中药补肾调冲方对卵巢储备功能低下大鼠的影响

目的:观察中药补肾调冲方对环磷酰胺所致卵巢储备功能低下(DOR)大鼠性激素水平和免疫因子TNF-α、IFN-γ含量的影响,探讨补肾调冲方对DOR的预防、改善和调节作用。方法:将SD雌性大鼠40只,随机分为对照组、模型组、补肾调冲方预防组、补肾调冲方治疗组各10只。运用ELISA法检测大鼠血清中雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)与黄体生成素(LH)比值、抗苗勒激素(AMH)水平。采用Real Time PCR法检测大鼠卵巢组织相关细胞因子TNF-α、IFN-γmRNA转录水平的变化情况。结果:补肾调冲方可升高DOR大鼠的E2、AMH水平,降低FSH/LH比值和TNF-α、IFN-γmRNA表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:中药补肾调冲方对卵巢损伤具有一定的预防保护作用,可以预防DOR的发生,其作用机制可能与补肾调冲方中某些中药能够调节卵巢性激素水平,抑制TNF-α、IFN-γ分泌,降低卵泡闭锁的速度,抑制卵泡过度凋亡,进而改善卵巢功能。     

知母总皂苷对雌性性早熟SD大鼠性激素水平的影响及对HPGA轴的作用研究

[目的]探讨知母总皂苷对雌性性早熟SD大鼠性激素水平的影响及对下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的作用。[方法]建造雌性性早熟SD大鼠模型,随机分为模型组、知母总皂苷低剂量组(知低组)、知母总皂苷高剂量组(知高组)、阳性对照组,另设正常组。经相应干预后,记录各组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间;取大鼠性器官,计算子宫、卵巢指数;HE染色观察大鼠卵巢形态学变化;ELISA检测大鼠血清性激素卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)水平;qPCR和Western blot检测大鼠下丘脑肿瘤转移抑制基因亲吻素-1(KISS-1)、G蛋白偶联受体54(GPR54)、促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRHR)mRNA与蛋白表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较短,子宫、卵巢指数较高,黄体数量较多,血清FSH、LH、E2水平较高,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较高(P<0.05);与模型组比较,知低组、知高组、阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05);与知低组比较,知高组、阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05);与知高组比较,阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05)。[结论]知母总皂苷可调节雌性性早熟SD大鼠性激素水平,对HPGA轴有抑制作用。     

电针命门穴对去势骨质疏松模型大鼠肾上腺雌激素受体ERαmRNA表达的影响

目的研究电针命门穴对去卵巢骨质疏松模型(OVX)大鼠肾上腺功能的影响。方法造模成功的雌性SD大鼠18只,随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只。大鼠处死后,用放免法测各组大鼠血清中雌二醇(estradiol,E2)水平,荧光定量PCR(探针法)检测各组大鼠肾上腺ERαmRNA表达。结果模型组与假手术组比较,血清E2水平明显下降,有显著性差异(P0.05),电针组血清E2水平有一定升高,与模型组比较,无统计学意义(P0.05);模型组肾上腺ERαmRNA表达强于假手术组,有统计学意义(P0.05),电针组肾上腺ERαmRNA表达降低,与模型组相比,有显著性差异(P0.05)。结论去卵巢后,大鼠肾上腺可起代偿作用,电针能提高去卵巢骨质疏松大鼠血清雌激素水平,并影响大鼠ERα在肾上腺的表达。     

补肾更年方对更年期综合征大鼠血清FSH、LH水平及子宫ERα蛋白表达的影响

目的:观察补肾更年方对更年期综合征(MPS)大鼠血清FSH、LH水平和子宫ERα蛋白表达的影响,探讨其效应机制。方法:将40只大鼠用手术去除卵巢后随机分为补肾更年方大剂量组、中剂量组、小剂量组和西药组,并与模型组和空白组做对照,每组10只,补肾更年方大、中、小剂量组以不同剂量灌胃,模型组和空白组以生理盐水灌胃,西药组以己烯雌酚液灌胃,连续干预45天,干预结束后,运用放免法检测大鼠血清FSH、LH含量,Western blot法检测大鼠子宫ERα蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清FSH、LH水平显著升高、子宫ERα蛋白表达显著减少(P0. 01);与模型组比较,补肾更年方大、中剂量组和西药组能够显著降低大鼠血清FSH、LH水平并增加子宫ERα蛋白表达(P0. 05),补肾更年方小剂量组对其无明显影响(P0. 05)。结论:补肾更年方可能通过提高MPS大鼠子宫ERα蛋白表达水平,上调ER含量,增强雌激素的生物活性,改善MPS大鼠性激素FSH、LH水平,从而发挥对MPS的治疗效应。     

补肾调冲方对卵巢早衰大鼠性激素水平和卵巢Bcl-2/Bax表达的影响

目的:观察补肾调冲方对雷公藤多苷片所致卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)雌性大鼠卵巢性激素水平和卵巢中B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2),促进凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 assaciated X protein,Bax)蛋白及mRNA表达的影响,探讨补肾调冲方的预防作用。方法:SD雌性大鼠42只,随机分为正常组,模型组,结合雌激素组,补肾调冲方预防高、中、低剂量组。运用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中雌二醇(estradiol,E_2),卵泡刺激素(follicule-stimulating hormone,FSH),黄体生成素(luteinizing hormone,LH),孕酮(progesterone,P)水平。蛋白质免疫印迹(Western blot)法和逆转录-聚合酶链式方应(RT-PCR)法检测卵巢组织中Bcl-2,Bax蛋白和mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠FSH,LH含量明显升高,E_2的含量明显降低,卵巢组织中Bcl-2蛋白及mRNA的表达明显降低,Bax蛋白及mRNA的表达明显升高(P0.01);补肾调冲方各给药组和结合雌激素组E_2的含量均高于模型组(P0.01),其中补肾调冲方低、中、高剂量和结合雌激素组E_2含量与正常组比较,差异无统计学意义。补肾调冲方各给药组和结合雌激素组FSH,LH的含量均低于模型组(P0.01);低、中、高剂量组和结合雌激素组FSH,LH含量与正常组比较,差异无统计学意义。各组与正常组P含量比较差异无统计学意义。补肾调冲方预防低、中、高剂量组和结合雌激素组Bcl-2蛋白及mRNA的表达明显高于模型组(P0.01);Bax蛋白及mRNA的表达明显低于模型组(P0.01)。结论:补肾调冲方对卵巢具有一定的保护作用,可以预防卵巢早衰的发生。其作用机制可能与补肾调冲方中某些中药能够调节卵巢性激素水平,维持Bcl-2,Bax的平衡,降低卵泡闭锁的速度,抑制卵泡的过度凋亡,改善卵巢的功能。     

马鬃蛇醇提物对下丘脑抑制大鼠雌激素水平及卵巢ER的影响

目的:研究马鬃蛇醇提物(CVAE)对下丘脑抑制大鼠雌激素水平及卵巢雌激素受体(ER)的影响。方法:sc吗啡建立未成年雌性大鼠下丘脑抑制模型,灌胃给药21d,用放射免疫法测定血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)水平,用免疫组化法测定卵巢ER。结果:CVAE可提高雌激素受体阳性细胞表达,明显升高血清中E2、FSH水平,大鼠出现动情期提前,并可升高子宫、卵巢的脏器系数。显微镜观察显示,大鼠子宫内膜增厚,腺体数量增多,间质致密。结论:CVAE可提高未成年雌性大鼠下丘脑抑制的E2、FSH水平,增加卵巢ER阳性细胞表达,提示其作用机制可能是通过下丘脑-垂体-卵巢轴的调节。     

“逆针灸”对去卵巢大鼠生殖内分泌影响的研究

目的:探讨逆针、逆灸关元穴对去卵巢大鼠生殖内分泌包括血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、促卵泡素(FSH)、黄体生成激素(LH)、FSH/LH及子宫E2、雌激素受体-α(ER-α)的影响及其机制.方法:将80只3.5月龄SD雌性大鼠随机分为5组,采用放射免疫、免疫组化等方法,观察在3.5月龄逆针、逆灸关元穴(每周2次,连续4周)对随后去卵巢大鼠的血清E2、P、T、FSH、LH、FSH/LH及子宫E2、ER-α的影响.结果:与假手术组相比,去卵巢大鼠的血清E2、P及T降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),FSH、LH及FSH/LH升高,子宫E2和ER-α表达下降(P＜0.05,P＜0.01);而预先介入逆针、逆灸疗法后,血清E2回升,FSH、LH及FSH/LH下降,其中以逆灸去卵巢组FSH及逆针、逆灸去卵巢组FSH/LH下降最为明显(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),子宫E2和ER-α表达提高,其中逆针去卵巢组E2及逆针、逆灸去卵巢组ER-α表达均显著增强(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).对血清P影响不明显,而对于血清T则有下调之势.结论:逆针、逆灸关元穴可以减缓去卵巢大鼠的生殖内分泌紊乱,可能与该疗法直接或间接促进E2的合成,提高性器官的ER-α表达,调节下丘脑-垂体-卵巢轴的功能异常有关.     

加味左归饮对去卵巢骨质疏松大鼠下丘脑雌激素α受体的影响

目的观察加味左归饮对绝经后骨质疏松大鼠下丘脑雌激素受体α(ERα)及其基因表达的影响.方法 以切除卵巢的雌性大鼠作为骨质疏松的动物模型,将大鼠分为假手术组、模型组、阳性对照组和加味左归饮低、中、高剂量组,用免疫组织化学方法和原位杂交方法检测下丘脑ERα及其mRNA表达.结果模型组ERα受体及其mRNA阳性细胞与假手术组比较显著减少;而加味左归饮能够提高去卵巢后下丘脑ERα及其mRNA阳性细胞数.结论加味左归饮可通过增加去卵巢大鼠下丘脑ERα表达以增强雌激素的生物效应.     

调更汤对围绝经期雌性大鼠生殖内分泌影响的实验研究

目的观察调更汤对围绝经期雌性大鼠生殖内分泌的影响,探讨其对围绝经期综合征症状改善的作用机制。方法 40只4~5月龄雌性SD大鼠,随机选择10只为青年组,其余30只均摘除双侧卵巢去势。随机分为3组,分别为模型组、中药组、西药组。围绝经期模型组与青年组予0.9%Na Cl溶液灌胃,中药组予调更汤,西药组予倍美力。灌药8周后,检测下丘脑及血清促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、瘦素(Leptin)水平,观察各组大鼠生殖内分泌情况。结果 1造模成功后血清及下丘脑性激素的变化:与青年组比较,模型组血清E2、T水平显著降低(P0.01),FSH、LH、Leptin水平显著升高(P0.05,P0.01)。2中药组给予调更汤后血清性激素的变化:与模型组比较,中药组血清E2水平显著提高(P0.05),FSH、Leptin水平显著降低(P0.05,P0.01),但对LH、T影响不明显(P0.05)。与西药组比较,中药组血清E2、T含量降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。3中药组给予调更汤后下丘脑性激素的变化:与模型组比较,中药组下丘脑E2、FSH、LH、T变化不明显(P0.05),但可明显降低下丘脑Leptin含量(P0.05)。与西药组比较,中药组下丘脑E2、T含量降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论调更汤可通过提高血清E2水平,降低FSH与Leptin水平,进而减缓卵巢退行性变,延缓卵巢衰退,提高卵巢功能,从而起到治疗围绝经期综合征的作用。     

葛根素对去卵巢大鼠子宫雌激素受体α表达的影响

目的:探讨葛根素对去卵巢大鼠子宫雌激素受体(ER)α表达的影响。方法:大鼠去势后灌服不同剂量葛根素、倍美力溶液30d后,用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察血清雌二醇(E2)水平,免疫组织化学法观察子宫ERα的表达。结果:大鼠去势后血清E2下降(P<0.01),给药30d后,给药各组血清E2水平及子宫ERα阳性表达明显上升,与模型组比较,有显著性差异(P<0.01)。结论:葛根素具有雌激素样作用,通过影响ERα的表达调节去卵巢大鼠生殖内分泌的功能。     

更年乐颗粒剂对12月龄大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的调节作用

目的:通过检测内分泌激素的水平,下丘脑雌激素受体(ER)表达,考察更年乐对下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO)的调节作用。方法:采用12-15月龄SD大鼠,同时设青年鼠作对照,灌胃给药30 d后,放免法检测血清E2、P、Te、FSH、LH水平,免疫组化法检测下丘脑GnRH,垂体和下丘脑ER表达。结果:与更年组比,12月龄组可以升高12月龄大鼠血清中E2,P(P<0.05或P<0,01)水平,有降低LH水平的趋势(P>0.05),明显降低下丘脑GnRH的表达(P<0.05),上调下丘脑ER表达。结论:更年乐能改善因体内雌激素水平降低导致的下丘脑、垂体功能的相对亢进状态,上调下丘脑ER表达,增强雌激素效应,调节HPO轴的失调。     

基于下丘脑-垂体-卵巢轴探讨藏药二十五味鬼臼丸对绝经后骨质疏松症大鼠的干预作用

目的基于下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamus-pituitary-ovary axis,HPOA)探讨藏药二十五味鬼臼丸对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法将40只SD雌性未孕大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、二十五味鬼臼丸组,每组10只。除假手术组仅摘取卵巢旁同样大小的脂肪块,其余3组大鼠均摘除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)大鼠模型。手术1周后开始给药处理,雌二醇组ig0.1mg/kg戊酸雌二醇,二十五味鬼臼丸组ig441mg/kg二十五味鬼臼丸,假手术组和模型组ig等体积蒸馏水,1次/d,连续12周后,ELISA法检测血清雌二醇、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)水平;RT-PCR检测下丘脑、垂体、左侧股骨远端雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)m RNA表达;免疫荧光染色法检测下丘脑、垂体和右侧股骨远端ERα、ERβ蛋白表达;HE染色法观察大鼠右侧股骨远端组织形态变化;Micro-CT检测右侧股骨远端微结构的改变。结果藏药二十五味鬼臼丸能显著降低大鼠体内血清LH、FSH、GnRH水平(P0.05、0.01),并在HPOA轴中显著性上调下丘脑及垂体ERαm RNA及蛋白表达(P0.01),同时显著性上调股骨ERβm RNA及蛋白表达(P0.01),并能显著回调大鼠股骨密度及骨微结构参数(P0.01)。结论藏药二十五味鬼臼丸可有效防治PMOP,其机制可能与药物直接作用骨组织雌激素受体或作用HPOA轴靶器官相关雌激素受体后,通过改变体内性激素的水平间接调控骨代谢有关。     

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证大鼠下丘脑和海马雌激素受体α,β mRNA表达的影响

目的:研究中药复方经前舒颗粒对经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑和海马中雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)mRNA表达的影响.方法:以情志刺激多因素法复制PMS肝气郁证大鼠模型,使用中药复方经前舒颗粒进行干预治疗,采用RT-PCR法检测大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达变化.结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达量高于正常组(P＜0.05);与模型组大鼠相比,经前舒颗粒给药组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达量则显著降低(P＜0.05),与正常组无差异.结论:经前舒颗粒可下调下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达水平,这可能是其治疗PMS肝气郁证的作用机制之一.     

丹地剂对去卵巢高脂雌鼠雌激素受体α、βmRNA表达的影响

目的：观察丹地剂对去卵巢高脂雌鼠ER（α、β）mRNA表达的影响。方法：采用8周龄雌性大鼠建立去卵巢高脂模型，将24只大鼠随机分为三组：去卵巢＋丹地剂组（丹地组），去卵巢＋苯甲酸雌二醇组（雌二醇组），去卵巢＋生理盐水组（对照组），每组8只，丹地组每天每只大鼠灌饲丹地剂，含生药量6g，共6周；雌二醇组用苯甲酸雌二醇注射液按每鼠每3天1次皮下注射0．2mg，共12次；对照组给予生理盐水，早晚各一次灌胃，共6周。RT-PCR法分析ERα、ERβmRNA表达，应用全自动生化仪测血脂、放免法测FSH、E2，硝酸还原酶法测NO。结果：与对照组比较，丹地组能明显降低TC、TG，差异有显著性（P〈0．01），升高HDL—C（P〈0．05），E2上升（P〈0．05），NO明显上升（P〈0．01），ERα、ERβmRNA表达均明显高于对照组（P〈0．01）。结论：丹地剂具有调高去卵巢高脂大鼠主动脉ERα、ERβmRNA的表达及升高血清NO的作用，并可改善血脂，该作用为其在绝经女性防治动脉粥样硬化和冠心病等应用提供了依据。     

补肾化痰祛瘀类中药对PCOS模型大鼠生殖内分泌系统影响的实验研究

目的:观察PCOS模型大鼠血清性激素T、FSH、LH及卵巢重量、面积的变化,探讨补肾化痰祛瘀类中药对PCOS模型大鼠生殖内分泌系统的影响.方法:用Poresky法诱导多囊卵巢综合征大鼠,并分别以补肾化痰祛疼类中药、西药(罗格列嗣)、中西药联合用药治疗.观察治疗后对血清性激素T、FSH、LH的影响以及卵巢重量和面积的变化.结果:补肾化痰祛瘀类中药能降低降低血清T、LH水平,以及降低LH/FSH比值,降低卵巢重量及卵巢平均面积.结论:补肾化痰祛瘀类中药能改善PCOS大鼠的生殖内分泌功能.     

六味地黄丸对去卵巢高血脂大鼠雌激素受体α、βmRNA表达的影响

目的观察六味地黄丸(地黄丸)对去卵巢高血脂大鼠雌激素受体α、β(ER α、β)mRNA 表达的影响。方法采用8周龄雌性大鼠建立去卵巢高血脂模型,将24只大鼠随机分为3组:去卵巢加六味地黄丸组(地黄丸组),去卵巢加苯甲酸雌二醇组(雌二醇组),去卵巢加生理盐水组(对照组),每组8只,地黄丸组用六味地黄丸每天每只2.4g,分2次灌胃,共6周;雌二醇组用苯甲酸雌二醇注射液按每鼠每3天1次皮下注射0.2mg,共12次;对照组给予生理盐水,早晚各1次灌胃,共6周。RT-PCR 法分析 ERα、ERβmRNA 表达。结果 ERα、ERβ mRNA 表达均明显高于对照组(P<0。01)。结论六味地黄丸具有调高去卵巢高脂大鼠主动脉 ERα、ERβ mRNA 的表达的作用,该作用为其在绝经女性防治动脉粥样硬化和冠心病等应用提供了依据。     

补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠始基卵泡募集因子GDF-9、AMH表达的影响

目的:研究补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢功能的调节,探讨补肾调冲方通过调控卵巢始基卵泡募集因子GDF-9及AMH调节卵巢功能及治疗POF的机制。方法:建立半乳糖致POF大鼠模型,将造模成功的POF大鼠随机分为模型组与治疗组,每组各20只,另设正常对照组。于PND80开始,治疗组大鼠每日灌服补肾调冲方水溶液,模型组及空白组大鼠每日灌服等体积生理盐水,共4周。实验结束后光镜下计数各组大鼠卵巢内各级卵泡数目,ELISA法检测各组大鼠血清FSH、LH及E2水平,Real-time PCR法检测各组大鼠卵巢内GDF-9及AMH mRNA表达水平。结果:①补肾调冲方可使POF大鼠动情周期趋于正常,并能明显降低血清FSH、LH水平(P<0.05),提高E2水平(P<0.05),从而改善POF大鼠血清高促性腺激素低雌激素状态;组织形态学检测结果显示治疗组大鼠卵巢体积较POF模型组增大,各级卵泡生长较好,颗粒细胞层次多,黄体数目明显增多;始基卵泡、窦前卵泡及窦状卵泡数目均较模型组增多,闭锁卵泡数目则明显减少。②与正常组比较,POF大鼠卵巢GDF-9及AMH mRNA水平均明显降低(P<0.01),而治疗组大鼠卵巢GDF-9及AMH mRNA水平较模型组明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:补肾调冲方治疗POF的作用机制之一可能是通过上调卵巢局部始基卵泡募集因子GDF-9及AMH的表达,促进卵泡的生长发育,抑制卵泡的过度耗竭与闭锁,恢复始基卵泡的正常募集状态,从而抑制卵巢功能的过早衰竭。     

更欣汤对围绝经期失眠模型大鼠血清雌激素水平及下丘脑雌激素受体的影响

目的：探讨国医大师肖承悰教授临床验方“更欣汤”对围绝经期失眠模型大鼠行为、血清雌激素水平及下丘脑雌激素受体表达的影响。方法：选取60只7周龄雌性SD大鼠,采用雷公藤多苷溶液灌胃联合对氯苯丙氨酸(PCPA)混悬液腹腔注射诱导围绝经期失眠大鼠模型。将26只造模成功的大鼠随机分为模型组和中药组各13只,另设空白组12只;中药组每日予更欣汤颗粒剂溶液1.8 g/kg灌胃,空白组和模型组大鼠每日予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,周期14 d。利用旷场实验(OFT)观察大鼠行为学改变,放射免疫分析法检测大鼠血清雌二醇(E₂)水平,Western Blot法检测大鼠下丘脑雌激素受体(ER)蛋白表达,RT-qPCR法检测大鼠下丘脑ERα、β mRNA表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠OFT水平与垂直活动得分均显著降低(P<0.05),修饰次数显著增多(P<0.01),血清E₂显著下降(P<0.01),下丘脑ERα、ERβ蛋白表达显著下降(P<0.05),ERα/ERβ比值显著升高(P<0.01);与模型组比较,中药组大鼠修饰次数显...     

补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢储备力及其相关因子INHB、AMH表达的影响

目的 研究补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢储备力及其相关因子INHB、AMH蛋白表达的影响,为临床防治卵巢储备力降低提供理论依据.方法 建立半乳糖致POF大鼠模型,将造模成功的POF大鼠随机分为模型组与治疗组,每组各20只;另设正常对照组.于PND80开始,治疗组大鼠每日灌服补肾调冲方水溶液,模型组及空白组大鼠每日灌服等体积生理盐水,共4周.实验结束后光镜下计数各组大鼠卵巢内各级卵泡数目,ELISA法检测各组大鼠血清FSH、LH及E2水平,Western blot法检测各组大鼠卵巢内INHB及AMH蛋白表达水平.结果 ①补肾调冲方可使POF大鼠动情周期趋于正常,并能明显降低血清FSH、LH水平(P＜0.05),提高E2水平(P＜0.05),从而改善POF大鼠血清高促性腺激素低雌激素状态;组织形态学结果显示治疗组大鼠始基卵泡及窦状卵泡数目均较模型组增多,闭锁卵泡数目则明显减少.②与正常组比较,POF大鼠卵巢INHB及AMH蛋白表达水平均明显降低(P＜0.01),而治疗组大鼠卵巢INHB及AMH表达水平较模型组明显升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 补肾调冲方可明显改善POF大鼠血清高促性素低雌激素状态,促进卵泡发育,抑制卵泡过度闭锁,从而调节卵巢功能,提高卵巢储备力,其机制可能是通过上调卵巢局部因子INHB及AMH的表达而实现的.     

自然衰老法与卵巢去势法建立围绝经期小鼠模型的比较研究

目的:比较自然衰老法与卵巢去势法建立的ICR小鼠围绝经期模型,并对模型进行评价。方法:通过观察阴道脱落细胞,比较自然衰老组及卵巢去势组小鼠的动情周期情况;观察小鼠悬尾活动,比较自然衰老组及卵巢去势组小鼠的情绪状态;测定血清性激素,比较血清卵泡刺激素(FSH)、促黄体激素(LH)、雌二醇(E2)的含量;测定小鼠下丘脑神经肽,比较下丘脑Kiss-1及其受体GPR54 mRNA的表达。结果:自然衰老组及卵巢去势组小鼠动情周期均紊乱,动情频率均减少;两组小鼠悬尾活动比均显著提高;两组小鼠血清的FSH、LH水平显著上升,E2水平明显降低;两组小鼠的下丘脑Kiss-1及受体GPR54 mRNA的表达显著升高。相比卵巢去势小鼠,自然衰老小鼠动情周期相对延长,动情频率明显减少,血清的FSH、LH水平上升更显著,E2水平降低更显著,Ki SS-1/GPR54 mRNA的表达升高更明显。结论:自然衰老法与卵巢去势法均能建立小鼠围绝经期模型,而自然衰老法优于卵巢去势法。