常规法测定不同GGT催化活性的不确定度评定

摘要：目的：评定常规方法测定不同γ-谷氨酰基转移酶(GGT)活性的不确定度。 方法：用实验室常规方法和IFCC推荐的参考方法分别检测混合血清,以参考方法为依据评定常规方法测定GGT活性的不确定度,并绘制GGT活性测定的不确定度特征曲线,建立不确定度与酶活性水平间的函数关系。 结果：运用不确定度特征曲线分析,当GGT活性较低时,应使用不确定度的绝对形式表示;当GGT活性较高时,应用相对不确定度表示。建立了GGT活性（x）与不确定度(u)之间的近似关系：u(x)≈2.42+0.033x。 结论：绘制不确定度特征曲线或建立不确定度与活性水平之间的函数关系可以方便地指导临床实验室评定测量不确定度。     

GUM法与蒙特卡洛法在IFCC 37 ℃肌酸激酶催化活性水平参考测量程序不确定度评定中的应用

目的用测量不确定度表示指南(GUM)与蒙特卡洛法(MCM)评定本室条件下国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)37℃肌酸激酶(CK)参考测量程序的不确定度,比较两种评定结果并尝试寻找适用的酶学参考测量不确定度评定模式。方法按照IFCC参考方法测定样品RELA2012KSA中CK活性水平,寻找测定过程中各不确定度来源,确定本室酶学参考测量模型。用GUM法与MCM法评定3次测量结果的不确定度,并以自适应MCM法对GUM法结果进行验证。结果本室实验条件下,CK活性测定不确定度来源主要有修正后的反应速率、总体积比、样品复溶体积、比色皿光径、摩尔吸光系数、反应温度与pH值及监测波长的偏离等。CK单次测定GUM法不确定度评定结果为(260.0±12.2)U/L,相对扩展不确定度为4.7%,3次测定结果的95%概率对称包含区间分别为(247.829 5,272.094 7)U/L、(246.938 8,270.923 6)U/L、(246.495 1,269.857 5)U/L,均值的不确定度评定结果为(259.0±7.0)U/L,相对扩展不确定度为2.7%。3次CK测定MCM法不确定度评定结果为输出量估计值,分别为260.0、259.0、258.2 U/L,95%概率对称包含区间分别为(248.753 2,271.535 7)U/L、(247.746 9,270.418 0)U/L、(247.303 9,269.330 8)U/L。用MCM法验证GUM法包含区间,3组绝对偏差dlow与dhigh值均大于数值容差0.05,GUM法结果未通过MCM法验证。结论 MCM法结果更为准确,可用于结果报告。GUM法结果经MCM法验证其质量后,可用于发现各不确定度来源对参考测量质量的影响,提高实验室质量改进效率。联合应用GUM法与MCM法进行不确定度评定可作为酶学参考测量不确定度评定方案的一种选择。     

关注测量不确定度在临床检验中的应用

临床检验需要可靠的评价检验结果质量的定量指标，测量不确定度已被引人临床检验领域。测量不确定度是一个相对较新的概念，历经几十年的发展，已被包括国际临床化学联合会（IFCC）在内的多个国际组织推荐作为评价测量结果质量的定量指标。相对于其他测量，临床检验有其特点，其测量不确定度评定尚需进一步研究。临床检验工作者需关注和探索测量不确定度在临床检验中的应用。     

测量不确定度和标准不确定度（摘要）

1测量不确定度 表征合理地赋予被测量之值的分散性、与测量结果相联系的参数，称为测量不确定度。     

用蒙特卡罗法评定测量不确定度

测量不确定度评定主要依据《测量不确定度表示指南》(GUM)的基本原理和方法,蒙特卡罗法(Monte Carlo method,MCM)是除GUM方法外研究最多的测量不确定度评定方法。本文介绍MCM的发展以及评定测量不确定度的原理和步骤,并举例说明如何用MCM评定测量不确定度。     

速率法血清ALT活性浓度的不确定度评定

目的通过对ALT活性浓度测量不确定度的评定,初步探讨血站实验室对测量不确定度的评定方法。方法依据中国合格评定国家认可委员会(CNAS)《测量不确定度要求的实施指南》及JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》等其他不确定度指南文件,采用A、B类评定方法对血站献血者标本ALT活性浓度的测量不确定度进行评定。结果血清ALT活性浓度为40.1 U/L时,ALT活性浓度扩展不确定度为U=2.2 U/L(包含因子k取2,置信区间95%)。结论本实验所使用的方法可以对ALT活性浓度测量不确定度进行评定。     

血清葡萄糖测定的测量不确定度评定

目的 通过对血清葡萄糖浓度的测量不确定度评定,探讨实验室对测量不确定度的评定方法和程序.方法 用Olympus生化检测系统己糖激酶法检测血清葡萄糖浓度,建立反映整个过程测量不确定度分量来源的数学模型.根据数学模型,分析各不确定度的来源,按A、B两类不确定度的计算方式对各分量分别进行评定,计算合成标准不确定度,最后,取95%置信区间,计算出扩展不确定度.结果 血清葡萄糖浓度为4.61 mmol/L,合成标准不确定度uc=0.1667,取95%置信区间,包含因子k=2,则扩展不确定度U=0.1667×2=0.33 mmol/L.结论 医学实验室的测量不确定度与传统用准确度表示的误差相比,更能反映测量的水平,且对检测结果的临床应用有实际指导意义.     

临床检验中的测量不确定度

测量不确定度代表测量结果的分散性，是一个反映测量结果质量的参数。有关国际导则已规定测量不确定度评定的一般原则和方法，不确定度评定一般包括鉴别不确定度来源、量化不确定度分量和合并不确定度分量等步骤。不确定度首先在计量学领域普遍采用，现被引入临床检验领域。近年来几个有关临床检验的国际标准都对测量不确定度评定作出要求。对于临床检验参考测量及参考物质定值有关的测量，其不确定度基本可按现有国际导则进行评定。但对于临床实验室检验，影响检验结果或与检验结果有关的因素很多，其测量不确定度评定仍存在许多有待澄清的问题。临床实验室中不确定度的合理评定和应用，可能需要一定程度的国际约定。     

临床检验测量不确定度的评定

随着对测量不确定度(uncertainty of measurement)的研究不断深入,其在医学检验中的作用和意义不可忽视。首先,实验室认可准则的国际标准ISO 17025和ISO 15189都对测量不确定度提出了明确要求,实验室要通过认可就必须考虑测量不确定度;其次,国内外的相关标准和规范明确规定参考测量结果和标准物质定值都必须给出测量不确定度;最后,如果要将患者的检测结果与以前的结果或者临床决定水平(如参考值)进行比较,需要获得测量程序不确定度的信     

Bootstrap方法对参考测量程序测定肌酸激酶催化活性浓度不确定度的评价

目的探讨用Bootstrap方法对参考测量程序测定肌酸激酶(CK)催化活性浓度的不确定度进行评价。方法用参考测量程序测量CK催化活性浓度;用Bootstrap方法对数据进行有放回的重抽样并进行分析,计算均数、不确定度;与GUM法评估结果进行比较。结果 Bootstrap方法评估时,标本A CK催化活性浓度的测量结果为(108.57±3.26)U/L(k=2),包含区间为[105.31 U/L,111.83 U/L],标本B结果为(375.15±8.86)U/L(k=2),包含区间为[366.29U/L,384.01 U/L];GUM方法评估时,标本A CK催化活性浓度测量结果为(108.57±3.38)U/L(k=2),包含区间为[105.19 U/L,111.95 U/L],标本B结果为(375.16±8.92)U/L(k=2),包含区间为[366.24 U/L,384.08 U/L]。结论 Bootstrap重抽样方法评估结果与GUM法一致,该法操作简便,便于推广。     

测量不确定度在临床生化检验中的应用

目的对测量不确定度在临床生化检验中的应用进行研究分析。方法使用日立7080型的生化分析仪以及其配套的试剂;相关试验的校准品、定值质控品、室内质控品都为Roche品牌产品。K+、Cl-、Na+、Ca2+采用间接选择的电极法;丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和谷氨酰转肽酶(GGT)则采用速率法;总蛋白(TP)采用双缩脲的终点法;清蛋白(Alb)采用溴甲酚绿显示终点法;磷(P4+)则采用磷钼酸的紫外法;尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)为酶法;尿酸(UA)采用尿酸酶比色法;葡萄糖(Glu)则为氧化酶法;而胆固醇(Ch)则采用胆固醇氧化酶的方法;三酰甘油(TG)采用GPO-PAP酶法。结果各指标测量的不确定度:TP为2.93%,Alb为7.21%,GGT为14.20%,AST为11.71%,ALT为12.80%,ALP为8.22%,Na+为1.34%,K+为2.38%,Cl-为2.65%,Ca2+为4.17%,P4+为4.00%,BUN为9.17%,Cr为9.34%,UA为13.72%,GLU为4.06%,Ch为3.87%。结论不确定度评估的一个重要前提就是实验室内必须具备一系列行之有效的控制措施以及质量保证体系,才能够确保过程中的稳定以及在控。     

自上而下方法评定测量不确定度的简介

测量不确定度是保证测量结果完整性的重要参数,自上而下方法是从不精密度和偏移两个方面评定医学实验室不确定度的首选方法。自1995年该方法提出后,不确定度的评定对象和计算方法在不断地发展和完善,目前不精密度评定对象包括重复测量数据和室内质量控制数据,偏移的评定对象可包含有证参考物质、参考测量程序、回收实验和室间质量评价数据,我们将对不同评定对象的计算方法进行详述。     

临床生物化学实验室测量不确定度的评估

目的通过临床生物化学实验室肌酐(Cr)测量不确定度的评估,探讨医学实验室认可工作中测量不确定度的评估方法和程序。方法以中国合格评定国家认可委员会(CNAS)提供的《测量不确定度要求的实施指南》为基础,参考其他测量不确定度指南文件,对本实验室血清Cr的测量不确定度进行评估。结果血清Cr浓度为59.65μmol/L时,所有不确定度分量影响的合成不确定度为2.69μmol/L,取95%可信区间,包含因子k=2,则血清扩展不确定度U=5.38μmol/L;排除生物学变异和分析前因素后,其他不确定度分量影响的合成不确定度为0.75μmol/L。结论我们所建立的测量不确定度评估方法简单方便,能分析不同因素对测量结果的影响程度,可用于医学实验室认可工作。     

临床生物化学指标测量不确定度的评估

目的通过对临床生物化学指标测量不确定度的评估,探讨医学实验室认可工作中测量不确定度的评估方法和程序。方法利用室内质控数据计算批内变异及批问变异系数,卫生部临检中心室间质评数据计算偏倚不确定度,利用3个来源的不确定度综合评估丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）、总蛋白、血清清蛋白、葡萄糖、尿素、肌酐、尿酸、三酰甘油、总胆固醇、钠（Na）、钾、氯（C1）、钙、磷（P）等指标的测量不确定度。结果19项临床生物化学指标中,低浓度C1及高浓度Na扩展不确定度值最小,低浓度P及高浓度ALP扩展不确定度值最大。低浓度ALT、ALP、P及高浓度ALP扩展不确定度大于10％,检测结果与真实值差波动较大,其他各项指标扩展不确定度均较小。结论本研究采用的测量不确定度评估方法简单方便,能分析不同因素对测量结果的影响程度,可用于医学实验室认可工作。     

临床生化检验测量不确定度的评估

目的探讨测量不确定度在临床生化检验中的应用。方法以中国合格评定国家认可委员会（CNAS）提供的《测量不确定度要求的实施指南》为基础,参考其他测量不确定度指南文件,对本实验室生化检测项目的测量不确定度进行评估,按测量不确定度评估的过程,分析不确定度分量的来源并分别按A类和B类进行评估,合成标准不确定度,计算扩展不确定度。结果不确定度分量来源主要包括：测量的不精密度、校准品的不确定度。其中,不精密度分量按美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP5A文件评定,校准品的不确定度分量根据厂家的溯源性报告评定。结论该研究只评估测量过程的不确定度,临床生化检验常规测量中应根据具体情况分析不确定度分量的来源,对测量结果进行不确定度的评估。     

14项临床化学检验指标分析前不确定度评定

目的以14项临床生化指标为例,探讨评定分析前不确定度的方法。方法招募25名志愿者,各采集左右手臂共7管血,按照设定的参照方法及常规检验所用方法处理标本血清,于同一批内将结果配对计算分析。结果 LDH对每个因素都最敏感,分析前相对不确定度为12.01%;其次为AST、Glu,大于6.00%;Urea、TC分别为1.05%、1.61%;ALT、ALP、GGT、Cr、UA、TG、HDL-C、LDL-C、CK为2.5%~5.0%。AST、ALP、Urea、Cr、TC、TG因采血手臂不同带来的不确定度大;ALT、LDH、GGT、Glu由凝血时间不同带来的不确定度较大;LDL-C受运输方式的影响较大;UA、HDL-C、CK受真空管类型不同影响较大。结论通过计算各分析前不确定度,说明采取相应对策从源头上减小不确定度值的必要性;其计算方式有望应用于其他指标与因素。     

函数法评定医学参考实验室酶学指标测量不确定度

目的使用函数法评定医学参考实验室酶学指标测量不确定度。方法各酶学指标测量不确定度评定过程分为3部分:不确定度分量来源的识别、不确定度分量的量化、不确定度函数公式的建立;以α-淀粉酶(α-Amy)为例说明如何用函数公式获得相应结果的测量不确定度。结果医学参考实验室丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、α-Amy、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)不确定度函数公式分别为:urel=[0.000 006 6+u_(rel)~2(reconstruct)+u_(rel)~2(bb)+u_(rel)~2(imprecision)]~(1/2)、urel=[0.000 006 6+u_(rel)~2(reconstruct)+u_(rel)~2(bb)+u_(rel)~2(imprecision)]~(1/2)、urel=[0.000 010 2+u_(rel)~2(reconstruct)+u_(rel)~2(bb)+u_(rel)~2(imprecision)]~(1/2)、urel=[0.000 008 2+u_(rel)~2(reconstruct)+u_(rel)~2(bb)+u_(rel)~2(imprecision)]~(1/2)、urel=[0.000 006 3+u_(rel)~2(reconstruct)+u_(rel)~2(bb)+u_(rel)~2(imprecision)]~(1/2)、urel=[0.000 007 2+u_(rel)~2(reconstruct)+u_(rel)~2(bb)+u_(rel)~2(imprecision)]~(1/2)、urel=[0.000 007 2+u_(rel)~2(reconstruct)+u_(rel)~2(bb)+u_(rel)~2(imprecision)]~(1/2)。当α-Amy浓度为100 U/L时,应用函数公式计算得扩展不确定度为2.5 U/L,当α-Amy浓度为400 U/L时,扩展不确定度为10.9 U/L。结论用函数法可简便有效地评定医学参考实验室酶学指标测量不确定度。     

人血清胆固醇常规测量不确定度的研究

目的 探索测量不确定度评定在临床检验常规测量中的应用。 方法 以总胆固醇（TC）常规测量为例,按测量不确定度评定过程,分析不确定度分量的来源并分别按A类和B类进行评定;根据针对单一样本和针对受试者的方案合成标准不确定度,计算扩展不确定度。 结果 不确定度分量来源包括：不精密度、人体生理变异、校准品、偏倚。其中,不精密度分量按CLSI EP5A文件评定,分别为1.67% (TC=4.25 mmol/L)和2.46%(TC=6.79 mmol/L);参照文献,TC生理变异的不确定度分量为6.0%;根据厂家的溯源性报告,校准品的不确定度分量为0.4%;根据卫生部室间质评回报结果,偏倚所致的不确定度分量为2.03% (TC=3.52 mmol/L)和0.45%(TC=6.74 mmol/L)。经合成,针对单一样本的扩展不确定度为（4.25±0.22） mmol/L(κ=2)、(6.79±0.34) mmol/L(κ=2);针对受试者的扩展不确定度为（4.25±0.56） mmol/L(κ=2)、（6.79±0.88） mmol/L(κ=2)。 结论 临床检验常规测量中应根据具体情况分析不确定度分量的来源,用不同的方案合成标准不确定度。     

用室间质量评价数据评价偏移的不确定度

目的探索室间质量评价(EQA)数据评定偏移的不确定度所需最少次数。方法偏移的相对不确定度(ubias,rel)包括靶值自身相对不确定度(ucref,rel)和实验室相对偏移(RMSbias,rel)。收集2010~2011年上海地区9家使用Roche公司生化指标分析封闭系统的医院20个指标EQA数据,以期望值的20%分析每个医院的ucref,rel或RMSbias,rel达到稳定所需最少次数,并以u检验探讨指标对RMSbias,rel达到稳定的变化趋势的影响。分析所有指标在6次、11次EQA的ubias,rel与末次EQA ubias,rel相对偏移。结果不同指标间RMSbias,rel达到稳定的变化趋势较一致,相同的比例达到94.21%,ucref,rel与RMSbias,rel达到稳定所需最少次数分别占10次与11次。所有医院6次和11次EQA相对偏移≤10%的分析组所占百分比分别占34%和65%。结论 11次以上的EQA数据评定医学实验室偏移的不确定度更有代表性。