全外显子测序技术在骨骼发育不良胎儿产前诊断中的应用

目的 探讨全外显子测序技术（whole exome sequencing, WES）对超声提示骨骼发育不良（skeletal dysplasia, SD）胎儿进行产前诊断的临床应用价值。方法 2019年1月至2021年9月,在常州市妇幼保健院经常规产前超声筛查发现的20例骨骼发育不良胎儿,取羊水细胞后同时进行胎儿染色体核型、染色体微阵列分析（chromosomal microarray analysis, CMA）及WES检测,并留取父母外周血样本进行一代测序验证。结果 20例SD胎儿产前诊断结果发现1例致病性拷贝数变异（copy number variants, CNV）;15例存在致病/可能致病的基因突变（FGFR3、COL2A1、COL1A1、COL1A2、RUNX2、LMX1B、GLI3、DYNC2H1和ALPL）,其中8例为新发突变（FGFR3、COL2A1、COL1A1）;1例为临床意义不明的TBX4基因突变;3例未见异常。结论 超声发现的SD胎儿,核型检查和CMA不宜作为一线产前诊断技术,产前WES应作为其重要的分子遗传检测工具。     

产前诊断 ABCA12基因变异所致丑角样鱼鳞病1例

本文报告了1例产前超声提示胎儿多发结构异常、经家系全外显子组测序诊断为丑角样鱼鳞病的病例。因孕24周+4超声提示胎儿唇角略外翻, 鼻梁低平, 下颌略后缩, 左耳耳廓小, 双足足趾姿势异常进行产前诊断。全基因组拷贝数变异检测提示胎儿及父母样本未检测到染色体非整倍体或100 kb以上已知的、明确致病的基因组拷贝数变异。家系全外显子组测序结果提示胎儿ABCA12基因c.2593-1G>A和c.7444C>T致病性变异, 分别遗传自临床表型正常的父母, 最终确诊为丑角样鱼鳞病。经充分遗传咨询后, 孕28周+4引产后死胎可见全身多发畸形。c.2593-1G>A变异位点未见报道, 该位点的发现拓宽了ABCA12基因突变谱。     

75例骨骼发育异常胎儿与遗传因素的相关性分析

目的 探讨遗传因素在骨骼发育异常(skeletal dysplasia, SD)胎儿中的作用,为临床遗传咨询提供参考。方法 2018年1月至2022年12月因骨骼发育异常伴或不伴有其他超声异常至深圳市龙岗区妇幼保健院医学遗传与产前诊断科行遗传学检测的75例胎儿,47例胎儿进行介入性产前诊断行染色体核型、染色体微阵列分析,部分阴性病例进一步行全外显子测序;28例超声诊断后孕妇要求引产,取引产胎儿组织行染色体微阵列分析,部分阴性病例行全外显子测序。结果 75例骨骼发育异常胎儿中,检出染色体非整倍体12例,包括10例18三体、1例13三体、1例X单体嵌合体,检出率为16%(12/75),染色体微阵列分析额外检出6例致病性变异(8%,6/75),染色体异常总体阳性检出率为24%(18/75);9例染色体检测阴性胎儿进一步行全外显子测序,3例致病性突变,2例可疑致病性突变,2例临床意义不明突变,阳性检出率为77.8%(7/9)。其中,单纯SD组及SD合并其他系统异常阳性检出率分别为21.3%(10/47)、53.6%(15/28),两组阳性检出率差异有统计学意义(χ²=6....     

胎儿短肢畸形的基因突变位点筛查

目的 研究胎儿短肢畸形的致病基因突变位点. 方法 2008年8月至2011年8月,妊娠18～24周和(或)30～32周常规胎儿超声检查发现胎儿肢体明显短小者共10例,知情同意后引产终止妊娠,同时抽取羊水或脐带血进行胎儿染色体核型分析.采用聚合酶链反应及直接测序技术检测羊水或脐带血成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)基因的热点突变位点.染色体及FGFR3基因检测异常胎儿的双亲进行FGFR3基因相同部位的测序.1例胎儿(病例3)颅骨骨化差,考虑软骨生成不全,进行FGFR3基因全部外显子及SLC26A2,Trip11基因外显子测序. 结果 10例短肢畸形胎儿,妊娠中、晚期各检出5例,均引产终止妊娠.染色体核型分析发现1例为嵌合体(46,XY/45,XY,-18),余9例正常.10例胎儿全部进行了FGFR3基因热点突变部位的检测,发现4例基因突变.其中1例为罕见的c.1108G＞T(G370C)突变,胎龄21+3周,诊断致死性骨发育不良;另3例胎龄30～32周胎儿为FGFR3 c.1138G＞A(G380R)突变,明确诊断为软骨发育不全.4例基因突变胎儿的双亲均未见相同位点突变,再发风险低,其中3例胎儿母亲目前已再次妊娠分娩,新生儿无异常.病例3胎儿FGFR3基因全部外显子及SLC26A2,Trip11基因检测均未发现致病突变. 结论 染色体及FGFR3基因热点突变部位的检测可为部分短肢畸形胎儿明确致畸原因,为患病家庭提供准确的遗传咨询及再次妊娠的产前诊断;妊娠晚期超声发现胎儿肢体明显短小,应考虑软骨发育不全.     

1个 DYNC2H1基因变异导致的短肋多指综合征Ⅲ型家系的遗传学分析

本文报道1个连续3次妊娠早孕期超声均提示胎儿四肢短小家系的遗传学分析。取第2次妊娠引产胎儿组织行染色体核型分析及全外显子组测序,结果提示 DYNC2H1基因存在EX64-EX83 Del及c.8190G>T杂合变异。实时荧光定量聚合酶链反应及Sanger测序验证2个变异分别遗传自表型正常的父亲和母亲,前者为...     

无创产前诊断在胎儿单基因病中的诊断价值初探

目的 初步探讨无创产前诊断在胎儿单基因病中的诊断价值。方法 通过基于目标序列捕获技术的高通量测序方法检测8例可能孕有单基因病胎儿并决定引产的孕妇外周血进行基因测序,以引产胎儿绒毛组织基因检测的结果为诊断的金标准。结果 8例孕妇均行外周血胎儿游离DNA高通量基因测序,结果提示：病例1检测出COL1A2基因发生c.2962G>T突变,为胎儿成骨发育不全;病例4和7检测到FGFR3基因发生c.742C>T突变,为致死性侏儒;其余病例未检测到明显致病性突变,引产后发现胎儿存在不同程度的宫内生长受限。与引产绒毛组织基因检测结果比对证实,符合率100%。结论 无创产前诊断检测可在产前明确胎儿异常的病因方面发挥作用,为患者提供准确的遗传咨询及下一次妊娠指导。     

CTCF基因突变致胎儿不良妊娠结局的遗传学分析

目的 探讨CTCF基因致病突变的产前遗传学分析及咨询。方法 运用染色体核型分析、荧光原位杂交技术(FISH)、染色体微阵列分析(CMA)及全外显子组测序技术(WES)对一例产前超声发现双侧肾脏回声增强结构模糊的胎儿进行产前遗传学检测。结果 核型分析、荧光原位杂交技术、染色体微阵列分析未见异常,家系全外显子测序检测到胎儿CTCF基因存在新发变异c.944＿951dup,为移码突变,导致318位甘氨酸密码子(GGT)被替换为组氨酸密码子(CAC),并在第18个密码子后终止(p.Gly318Hisfs*18),产生截短蛋白质。CTCF基因突变可致罕见常染色体显性智力障碍21型,胎儿期尚未见报道。结论 本例为首次在胎儿期检出CTCF基因致病突变,推测双肾回声增强结构模糊为该基因突变相关的一种新的胎儿期表型。全外显子组测序技术在产前检测出罕见致病突变的病例需重视检测前后的咨询。     

全外显子测序检测6个囊性肾病胎儿及其核心家系的致病突变

目的全外显子测序技术检测6个囊性肾病胎儿及其核心家系,寻找致病变异,为遗传咨询、产前诊断或植入前诊断提供遗传学数据支持。方法应用Illumina Hiseq2500测序平台,对超声检查提示为囊性肾病、染色体微阵列检测(CMA)未见异常的胎儿标本进行家系全外显子检测,参考数据库Human Genome 19(hg19/GRCh37),根据美国医学遗传学与基因组学学会指南(ACMG,2015)及指南应用建议评估变异致病性,对评级可疑致病位点应用Sanger测序验证。结果家系WES检出3个家系存在异常突变,其中1个家系的突变为遗传性,2个家系胎儿的突变为新发突变;余3个家系未检出明确致病突变。胎儿1 PKHD1基因c.5869G>A(父源)和c.9455delA复合杂合突变(母源),均为可能致病的变异。胎儿5 HNF1B基因c.826C>T杂合突变,为致病性新发突变。胎儿6 HNF1B基因c.1318G>T杂合突变,为可能致病性新发突变。Sanger测序验证结果与全外显子检测结果一致。结论对囊性肾病可运用家系核心成员全外显子检测,筛选出候选变异后进行Sanger测序验证,并对家系进行遗传分析,有助于遗传咨询、再次妊娠的产前诊断或辅助生殖的植入前诊断。本研究检出3个未见文献报道的可能致病突变位点,1个致病性突变位点已在个别文献报道但是未在国际公认数据库明确为致病突变位点,本研究拓宽了囊性肾病的致病基因位点谱。     

COQ4基因变异致新生儿期起病的原发性辅酶Q10 缺乏症1例

本文报道1例COQ4基因变异导致的新生儿期起病的原发性辅酶Q10缺乏症病例。患儿生后当天出现不明原因的喂养困难、间断发绀、呼吸和循环衰竭。其同胞姐姐有类似病史, 生后9 d死亡, 全外显子组测序未检出致病性变异。本例患儿全外显子组测序检出COQ4基因c.370G>A致病性纯合变异。追查姐姐全外显子组测序结果, 获知COQ4基因c.370G>A纯合变异(当时定义为临床意义未明), Sanger测序验证发现其父母均为c.370G>A杂合变异。结合临床表现, 诊断原发性辅酶Q10缺乏症。给予呼吸循环支持并口服补充辅酶Q10后症状缓解, 近1岁时随访显示患儿存在癫痫和精神运动发育落后。     

产前诊断胎儿ZTTK综合征1例

本文报道了1例产前诊断的ZTTK综合征胎儿。孕妇因配偶染色体平衡易位, 行胚胎植入前遗传学诊断。孕18周+取羊水细胞行染色体核型分析及基因组拷贝数变异测序均未发现异常。孕23周+5及孕26周+3超声检查显示严重胎儿生长受限、小脑发育异常、骶骨及尾骨显示欠清、脊柱裂, 孕23周+6胎儿颅脑MRI显示胎儿双侧小脑半球体积小, 大枕大池。对胎儿及其父母行全外显子组测序, 结果显示胎儿SON 基因3号外显子存在1个杂合变异c.2092delG(p.Glu698fs*4), 父母不存在该变异, 为新发变异;该位点为致病性, 关联疾病为ZTTK综合征。经遗传咨询, 孕妇及家属选择终止妊娠。     

特殊类型外阴阴道畸形六例临床分析

目的 分析6例特殊类型的外阴阴道畸形患者的临床特点,探讨其分型及处理.方法 回顾1998年3月至2008年3月北京协和医院收治的6例特殊类型外阴阴道畸形(即与泌尿生殖赛发育异常相关的外阴阴道畸形)患者的临床资料,根据胚胎发育学及解剖学特点对其进行分型,并总结其处理方式.结果 此类外阴阴道畸形罕见,也未被纳入目前的分类及诊断系统,但该类患者的临床表现具有娃著共性:月经正常来潮,但经血与尿液自同一孔道流出;妇科检查发现会阴仅见2个孔道,前方孔道位于阴蒂下方,似尿道外口,后方孔道为肛门,之间无类似阴道前庭和阴道外口的结构.本研究根据其特征分为3型,即:Ⅰ型(3例):小阴唇融合,即泌尿生殖窦末端存留;Ⅱ型(1例):远端尿道阴道瘘伴阴道闭锁(尿道外括约肌下型),阴道与尿道低位交通;Ⅲ型(2例):近端尿道阴道瘘伴阴道闭锁(尿道外括约肌上型),阴道与尿道高位交通,严重者可伴消化道及其他系统发育异常.6例患者均接受手术治疗,不同类型的畸形患者术式也不相同,但多可经1次手术完成,术后患者外阴形态接近正常,未见阴道狭窄.结论 特殊类型外阴阴道畸形结构复杂多样,对其进行分型有利于临床诊断和处理,但手术设计仍应个体化,在争取满意的解剖与功能恢复的同时,应兼顾美学、性学及心理学需求.     

Characterization of a balanced complex chromosomal rearrangement carrier ascertained through a fetus with dup15q26.3 and del5p15.33: case report

Abstract

Complex chromosomal rearrangements (CCRs) are structural aberrations involving more than two chromosomes which rarely appear in individuals with normal phenotypes. These individuals report fertility problems, recurrent miscarriages, or congenital anomalies in newborn offspring as a consequence of either meiotic failure or imbalanced chromosome segregation. A CCR involving chromosomes 5, 15, and 18 was discovered in a phenotypically normal man through a fetus with congenital malformations and partial trisomy of chromosome 15 and monosomy of chromosome 5. Ultrasound examination at 20 weeks of gestation showed severe oligoamnios and hydrothorax. Prenatal cytogenetic analysis and array comparative genomic hybridization (array-CGH) revealed a female fetus with dup15q26.3 and del5p15.33. We diagnosed the CCR using three-color fluorescence in situ hybridization (three-color FISH), and a balanced CCR using array-CGH and FISH was diagnosed in the paternal karyotype. The father is a carrier of a balanced translocation 46,XY,t(5;15;18)(p15.31;q26.3;p11.2). Due to the complexity of these rearrangements the diagnosis is difficult and the reproductive outcome uncertain. Reporting such rare cases is important to enable such information to be used for genetic counseling in similar situations and help estimate the risk of miscarriage or of newborns with congenital abnormalities.     

肺动脉供血的先天性叶外型肺隔离症1例

本文报道了1例肺动脉供血的左上叶先天性肺隔离症的临床特点。该患儿母亲孕24周产前B超发现胎儿左侧胸腔可见一高回声均匀密度肿块,病变体积与头围比值为1.16,供血来源于左肺动脉。孕27周完善MRI检查提示胎儿左肺体积增大,容积约48.52 ml,右肺容积约8.56 ml,总肺容积约57.08 ml。产前诊断考虑左侧先天性...     

出生缺陷影响因素的病例对照研究

目的 探讨出牛缺陷的影响因素.方法 2009年4月1日-2010年3月31日,选择在青岛市妇女儿童医疗保健中心、青岛大学医学院附属医院、青岛市市立医院等75家医疗保健机构、孕龄为13周至产后7 d内发现的缺陷儿为出生缺陷组;选取同期无出生缺陷的健康新生儿作为对照组.采用病例对照研究方法,利用出生缺陷三级监测网络信息,以专门设计的出生缺陷影响因素病例对照调查表,对两组胎婴儿的父母进行问卷调查.结果 (1)青岛市妇女儿童医疗保健中心等75家医疗保健机构分娩围产儿数77 231例,其中分娩围产期出生缺陷儿466例,围产儿出生缺陷发生率为60.34/万.前6位的出生缺陷病因依次是先天性心脏病112例、总唇裂(唇裂、唇裂合并腭裂)85例、多指(趾)53例、神经管畸形38例、先天性脑积水37例、肢体短缩28例,共计353例,占全部出生缺陷儿的54.48%(353/648).(2)出生缺陷组母亲的大专及以上文化程度(25.6%)低于对照组(30.0%),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(3)出生缺陷组中父母经常被动吸烟、经常饮酒、饲养宠物的比例高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(4)出生缺陷组母亲孕期有害化学物质及有害物理因素接触率(分别为13.9%及20.5%)与对照组(分别为1.1%及11.7%)比较,差异有统计学意义(P<0.01).出生缺陷组母亲孕期患感冒(34.3%)、发热(13.1%)及服用药物(33.8%)的发生率高于对照组(分别为13.5%、1.5%及9.9%),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).出生缺陷组母亲孕期有不良精神因素刺激的发生率(11.3%)高于对照组(1.4%),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(5)出生缺陷组中有家族遗传病史者有19例(2.9%,19/648),对照组中无.两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).出牛缺陷组中母亲有异常生育史者有89例(13.7%,89/648),对照组有31例(4.8%,31/650).两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(6)多因素条件logistic回归分析显示,母亲孕期接触有害化学物质(OR=13.46)、孕期患病(OR=3.37)、孕期服药(OR=2.20)、不良精神凶素刺激(OR=5.44)、孕期挑食与偏食(OR=1.90)、孕期贫血(OR=1.52)、多胎(OR=4.40)及父亲饮酒(OR=1.55)是出生缺陷发生的主要危险因素,而孕期补充钙、铁等微量元素及营养素是保护性因素(OR=0.45).结论 (1)主要出生缺陷疾病依次是先天性心脏病、唇裂、多指(趾)、神经管畸形、先天性脑积水及肢体短缩.(2)母亲孕期接触有害化学物质、孕期患病、孕期服药、不良精神因素刺激、孕期挑食与偏食、孕期贫血、多胎及父亲饮酒是出生缺陷发生的主要危险因素;而孕期补充钙、铁等微量元素及营养素是保护性凶素.(3)减少和控制孕期主要危险因素是预防出生缺陷的重要环节.

Abstract：

Objective To investigate the influence factors of birth defects. Methods The congenital malformational fetuses born from 13 week of gestation to 7 days after birth were selected as the study group between April 1st, 2009 and March 31st, 2010. The health born fetuses were set as control in the same period. Case-control and the three-level of monitor network of birth defects were used in the study in the participating 75 hospitals (Qingdao Women and Children's Medical Center, Affiliated Hospital of Medical College Qingdao University, Qingdao Municipal Hospital, etc.) . The study and control group's parents were interviewed by an uniformed questionnaire which was designed specially with influence factors of birth defects. Results (1) There are 466 congenital malformational fetuses in the total of 77 231 fetuses collected in 75 hospitals. The congenital malformational rate accounts for about 6. 034‰. The top six defect diseases were congenital heart disease (112 cases) , total harelip (cleft lip; cleft lip with palate; 85 cases) ,polydactyly (53 cases) , neural tube defects (38 cases) , congenital hydrocephalus (37 cases) and limb reduction defect (27 cases) in turn, which amounts to 353 cases (54.48% , 353/648). (2) Their mother education level in the birth-defect group (25. 6%) were significantly lower than that in control group (30. 0% , P < 0. 05). (3) The rate of passive smoking, drinking, raising pets of the parents in birth-defect group were significantly higher than that in control group (P < 0. 05). (4) The rate of exposure to harmful chemical and physical factors of mothers in birth defects group (13.9% and 20. 5% , respectively) was higher than that in control group (1.1% and 11.7% , respectively) , the difference between which were significant (P < 0. 01) . The rate of disease (34. 3%) , fever (13. 1%) , taking drugs (33. 8%) in pregnancy period in birth defect group were higher than that in control group (13. 5% , 1.5% and 9. 9% ,respectively) , the difference between which were significant (P <0. 01). The rate of bad moral irritation to the mother in pregnancy in birth defect group (11. 3%) was significantly higher than that in control group (1.4% , P<0.01). (5) There were 19 cases (2.9% , 19/648) with family heredity medical history in birth defect group, but there were none in the control group, the difference between which were significant (P<0. 01). There were 89 cases (13.7% , 89/648) with unusual birth history of their mothers in birth defect group, but there were 31 cases (4. 8% , 31/650) in control group, the difference between which were significant (P<0. 01). (6) Conditional Logistic Regression model was used for univalent and multivariate analysis. The results showed that main influence factors were identified as having important effect on birth defects, including mothers' exposure to harmful chemical factors (OR=13. 46) , disease (OR=3. 37) ,taking drugs (OR=2. 20) , exposure to bad moral irritation (OR=5. 44) , food-choosy (OR=1. 90) ,anemia (OR=1. 52) in gestational period, polyembryony (OR=4. 40) , father drinking (OR=1. 55) .While it was protective factors to supplement microelements such as the calcium iron and nutrient, etc. in pregnancy period (OR=0. 45). Conclusions First, the main birth defects were congenital heart disease, total harelip (cleft lip; cleft lip with palate) , polydactyly, neural tube defects, congenital hydrocephalus and limb reduction defect in turn. Second, the main influence factors identified as having important effect on birth defects were mothers' exposure to harmful chemical factors, ill, taking drugs, exposure to bad moral irritation, food-choosy, anemia in gestational period, polyembryony, father drinking. But it is protective factors to supplement microelements such as the calcium iron and nutrient, etc. in pregnancy period. Finally, it is the important part to prevent the birth defects by reducing and controlling dangerous factors in pregnancy period.     

子宫畸形的发生及其对妊娠的影响

子宫畸形分为先天性子宫畸形和获得性子宫畸形。先天性子宫畸形是女性生殖器官发育异常中最常见的一种,包括子宫未发育或发育不全、单角子宫、双子宫、双角子宫、纵隔子宫、弓形子宫、己烯雌酚(DES)相关异常。获得性子宫畸形多继发于流产、剖宫产、宫腔镜手术及宫颈手术后,包括宫颈宫腔粘连、子宫Ⅲ度后倾后屈、子宫前腹壁固定、颈管宫腔形态失常。介绍子宫畸形的发生原因及其对妊娠结局的影响,以期为子宫畸形患者的正常妊娠及不良妊娠结局的处理和预后提供帮助。     

残角子宫伴右肾缺如一例并文献复习

苗勒管畸形是女性生殖道的先天性畸形,残角子宫（rudimentary uterus horn）就是由于其中一条苗勒管发育受阻形成的。该畸形通常在青春期得以明确诊断,而在青春期之前常因无明显症状而漏诊。该畸形的初始临床症状并无特异性,患者可表现为痛经、不孕、慢性或急性腹痛等症状。报告1例23岁有8年痛经史的患者,最终诊断为残角子宫伴右肾缺如,回顾性分析其分型、诊断及治疗资料,旨在提醒临床上对年轻腹痛患者宜将苗勒管异常作为一个重要的鉴别诊断。     

776对原发不孕夫妇病因及细胞遗传学分析

目的 :探讨原发不孕的原因及诊断方法。方法 :1.夫妇双方一同就诊 ;2 .女方常规妇科检查、实验室及物理检查 ;3.分析男方精液 ,以WHO检验手册标准分析结果 ;4 .细胞遗传学染色体检查。结果 :776对原发不孕患者中 ,单纯女方异常 313对 ,占4 0 .34% ;单纯男方异常 178对 ,占 2 2 .94 % ;双方均异常 2 85对 ,占 36.73%。发现染色体异常 10 3例 ,异常检出率为 13.2 7%。结论 :1.重视男性不育和严格的精液检查在不孕症的诊断中至关重要 ;2 .在原发不孕中 ,染色体异常是重要原因之一 ,染色体异常导致的不孕多数是不可逆的 ,所以婚前的细胞遗传学检查染色体分析尤为重要 ,在了解自己的生育状况后 ,才可能正确选择婚姻和配偶     

先天性阴道斜隔综合征的超声诊断

目的：总结先天性阴道斜隔综合征的超声图像特点及正确的诊断方法。方法：回顾性分析10例经手术证实的阴道斜隔综合征患者的临床症状及超声图像特点。结果：阴道斜隔综合征的超声图像特点为：双宫体,双宫颈,患侧阴道斜隔内积血和患侧肾脏缺如。妊娠期诊断阴道斜隔综合征有一定难度。结论：先天性阴道斜隔综合征的超声图像特点明显,超声可作为诊断该病首选且可靠的方法。