EGFR单抗类靶向药物治疗脑胶质瘤的研究进展

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是表皮生长因子(EGF)和转化生长因子(TGF)等因子的受体,主要调节细胞增殖等细胞活动。EGFR基因突变或扩增常导致EGFR过度激活,成为肿瘤细胞增殖失控的重要因素。尼妥珠单抗、帕尼单抗、西妥昔单抗和m Ab 806是针对EGFR的单克隆抗体,可竞争性特异性结合EGFR蛋白或(和)EGFRvⅢ型突变体,阻断EGFR胞内磷酸化位点激活,抑制肿瘤恶性表型。本文就EGFR单抗类靶向药物在脑胶质瘤中的治疗进展进行系统性回顾,并结合本团队的研究系统评估尼妥珠单抗在脑胶质瘤中的疗效。     

胶质瘤中P53、EGFR、Ki-67及MGMT 的表达及临床意义

目的 探讨不同级别胶质瘤中P53、EGFR、Ki-67 及MGMT 的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测152 例胶质瘤中P53、EGFR、Ki-67 及MGMT 表达,统计分析上述蛋白的表达差异.结果 P53 在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中阳性率分别为71.4%,73.1%和60.0%.95 例EGFR 阳性,其阳性表达率与染色强度均与病理级别呈正相关(P ＜0.01).Ki-67 均为阳性表达,Ki-67LI 在高级别胶质瘤中明显高于其在低级别胶质瘤中的表达水平(P ＜0.01).MGMT 阳性84 例,阴性68 例,在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤之间的MGMT 表达无明显差异(P ＞0.05).结论 EGFR 和Ki-67 表达与肿瘤病理级别呈正相关,与胶质瘤恶性进展及预后差密切相关.P53 和MGMT 与肿瘤病理级别无明显相关性.检测有助于评估胶质瘤侵袭能力、增殖性,预测胶质瘤对放、化疗敏感性及判断分子靶向药物治疗是否有效.     

表皮生长因子受体反义RNA联合伽玛刀治疗对胶质瘤细胞生长抑制作用的研究

人表皮生长因子受体(vascularendothelial growth factor,EGFR)的扩增、过表达和突变在胶质瘤的发生、发展中起重要作用,是恶性胶质瘤的重要责任基因之一。针对EGFR传导通路的干预治疗及其与放疗联     

人脑胶质瘤EGFR-AKT通路活性的研究

目的研究胶质瘤中细胞EGFR和磷酸化AKT(p-AKT)的表达以及EGFR与AKT活性的相互关系.方法用免疫组化方法观察6例正常脑组织、50例胶质瘤标本和2个恶性胶质瘤体外细胞系的EGFR表达,并应用Western blot分析p-AKT的表达.结果EGFR在胶质瘤中的表达阳性率随肿瘤恶性程度增加而增加;其蛋白表达水平与病理分级呈正相关.Western blot分析发现在正常脑组织中p-AKT蛋白水平表达极低,胶质瘤中p-AKT的表达水平均随肿瘤恶性程度增加而明显上升,且与胶质瘤病理级别正相关;低恶度肿瘤与高恶度肿瘤有明显差异.EGFR的阳性表达率与AKT磷酸化水平显著相关.结论EGFR-AKT通路的活性状态在胶质瘤的恶性进展具有重要作用,该通路可能是胶质瘤恶性表型的责任通路.     

表皮生长因子受体拮抗剂靶向抑制胶质瘤细胞增殖的实验研究

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)拮抗剂-吉非替尼对人脑胶质瘤细胞的增殖抑制作用,为胶质瘤干细胞靶向治疗研究作准备。方法荧光定量PCR检测人脑胶质瘤细胞U251、GBM、SHG44及神经干细胞、脑肿瘤干细胞中EG-FR基因的表达。选择不同浓度的吉非替尼作用于U251细胞48h,MTT法检测药物对细胞的抑制率;流式细胞仪分析吉非替尼作用U251细胞后细胞增殖周期和细胞凋亡比率的变化。结果U251和脑肿瘤干细胞中都高表达EGFR。吉非替尼对U251细胞有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,IC50为19.0μM。以12.7μM、19.0μM和25.3μM吉非替尼处理U251细胞,随着药物浓度的增加,G0-G1期细胞比例和细胞凋亡率都逐渐升高。结论EGFR在U251细胞和脑肿瘤干细胞中都高表达,其拮抗剂吉非替尼对U251的细胞增殖有显著的抑制作用,为靶向治疗胶质瘤干细胞的研究开拓了思路。     

神经胶质瘤药物靶向性化疗的研究进展

在神经胶质瘤治疗中,药物化疗特别是药物靶向性化疗是胶质瘤治疗中最重要的环节之一,然而临床应用结果表明,胶质瘤化疗效果并不理想。本文对传统胶质瘤药物化疗存在的缺陷进行了分析,从化疗药物载体系统,胶质瘤化疗药物的一些重要靶点和胶质瘤干细胞标志物几个方面进行论述,介绍近年来胶质瘤靶向性化疗方面取得的一些进展和仍然存在的问题,旨在为胶质瘤化疗相关研究提供有价值的信息。     

分子标志物应用于恶性胶质瘤诊治的研究进展

恶性胶质瘤是成人最常见的中枢神经系统肿瘤,由于其呈浸润性生长,故易复发而难以治愈.随着分子生物学新技术的应用,已发现一系列对诊断、鉴别诊断和治疗有实用价值的生物学标志物.其中染色体ip/19q,O6-甲基鸟嘌吟-DNA甲基转移酶(MGMT)、表皮生长因子受体(EGFR)、异柠檬酸脱氢酶(1DH)是成人恶性胶质瘤研究的热点,为进一步完善胶质瘤的诊断、鉴别诊断和开辟有效的分子靶向治疗提供重要依据.     

脑肿瘤中上皮生长因子及其受体的研究进展

上皮生长因子及其受体(EGF/EGFR)与中枢神经系统细胞的增殖、分化及CNS肿瘤的发生和发展密切相关。EGFR在人胶质瘤中常过表达,脑膜瘤中少量表达,而在正常脑组织中极少表达,提示它与脑肿瘤的发生和发展有关。深入研究EGFR将会对脑肿瘤特别是恶性胶质瘤的诊断和治疗产生积极的影响。     

靶向表皮生长因子受体的shRNA抑制U251胶质瘤生长的实验研究

目的探讨靶向表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的RNA干涉(RNAi)技术抑制恶性胶质瘤体外细胞系U251的EGFR表达后,在体内外对U251细胞生长抑制作用。方法在人EGFR开放阅读框的细胞内区酪氨酸激酶结构域选择1个siRNA靶序列、进行短发夹RNA(shRNA)表达载体psiRNA-2400的构建,并以含有随机序列的psiRNA-scr表达质粒为对照进行了脂质体介导的U251人脑恶性胶质瘤细胞系表达。应用RT-PCR检测EGFR表达水平,应用MTT法、流式细胞术和Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转染前后的生物学行为。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导shRNA基因治疗对U251细胞生长抑制作用。对肿瘤组织应用免疫组化的方法进行EGFR、PCNA和GFAP表达比较。结果脂质体介导、靶向EGFR的shRNA可显著抑制U251细胞ECFR表达,MTT法分析显示psiRNA-2400转染组细胞生长抑制率为68%;与对照组和psiRNA-scr转染组比较,细胞周期分析结果表明psiRNA-2400转染组G_0～G_1期细胞数没有明显变化,进入S期的细胞数较对照组减少了12.7%～13%,而进入G_2期细胞则增加了10.5%～11.7%。Matrigel基质生长实验显示对照组和psiRNA-scr转染组细胞呈正常形态贴壁生长,而psiRNA-2400转染组细胞不能贴壁生长,呈团块状簇集生长。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示psiRNA-2400显著抑制皮下肿瘤生长,组织病理学分析显示治疗组EGFR表达下降、PCNA标记指数降低而GFAP表达上调。结论靶向EGFR的RNAi技术可以显著抑制U251细胞的EGFR表达,在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用。因此,shRNA表达质粒介导的基因治疗可以成为胶质瘤靶向性EGFR治疗的新策略。     

LRIG1、EGFR、E-Cadherin及N-Cadherin在胶质瘤中表达及其临床意义

目的研究富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)、表皮生长因子受体(EGFR)、ECadherin及N-Cadherin在不同病理级别胶质瘤中表达差异,探讨LRIG1在胶质瘤恶性进展中可能的作用机制。方法收集74例胶质瘤患者手术标本,包含12对原发及复发配对胶质瘤标本,采用qRT-PCR检测LRIG1、EGFR、E-Cadherin、N-Cadherin基因的表达,并采用免疫印迹检测LRIG1、EGFR、E-Cadherin、NCadherin、Vimentin蛋白表达情况。结果随着胶质瘤病理级别的升高,LRIG1、E-Cadherin基因及蛋白表达水平降低,EGFR、N-Cadherin基因及蛋白表达水平升高,差异均具有统计学意义(均P0.05)。WHOⅢ-Ⅳ组胶质瘤EGFR/LRIG1及N-Cadherin/E-Cadherin比值显著高于WHOⅠ-Ⅱ组(均P0.05)。EGFR/LRIG1与NCadherin/E-Cadherin变化之间存在正相关(r=0.56,P0.05)。对原发及复发配对胶质瘤标本的研究结果与上述一致。结论胶质瘤中EGFR/LRIG1表达失衡,可能通过诱导上皮间质转化(EMT)促进胶质瘤细胞的恶性进展。LRIG1可能成为胶质瘤治疗的新靶点。     

中国人胶质瘤中表皮生长因子受体基因的扩增及对患者预后的影响

目的：了解国人胶质瘤中表皮生长因子受体基因（EGFR）的扩增情况及对患者预后的影响。方法：使用半定量的Differential PCR方法对113例福尔马林固定-石蜡包埋（FFEP）胶质瘤标本内的EGFR基因扩增情况进行了检测；对其中的83例进行了生存分析研究。结果：113例胶质瘤中存在EGFR基因扩增的有26例，其中低度恶性组中仅占3.5％，而在高度恶性组中占42.1％。生存分析显示：EGFR基因扩增对患者预后并无显著影响，而起病年龄、肿瘤病理分级、肿瘤生长部位及起病症状为失语对患者术后生存期有显著影响。结论：恶性胶质瘤中存在着较为广泛的EGFR基因扩增，但EGFR基因的扩增与胶质瘤患者预后之间并不存在显著关联。     

纳米载体系统治疗恶性胶质瘤研究进展

恶性胶质瘤是最常见的原发性颅内恶性肿瘤,具有无限增生的特点,现有的手术及放化疗对其治疗效果有限。纳米载体系统可以负载药物通过血脑屏障(blood-brain barrier,BBB),对肿瘤细胞具有特异靶向性,有缓释控释药物的作用,并能联合化疗、放疗、热疗、基因治疗等多种治疗方法,因而成为恶性胶质瘤治疗研究的前沿热点,其中集诊断、治疗及疗效评价的多功能纳米载体系统具有良好的发展前景。     

脑胶质瘤ADAM17与EGFR的表达及临床意义

目的探讨解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)与表皮生长因子受体(EGFR)在脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法选择2014年2月至2016年8月手术切除68例新鲜脑胶质瘤标本,其中高级别胶质瘤42例,低级别胶质瘤26例。另选择同期颅脑损伤内减压术获取的正常脑组织标本10例为对照组。采用免疫印迹法和免疫组化染色检测ADAM17和EGFR表达。结果高级别胶质瘤ADAM17和EGFR表达水平均明显高于低级别胶质瘤(P0.05),而低级别胶质瘤ADAM17和EGFR表达水平均明显高于对照组(P0.05)。胶质瘤表达水平呈明显正相关(r=0.444,P0.001)。结论随着脑胶质瘤恶性程度的增加,EGFR和ADAM17表达水平明显升高,提示EGFRA、DAM17可作为脑胶质瘤恶性程度的评估指标。     

胰岛素样生长因子结合蛋白-2与胶质瘤的研究进展

IGFBP-2是IGF结合蛋白家族中的一员,也是在神经系统中含量最多的一员。近年来的研究发现,IGFBP-2在胶质瘤的发生发展及预后中有着重要的作用。IGFBP-2可以通过IGF依赖/非依赖通路、β-catenin通路等多种通路参与调节胶质瘤的增殖、侵袭、转移及血管生成等多种生理过程。同时,胶质瘤患者瘤体及瘤周脑组织和患者血浆中IGFBP-2的表达量均明显高于正常人,其表达水平与胶质瘤的恶性程度分级、复发及预后密切相关。干预瘤体中IGFBP-2的活性和表达,可以抑制胶质瘤细胞的增殖和转移并促进其凋亡。因此,IGFBP-2的靶向治疗可能为胶质瘤药物研发治疗提供一个潜在的新的作用靶点。     

靶向表皮生长因子受体psiRNA抑制人脑胶质瘤细胞系U251生长的体外研究

目的探讨靶向表皮生长因子受体(EGFR)RNA干扰(RNAi)技术抑制人脑胶质瘤细胞系U251EGFR表达后,在体外对细胞增殖活性和侵袭能力的抑制作用。方法应用流式细胞术、Annexin V法、MTT法、Matrigel细胞外基质生长实验和Transwell细胞侵袭实验评价由脂质体Lipofectamine 2000介导转染的人脑胶质瘤细胞系U251转染前后细胞增殖活性和侵袭能力的变化;Western blotting检测EGFR和PI3K/Akt信号转导通路中相关蛋白质的表达水平。结果与对照组和psiRNA-scr组比较,psiRNA-EGFR组EGFR以及PI3K/Akt信号转导通路中相关蛋白质表达水平降低(均P=0.000)。转染后,psiRNA-EGFR组细胞阻滞于G0和G1期,S期细胞数目减少(均P=0.000);其细胞凋亡率为(9.60±0.26)%,高于对照组和psiRNA-scr组(均P=0.000);自培养第2天其细胞增殖速率即呈下降趋势,且低于对照组和psiRNA-scr组(均P=0.001)。结论靶向表皮生长因子受体RNAi技术可以序列特异性地抑制人脑胶质瘤细胞系U251细胞表皮生长因子受体表达,在体外对U251细胞生长具有明显抑制作用。靶向表皮生长因子受体psiRNA基因治疗可能成为脑胶质瘤治疗的新策略。     

胶质瘤侵袭迁移靶向治疗

恶性胶质瘤是临床最为常见的原发性中枢神经系统肿瘤,属于难治性肿瘤之一,患者多预后不良。具有高度侵袭性的胶质瘤细胞可以逃避手术最大切除,以及同步放射治疗和药物化疗,是导致治疗难以奏效和复发的主要原因。回顾本实验室相关研究结果并结合文献,阐述胶质瘤侵袭迁移的相关分子机制及靶向治疗研究进展。     

靶向性毒素治疗胶质瘤的新进展

恶性星形细胞瘤预后不良,靶向性毒素有独特的疗效,靶向性毒素在体外对恶性星形细胞瘤有强烈细胞毒性,动物试验表明靶向性毒素可以延长生命和使肿瘤消退。临床上对软脑膜肿瘤和恶性脑瘤分别行鞘内注射和瘤内注射,结果表明靶向性毒素无明显神经毒性,脑脊液细胞学分析和放射学检查证明治疗有效。在正常脑组织和恶性肿瘤之间存在一个治疗窗,可以利用这一治疗窗施行靶向性疗法。靶向性毒素治疗恶胶质瘤具有广阔前景。     

下期内容预告

正本刊2020年第2期报道专题为胶质瘤免疫研究进展,重点内容包括:神经外科免疫相关疾病;脑肿瘤免疫治疗及转化研究进展;微环境中胶质瘤细胞与免疫细胞的代谢对抗肿瘤免疫反应的调控作用;脑胶质瘤免疫检查点抑制剂及其临床研究进展;嵌合抗原受体T细胞治疗胶质母细胞瘤研究进展;恶性胶质瘤溶瘤病毒治疗进展;树突状细胞疫苗在恶性胶质瘤免疫治疗中的应用;靶向胶质瘤干细胞及其微环境的免疫治疗进展;放射治疗对胶质母细胞瘤免疫状态的影响和意义     

EGFR、p53与Ki-67在国人胶质瘤中表达研究

表皮生长因子受体（epidermal grotwth factor receptor，EGFR）的过表达或扩增、激活以及抑癌基因p53的缺失、突变失活均是导致胶质瘤的主要分子事件。本文应用免疫组化方法对50例国人脑胶质瘤中表皮生长因子受体EGFR、p53蛋白及胶质瘤恶性程度的标志Ki-67标记指数（Ki-67 LI）联合检测，对胶质瘤分子生物学行为进行探讨，为基因治疗在胶质瘤中的应用提供理论依据。     

靶向胶质瘤干细胞及其微环境的免疫治疗进展

胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,胶质瘤干细胞及其微环境是支持胶质瘤发生、恶性进展的根本原因,将其作为包括免疫治疗在内的各项治疗策略的靶点有望提高疗效。单克隆抗体可通过特异性识别胶质瘤干细胞标志物,靶向并抑制其生物学活性;胶质瘤干细胞中肿瘤相关基因变异,使溶瘤病毒选择性复制,裂解胶质瘤干细胞,抑制肿瘤生长;过继转移的嵌合抗原受体T细胞经体外激活、回输后可直接靶向胶质瘤干细胞相关抗原,发挥抗肿瘤作用;树突状细胞疫苗通过胶质瘤干细胞mRNA致敏,发挥靶向激活抗胶质瘤干细胞免疫反应的作用。胶质瘤干细胞活化性配体表达水平升高且低表达主要组织相容性复合物Ⅰ类分子,针对此特点,自然杀伤细胞可以较好地发挥抗肿瘤作用。胶质瘤干细胞微环境中免疫检查点抑制在免疫逃逸过程中起关键作用,对这些免疫检查点进行干预成为肿瘤免疫治疗的重要靶点。靶向胶质瘤干细胞的免疫治疗策略虽在不同程度上显示出一定疗效,但远未成熟,尚待持续深入探究。