ROS production. MeOH-PYO-PRE-treated HepG2 cells underwentapoptosis via caspase-9 and-3 activation. The level of γ-oryzanol was highest in DCM-PYO-PRE (44.17 mg/g)whereas anthocyanin content was high in MeOH-PYO-PRE (5.80 mg/g). In conclusion, methanolic Payaopurple rice extract was mostly toxic to human HepG2 cells and synergistically enhanced the cytotoxicity ofvinblastine. Human HepG2 cell apoptosis induced by MeOH-PYO-PRE and vinblastine was mediated througha mitochondrial pathway.     

常用化疗药物对大肠癌细胞系PTEN蛋白表达的影响

目的　探讨常用化疗药物对大肠癌细胞系PTEN蛋白表达的调控作用。方法　采用WesternBlot法 ,检测氟脲嘧啶( 5 Fu)、丝裂霉素及顺铂作用于大肠癌细胞HT 2 96h及 2 4h后PTEN蛋白表达情况。结果　 3种药物作用 6h后 ,与对照组比较 ,PTEN表达量均呈不同程度增高 ,其中以顺铂的上升幅度最大 ,为对照组的 2 .16倍 ,5 Fu为对照组的 1.2 1倍 ,丝裂霉素为对照组的 1.5 0倍。作用 2 4h后 ,PTEN表达量顺铂为对照组的 3 .5 3倍 ,5 Fu为对照组的 1.68倍 ,丝裂霉素为对照组的 2 .2 1倍。且用上述药物作用 6h后 ,大肠癌细胞的生长速度较对照组明显减慢。结论　常用化疗药物可通过上调癌细胞中PTEN表达量来实现其抗癌作用     

恩度联合化疗对不同Stat6活化表型直结肠癌细胞的作用

目的研究恩度联合化疗对直结肠癌细胞的抑制作用,并进一步观察不同Stat6表型的直结肠癌细胞对恩度联合化疗药物敏感性的差异。方法采用MTT法检测不同浓度的恩度单药或联合5-Fu及奥沙利铂对2种不同Stat6活化表型的直结肠癌细胞(Caco-2和HT-29)的增殖抑制作用。用流式细胞仪检测不同药物处理组对2种直结肠癌细胞早期凋亡率的影响。结果恩度单药作用于Caco-2和HT-29细胞没有显示出明显的增殖抑制和凋亡促进的作用(P>0.05)。而恩度联合1种或2种化疗药物[(5-Fu)和奥沙利铂(OXP)]对这2种癌细胞的生长抑制和凋亡促进的能力明显升高(P<0.05和P<0.01)。恩度联合化疗药物对Caco-2细胞生长抑制率和早期凋亡率均高于HT-29细胞(P<0.05)。结论恩度联合化疗药物能更好的抑制直结肠癌细胞的增殖能力,不同Stat6活化状态可能成为评价化疗疗效的潜在指标之一。     

Effects of Gastric Cancer Cells on the Differentiation of Treg Cells

The aim of this study was evaluated the prevalence of Treg cells in peripheral blood in patients with gastriccancer, and investigate the effect of gastric cancer cells on their differentiation. ELISA was employed to assessthe concentrations of TGF-β and IL-10 in gastric cancer patients’ serum. Then, mouse gastric cancer cells wereco-cultured with T lymphocytes or T lymphocytes + anti-TGF-β. Flow cytometric analysis and RT-PCR werethen performed to detect Treg cells and TGF-β and IL-10 expression in gastric cancer cells. Our data showedthat the expression of TGF-β and IL-10 in the patients with gastric cancer was increased compared to the casewith healthy donors. The population of Treg cells and the expression levels of TGF-β and IL-10 in the co-culturegroup were much higher than in the control group (18.6% vs 9.5%) (P<0.05). Moreover, the population of Tregcells and the expression levels of TGF-β and IL-10 in the co-culture systerm were clearly decreased after additionof anti-TGF-β (7.7% vs 19.6%) (P<0.01). In conclusion, gastric cancer cells may induce Treg cell differentiationthrough TGF-β, and further promote immunosuppression.     

TNF与化疗药物不同配伍对胃癌细胞作用的研究

研究肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、５－氟脲嘧啶、丝霉素单用及ＴＮＦ与５－Ｆｕ、ＭＭＣ不同配伍方案对人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１细胞毒作用。方法应用噻唑蓝比色法（ＭＴＴ）测量各实验组的光密度（ＯＤ值），计算杀伤率。结果单独应用各药时，三者地ＳＧＣ－７９０１均有细胞毒作用，ＴＮＦ与５－Ｆｕ、ＭＭＣ配伍时细胞毒作用明显增强，不同配伍方案存在非常显著的差异（Ｐ〈０．０１），以先给化学药物，后加ＴＮＦ且毒性作用最经     

人胃癌细胞系(BGC-823)的细胞遗传学研究

本研究以人胃癌(BGC-823)细胞系为材料,自建系后40～60代进行了细胞遗传学研究。先后共计数600个分裂中期细胞的染色体数,并对其中的30个分裂相作了胰酶消化和G-分带。核型分析结果表明:染色体众数为亚三倍体,发现了规律性出现的标记染色体和Ⅰ号染色体长臂的部分缺失,部分核型出现双微小体。带型分析表明。Ⅰ号标记染色体为染色体11,12间的易位,t(11,12)(11pter→11q23::12q13→12qter).12号染色体的断裂点和染色体的脆性部位位于同一染色体区带(12q13)。这将有助于阐明此系的癌基因ras与标记染色体的关系,进而了解癌变过程中癌基因的作用。