宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌中cyclin D1、Ki-67的表达及其意义

目的： 检测细胞周期素D1（cyclin D1）、增殖细胞核抗原（Ki-67）在人乳头瘤病毒（HPV）感染患者宫颈上皮内瘤样病变（CIN）及宫颈鳞癌中的表达及其相关性,研究其在CIN及宫颈鳞癌发生及发展过程中的作用。方法: 研究组HPV阳性病理确诊CINⅠ17例、CINⅡ19例、CINⅢ23例、宫颈鳞癌23例,对照组HPV阳性病理确诊柱状上皮异位22例。应用免疫组化S-P法检测宫颈病变组织中cyclin D1、Ki-67蛋白的表达,杂交捕获二代检测宫颈分泌物中HPV感染的情况。结果: (1)Cyclin D1在5组宫颈组织细胞的细胞核内均有表达,CINⅢ组、宫颈鳞癌组与对照组比较差异显著（P<0.05）,CINⅢ组、宫颈鳞癌组与CINⅠ组比较差异显著（P<0.05）,宫颈鳞癌组与CINⅡ组比较差异显著（P<0.05）。(2)Ki-67在5组宫颈组织细胞的细胞核内均有表达,对照组与CINⅢ组比较差异显著（P<0.05）,对照组与宫颈鳞癌组比较差异显著（P<0.05）,CINⅠ组与宫颈鳞癌组比较差异显著（P<0.05）,CINⅡ组与宫颈鳞癌组比较差异显著（P<0.05）。(3)Cyclin D1、Ki-67在CIN及宫颈鳞癌中的表达强度呈正相关关系 （P<0.05）。结论: Cyclin D1和Ki-67在CIN和宫颈鳞癌发生发展及细胞增殖活动中起一定的作用;两者在CIN和宫颈鳞癌的发生发展中可能发挥协同作用。     

hTERC和HPV联合检测在宫颈上皮内瘤变筛查中应用

目的 观察人端粒酶mRNA基因(human telomerase mRNA componentgene,hTERC)在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌中的表达情况,探讨其作为宫颈病变筛查的临床意义.方法 收集135例宫颈疾病患者的宫颈活检组织标本.根据组织学结果分组,其中正常组(包括炎症患者)24例;CIN组100例,其中CIN 1级30例,CIN 2级50例,CIN 3级20例;宫颈癌(鳞癌)组11例.采用双色间期FISH技术检测宫颈细胞hTERC基因扩增情况,同时其中的85例患者进行了HPV-DNA检测,阳性者49例,阴性者36例.结果 (1)hTERC基因在正常组、CIN组及宫颈癌组中的阳性表达率分别为4.2%、38.0%和90.9%,各组间差异有统计学意义(P<0.01),与病变程度呈正相关(r=0.419,P<0.01).(2)hTERC基因在CIN 1～3级组中的阳性表达率分别为10.0%、48.0%和55.0%,CIN 2级组与CIN 3级组比较差异无统计学意义(P>0.05),CIN 1～3级组间比较差异有统计学意义(P<0.01),与病变的恶性程度呈正相关(r=0.354,P<0.01).(3)49例HPV阳性患者中,hTERC基因扩增阳性率为57.14%(28/49);而在36例HPV阴性患者中,hTERC基因扩增阳性率为25.0%(9/36),两者差异比较有统计学意义(P<0.005),同时hTERC基因的扩增情况与HPV感染情况两者间呈正相关(r=0.320,P<0.003).结论 hTERC基因的阳性率随宫颈病变级别的升高而增加,可预测病变的进展情况.hTERC基因的扩增和HPV感染呈正相关,提示HPV的感染可能是hTERC基因异常扩增的早期事件.HPV-DNA和hTERC基因联合检测相结合是宫颈CIN早期筛查的理想手段.     

宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中HPV16感染与hTERT、p21waf1和Ki67表达的关系及意义

目的探讨宫颈鳞状细胞癌(SCC)及宫颈上皮内肿瘤(CIN)组织中人乳头瘤病毒(HPV)16感染与端粒酶反转录蛋白(hTERT)、抑癌基因p21waf1和增生抗原Ki67表达的关系及其意义。方法在130例宫颈组织中利用组织芯片技术结合原位杂交技术检测HPV16感染及结合免疫组织化学技术检测hTERT、Ki67、p21waf1的表达。结果(1)HPV16杂交信号阳性率及hTERT、Ki67表达在CINⅡ～Ⅲ级、原位癌、浸润性鳞癌组织中都显著高于正常宫颈组织(P均<0.05),浸润癌也显著高于CIN(P均<0.05),CIN三级之间差异也具统计学意义(P均<0.05)。(2)p21waf1仅在浸润性鳞癌组织中的阳性率显著低于正常宫颈组织(P<0.05),其他组别之间差异无统计学意义(P均>0.05)。(3)HPV16感染及Ki67表达与hTERT表达均呈正相关(P<0.05,r=0.339;P<0.05,r=0.398);HPV16感染、hTERT及Ki67表达与p21waf1表达均呈负相关(P<0.05,r=0.337;P<0.05,r=0.248;P<0.05,r=0.446);HPV16感染与Ki67表达无相关性(P>0.05)。结论宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中hTERT、p21waf1、Ki67表达的改变可能与HPV16感染有关,且互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈鳞癌的发生。这些指标综合分析可能为阐明HPV16的恶性转化机制以及为提高宫颈鳞癌及其癌前病变诊断率提供参考依据。组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台。     

荧光定量PCR检测宫颈脱落细胞和组织标本人乳头瘤病毒感染的比较分析

目的探讨利用宫颈标本建立快速、灵敏检测宫颈人乳头状瘤病毒(HPV)16.18型感染的方法.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,检测165例异常宫颈脱落细胞和宫颈活检组织标本HPV 16.18型感染状况.结果 FQ-PCR检测宫颈细胞标本LSIL 60例,HSIL51例,ASC 40例,鳞状细胞癌13例.HPV16.18型DNA阳性率分别为31%、68%、30%、12/13.活检组织标本:CIN Ⅰ级阳性率42%(38/39),Ⅱ为12/19,Ⅲ级为11/15,鳞癌为74%(23/31).结论 FQ-PCR方法检测宫颈细胞标本HPV16.18型感染,具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,适用于大规模筛查和在临床日常工作中采用.     

P16、Ki-67和Bcl-2在宫颈上皮内瘤变中的表达及应用

目的探讨P16、Ki-67、Bcl-2抗体在宫颈上皮内瘤变(CIN)中的表达及应用价值。方法用快捷免疫组化染色法检测30例正常宫颈组织和66例CIN中p16、Ki-67和Bcl-2的表达,分析比较两组的标记结果。结果 CIN中p16、Ki-67、Bcl-2的阳性率显著高于正常宫颈(﹤0.05),CINⅡ-Ⅲ的表达率显著高于CINⅠ(﹤0.05)。结论 P16、Ki-67和BCL-2抗体联合标记可作为病理诊断CIN和区分级别的重要参考指标。     

人乳头状瘤病毒分型检测在宫颈细胞学诊断为ASCUS分层处理中的意义

目的 探讨人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)分型检测在宫颈细胞学诊断为不典型鳞状细胞意义不明确(atypical squamous cell of undetermined significance.ASCUS)分层处理中的意义.方法 对184例宫颈细胞学诊断为ASCUS的患者,分别进行HPV检测和阴道镜下宫颈组织活检.结果 184例宫颈细胞学诊断为ASCUS的患者中,经组织病理学证实炎症112例(60.87%),CIN Ⅰ级33例(17.93%),CIN Ⅱ级17例(9.24%),CIN Ⅲ级8例(4.35%),宫颈鳞癌4例(2.17%),宫颈湿疣10例(5.43%).其中124例经检测呈高危型HPV(high-risk types HPV,HR-HPV)阳性,阳性率为67.39%(124/184),随后经病理学证实炎症66例(53.23%),CIN Ⅰ级22例(17.74%),CIN Ⅱ级16例(12.90%),CIN Ⅲ级8例(6.45%),宫颈鳞癌4例(3.23%),宫颈湿疣8例(6.45%).HPV阳性组CIN以上病变检出率明显高于HPV阴性组(P<0.003).结论对宫颈细胞学诊断为ASCUS的患者,建议作HPV检测,若HR-HPV阳性,则需进一步阴道镜下宫颈活检;若HPV阴性,酌情处理.     

宫颈上皮内瘤变中p16INK4A和Ki-67的表达

摘要：目的探讨p16^INK4A、Ki-67和HPV抗原表达及高危型HPV（HR—HPV）检测在宫颈上皮内瘤变（CIN）病理诊断中的意义。方法选取宫颈活检病理确诊为CIN的组织蜡块101例,重新切片,应用免疫组化两步法检测p16^INK4A、Ki-67和HPV抗原表达,并取正常宫颈组织50例进行对比研究。同时,应用第二代杂交捕获法对其中25例CIN组织样品进行HR—HPV检测。结果p16^INK4A蛋白表达水平在CINI、CINⅡ、CINⅢ级之间差异有非常显著性（P〈0．001）,其表达水平随着CIN级别的增高而增加,呈现良好的线性相关性（P〈0．001）;Ki-67蛋白表达阳性细胞多少与CIN分级之间无显著相关性（P〉0．05）,但其在宫颈鳞状上皮中的位置分布与CIN级别之间却有显著相关性（P〈0．05）;HPV抗原免疫组化染色阳性反应仅呈现于CIN鳞状上皮表层挖空细胞内,其阳性率在不同级别CIN之间的差异无统计学意义（P〉0．05）;HR—HPV在CINI、CINⅡ和CINⅢ级的检出率分别为81．8％、80．0％和100．0％,但其检出率在不同级别CIN之间差异也无显著性（P〉0．05）。结论p16^INK4A和Ki-67染色对CIN的病理诊断和分级具有一定诊断价值,对于CINI级形态结构不典型的病例,HR—HPV的检测结果对病理诊断有辅助意义。     

HPV E6/E7mRNA检测与P16/Ki-67免疫组化检测对宫颈CIN2级病变的筛查价值探究

目的:研究人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)E6/E7mRNA与免疫组化抑癌基因P16/细胞增殖核抗原Ki-67 在宫颈上皮内瘤样病变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)2 级病变筛查中的应用价值.方法:选取 2020 年 2 月至 2023 年 2 月期间本院收治的 92 例宫颈炎症及病变患者作为研究对象.根据病理检查结果,将CIN2 级患者纳入研究组(n=45),宫颈CIN1 级和宫颈炎患者纳入对照组(n=47).对比两组HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67 单独及联合检测阳性表达率差异,采用Logistic回归分析影响CIN2 诊断的危险因素,并采用受试者工作曲线分析 HPV E6/E7mRNA 与 P16/Ki-67 单独及联合检测在宫颈 CIN2 级病变筛查的价值.结果:研究组HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67单独检测阳性率、联合检测阳性率(82.22%,77.78%,84.44%)高于对照组(63.83%,48.94%,53.19%)(P＜0.05).Logistic回归分析显示HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67 是影响CIN2 诊断的危险因素(P＜0.05);HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67 联合检测CIN2 级病变的受试者工作特征曲线下面积为 0.688(95%CI:0.579～0.798),优于 HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67 单独预测[0.592(95%CI:0.476～0.708);0.634(95%CI:0.519～0.748)].联合检测的准确度、灵敏度、特异度(68.8%,84.4%,53.2%)均高于单独检测HPV E6/E7mRNA(59.2%,82.2%,36.2%)、P16/Ki-67(63.4%,77.8%,48.9%).结论:HPV E6/E7mRNA与P16/Ki-67 免疫组化检测在宫颈CIN2 级病变筛查中具有一定的应用价值,可以显著提高筛查宫颈CIN2 级病变的诊断效能.     

HPV-DNA负荷量与宫颈癌前病变及宫颈癌的相关性

目的 探讨人乳头状瘸病毒(HPV)DNA的负荷量与宫颈癌前病变及宫颈癌的相关性.方法 2005年4月-2007年3月于我院就诊的宫颈病变患者330例为研究时象,其中正常宫颈组织58例,CIN182例,宫颈鳞状细胞癌90例;所选病例行阴道镜下活捡前均采用杂交捕获2代(HCⅡ)方法定量检测宫颈HPV DNA的含量,病毒负荷以RIU/CO表示.按HPV DNA舍量分成5组,分别为:HPV<1,1≤HPV≤100,101≤HPV≤500.501≤HPV≤1000,HPV>1000.结果 1.高危型HPVDNA在宫颈正常组织中的检出率为32.76%,在CIN组中的检出率为67.58%,在宫颈鳞癌组中的检出率为97.78%,三组间比较有显著统计学意义(P<0.001).2.高危型HPV DNA检出率在CIN Ⅰ组为47.46%,CIN Ⅱ组为57.38%,CINⅢ组为95.16%,三组间比较有显著统计学意义(P<0.001).结论 HPV DNA检出率随宫颈病变的严重程度而增加;HPV DNA负荷量与宫颈病变的严重程度不完全相关.     

联合检测宫颈脱落细胞hTERC基因及HR-HPV病毒负荷量对宫颈癌筛查预测的意义

目的探讨高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)检测联合hTERC(human telomerase RNA gene component)基因荧光原位杂交(FISH)检测在宫颈癌筛查诊断中的价值。方法收集深圳市深圳市龙岗中心医院妇科门诊就诊的患者和北京医院病理科2008-2010年宫颈细胞学和活检共89例,根据组织学诊断结果分为4组,采用第二代杂交捕获法(hybrid capture 2,HC-2)进行了HPV定量检测;FISH方法检测宫颈细胞hTERC基因。结果 HPV阳性率各组间比较与HPV感染载荷量各组间比较,结果相似,除CIN2-3与宫颈鳞癌组间差异无统计学意义(P>0.05)外,余各组间差异均有统计学意义(P<0.01)。hTERC基因随着CIN病变程度的增加,其阳性表达率呈现显著上升趋势,宫颈鳞癌组表达最高;具体两组间比较,对照组与CIN各组及宫颈鳞癌组间表达率差异有统计学意义(P<0.01),CIN1与CINⅡ/Ⅲ、CIN1与SCC和CINⅡ/Ⅲ与SCC组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HR-HPV定量检测联合hTERC检测对于宫颈高级别上皮内病变和宫颈癌筛查的诊断具有一定的价值。     

子宫颈癌中Hedgehog信号通路蛋白表达与人乳头状瘤病毒16型感染的关系

目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路蛋白在宫颈癌及其癌前病变中的临床病理学意义,并分析其与人乳头状瘤病毒(HPV)16型感染的关系.方法 32例正常宫颈上皮、71例宫颈上皮内瘤变(CIN;CIN Ⅰ 28例,CIN Ⅱ 18例,CIN Ⅲ25例)和80例宫颈鳞状细胞癌共183例选自延边大学医院、延边妇幼保健院和延边肿瘤医院病理科存档蜡块.应用PCR技术检测上述组织中HPV16型的感染情况,并应用Shh、Ihh、Ptch和Smo 4种Hh信号通路蛋白抗体、组织芯片和免疫组织化学EnVision法检测Hh信号通路蛋白在上述病变组织中的表达情况.结果 Shh、Ihh、Ptch和Smo在正常宫颈黏膜上皮中为弱阳性,而在宫颈癌和CIN Ⅲ中呈强阳性,其表达率均显著高于正常宫颈黏膜上皮(P均<0.05).80例官颈癌标本中HPV16阳性率是77.5%(62/80),而且Shh蛋白的强阳性率在HPV16型阳性的宫颈癌组织中显著高于HPV16阴性组(P<0.05).结论 Hh信号通路蛋白过表达可以作为宫颈癌及其癌前病变的早期辅助诊断指标并有望成为宫颈癌靶向治疗的新靶点,而且Shh蛋白的过表达与HPV16型感染密切相关.     

应用荧光原位杂交技术在组织标本中检测宫颈上皮病变的端粒酶RNA基因扩增

目的 用荧光原位杂交(FISH)技术检测端粒酶RNA基因(TERC)在宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈鳞状细胞癌(SCC)组织中的扩增,探讨其用于SCC筛查及CIN诊断的可行性及实际意义.方法 选取手术切除及活检的子宫颈组织标本196例,有效样本150例,采用FISH技术在石蜡包埋组织芯片上检测TERC基因的扩增情况.结果 150例组织芯片样本中,正常宫颈鳞状上皮24例,CIN 78例(CIN Ⅰ级25例,Ⅱ级21例,Ⅲ级32例),SCC 48例.正常宫颈鳞状上皮组织中TERC基因无扩增,从CIN Ⅰ级到SCC组织中,TERC基因的扩增率依次为8.0%(2/25)、47.6%(10/21)、71.9%(23/32)和87.5%(42/48),差异有统计学意义(P＜0.05).组间两两比较:正常宫颈鳞状上皮与CINⅡ级、Ⅲ级、SCC组,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);CIN Ⅰ级与CINⅡ级、Ⅲ级及SCC组组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);CINⅡ级组与SCC组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).正常宫颈鳞状上皮与CIN Ⅰ级组、CINⅡ级与Ⅲ级组、CINⅢ级与SCC组,组间差异均无统计学意义(P＞0.05).高度癌前病变(CINⅡ～Ⅲ级)与低度癌前病变(CIN Ⅰ级)的TERC基因扩增结果:25例CIN Ⅰ级病变中,2例扩增,23例不扩增;53例CINⅡ～Ⅲ级病变中,33例扩增,20例不扩增.经公式计算,敏感性为62.3%、特异性为92.0%、准确度为71.8%、阳性预测值为94.3%、阴性预测值为53.5%.结论 在石蜡包埋CIN及SCC组织切片上应用FISH技术进行TERC基因检测,方法可行,结果可靠;可作为辅助CINⅡ级的诊断;TERC基因扩增可以预测CIN发展为癌的风险,具有一定的实用价值.

Abstract：

Objective To explore the feasibility and practical value of fluorescence in situ hybridization (FISH) detection of TERC gene amplification in cervical intraepithelial lesions (CIN) and squamous cell carcinoma (SCC). Methods Tissue microarray was constructed to cover 150 cases of various cervical conditions, including 24 cases of normal cervical mucosa, 78 cases of CINs ( CIN Ⅰ , 25 cases; CIN Ⅱ , 21 cases and CIN Ⅲ, 32 cases) and 48 cases of SCC. FISH was used to detect TERC gene amplification. Results TERC gene amplification was detected in 8% (2/25) CIN Ⅰ , 47.6% ( 10/21 )CIN Ⅱ, 71.9% (23/32) CIN Ⅲ and 87.5% (42/48) SCC. There were significant differences among these groups (P ＜ 0.05 ). The amplification rates of TERC gene in SCC, CIN Ⅲ and CIN Ⅱ were significantly higher than those of normal cervical epithelium and CIN Ⅰ ( P ＜ 0.05 ). Significant differences were also observed among CIN Ⅰ and CIN Ⅱ , CIN Ⅲ and SCC ( P ＜ 0.05 ), and between CIN Ⅱ and SCC(P ＜0.05). There were no significant differences between normal cervical epithelium and CIN Ⅰ , CIN Ⅱ and CIN Ⅲ, and between CIN Ⅲ and SCC (P ＞ 0.05 ). FISH detection of amplification of TERC gene in CIN Ⅰ and CIN Ⅱ -Ⅲ demonstrated the following statistics: sensitivity of 62. 3%, specificity of 92.0%,accuracy of 71.8%, positive and negative predictive values of 94.3% and 53.5%, respectively.Conclusions FISH detection is a reliable method in detecting TERC gene amplification using paraffin tissue sections. When histological evaluation becomes difficult, TERC amplification detectable by FISH may offer a diagnostic distinction of CIN Ⅰ from CIN Ⅱ. Moreover, TERC amplification may be used as a biomarker in predicting CIN progression to invasive cancer.     

p16ink4a与Ki-67用于人宫颈病变 辅助诊断的比较

目的对p16ink4a与Ki-67作为辅助诊断人宫颈病变的两种标记物进行比较。方法采用免疫组织化学方法,检测p16ink4a与Ki-67蛋白在42例人正常宫颈组织,21例人宫颈上皮内瘤样变(CIN)Ⅰ级、21例CINⅡ、36例CINⅢ组织中的表达,用等级相关方法分析p16ink4a、Ki-67表达水平与CIN等级之间的相关性。计算两种标记物的敏感性、特异性、阳性预测价值、阴性预测价值和约登指数。结果p16ink4a和Ki-67表达均与CIN等级呈正相关。p16ink4a检测人宫颈病变的敏感性为83.3%,特异性为90.5%,阳性预测值为94.2%,阴性预测值为74.5%,约登指数为0.738。Ki-67检测人宫颈病变的敏感性为98.7%,特异性为16.7%,阳性预测值为68.75%,阴性预测值为87.5%,约登指数为0.154。联合使用两种标记物的敏感性、特异性均为83.3%。结论Ki-67敏感性、阴性预测值高,但特异性差,适用于早期发现人宫颈病变。p16ink4a特异性、阳性预测值高,是辅助诊断人宫颈病变的较好指标。综合比较,p16ink4a优于Ki-67。     

实时荧光定量PCR法检测人乳头状瘤病毒的实验研究

目的 通过研究病变宫颈中人乳头状瘤病毒(HPV)16/18型的表达,探讨HPV16/18型病毒感染与宫颈病变发生发展之间的关系.方法 结合病理切片诊断,以免疫组化作对照.运用实时荧光定量PCR技术检测病变宫颈中HPV16/18型DNA拷贝数,以及HPV16/18型E7基因mRNA表达量.结果 慢性宫颈炎患者中HPV16/18型感染率低(7.4%).宫颈管上皮内瘤样变(CIN)组HPV16型感染率较高为69.6%,宫颈癌患者巾为72.7%.HPV16型DNA的拷贝数在宫颈上皮内瘤样变患者中与病理分级没有明显的相关性.但在宫颈癌患者中,病毒DNA的拷贝数明显升高,二者差异明显.CIN轻度(I)、中度(Ⅱ)、高度(Ⅲ)组和宫颈癌患者中,HPV16 E7基冈的表达率分别为0、37.5%、42.9%、63.6%.统计学分析表明,HPV16 E7 mRNA的拷贝数与病情呈明显的正相关性.结论 感染者中主要以HPV16型为主,HPV18型较少.宫颈癌患者中HPV16 DNA拷贝数明显高于CIN Ⅱ、Ⅲ组,HPV16型E7 mRNA在宫颈癌中表达率及表达量明显增加并与宫颈癌变呈正相关.实时荧光定量PCR适合临床宫颈病变病毒的筛查与检测.     

子宫颈癌及癌前病变HPV16、Ki-67的表达及其相关性

目的对子宫颈癌及癌前病变中HPV感染和增殖细胞核抗原Ki-67表达情况进行研究。方法对45例子宫颈浸润性鳞状细胞癌、5例子宫颈腺癌、35例子宫颈上皮内瘤变（CIN）和5例正常宫颈组织采用免疫组化EnVision法进行HPV16和Ki-67表达的检测。结果HPV16阳性率为78．9％（71／90）,其中HPV16阳性率在子宫颈癌组织中为76．0％（38／50）,在CIN病变中为94．3％（33／35）,在正常子宫颈黏膜上皮组织中为阴性（0／5）。Ki-67阳性细胞在正常子宫颈、CIN和子宫颈癌组织中表达逐级增加,显示Ki-67表达程度与组织学类型有关。HPV和Ki-67在CIN和癌组织中的表达呈显著相关（P〈0．005）。结论瑞安地区子宫颈癌及癌前病变组织中存在HPV感染,HPV感染可能在子宫颈癌的发生、发展中起着重要作用。联合应用Ki-67与HPV可作为筛选子宫颈癌高危个体有价值的生物学标记。     

应用表面等离子共振生物传感器分型检测HPV及其应用评价

目的评价表面等离子共振(SPR)生物传感器分型检测女性生殖道人类乳头瘤病毒(HPV)的临床应用价值。方法采集女性宫颈脱落细胞504例,按病理学结果分为炎症组、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ组、CINⅠ-Ⅱ组、CINⅡ组、CINⅢ组、宫颈癌组。应用SPR生物传感器对各组进行检测,一次性分型检测16种HPV高危型和8种低危型,同时采用克隆测序作平行对照,结合病理诊断结果,对SPR生物传感器进行应用评价。结果SPR生物传感器和克隆测序结果的一致率为0.994,Kappa指数为0.987,(P=0.0000.05)。SPR生物传感器测得各病理组别HPV阳性率、高危型阳性率及多重感染率依次为总体(64.7%、62.1%、15.5%),炎症(41.9%、36.6%、11.8%),CINⅠ(44.6%、41.2%、13.5%),CINⅠ-Ⅱ(51.9%、48.1%、11.1%),CINⅡ(74.2%、74.2%、9.7%),CINⅢ(94.3%、93.5%、23.6%)及宫颈癌组(98.2%、98.2%、16.4%)。24种HPV基因型检出21种,阳性率依次为:16、58、33、52、66、11、18、53、6、31、45、39、81、59、70、68、51、54、56、35、40。SPR生物传感器检测HPV DNA诊断CIN III和宫颈癌的灵敏度为95.5%、特异度为52.1%、阳性预测值为52.1%、阴性预测值为95.5%。结论随宫颈病变严重程度的增高,HPV感染率和高危型感染率呈升高趋势,多重感染率无明显升高趋势;SPR生物传感器检测HPV DNA与克隆测序一致性良好,可以实现HPV分型检测,其诊断CINⅢ和宫颈癌具有较高的灵敏度和阴性预测值,在宫颈病变的临床诊断和流行病学调查中具有重要意义。     

HPV16、18、31、33亚型在≥30岁妇女宫颈癌筛查中的作用

目的 探讨HPV16、18、31、33亚型感染在≥30岁妇女宫颈癌筛查中的作用.方法 2008年1月至2009年3月在我院妇产科门诊同时行宫颈TCT及HPV-DNA分型检测的≥30岁妇女,对其中HPV16、18、31、33亚型检测阳性的妇女进一步行阴道镜及宫颈活检病理检查,分析HPV16、18、31、33亚型感染与宫颈浸润癌及CINⅡ、Ⅲ的相关性.结果 275例HPV16、18、31、33亚型检测阳性妇女,年龄30～72（41.76±8.88）岁;16亚型感染占64.0%,单一亚型感染占64.7%;210例细胞学异常的妇女中有127例（60.5%）诊断为CINⅡ＋.在宫颈细胞学结果为ASC-US、ASC-H、LSIL、HSIL、SCC及AGC患者中分别检出CINⅡ＋的为32.6%、67.8%、42.3%、81.8%、100.0%、50.0%（P=0.000）;在65例细胞学正常的妇女中,宫颈活检组织病理学检出CINⅡ、Ⅲ患者10例（15.4%）,占所有被检出CINⅡ＋的7.3%,其中9例发现在HPV16亚型感染者中.结论 HPV16、18、31、33亚型感染在≥30岁妇女宫颈癌筛查中具有作用,可在细胞学正常的妇女中额外检出7.3%的CINⅡ、Ⅲ,尤其是在HPV16亚型感染的妇女中.     

人类白细胞抗原G和人类白细胞抗原E在宫颈癌中的表达及临床意义

目的 评估人类白细胞抗原G(HLA-G)和人类白细胞抗原E(HLA-E)的表达在宫颈癌进展中的意义及对患者预后的影响.方法 采用聚合酶链反应和流式细胞术检测正常组、CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ(宫颈上皮内瘤变Ⅰ-Ⅲ级)及浸润癌组HLA-G和HLA-E基因及蛋白的表达,比较两者在各组表达的差异及其对病人长期生存的影响.结果 CINⅢ及浸润癌组HLA-G表达与CIN Ⅰ、CINⅡ和正常组比较U值分别为564.0、536.0和565.5,P均＜0.05,HLA-E前两组的表达与后者比较U值分别为550.0、542.0和578.5,P均＜0.05;并且HLA-G和HLA-E阳性的患者生存率明显低于阴性者(P＜0.05).结论 HLA-G和HLA-E的异常表达促使宫颈癌的发生和发展,并且影响患者的术后长期生存.     

P16 and Ki-67 expression improves the diagnostic accuracy of cervical lesions but not predict persistent high risk human papillomavirus infection with CIN1

Objective: To determine the association between the expression of p16 and Ki-67 and cervical lesions, and to evaluate the role of p16 and Ki-67 as prognostic markers for persistent high risk human papillomavirus (hr-HPV) infection. Methods: Totally 1,154 cases of cervical biopsies were enrolled, 331 cases with negative for dysplasia (NEG), 462 with cervical intraepithelial neoplasia 1 (CIN1), 176 with CIN2, 163 with CIN3 and 22 with cervical squamous cell carcinoma (SCC). Furthermore, 283 women with CIN1 were recruited into 12-month follow-up, and HPV specific gene detection by polymerase chain reaction was used to detect hr-HPV of cervical secretions at 6-month-interval for 12-month follow-up period. 40 women were infected with persistent hr-HPV, 182 with transient infection and 61 unfected with hr-HPV. The expression of p16 and Ki-67 were evaluated by immunohistochemical method. The immunostaining results of p16 and Ki-67 were classified into four categories: negative, 1+, 2+ and 3+. Results: There was significant increase in the expression of p16 (P < 0.001) and Ki-67 (P < 0.001) from NEG to SCC. The expression of Ki-67 (P < 0.001) but not p16 (P = 0.254) significantly increased in CIN2, CIN3. Ratio of p16 (P = 0.215) and Ki-67 (P = 0.495) positivity were not correlated with persistent hr-HPV infection. Conclusion: P16 and Ki-67 can improve the diagnostic accuracy of cervical lesions but can not predict persistent hr-HPV infection with CIN1.