HSP27-siRNA抑制肝癌细胞生长的实验研究

目的探讨HSP27-siRNA对肝癌细胞的生长的影响。方法将HSP27-siRNA转染到人肝癌细胞株QGY细胞中;利用MTT法检测不同浓度不同时间HSP27-siRNA对QGY细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测分析HSP27-siRNA对QGY细胞周期及凋亡的影响。RT-PCR检测HSP27-siRNA对QGY细胞HSP27 mRNA表达的影响;Western blot检测HSP27-siRNA对HSP27基因表达蛋白的抑制效率。结果HSP27-siRNA能抑制QGY细胞HSP27 mRNA的表达,使其HSP27蛋白的表达下降。HSP27-siRNA在体外能抑制QGY肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡,作用均呈剂量-时间依赖。结论HSP27-siRNA能抑制QGY细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,有可能成为临床治疗人肝癌有效方法。     

HSP27 和claudin-10在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨HSP27和claudin-10在结直肠癌中的表达及其临床意义。 方法：应用免疫组化法检测50例结直肠癌组织、25例结直肠腺瘤组织、50例正常结直肠黏膜组织中HSP27和claudin-10的表达,并分析结直肠癌中两者表达的关系以及与结直肠癌患者临床病理因素及预后的关系。 结果：在结直肠癌组织、结直肠腺瘤组织、正常结直肠黏膜中HSP27阳性表达率分别为54.0%、20.0%、16.0%,差异有统计学意义（P<0.001）;claudin-10阳性表达率72.0%、56.0%、54.0%,差异无统计学意义（P>0.05）;结直肠癌中HSP27与claudin-10的表达呈正相关（r=0.318,P=0.024）。单因素分析显示,HSP27的阳性表达率与与淋巴结转移有关（P<0.05）;claudin-10的阳性表达率与肿瘤直径、浸润深度及淋巴结转移有关（均P<0.05）。生存分析显示,HSP27和claudin-10阳性表达患者平均生存期明显低于各自的阴性表达患者（均P<0.05）。多因素分析显示,HSP27、claudin-10表达及淋巴结转移是影响结直肠癌患者预后的独立风险因素（均P<0.05）。 结论：HSP27在结直肠癌中组织中表达上调,并可能与claudin-10协同在结直肠癌转移中起重要作用。     

热休克蛋白27和c-kit在良性前列腺增生和前列腺癌组织中表达差异的临床意义

目的:检查热休克蛋白27(HSP27)和c-k it在良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)组织中表达的差异,分析其与BPH的发生和PCa间的关系,特别是其与PCa的发生、发展及预后和治疗的关系。方法:用免疫组化方法(SP法)检测40例BPH和40例PCa组织中HSP27和c-k it的表达。结果:BPH组织标本中HSP27的反应表现为腺上皮的强阳性表达,同时间质也呈阳性表达。PCa组织标本中HSP27的表达主要定位于腺上皮细胞胞质,PCa组织中HSP27的表达强度高于BPH组织(P<0.05)。BPH标本中c-k it蛋白主要分布于平滑肌细胞的胞质。PCa标本中c-k it蛋白主要表达于腺上皮。PCa组织中c-k it蛋白的表达强度低于BPH组织(P<0.05)。HSP27和c-k it的表达均与肿瘤分级呈负相关(P<0.05),HSP27与临床分期呈正相关(P<0.05),c-k it表达与临床分期呈负相关(P<0.05)。结论:HSP27和c-k it的表达水平与BPH向PCa的发展、转化过程,以及PCa的分级分期关系密切,HSP27和c-k it在PCa组织中的表达,可以判断其恶性程度,为临床判断预后和制定治疗方案提供了重要参考指标。     

热休克蛋白27、70与恶性肿瘤

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)广泛存在于生物体内,是一类在进化上高度保守的细胞应激蛋白.其中HSP27和HSP70在抗凋亡过程中发挥重要的作用,在多种肿瘤细胞中异常高表达,尤其是腺癌起源的肿瘤.HSP27和HSP70在恶性肿瘤的发生、发展中的作用及其机制是近年来研究的热点,有望对肿瘤的治疗提供新的平台.     

14-3-3σ和热休克蛋白27在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨14-3-3σ和热休克蛋白（HSP）27在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学染色方法检测14-3-3σ和HSP27在50例结直肠癌组织中的表达情况．（取距肿瘤组织15cm以上,病理证实无癌细胞的癌旁组织作对照）结合其临床病理学资料,分析它们之间的关系。结果14-3-3σ在对照组和肿瘤组中的阳性表达率分别为10％和58％．差异有统计学意义（P〈0．01）;HSP27在对照组和肿瘤组中的阳性表达率分别为16％和54％,差异有统计学意义（P〈0．01）;结直肠癌组织中14-3-3σ与HSP27表达无明显相关（p〉0．05）。14-3-3σ表达与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移（均P〈0．05）有关,而与性别、分化程度、浆膜浸润无关（均p〉0．05）：HSP27表达与淋巴结转移有关（P〈0．05）,与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、浆膜浸润无关（均P〉0．05）。结论14-3-3σ和HSP27在结直肠癌中表达明显增高．这两种蛋白均与结直肠癌淋巴结转移关系密切。     

Survivin和热休克蛋白27在胰腺癌组织中的表达及关系

目的:探讨Survivin和热休克蛋白27(HSP27)在胰腺癌组织中的表达及二者的相关性。方法:用免疫组织化学法检测59例胰腺癌及癌旁组织中Survivin与HSP27的表达,比较其阳性表达率及Survivin表达与HSP27表达的关系。结果:Survivin在胰腺癌中阳性表达率为74.6%,而在癌旁组织中未见表达(P<0.01);Survivin表达与胰腺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移无相关性;HSP27在胰腺癌中的表达率为66.1%,明显高于癌旁组织22.8%(P<0.01),并且与胰腺癌的分化程度相关,但与临床分期及淋巴结转移无关;胰腺癌组织中Survivin与HSP27的表达有相关性。结论:Survivin和HSP27在胰腺癌中过度表达,提示二者在胰腺癌的发生发展中起重要作用;Survivin和HSP27通过抗凋亡机制协同参与胰腺癌的发生。     

HSP60在胃癌中的表达与微血管生成的关系及临床意义

目的：观察热休克蛋白（HSP60）在胃癌组织中的表达以及其与肿瘤微血管生成的关系。方法：采用免疫组化SP法检测85例胃癌组织和35例癌旁正常胃组织中HSP60蛋白的表达;通过测定CD34来衡量微血管密度（MVD）。结果：胃癌组织HSP60表达明显高于癌旁正常胃组织（P〈0.01）,其中HSP60的表达与肿瘤的大小、分化和浸润程度密切相关（P〈0.05）;胃癌组织MVD与肿瘤大小和浸润程度密切相关（P〈0.05）;MVD与HSP60的蛋白在胃癌组织中的表达高度相关（r=0.404,P〈0.05）。结论：HSP60的高表达与肿瘤微血管生成及肿瘤的进展密切相关,可作为评估胃癌患者预后的重要参考指标。     

非小细胞肺癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白表达及其意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血淋巴细胞热休克蛋白(HSP)27、HSP72和HSP73的表达水平及其与临床病理生理特征的关系.方法 采用流式细胞术检测34例NSCLC患者外周血淋巴细胞HSP27、HSP72和HSP73的表达水平,并以40例健康受试者作为对照.结果 NSCLC外周血淋巴细胞HSP27、HSP72的表达量均低于对照组(P<0.05),两者表达量呈正相关(P<0.01),而HSP73的表达量和对照组差异无统计学意义(P>0.05).NSCLC外周血淋巴细胞HSP27的表达量与临床病理生理特征尤明显相关,而HSP72的表达量与NSCLC原发肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期相关(P<0.05).结论 NSCLC患者外周血淋巴细胞HSP27、HSP72表达下调,且HSP72与NSCLC的发生发展及淋巴结转移相关.     

食管癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白表达及其意义

目的 观察食管癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白(HSP)27和HSP72的表达,探讨其与临床病理生理特征的关系.方法 采用流式细胞术检测45例食管癌患者外周血淋巴细胞HSP27和HSFP72的表达水平,并以43例健康受试者作为对照.结果 食管癌外周血淋巴细胞HSP27、HSP72的表达量分别为17.32±2.97和19.46±5.91,均低于对照组(P＜0.05),两者表达量呈正相关(P＜0.01),食管癌外周血淋巴细胞HSP27的表达量与临床病理生理特征无明显相关(P＞0.05),而HSP72的表达量与食管癌原发肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期相关(P＜0.05).结论 食管癌外周血淋巴细胞HSP27、HSP72表达下调,HSP72与食管癌的发生发展及淋巴结转移相关.     

热休克蛋白70和90表达水平与结直肠癌肝转移化疗疗效的关系

目的探讨热休克蛋白（HSP）70和HSP90的表达与结直肠癌肝转移化疗疗效的关系。方法分析52例手术切除了原发病灶而未能切除肝转移病灶并进行奥沙利铂、氟尿嘧啶及四氢叶酸钙化疗方案（FOLFOX4方案）化疗的结直肠癌肝转移患者的临床资料,通过cT检查比较化疗前后肝转移病灶数目及大小的变化：采用亲和免疫组织化学方法测定原发肿瘤组织HSP70和HSP90的表达：分析HSP70和HSP90的表达与化疗疗效间的关系。结果HSP70高表达者,部分缓解（PR）率为33．3％,低表达者PR率为64．5％,两者差异有统计学意义（P〈0．05）;HSP90高表达者,PR率为50％。低表达者PR率为53．1％,两者差异无统计学意义（P〉0．05）。结论对于HSP70低表达的结直肠癌肝转移患者．FOLFOX4方案化疗的疗效可能优于HSP70高表达者;HSP90的表达与其疗效无关。     

热休克蛋白70和27在非小细胞肺癌中的表达和临床意义

目的研究热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70和27在非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)组织中的表达,探讨HSP70和HSP27与NSCLC细胞的组织学类型、分化和转移之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例NSCLC标本中HSP70和HSP27的表达情况。结果NSCLC中HSP70和HSP27的表达与肿瘤细胞组织学类型无关。HSP70和HSP27的表达正相关。HSP70的表达与肿瘤细胞分化程度和淋巴结转移明显相关,HSP27的表达则无关。结论HSP70在NSCLC中的高表达与肿瘤细胞的分化和转移明显正相关,提示HSP70可以作为NSCLC辅助诊断和估计预后的指标。而HSP27尽管在多种恶性肿瘤中发挥促进细胞恶变的作用,但在NSCLC中的作用需要进一步研究。     

亚高温盆腔区域热疗诱导原位的大鼠浸润性膀胱肿瘤HSP70表达的研究

目的 研究亚高温盆腔区域热疗能否诱导原位的大鼠浸润性膀胱肿瘤热休克蛋白70(HSP70)表达增加.方法 制备原位的大鼠浸润性膀胱肿瘤动物模型,分为对照组(A组)、单次热疗组(B组)、间隔24 h再次热疗组(C组)、间隔72 h再次热疗组(D组).从体外加热大鼠盆腔至41℃,持续1 h.用胶体金免疫电镜、免疫组化、蛋白芯片检测肿瘤细胞HSP70表达.结果 A组HSP70定位于肿瘤细胞质,B、C、D组HSP70均定位于肿瘤细胞核、线粒体和细胞质.B、C、D组HSP70阳性表达率均高于A组,差异有统计学意义(P(0.01),但B、C、D组组间差异无统计学意义(P=0.101).B、C、D组HSP70表达量高于A组,差异有统计学意义(P＜0.01);C、D组HSP70表达量均高于B组,差异有统计学意义(P＜0.01);C组HSP70表达量高于D组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 不同方案的亚高温盆腔区域热疗均能诱导原位的大鼠浸润性膀胱肿瘤发生热休克反应,上调HSP70表达;亚高温盆腔区域热疗是一种温和的加热方法,它不能使全部肿瘤细胞发生热休克反应;HSP70表达率与热疗次数无关,但表达量与热疗次数呈正相关;间隔24 h再次热疗的HSP70表达量最高.     

子宫内膜癌热休克蛋白70、90的表达及其临床意义

目的 :探讨子宫内膜癌中热休克蛋白 ( HSP) 70、90的表达及意义。方法 :用免疫组化 Envision法及图象分析仪检测了 3 0例正常子宫内膜、3 0例增生过长子宫内膜和 53例子宫内膜癌中 HSP70、90的表达情况。结果 :子宫内膜癌中 HSP70的表达为( 2 0 9.0 6± 5.3 6 ) ,明显高于正常内膜 ( 1 45.2 1± 4.0 9)和增生过长内膜 ( 1 48.59± 4.2 3 ) ,P均 <0 .0 1 ;子宫内膜癌中 HSP90的表达为 ( 1 6 6 .98± 5.71 ) ,明显低于正常子宫内膜( 2 0 8.57± 3 1 .1 4)和增生过长子宫内膜 ( 2 49.73± 4.94) ,分别为 P<0 .0 5、P<0 .0 1。子宫内膜癌中 HSP70表达随肿瘤病理分级升高而增强 ( P<0 .0 1 ) ,非内膜样癌较内膜样癌表达增强 ( P<0 .0 1 ) ;子宫内膜癌中 HSP90表达随肿瘤病理分级升高而表达减弱 ( P<0 .0 1 ) ,非内膜样癌较内膜样癌表达减弱 ( P<0 .0 1 )。但子宫内膜癌中 HSP70、90表达与肌层浸润深度、术后病理分期、淋巴结转移未见显著相关性 ( P>0 .0 5)。结论 :HSP70、90可能与子宫内膜癌发生及预后有关     

HSP60和TSGF联合检测在甲状腺癌诊断中的应用

目的:探讨血浆热休克蛋白-60(HSP60)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)联合检测在甲状腺癌早期诊断中的临床应用价值.方法:选择1 27例经病理证实的甲状腺癌患者、78例结节性甲状腺肿患者和1 01例健康对照者,采用ELISA试剂盒检测血浆HSP60和TSGF水平,分析两个指标与甲状腺癌临床病理因素间的关系.结果:HSP60和TSGF表达在甲状腺癌组明显高于结节性甲状腺肿组和健康对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).HSP60和TSGF联合诊断甲状腺癌的曲线下面积为0.922,显著高于单项检测的0.899和0.846.甲状腺癌患者HSP60及TSGF水平与性别、年龄、淋巴结转移及临床分期均无相关性(P＞0.05).结论:血浆HSP60与TSGF联合检测有助于甲状腺癌的早期诊断.     

热休克蛋白27在人胸主动脉夹层的表达研究

目的：探讨热休克蛋白（heat shock protein，HSP）27在胸主动脉夹层（thoracic aortic dissection，TAD）中的表达情况，并初步了解其在TAD中的可能作用。方法：组织化学染色检测TAD病理特征，免疫组织化学染色检测HSP27在动脉壁中的表达和定位，Western Blot验证其表达，并分析HSP27表达与TAD患者临床病理参数如直径、高血压和炎症反应等的关系。结果：Western blot和免疫组化染色均显示HSP27在两组标本中均有表达，TAD组表达较正常组减低。HSP27蛋白主要位于中膜和外膜小血管和炎性细胞的胞质。相邻切片α肌动蛋白表达分布与HSP27基本一致。HSP27表达与其直径、患者高血压、急慢性病程和年龄等参数无明显相关性，这可能与例数较少有关。结论：HSP27蛋白在TAD中表达减少，中膜平滑肌细胞（smooth muscle cell，SMC）是其主要细胞来源；HSP27可能通过调节肌动蛋白和SMC的功能等机制在TAD发挥作用，需进一步研究证实。     

shRNA介导的热休克蛋白70敲低对人结肠癌细胞在裸鼠体内生长的影响

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)敲低对结肠癌细胞在裸鼠体内生长的影响。方法:构建两种干扰HSP70的shRNA(HSP70 shRNA-1和HSP70 shRNA-2)质粒表达载体,分别转染到结肠癌HT29细胞,并以空质粒转染(阴性对照)和未转染的HT29细胞(空白对照)为对照,用RT-PCR和Western blot方法检测各组HT29细胞HSP70基因和蛋白的表达;将HSP70shRNA-2转染、空质粒转染及未转染的HT29细胞分别接种至裸鼠皮下建立移3组植瘤模型,观察肿瘤生长情况,3周后剥离瘤块,用HE染色、免疫组化和TUNEL法分别检测移植瘤组织形态学、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及细胞凋亡情况。结果:RT-PCR和Western blot结果显示HSP70 shRNA-1和HSP70 shRNA-2均能明显抑制HT29细胞HSP70基因和蛋白的表达,且HSP70 shRNA-2的抑制作用更为明显,空质粒转染对HSP70的表达无明显影响;与空白对照组比较,HSP70 shRNA-2转染组裸鼠移植瘤生长明显较明显减慢(P<0.01),瘤组织中心出现明显坏死,PCNA表达明显降低,细胞凋亡率明显增加(P<0.01),而空质粒转染组无明显上述改变(P>0.05)。结论:HSP70沉默能抑制结肠癌HT29细胞裸鼠移植瘤的生长,促进细胞凋亡,HSP70可能是治疗结肠癌有效靶点。     

HSP90β在结肠癌组织和细胞中的表达及其与化疗耐药的关系

目的 研究热休克蛋白90β(HSP90β)在结肠癌组织和HCT-8细胞中的表达,及其与结肠癌细胞对化疗药物耐药性之间的关系.方法 应用免疫组化染色法研究HSP90β在结肠癌组织中的表达水平以及与Duke's分期、病理分级之间的关系;MTT法检测长春新碱(VCR)对结肠癌亲本细胞HCT-8和耐药细胞HCT-8/VCR的半数抑制浓度(IC50;以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP90β mRNA在结肠癌亲本和耐药细胞系中表达的差异,探讨其与细胞耐药性之间的关系.结果 结肠癌组织中HSP90β的表达阳性率为41.67%,高于癌旁结肠组织的16.67%(P<0.05).HSP90β表达水平与肿瘤分化之间有关(r=-0.8825,P<0.05),与肿瘤Duke'S分期之间无关(P>0.05);HCT-8/VCR细胞对VCR的耐药性显著高于HCT-8细胞(P<0.05);HSP90β mRNA在耐药细胞中的含量(0.955±0.03)明显高于亲本细胞(0.835±0.029)(P<0.01).结论 HSP90β在结肠癌中的表达水平升高,可能与结肠癌的恶性转化、化疗耐药性有关,可望作为改善结肠癌化疗敏感性的一个新靶点.     

蛋白质组学技术筛选结直肠癌淋巴结转移相关蛋白的初步研究

目的应用蛋白质组学技术寻找与结直肠癌淋巴结转移相关的蛋白。方法根据术后病理结果将10例结直肠癌新鲜标本分为有淋巴结转移的A组、及无淋巴结转移的B组,以该病例的正常大肠黏膜作为对照(C组)。将组织总蛋白进行双向凝胶电泳,对部分差异蛋白质点进行质谱分析和鉴定。应用免疫组织化学方法检测组织中蛋白表达。结果A组、B组、C组的平均蛋白质点数分别为874±28、860±45、756±32;A组与C组、B组与C组的平均匹配率分别为89．7％、86．1％;A组与C组、B组与C组、A组与B组的差异表达蛋白质点数分别为72±12、64±9、21±4。确定A组表达高于B组表达的5种蛋白质为:HSP27、Annexin A2、AnnexinⅣ、GST、LFBP。免疫组织化学结果显示,GST在正常黏膜组,非转移组、转移组、转移灶中的表达阳性率分别为25％,57．5％, 90％,95％,多组间比较差异有统计学意义。HSP27在正常黏膜组,非转移组、转移组、转移灶组中的表达阳性率分别为5％,50％,90％,95％,多组间比较差异有统计学意义。GST和HSP27表达之间无显著性相关。结论结直肠癌组织淋巴结转移组、无淋巴结转移组和正常肠黏膜组存在差异表达蛋白,GST和HSP27表达可能在淋巴结转移中有重要意义。     

原发性肝癌中HSP90α的表达及意义

目的　研究热休克蛋白 90α(HSP90α)在人原发性肝细胞癌 (HCC)组织中的表达并探讨其与肿瘤生物学行为、预后的关系。方法　采用免疫组织化学方法检测了 10例正常肝组织、40例HCC肿瘤组织及癌旁组织中HSP90α的表达。结果　HSP90α在正常肝脏、癌旁组织、原发性肝癌中的阳性表达率分别为 10 %、5 2 5 %、72 5 %。原发性肝癌中的阳性表达率明显高于正常肝脏和癌旁组织 (P <0 0 5 )。HCC的HSP90α与肿瘤分化程度、肿瘤大小显著相关 (P <0 0 5 ) ;与病灶数目无关(P >0 .0 5 ) ;与预后亦有关 ,HSP90α阴性病人预后显著优于HSP90α阳性病人 ,术后平均无瘤生存期前者 38 6个月、后者 2 5 5个月 (P <0 0 5 )。结论　HSP90α在原发性肝癌中表达增高 ,HSP90α可作为判断HCC分化程度和预后的指标。     

甲泼尼龙预干预脊髓缺血再灌注损伤对热休克蛋白27和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的 研究甲泼尼龙(MP)预处理脊髓缺血再灌注损伤(SCⅡ)对热休克蛋白27(HSP27)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 健康纯种成年雄性SD大鼠150只随机分成三组(n=50):对照组只暴露腹主动脉,不做模型;SCⅡ组夹闭腹土动脉30 min后松开,冉灌注3 h建立SCⅡ模型,然后处死大鼠,取腰段,脊髓标本;MP组于建立SCⅡ模型前30 min尾部静脉注射MP(30 mg/kg).通过HE染色观察损伤节段脊髓病删形态学变化,用免疫组织化学染色方法观察脊髓组织HSP27和TNF-α,的表达,并对大鼠后肢运动功能进行评分.结果 对照绀:神经元细胞轮廓清晰,极性存在,核圆,核仁清楚,尼氏体呈网状均匀排列于细胞核周围,胞浆均匀深染,组织结构完整清楚,无中性粒细胞浸润,无出血、水肿等异常现象;SCⅡ组:神经元细胞肿胀,数目减少,极性变钝,核仁轻度萎缩,尼氏体旱颗粒状,淡染,组织巾有中性粒细胞浸润;MP组:部分神经元细胞轻度水肿,极性稍变钝,核仁尚清,绀织中术见中性粒细胞浸润.SCⅡ组脊髓组织内HSP27及TNF-α大量表达,与对照绀对比差异有统计学意义(P<0.05).MP组脊髓细胞内TNF-α表达明显降低,而HSP27表达更显著, 者分别与SCⅡ组对比差异均有统计学意义(P<0.05).人鼠SCⅡ后肢功能评分降低,MP组大鼠后肢运动功能评分较SCⅡ组明显提高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MP预处理可降低大鼠SCⅡ中TNF-α的表达,增加HSP27的表达,并能提高大鼠后肢运动功能评分,预防性应用MP能减轻SCⅡ,保护脊髓神终功能.