用DNA倍体分析评估口腔黏膜疾病严重程度

目的:用DNA倍体分析法判断口腔黏膜病病变的严重程度。方法:用小刷刷取口腔黏膜病变处的上皮细胞,直接涂片制成1-2张玻片,经Feulgen染色,用全自动DNA图像分析仪测定细胞核内DNA含量。部分患者在可疑处活检做组织病理检查,将活检病例分成DNA倍体分析组和阴性组,比较两组病例病变的严重程度。结果:303例口腔黏膜病例中有口腔溃疡237例、口腔扁平苔藓17例、红斑34例、白斑25例。经DNA倍体分析其中267例为阴性,36例为阳性。将经活检组织病理检查97例患者分成DNA倍体分析阳性组和阴性组。在36例DNA倍体分析阳性病例中有11例组织像正常或炎性病变、6例轻度异常增生、9例中度异常增生、6例重度异常增生和4例浸润癌,中度异常增生以上改变19例,其阳性率为52.78%;61例DNA倍体分析阴性病例中发现有52例组织像正常或炎性病变、6例轻度异常增生、3例中度异常增生和1例浸润癌,中度异常增生以上改变3例,其阳性率为4.91%。经方差分析,两组之间有显著性差别(x2=30.98,P<0.005)。结论:测定口腔黏膜病变处细胞DNA含量是一种无创伤且能判别出病变严重程度的方法。     

运用DNA倍体系统对口腔鳞癌及癌前病变进行诊断及预测

口腔鳞癌的早期诊断、早期治疗能有效地提高治愈率,运用DNA倍体系统对可疑病变作DNA定量细胞学检查,具有取材广泛、无创、诊断标准化、敏感度高、快捷方便等优点,弥补了细胞病理形态学诊断的不足,已广泛运用于癌及癌前病变的诊断与筛查,本文对DNA倍体系统在口腔鳞癌及癌前病变诊断及预测作综述。     

DNA倍体分析在口腔黏膜糜烂病损恶性变诊断中的应用

组织病理检查是口腔黏膜可疑癌前病变诊断的金标准,但病检有创伤、可重复性有限。脱落细胞DNA倍体分析因其微创、可重复性好,敏感性、特异性可靠,已用于口腔白斑等潜在恶性疾病的辅助诊断。该研究结合两种技术诊断口腔黏膜糜烂病损恶性变2例,为临床对该类疾病恶变早期预警,减少误诊、漏诊提供参考。     

Garcinol对人口腔鳞癌细胞的抑制作用研究

目的 观察Garcinol对人口腔鳞癌细胞系SCC15增殖、细胞周期、凋亡和克隆形成能力的作用.方法 培养人口腔鳞癌细胞系SCC15,采用不同浓度的Garcinol处理细胞后,通过MTT法检测对细胞增殖的影响,PI单染色法流式细胞仪检测对细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI双染色法流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响,克隆形成实验检测对细胞克隆形成能力的影响.结果 Garcinol能显著抑制SCC15细胞增殖(P＜0.01),并呈浓度和时间依赖性.Garcinol能抑制SCC15细胞周期由G1期向S期转变(P＜0.01),并呈浓度依赖性.Garcinol还能够诱导SCC15细胞凋亡(P＜0.01),并呈浓度依赖性.同时,Garcinol能抑制SCC15细胞的克隆形成能力(P＜0.01),并呈浓度依赖性.结论 Garcinol作为一种化学预防制剂,对人口腔鳞癌细胞SCC15具有显著的抑制作用,其机制主要包括抑制SCC15细胞增殖、细胞周期和克隆形成能力,并诱导细胞凋亡.     

外周血单个核细胞对口腔鳞癌细胞生长的影响

目的:研究活化人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)在体外影响口腔鳞癌细胞生长及凋亡的机制.方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法以及流式细胞仪(FCM)检测植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激前、后人PBMC分泌细胞因子变化及其对口腔鳞癌细胞生长与凋亡的影响.采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析.结果:以PHA刺激人PBMC为实验组分泌的细胞因子显著高于对照组(P＜0.01);实验组能够诱导颗粒酶B及穿孔素mRNA的表达;实验组抑制口腔肿瘤细胞生长及诱导口腔鳞癌细胞凋亡也显著增加(P＜0.05).结论:PHA激活的人PBMC在体外能够显著抑制口腔鳞癌细胞生长及诱导口腔鳞癌细胞凋亡.     

基于脱落细胞DNA倍体定量分析的口腔鳞状细胞癌筛查及效果评价

目的:探究DNA倍体定量分析技术在口腔鳞状细胞癌筛查中的应用及效果评价。方法:2022年3月～2023年6月,对西安交通大学口腔医院门诊及住院107例患者,进行DNA倍体筛查及液基细胞学检查。DI>2.5的患者,为阳性患者,进行病理组织活检;DI<2.5的患者,若无明确临床恶性指征,视为阴性。将患者DNA倍体筛查结果与液基细胞学结果及病理活检结果进行比较。结果:107例患者中,28例患者进行了病理检查,其中27例患者DNA倍体诊断意见与病理报告结果相符,吻合率为96.43%。DI>2.5且病理结果为恶性的患者共24例,DNA倍体诊断意见与病理报告结果相符,吻合率为100%;DI>2.5,病理结果未明确恶性的1例,为鳞状上皮乳头状增生,部分上皮中-重度不典型增生;D1<2.5,病理结果为良性的患者2例;病理结果为恶性的患者1例,显示有效检测细胞不足。口腔鳞状细胞癌共22例,21例DNA倍体诊断意见与病理报告结果相符,吻合率为95.45%。结论:对于口腔鳞状细胞癌,DNA倍体筛查结果与病理活检结果的吻合率较高,DNA倍体定量分析比传统的细胞学检查敏感,是一种较...     

流式细胞仪在口腔颌面部肿瘤良、恶性诊断中的应用

目的:通过流式细胞仪对肿瘤DNA倍体及S期细胞增殖率的检测,探讨其对口腔颌面部肿瘤良、恶性诊断的可靠性。方法:对131例口腔颌面部良性、临界瘤及恶性肿瘤新鲜组织行流式细胞仪分析。结果:良性肿瘤组未检出DNA异倍体;混合瘤(临界瘤)组4例检出异倍体,提示有恶变倾向;恶性肿瘤异倍体的检出率最高为100%,S期增殖率也最高。结论:DNA异倍体的出现可以认为是癌变的标志,临界瘤中检出DNA异倍体预示有癌变倾向。S期增殖率为恶性肿瘤增殖的指标。     

口腔鳞癌细胞FasL表达对肿瘤浸润淋巴细胞及癌细胞凋亡的影响

目的 研究口腔鳞癌细胞FasL表达及其对癌细胞和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)凋亡的影响.方法 38例口腔鳞癌为实验组,10例正常口腔黏膜为对照组.采用免疫组织化学方法和末端脱氧核糖核酸转移酶介导的原位末端标记技术,观察癌组织FasL表达,计算TIL和癌细胞的凋亡指数,观察癌细胞FasL表达与TIL及癌细胞凋亡的关系.结果 FasL在正常口腔黏膜不表达,在鳞癌组织中表达明显上调(P＜0.05),FasL表达与口腔鳞癌分化程度无关(P＞0.05).口腔鳞癌细胞FasL表达阳性组癌细胞凋亡指数明显低于FasL表达阴性组,同时TIL的凋亡指数高于FasL表达阴性组(P＜0.05),口腔鳞癌细胞凋亡指数与TIL凋亡指数呈负相关(r＝-0.72,P＜0.05).结论 口腔鳞癌细胞可能通过上调表达FasL诱导TIL的凋亡,间接地使癌细胞凋亡下调而保护了自己,是口腔鳞癌组织免疫反攻击的体现.     

口腔鳞癌细胞增殖核抗原和P53免疫组化的比较研究

本文运用ＡＢＣ免疫组化结合图象分析，定量分析了ＰＣＮＡ（细胞增殖核抗原）和Ｐ５３在口腔鳞癌中的表达。探讨了两者在口腔鳞癌的临床病理、肿瘤侵龚和转移等方面的异同点。结果表明：ＰＣＮＡ的表达强度和阳性率与肿瘤的病理分级有关，与肿瘤细胞的侵龚转换无关。而Ｐ５３和肿瘤细胞的侵龚有关密切的关系（Ｐ〈０．０５）。Ｐ５３阳性者，淋巴结转移率较高（８０％）。结果表明在口腔鳞癌的临床行为恶性，预后等方面定量分析上述     

放射对口腔鳞癌细胞DNA损伤和糖酵解的影响

目的:探究放射诱导下口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)DNA损伤特点,及其对细胞糖酵解的影响。方法:4Gy的X-ray照射OSCC细胞(HSC3和CAL27)后,Western Blot和细胞免疫荧光检测DNA损伤标志γH2AX蛋白表达;CCK8法检测细胞增殖能力;RT-PCR检测若干糖酵解相关酶m R NA水平。结果:放射诱导OSCC细胞γH 2AX蛋白表达在0.5h后迅速上调,24h-48h恢复至正常水平,60h后再次上调;OSCC细胞增殖能力受到时间依赖性的抑制(P<0.05);糖酵解相关酶GLUT1、GLUT3、HK2、PK-M2和LDH A基因水平上调(P<0.05)。结论:放射诱导OSCC细胞发生DNA损伤,并促进糖酵解。     

转化生长因子β1对口腔鳞癌细胞系血管内皮生长因子的影响

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1)和口腔鳞癌侵袭转移的关系。方法　采用ELISA和免疫组织化学法测量不同浓度TGF β1作用于口腔鳞癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系后血管内皮生长因子(VEGF)活性和阳性表达的变化。结果　不同浓度的TGF β1作用于TSCCa 12h后 ,VEGF活性和阳性表达与对照组相比 ,无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;而不同浓度的TGF β1作用于GNM细胞 12h后 ,VEGF活性和阳性表达与对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,VEGF活性和阳性表达与TGF β1有剂量依赖关系。结论　TGF β1可能通过调节VEGF的活性和阳性表达的方式来参与口腔鳞癌侵袭转移。     

口腔白斑及鳞癌组织中DNA倍体值的研究

通过Feulgen染色及图像分析技术研究正常组织、白斑、上皮异常增生及鳞癌组织中DNA倍体的变化。结果显示：正常组织以2倍体为主．口腔白斑时为3～4倍体，随着病变的加重，高异倍体比例增加。提示，病理改变以DNA变化为基础，DNA倍体可作为预测白斑病变程度的指标。     

三氧化二砷诱导口腔鳞癌细胞凋亡的机制探讨

目的：探讨三氧化二砷诱导口腔鳞癌细胞凋亡的机制。方法：通过对两种舌鳞癌细胞系OSC－19，Tca8113经三氧化二砷作用后电镜下形态学改变、流式细胞仪测得的细胞周期变化、线粒体跨膜电位改变、凋亡相关蛋白BCL－2、p16、p53、Caspase-3及PARP变化；初步探讨三氧化二砷诱导舌鳞癌细胞系凋亡的机制。结果：（1）三氧化二砷抑制口腔鳞癌细胞生长通过毒性损伤和诱导凋亡双重途径来实现；（2）经三氧化二砷作用后，western blot检测bcl-2、p53、p16基因表达蛋白无变化，而caspase-3,PARP发生改变；（3）经三氧化二砷作用后，两类舌鳞癌细胞系线粒体跨膜电位明显下降，细胞周期G2－M期阻滞，且与凋亡产生同步。结论：（1）线粒体和微管可能是三氧化二砷的主要作用位点，为三氧化二砷发挥凋亡诱导效应的启动因素；（2）Caspase-3途径的激活可能为三氧化二砷诱导口腔鳞癌细胞凋亡的关键途径之一。     

三氧化二砷对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨不同剂量三氧化二砷(As2O3)对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及机制。方法体外培养人口腔鳞癌细胞株SCC-4,将处于对数生长期的SCC-4细胞接种于24只裸鼠后腿皮下,建立裸鼠移植瘤模型。荷瘤裸鼠随机分为四组,每组6只,分别为对照组(A)、As2O3低剂量组(B组)、中剂量组(C组)和高剂量组(D组)。分别于肿瘤细胞接种第6、9、12、15、18、21天按上述剂量给予裸鼠腹腔注射As2O3,对照组注射生理盐水。停药1周后处死动物,完整取出瘤块,测量肿瘤重量和体积,计算肿瘤抑制率,免疫组织化学法检测各组标本中Ki67、cleaved caspase-3、CD31的表达情况,计数阳性细胞数及微血管密度(MVD)并进行统计学分析。结果As2O3低、中、高剂量组均能抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,中剂量组移植瘤体积抑制率最大为64.95%,低剂量组为32.99%,高剂量组为44.33%。免疫组化结果显示,用药后As2O3中剂量组Ki67的表达及MVD值明显低于对照组,凋亡蛋白cleaved capase-3的表达显著高于对照组(P<0.01),高剂量组凋亡蛋白cleaved capase-3的表达亦显著高于对照组(P<0.01),MVD值明显低于对照组(P<0.05),低剂量组Ki67、cleaved caspase-3、CD31的表达与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。用药前各组裸鼠体重无差异(P>0.05),用药后高剂量组裸鼠体重显著低于对照组和中、低剂量组(P<0.05)。结论 As2O3对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤具有一定的抑制作用,其可能的机制为抑制肿瘤细胞增殖及血管生成,诱导肿瘤细胞凋亡。As2O3对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用与剂量有关。     

肿瘤相关成纤维细胞对口腔鳞癌细胞生长和迁移的影响

目的：研究肿瘤相关成纤维细胞（ cancer associated fibroblasts, CAFs）对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响,初步探讨CAFs在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法采用原代培养的方法,培养口腔鳞癌相关成纤维细胞,光学显微镜观察其形态,免疫组化和免疫印迹实验进行鉴定,CCK-8法检测细胞的增殖能力。 transwell迁移实验检测CAFs诱导口腔鳞癌细胞迁移的能力;萤火虫荧光素酶报告系统检测CAFs对肿瘤细胞增殖能力的影响;平板克隆形成实验评价 CAFs对肿瘤细胞克隆形成能力的影响。结果成功分离培养出口腔鳞癌来源的 CAFs。CAFs能促进口腔鳞细胞的迁移、增殖和克隆形成等生物学行为。结论 CAFs能显著影响口腔鳞癌的增殖和迁移,表明其在口腔鳞癌的发生发展中发挥着一定的作用。     

口腔鳞癌细胞系对葫芦素BE的敏感性研究

目的：观察具有多种生物活性的葫芦素BE对口腔鳞细胞的杀伤作用,方法：用四唑盐显色法（MTT法）检测人舌低分化鳞癌（Tca8113）和人平高分化鳞癌BcaCD885）细胞系对葫芒素BE的敏感性实验,结果：葫芦素BE对两种癌细胞系均有较高的相对抗瘤活性（RAA值分别为345、148）,结论：实验结果为葫芦素BE治疗口腔癌的进一步研究提供了重要依据。     

外源性转化生长因子β1对口腔鳞癌细胞中相关基因表达的影响

目的：探讨TGF—β1在El腔鳞癌发生发展中的作用。方法：采用免疫组化法观察不同浓度的TGF—β1作用于口腔鳞癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系中相关基因c-myc、c-erbB2和TGF-β1及EGFR蛋白表达，同时运用图象分析技术对蛋白表达的表达动态进行了相对定量分析。结果：相同浓度的TGF—β1对两细胞系作用不同；TGF-β1可促进GNM细胞中C-myc和C-erbβ2蛋白表达明显上调，对TGF—β1和EGFR蛋白表达有轻微的促进作用；而TGF-β1作用于TSCCa细胞后C—myc、Cerbβ2、TGF—βl和EGFR蛋白表达明显下调，并与TGF—β1有剂量依赖关系。结论：TGF—β1可能在不同转化的口腔鳞癌细胞中的作用不同。     

山竹醇对人口腔鳞癌细胞糖酵解代谢通路的影响

目的 观察山竹醇(Garcinol)对人口腔鳞癌细胞系CAL27增殖和克隆形成能力的影响,以及对CAL27细胞糖酵解代谢的影响. 方法 培养人口腔鳞癌细胞系CAL27,不同浓度的Garcinol处理CAL27细胞, MTT法检测其对细胞增殖能力的影响.克隆形成实验检测对细胞克隆形成能力的影响.RT-PCR检测Garcinol对细胞内糖酵解通路关键酶表达的影响,以及对糖酵解通路的重要基因表达的影响.并检测细胞上清液中葡萄糖、乳酸含量的变化来评估Garcinol对CAL27细胞内糖酵解水平的影响.通过酶活性实验检测细胞内糖酵解关键酶(HK、PK、LDH)的酶活性变化. 结果 Garcinol能显著抑制CAL27细胞的增殖,呈浓度和时间依赖性(P<0.01);能明显抑制CAL27细胞的克隆形成能力(P<0.01).同时,Garcinol能促进糖酵解关键酶己糖激酶(HK),丙酮酸激酶(PK),乳酸脱氢酶(LDH)的基因表达,增强糖酵解关键酶(HK、PK、LDH)的酶活性(P<0.05).Garcinol也能增加AKT和mTOR的基因表达水平(P<0.05).Garcinol还能促进CAL27细胞的葡萄糖吸收和乳酸分泌.结论 Garcinol能够抑制人口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖和克隆形成能力,同时也增加了细胞内的糖酵解水平.