Mus81对人乳腺癌SKBR3增殖、侵袭和迁移的影响

目的 研究Mus81过表达对人乳腺癌SKBR3增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 从相应甘油菌中抽提Mus81过表达质粒和阴性对照质粒,通过Lipofectamine@2000脂质体转染人乳腺癌SKBR3细胞.分别利用RT-PCR和Western blot法检测Mus81过表达效果,CCK-8增殖实验检测过表达前后细胞增殖能力变化,Transwell侵袭实验检测过表达前后细胞侵袭能力变化,Transwell迁移实验和细胞划痕实验检测过表达前后细胞迁移能力变化.结果 RT-PCR和Western blot法表明Mus81基因过表达效果良好.Mus81过表达后,增殖实验结果显示实验组细胞增殖速度明显低于对照组（P＜0.05）.Transwell侵袭实验显示,实验组细胞每高倍视野平均穿膜个数低于对照组（P＜0.05）.Transwell迁移实验显示,实验组细胞每高倍视野平均穿膜个数同对照组相比,差异无统计学意义（P＞0.05）.细胞划痕实验结果显示,实验组划痕愈合率同对照组相比,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 Mus81过表达抑制了人乳腺癌SKBR3细胞的增殖,降低了细胞的侵袭能力,但对SKBR3细胞迁移能力没有明显影响.     

LncRNA MIR4435-1HG对胃癌细胞生物学特性的影响

目的 研究长链非编码RNA MIR4435-1HG（LncRNA MIR4435-1HG）对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响以及作用机制。方法 荧光定量PCR（qPCR）检测LncRNA MIR4435-1HG在多种胃癌细胞系（MGC-803、MKN45、AGS、GES-1）中的表达量。AGS细胞分为对照组、siRNA-NC组、siRNA-MIR4435-1HG组。对照组细胞常规培养,siRNA-NC组、siRNA-MIR4435-1HG组分别在AGS细胞中转染siRNA-NC和siRNA MIR4435-1HG质粒。CCK-8检测各组细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell检测细胞迁移、侵袭能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率。在线数据库DIANA-LncBase v2、双荧光素酶报告基因预测和验证LncRNA MIR4435-1HG与微小RNA 150-5p（miR-150-5p ）的靶向关系。 结果 LncRNA MIR4435-1HG在胃癌细胞系中表达量上调（P＜0.05）,其中在AGS细胞中表达量相对较高。与对照组相比,siRNA-MIR4435-1HG组AGS细胞中LncRNA MIR4435-1HG的表达量明显降低（P＜0.05）。下调LncRNA MIR4435-1HG抑制AGS细胞增殖（P＜0.05）,阻碍其侵袭、迁移（P＜0.05）,诱导其凋亡（P＜0.05）。miR-150-5p是LncRNA MIR4435-1HG下游靶基因。结论 LncRNA MIR4435-1HG在多种胃癌细胞系中表达量上调;下调LncRNA MIR4435-1HG可能通过靶向miR-150-5p抑制AGS细胞增殖、侵袭、迁移,诱导凋亡。     

ARHI真核表达质粒对胃癌恶性表型的影响

目的 观察外源ARHI在胃癌细胞中过表达对胃癌细胞增殖、迁移以及侵袭的影响.方法 构建pEGFP-ARHI表达载体,并通过lipofectamineTM 2000将其转入ARHI低表达的胃癌细胞系MKN-28中作为实验组,空载质粒pEGFP-N1转入MKN-28作为空载组,未处理MKN-28细胞作为未处理组.通过荧光显微镜及Western blot检测外源ARHI的表达,采用增殖实验、损伤刮擦实验、体外侵袭实验(Transwell小室)分别检测过表达ARHI胃癌细胞MKN-28的增殖能力、侵袭和迁移能力的变化.结果 ARHI在胃癌细胞系MKN-28中表达较低,成功构建重组真核表达质粒pEGFP-ARHI并成功转染MKN-28细胞后,CCK8法检测显示,相对于空载组和未处理组,转染pEGFP-ARHI的实验组细胞增殖变慢(P＜0.05),Transwell小室实验显示实验组细胞侵袭能力减弱(P＜0.05),细胞划痕实验表明实验组细胞迁移能力减弱(P＜0.05).结论 在ARHI低表达的胃癌细胞系MKN-28中表达重组质粒pEGFP-ARHI能够抑制细胞的增殖、侵袭和迁移能力.     

转移相关基因2对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨转移相关基因2(MTA2)对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响。方法:通过针对MTA2基因的小干扰RNA(siRNA-MTA2)对MTA2基因表达进行下调,采用RT-PCR和Transwell检测转染,作为实验组,对照组转染阴性对照(sicontrol),通过MTT、细胞划痕实验和Transwell法分别检测MTA2对Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响。结果:实验组MTA2mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05),实验组培养7d和9d时细胞增殖能力明显低于对照组(P<0.05),实验组细胞迁移能力和细胞侵袭能力明显低于对照组(P<0.05)。结论:MTA2与喉癌细胞系Hep-2细胞增殖、迁移和侵袭密切相关,有望成为治疗喉癌的靶点。     

miR-506对结肠癌细胞增殖和转移活性的影响

目的：观察miR-506对结肠癌细胞活性、增殖、转移等恶性表型的影响。方法：以结肠癌细胞系HCT116为模型，以处理方式不同分为pcDNA3空载体对照组、过表达miR-506组、pSIH1空载体对照组及抑制miR-506组。荧光实时定量PCR检测各组中miR-506的表达水平，CCK8实验检测细胞的活性，集落形成实验检测细胞的集落形成能力，Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果：与pcDNA3空载体对照组比较，过表达miR-506后HCT116细胞内miR-506表达水平升高，差异有统计学意义（t=28.97,P<0.05），而细胞活性、集落形成能力、迁移和侵袭的能力减弱，差异有统计学意义（t=6.14、8.63、5.32、3.24,P<0.05）；抑制miR-506组与pSIH1组比较，miR-506的相对表达量、细胞活性、集落形成能力、迁移和侵袭能力比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：miR-506抑制结肠癌细胞HCT116活性、集落形成能力、侵袭和迁移能力，在结肠癌细胞中发挥抑癌基因的作用。     

长链非编码RNA-MALAT1调控miR-22/snail轴对胃癌增殖、迁移及侵袭的影响

目的：探讨长链非编码RNA MALAT1（long non-coding RNA MALAT1,lnc RNA MALAT1）调控miR-22/snail轴对胃癌增殖、迁移及侵袭的影响。方法：采用siRNA干扰技术抑制MALAT1表达,同时过表达miR-22和Snail;采用RT-PCR检测MALAT1,miR-22和snail在胃癌细胞系中的表达水平（n=3）;采用Western blot检测NC组、si-MALAT1组中snail蛋白的表达水平（n=3）;采用CCK-8法在12、24、48、72 h检测NC组、si-MALAT1组、miR-22组、miR-22+snail组、si-MALAT1+miR-22组中细胞吸光度值（n=3）;采用划痕实验检测NC组、si-MALAT1组、miR-22组迁移速度（n=3）;采用Transwell检测NC组、si-MALAT1组、miR-22组、miR-22+snail组、si-MALAT1+miR-22组穿过膜细胞的个数（n=3）;采用双荧光素酶检测NC+pMIR-MALAT1-WT组、NC+pMIR-MALAT1-MUT组、miR-22+pMIR-MALAT1-WT组、miR-22+pMIR- MALAT1-MUT、NC+ pMIR-Snail-WT组、NC+pMIR-Snail-MUT组、miR-22+pMIR-Snail-WT组、miR-22+pMIR-Snail-MUT组的荧光活性（n=3）。两独立样本间的比较采用t检验,多组数据之间的比较采用单因素方差进行分析,涉及时间因素时采用重复测量方差分析。结果：MALAT1在胃癌细胞系中的表达水平明显高于正常胃黏膜上皮细胞（均P=0.000）;低表达MALAT1后,AGS和SGC-7901增殖能力（P1=0.001,P2=0.005）,迁移能力（P1=0.018,P2=0.007）,侵袭能力（P1=0.024,P2=0.015）均降低;同时双荧光素酶结果显示MALAT1能够靶向结合miR-22（P=0.001）,miR-22能够靶向结合snail（P=0.001）;miR-22在胃癌细胞中的表达水平明显低于正常胃黏膜上皮细胞（均P<0.05）;过表达miR-22后,AGS和SGC-7901增殖能力（P1=0.004,P2=0.009）,迁移能力（P1=0.034,P2=0.005）,侵袭能力（P1=0.037,P2=0.011）均降低;在低表达MALAT1和过表达miR-22后能够更进一步增加低表达MALAT1后对AGS和SGC-7901的增殖（P1=0.022,P2=0.006）和侵袭（P1=0.024,P2=0.015）的抑制作用;同时过表达miR-22和snail后能够反转miR-22对AGS和SGC-7901的增殖（P1=0.003,P2=0.004）和侵袭（P1=0.015,P2=0.01）的抑制作用。结论：MALAT1在胃癌细胞中明显高表达,并能通过调控miR-22/snail轴促进胃癌增殖、迁移及侵袭。     

基质细胞衍生因子1对人牙髓干细胞增殖、迁移和成牙本质能力的影响

目的：对比基质细胞衍生因子1（stromal cell-derived factor-1,SDF-1）和粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF）对人牙髓干细胞（dental pulp stem cell, DPSC）的体外增殖、迁移和成牙本质能力的影响。方法：分别在培养基中加入100 μg/L SDF-1或100 μg/L G-CSF,采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8)和集落形成实验（colony-forming unit,CFU）检测SDF-1和G-CSF对DPSC增殖的影响;采用划痕实验和Transwell迁移实验检测两者对DPSC迁移能力的影响;对DPSC进行成牙本质诱导,通过碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色、测定ALP活性、茜素红染色和real-time RT-PCR检测成牙本质相关基因的表达,以检测两者对DPSC体外成牙本质能力的影响。结果：SDF-1和G-CSF能够轻度提高DPSC的增殖及集落形成能力,但差异无统计学意义。加入SDF-1或G-CSF的实验组划痕汇合速率明显高于对照组（P<0.01）,但两种因子间差异无统计学意义。Transwell迁移实验中,对照组每视野的迁移细胞数量为(5.0±1.4)个,SDF-1组每视野的迁移细胞数量为(24.3±6.8)个,G-CSF组每视野的迁移细胞数量为(11.8±3.3)个,各组间差异有统计学意义（P<0.05）。经成牙本质诱导后,实验组细胞ALP染色加深,ALP活性上升,矿化结节形成数量增加,成牙本质相关基因的表达均显著高于对照组。结论：SDF 1对DPSC的增殖能力影响不显著,但能明显提高DPSC的迁移能力和成牙本质分化能力,效果优于G-CSF。     

长链非编码 RNA SNHG1对结直肠癌增殖、迁移的影响及调控机制

目的：探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因1 (SNHG1)对结直肠癌（CRC）增殖、迁移的影响及其调控机制。方法：采用实时荧光定量PCR检测人正常结直肠上皮细胞（FHC）、结直肠腺癌细胞系（HT29）细胞中IncRNA SNHG1的表达水平。将HT29细胞分为干扰组（si-SNHG1）和对照组（si-NC）,分别转染SNHG1 siRNA和NC siRNA,采用MTT检测细胞增殖活力,Transwell实验检测细胞迁移能力,Western blot检测JAK-STAT信号通路相关蛋白表达。结果：HT29细胞中SNHG1的表达明显高于FHC细胞,差异有统计学意义（t=17.045,P<0.05）;si-SNHGI组细胞增值活性、迁移细胞数均降低,差异有统计学意义（t=16.317、12.714,P<0.05）,STAT3蛋白表达差异无统计学意义（t=1.063,P>0.05）,P-STAT3蛋白表达减少（t=15.473,P<0.05）。结论：SNHG1在CRC细胞中呈高表达,可促进CRC细胞增殖、迁移,其机制可能与SNHG1上调P-STAT3蛋白的表达促进...     

TRIM28在胃癌中表达的临床意义及对胃癌细胞侵袭和迁移的影响

目的 分析三结构域蛋白28（tripartite motif-containing protein 28,TRIM28）在胃癌中的表达及与胃癌患者临床预后的关系;探讨TRIM28对胃癌细胞侵袭迁移的影响及机制。方法 结合TCGA数据库和实时荧光定量PCR （quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）,分析胃癌中TRIM28的表达。结合Kaplan-Meier Plotter,探究TRIM28与胃癌患者预后的关系。应用AGS胃癌细胞系,以siRNA干扰TRIM 28表达后,以Transwell和划痕愈合试验探究TRIM28对AGS侵袭和迁移的影响;并用Western blotting检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白变化。结果 TRIM28在胃癌组织及细胞中异常高表达;且高表达的胃癌患者预后差。Transwell和划痕愈合试验结果显示,敲低TRIM28表达的AGS细胞侵袭和迁移能力均下降,差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。Western blotting检测结果显示,干扰TRIM28使β-catenin和c-Myc蛋白的表达明显下降。结论 TRIM28在胃癌中的表达增加且其表达与胃癌不良预后明显相关,TRIM28促进胃癌细胞的侵袭和迁移。     

4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性

目的：研究4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性。方法：4’O-甲基补脂查尔酮B孵育胃癌细胞系AGS后,采用MTT和集落克隆形成实验检测细胞生长,划痕实验检测细胞迁移,流式细胞实验检测细胞周期和凋亡,Western blot实验检测双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A（DYRK1A）蛋白表达。结果：4’O-甲基补脂查尔酮B对胃癌细胞AGS的IC50为（7.7±1.3）μmol/L,并能浓度依赖性地抑制集落克隆形成以及抑制迁移,诱导周期阻滞及凋亡,并抑制DYRK1A的表达（P ＜0.05）。结论：4’-O-甲基补骨脂查尔酮B能够通过抑制DYRK1A产生显著的体外抗胃癌活性。     

Abl相互作用蛋白1过表达对胃癌细胞系AGS体外增殖的影响

目的 明确Abl相互作用蛋白1(ABI1)在正常胃黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系AGS中的表达模式,并探讨ABI1过表达对AGS细胞体外增殖的影响.方法 首先用免疫组化、免疫荧光、逆转录(RT)-PCR、实时定量PCR及Western印迹法明确ABI1在GES-1及AGS细胞中的表达模式;其次用脂质体转染方法分别将基因重组表达载体鼠干细胞病毒(MSCV)-绿色荧光蛋白(GFP)-ABI1质粒和对照载体MSCV-GFP质粒导入AGS细胞,用嘌呤霉素筛选稳定表达MSCV-GFP-ABI1和MSCV-GFP的细胞系,用实时定量PCR和Western印迹法鉴定是否成功构建了ABI1过表达的细胞模型;最后用细胞活力检测试剂盒[八肽胆囊收缩素(CCK-8)]检测ABI1过表达对细胞增殖的影响.结果 ABI1在正常胃黏膜细胞系GES-1及胃癌细胞系AGS中均有表达;与GES-1细胞相比,ABI1在AGS细胞中的表达从mRNA水平到蛋白质水平均下调;成功构建稳定表达MSCV-GFP-ABI1的AGS-MSCV-GFP-ABI1细胞模型,AGS-MSCV-GFP-ABI1细胞中ABI1的表达无论mRNA水平还是蛋白质水平均明显高于AGS细胞(均P=0.002);CCK-8法检测显示,AGS-MSCV-GFP-ABI1细胞在24、48、72、96 h 4个时间点增殖率分别为1.46±0.31、4.75±0.12、6.62±0.32、8.96±0.27,均明显低于AGS细胞及AGS-MSCV-GFP细胞(均P<0.01).结论 ABI1在胃癌细胞中表达下调,其过表达可以抑制人胃癌细胞系AGS的增殖,提示ABI1表达下调可能参与了胃癌的发生发展过程,而影响胃癌细胞的增殖可能是其发挥作用的重要途径之一.     

UBE2C基因沉默表达对人胃癌AGS细胞增殖和迁移的影响

  目的  探讨UBE2C基因沉默对人胃癌AGS细胞增殖和迁移能力的影响。  方法  将用RNA 干扰技术构建的UBE2C-shRNA表达载体转染到293T细胞，用含有病毒颗粒的上清感染人胃癌AGS细胞，经puromycin筛选获得稳定表达的AGS细胞株。实验分为UBE2C表达沉默人胃癌AGS细胞组（干扰组）和对照组。采用qRT-PCR验证人胃癌AGS细胞中UBE2C的mRNA 表达水平，随后利用实时无标记细胞分析仪（RTCA）检测UBE2C沉默对人胃癌AGS细胞的增殖和迁移情况；同时应用CCK-8 细胞增殖检测试剂盒进一步印证UBE2C表达水平对人胃癌AGS细胞增殖能力影响。  结果  干扰组中UBE2C mRNA 表达 水平与对照组相比明显降低，AGS细胞增殖和迁移能力显著下降（P < 0.01）。  结论  靶向沉默UBE2C基因表达能抑制人胃癌AGS细胞恶性生物学行为。     

癌胚抗原黏附分子1对胃癌细胞株AGS生物学特性的影响

目的:探讨癌胚抗原黏附分子1对胃癌细胞株AGS生物学特性的影响.方法:将CEACAM1 siRNA转染人胃癌细胞株AGS,再用western-blot检测CEACAM1的表达;流式细胞术、Transwell实验和裸鼠负荷瘤实验分析转染后的AGS细胞的生物学特性变化.结果:转染CEACAM1 siRNA后的AGS细胞几乎不表达CEACAM1.CEACAM1沉默基因对AGS细胞增殖、凋亡和细胞周期无影响.转染CEACAM1 siRNA后的AGS细胞侵袭能力明显降低,荷瘤裸小鼠肿瘤的生长受到抑制.结论:沉默CEACAM1基因的表达能够明显抑制AGS细胞的转移以及活体成瘤性,为胃癌的基因治疗提供理论依据.     

靶向封闭CapG基因对胰腺癌细胞运动侵袭能力的影响

目的观察靶向封闭CapG基因对胰腺癌细胞株BxPC3运动侵袭能力的影响。方法设计并体外合成靶向CapG的小干扰RNA,将其转染到BxPC3细胞中,蛋白质印迹法检测转染前后细胞中CapG蛋白的表达,采用Transwell小室检测转染前后细胞运动侵袭能力的改变。结果CapGsiRNA能有效降低BxPC3细胞中CapG的表达,CapG在蛋白质水平的表达抑制率达80％左右。抑制BxPC3细胞中CapG的表达后,BxPC3细胞的运动侵袭能力明显下降,穿过人工基底膜的细胞数显著低于阴性对照组和空白对照组（P〈0．05）。结论封闭CapG表达能明显抑制胰腺癌细胞BxPC3在体外的运动侵袭能力。     

siRNA靶向抑制ATDC蛋白对胃癌细胞生物学行为的影响

目的通过比较ataxia—telangiectasiagroupDcomplementinggene（ATDC）在永生化胃黏膜细胞GES与胃癌细胞系MNK45、AGS中的表达差异,探讨其对胃癌细胞生长、增殖及侵袭能力的影响。方法应用Westernblot实验检测ATDC在胃癌细胞系MKN45、AGS及永生化胃黏膜细胞系GES表达差异,利用慢病毒携带的siRNA下调ATDC在MKN45细胞表达水平,采用MTT实验检测细胞生长能力、流式细胞术检测细胞周期、平板克隆实验检测细胞克隆形成能力以及transwell实验检测细胞侵袭能力。结果ATDC在人胃癌细胞系MKN45与AGS细胞中的表达水平均明显高于永生化胃黏膜细胞GES（均P〈0．05）;转染siRNA慢病毒后,与Con—MKN45及MKN45比较,Si—MKN45细胞的表达水平明显下降（P〈0．05）：下调ATDC表达后MKN45细胞的生长能力明显受到抑制（P〈0．05）,S期细胞明显减少、增殖指数克隆形成率及侵袭能力均明显降低（均P〈005）。结论慢病毒携带的siRNA下调ATDC表达后能够抑制胃癌细胞MKN45的生长、增殖与侵袭能力,可为胃癌的基因治疗提供新的靶点。     

Max二聚化蛋白1（Mad1）真核表达载体的构建及其对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的：构建Max二聚化蛋白1 (Max dimerization protein 1,Mad1) 的真核表达载体,研究Mad1对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法：利用DNA重组技术将Mad1基因克隆至pEGFP-N1载体,构建成pEGFP-N1-Mad1重组真核表达载体。经酶切和测序鉴定后,采用脂质体转染技术将重组质粒瞬时转染人胃癌AGS细胞, RT-PCR及Western blot检测Mad1基因和蛋白的表达。荧光显微镜观察Mad1在AGS细胞内的定位情况。CCK-8和Transwell实验研究Mad1对胃癌AGS细胞增殖和迁移能力的影响。结果：成功构建携带Mad1基因的真核表达载体pEGFP-N1-Mad1。将重组质粒瞬时转染AGS细胞后,RT-PCR和Western blot检测到Mad1 基因和蛋白的表达。Mad1基因表达产物定位于AGS细胞核中。CCK-8和Transwell实验结果显示,转染Mad1的AGS细胞与转染空载体的AGS细胞、及正常AGS细胞相比,细胞增殖活力和迁移能力明显降低。 结论：成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-Mad1,研究表明Mad1可以抑制胃癌AGS细胞的增殖和迁移。     

体外RNA干扰抑制REG4基因表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨体外RNA干扰抑制REG4基因表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响。方法应用实时定量PCR方法检测七株胃癌细胞株中REG4基因的mRNA表达。针对REG4基因设计三条小干扰RNA片段(siRNA1、siRNA2、siRNA3),瞬时转染高表达胃癌细胞株。用RT-PCR方法检测转染后REG4基因的mRNA表达水平、MTT法检测细胞增殖能力、AnnexinV-PI法检测细胞凋亡水平。结果以永生化正常胃粘膜细胞株GES-1作为参照。MKN-45和AGS胃癌细胞株中REG4表达水平升高200倍以上,遂选用AGS细胞进行RNA干扰。RT-PCR结果证实siRNA2、siRNA3均有干扰效果,尤以siRNA3效果明显。选用siRNA3干扰AGS细胞株,MTT实验结果证实干扰AGS后,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)。AnnexinV-PI实验结果显示细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论干扰REG4基因具有抑制胃癌细胞增殖、促进凋亡的作用,REG4基因可能成为胃癌基因靶向治疗的新靶点。     

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1对胃癌细胞生物学行为的影响及相关机制

目的： 探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1，PCK1)在胃癌中的表达、与胃癌患者预后的关系及其潜在机制。方法： 利用TCGA数据库、HPA数据库及Oncomine 4.5数据库中胃癌以及癌旁组织的相关数据与图片，分析PCK1表达水平与胃癌患者临床病理学特征和总生存期的关系，采用基因功能富集分析(GSEA)预测PCK1调控胃癌潜在的信号通路。体外细胞学实验采用慢病毒转染胃癌HGC-27和AGS细胞，分别敲低与过表达PCK1，采用细胞功能学实验检测PCK1对胃癌细胞生长、增殖、迁移等影响，同时采用蛋白质免疫印迹检测相关蛋白的表达。结果： 与癌旁组织相比，PCK1在胃癌组织中表达明显上调(P＜0.05)；ROC曲线提示PCK1对胃癌患者预后具有良好的预测效能；通过GSEA富集分析提示原发性免疫缺陷、细胞黏附分子、趋化因子信号通路、全身性红斑狼疮、产生IgA的肠道免疫网络及RIGⅠ样受体信号通路相关的基因集在PCK1基因低表达表型中差异富集；敲低PCK1后，胃癌HGC-27和AGS细胞生长、克隆形成能力、迁移能力显著下降，同时p-AKT(Ser473)、p-mTOR、p-S6和p-4EBP1表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01)；过表达PCK1则与之作用相反。结论： PCK1在胃癌中呈高表达且与患者预后相关，其可能通过活化AKT mTOR信号通路促进胃癌细胞生长、增殖与迁移。     

miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达及对胃癌生物学行为的影响

目的:探讨miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达情况及对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:应用实时荧光定量PCR法分析31例胃癌组织和癌旁组织样本以及人胃癌细胞系SGC-7901、MKN45、人正常胃黏膜上皮细胞系GES1中miRNA-101的表达水平;建立miRNA-101重组腺病毒载体感染胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,对照组为感染阴性对照病毒的胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,MTT法检测miRNA-101对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力.结果:胃癌组织中miR-101表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01);miR-101在细胞系SGC-7901和MKN45中的表达量明显低于人正常胃黏膜上皮细胞系GES1(P<0.01).孵育48 h后MKN45细胞miRNA-101组的细胞增殖能力低于其对照组(P<0.05);而孵育72 h后SGC-7901细胞和MKN45细胞的miRNA-101组细胞增殖能力均亦低于相应对照组(P<0.05).迁移试验结果显示,miRNA-101组迁移的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数明显低于相应对照组(P<0.01);侵袭实验结果显示,miRNA-101组侵袭的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数亦明显低于其对照组(P<0.01).结论:miRNA-101在胃癌组织和胃癌细胞系中表达下调,转染miRNA-101可明显降低SGC-7901和MKN45细胞的增殖、迁移、侵袭能力,miRNA-101可能参与了胃癌疾病的发生及发展.