己酮可可碱对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用

目的观察己酮可可碱(PTX)对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用。方法以Hep3b人肝癌细胞株为研究对象,应用MTT法检测PTX的药物毒性;应用克隆形成实验(colony forming assay)观察PTX对Hep3b细胞株的放射敏感性的影响;流式细胞仪(FCM)技术测定照射后Hep3b细胞株细胞周期的再分布并观察PTX能否去除放射引起的细胞周期阻滞。结果不同浓度的PTX作用于人肝癌Hep3b细胞株48 h后,其细胞毒性呈剂量依赖性,最适浓度为2 mmol/L。PTX能明显降低放射后Hep3b细胞的克隆形成率,其放射增敏比为2.68±0.24(P>0.05)。FCM实验结果显示,照射明显导致Hep3b细胞株G2期阻滞,Hep3b细胞在照射后20 h G2/M期比例分别为86.8%和14.8%(P<0.05),PTX能够去除放射引起的Hep3b细胞G2期阻滞。结论PTX对Hep3b细胞株有放射增敏作用,其作用机制可能与PTX去除放射引起的G2期阻滞有关。     

mIκBα基因转染肝癌细胞HepG2的放射增敏作用

目的 探讨mIκαBα基因是否增加肝癌细胞的放射敏感性.方法 实验分3组:亲本细胞对照组、nepG2细胞转染Adv组、转染mIκBα基因的Hep G2细胞-Ad mIκBα组.在6 Gy X射线照射前后分别测定3组细胞下列指标:Western blot检测肝癌细胞浆内mIκαBα值;电泳迁移率法测定肝癌细胞核内NF-κB活性;TUNEL染色法测定肝癌细胞凋亡指数.2 Gv放射线照射后的肝癌细胞存活分数和用多靶单击模型确定的Do、Dq值判定肝癌细胞的放射敏感性.结果 放射线照射前,Adv组与Hep G2组细胞浆内mIκBα呈低值,照射后更减低;而细胞核内NF-κB活性照射前为( ),照射后为( ),呈持续激活状态;细胞凋亡指数在照射前分别为1.4、1.6,照射后升高至8.9、11.7.Ad mIκBα组在照射前、后细胞浆内mIκBα均呈高值,均为Adv组的3倍;而细胞核内NF-κB活性在照射前、后均呈阴性;照射前细胞凋亡指数为18.2,照射后升高至88.3.3组中Ad mIκBα组细胞存活分数最低,为0.301;而SER(放射增敏比)最大,为2.099;Do值最小,为1.468.Dq值最小,为0.709.结论 用mIκBα基因转染肝癌细胞Hep G2,可抑制肝癌细胞内NF-κB的抗凋亡活性.增强肝癌细胞的放射敏感性.     

吉西他滨对人舌鳞癌Tca8113 细胞的放射增敏作用及其机制研究

目的 研究吉西他滨（GEM）对人舌鳞癌Tca8113 细胞的放射增敏作用及其相关机制。方法 用不同浓度GEM 处理人舌鳞癌Tca8113 细胞24 h,测定细胞存活率并确定后续实验浓度。对Tca8113细胞进行单独放疗或联合GEM 处理,MTT 法测定细胞存活率;平板克隆形成实验研究各组细胞集落形成的能力;流式细胞术验证Tca8113 细胞对放射的敏感性变化。Western blotting 检测Bcl-2、Bax、 CleavedCaspase-3 及Cleaved Caspase-9 蛋白的表达。结果 不同浓度GEM 作用时的细胞存活率比较,经方差分析,差异有统计学意义（P <0.05）。与0.00μmol/L 组比较,GEM 浓度为0.01、0.02、0.03、0.10 及1.00μmol/L时细胞存活率降低（P <0.05）。照射剂量为4 Gy 时,与单纯放疗组比较,GEM 联合放疗组细胞存活率降低（P <0.05）。克隆形成实验显示,GEM 联合放疗组集落形成能力最弱（P <0.05）;流式细胞术进一步证实,GEM 联合放疗组较单纯放疗组凋亡率升高（P <0.05）。GEM 联合放疗组Tca8113 细胞凋亡高于其他各组,且Tca8113 细胞中Bax、Cleaved Caspase-3 及Cleaved Caspase-9 蛋白表达水平高于其他组（P <0.05）;而Bcl-2蛋白表达则低于其他各组（P <0.05）。结论 GEM 对舌鳞癌Tca8113 细胞的增殖有抑制作用,联合放射治疗能有效提高放射敏感性;两者可能具有协同抗肿瘤作用。     

过氧化氢对人肝癌细胞株HepG2增殖的促进作用

目的:探讨低剂量过氧化氢(H2O2)对人肝癌细胞株HepG2的促增殖作用及该作用与NF-κB和细胞周期的关系. 方法: 不同剂量H2O2直接作用于培养的HepG2细胞;20 μmol/L NF-κB抑制剂(PDTC)预处理细胞2 h, 50 μmol/L的H2O2作用HepG2细胞;50 μmol/L H2O2分别作用于G1, G2/M, S期细胞,MTT法测定细胞增殖活性. 结果: 50 μmol/L的H2O2具有明显的促进HepG2细胞生长的作用,此作用可以被PDTC抑制;50 μmol/L的H2O2可以明显的促进G1期HepG2细胞生长. 结论: 低剂量H2O2可诱导HepG2细胞增殖,该过程可能包含依赖NF-κB的信号途径的参与;H2O2诱导HepG2细胞增殖在细胞周期的不同时相效应敏感性不同,主要诱导G1期细胞增殖.     

抗血管内皮生长因子抗体对肝癌的放射增敏作用

目的: 观察抗血管内皮生长因子抗体(VEGF mAb)与不同剂量放射联合对肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用. 方法: 将SMMC-7721肝癌细胞种植于裸鼠皮下,成瘤动物分为单纯放射20 Gy组、放射20 Gy 抗体组、放射30 Gy 抗体组和对照组,腹腔给予抗VEGF mAb 50 μg/只,隔日1次,共6次,放射剂量一次性给予.测量肿瘤直径并计算瘤体积,抗体给药结束后2 wk处死动物,免疫组化法测肿瘤微血管密度(MVD). 结果: 放射能抑制肿瘤生长,减少肿瘤MVD,放射与抗体结合对肿瘤生长的抑制作用更显著,且放射30 Gy 抗体比放射20 Gy 抗体效果更好.单纯放射20 Gy组、放射20 Gy 抗体组和放射30 Gy 抗体组的瘤质量抑制率分别为75.3%,83.9%和94.7%,差异有统计学意义. 结论: 抗VEGF mAb对放射治疗肝癌移植瘤有增敏作用,是肝癌综合治疗的有效途径之一.     

抑制肝癌HepG2细胞N-Ras基因表达对放射敏感性的影响

目的:探讨RNA干扰(RNAi)N-Ras基因增强人肝癌HepG2细胞的放射敏感性。方法:通过构建干扰N-Ras基因siRNA,采用免疫组织化学、荧光定量RT-PCR、Western blot、MTT法等观察干扰前后的肝癌HepG2细胞RNA水平、蛋白水平、生长情况等变化。用细胞克隆计数实验检测放射敏感性变化。结果:肝癌HepG2细胞株干扰后mRNA、蛋白、免疫组织化学、生长情况均显著改变,HepG2细胞RNAi前后增敏比SER=1.10。结论:RNAi肝癌HepG2细胞N-Ras基因可以达到放射增敏的目的。     

胺碘酮对人肝癌HepG2细胞增殖的影响及其临床意义

目的:研究胺碘酮在体外对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的影响及细胞周期分布的特点,并探讨其可能的作用机制。方法:应用噻唑蓝比色法(MTT)法检测经不同浓度的胺碘酮或5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用后,HepG2细胞的吸光度值(A)、增殖抑制率,并应用PI单染流式细胞检测技术测定HepG2细胞周期分布的特点,总结胺碘酮对HepG2细胞增殖及细胞周期分布的影响。结果:HepG2细胞经胺碘酮(浓度0.5-4.5 mg/L)作用48 h后,细胞逐渐变小、折光率减弱,漂浮细胞逐渐增多,细胞生长受到明显抑制,并呈现明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系。在抑制率及细胞周期分布特点参数上,胺碘酮组与空白对照组相比有显著的统计学差异(P<0.01),而与5-Fu干预组相比,二者之间无统计学差异(P>0.05)。同时胺碘酮使细胞周期分布发生明显变化,表现为S期细胞比例下降,G0/G1期和G2/M期细胞比例上升;与5-Fu干预组呈现出相似的趋势。结论:胺碘酮能抑制肝癌HepG2细胞的增殖,并呈现出明显的剂量和时间依赖效应关系。胺碘酮可望为肝癌的新的辅助化疗特别是合并心律失常的肝癌患者的化疗提供新的思路。     

放疗对人肝癌HepG2细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:探讨放疗对人肝癌HepG2细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:采用6MV-X射线照射细胞,提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳,观察细胞发生凋亡的情况,并采用免疫组织化学染色观察人肝癌细胞株中Bax和Bcl-2蛋白的表达。同时观察细胞周期改变情况。结果:照射后48h,2Gy、4Gy和6Gy出现明显DNA降解("梯形结构"),但对照组及8Gy和10Gy无"梯形结构"出现。Bax和Bcl-2蛋白的表达在时间和剂量之间存在交互作用(F=1.733,P=0.042;F=1.700,P=0.048)。4Gy照射剂量作用细胞48h后,HepG2细胞中Bax表达显著上调,而Bcl-2表达明显降低。4GyX线照射后培养6h,即可观察到G2/M期、S期阻滞,G2/M期阻滞峰值为正常的56倍,在6~48h阻滞"崩溃",细胞被释放,再度进入细胞周期或死亡。结论:6MV-X射线照射HepG2细胞,可诱使其产生凋亡,其机制可能通过促进Bax蛋白表达和抑制Bcl-2蛋白的表达来诱导肝癌细胞凋亡。4Gy照射引起的G2期阻滞释放可能与凋亡水平上调有关。     

阿霉素对人肝癌细胞SMMC-7721抑制作用的研究

目的:研究阿霉素对人肝癌细胞SMMC-7721生长的影响。方法:应用MTT法、流式细胞术及透射电镜技术观察阿霉素对SMMC-7721细胞生长的作用及细胞周期和形态学改变。结果:阿霉素明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长(P相似文献   

小剂量吉西他滨可促进放疗致人肝癌细胞株SMMC-7721的凋亡

目的观察小剂量吉西他滨(GEM)对放疗诱导的人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的促进作用。方法将体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721分为空白对照、单纯放疗、单纯化疗及放疗加化疗4组,应用MTT法检测不同条件下SMMCC-7721细胞的生长活性;经光学显微镜、透射电镜及荧光显微镜观察各组细胞经GEM作用后凋亡的形态学变化。结果单纯放、化疗都可诱导GEM细胞凋亡,GEM可明显增加放疗诱导的细胞凋亡。结论小剂量GEM可明显增加放疗诱导的SMMC-7721细胞的凋亡。     

痰热清注射液抑制HepG2细胞的研究

目的研究痰热清注射液对HepG2肝癌细胞株的抑制及对细胞周期的影响。方法采用MTT法检测痰热清注射液对HepG2肝癌细胞株的抑制,采用凯基细胞周期法检测该药对细胞周期的影响。结果痰热清注射液呈剂量依赖性抑制HepG2细胞,使细胞阻滞于G0/G1期,细胞DNA合成减少。结论痰热清注射液对肝癌细胞具有一定抑制作用,可能与使细胞阻滞于休眠期或DNA合成前期,导致细胞DNA合成减少有关。     

姜黄素诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡及对细胞生长周期的影响

目的研究中药姜黄素在体外诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡的机制及对细胞生长周期的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的姜黄素（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0μmol/L）刺激人肝癌HepG2细胞24、36和48h,MTT法及台盼蓝拒染法检测姜黄素对人肝癌HepG2细胞生长增值的影响并绘制生长曲线图,流式细胞术（FCM）检测其对细胞生长周期的影响。结果MTT法结果表明姜黄素对人肝癌细胞HepG2的生长具有抑制作用,2.0μmol/L浓度组在24h与对照组比较便具有统计学意义（P〈0.05）,16μmol/L浓度组与HepG2细胞作用48h后对HepG2细胞的生长抑制作用最强（54.78±2.35）%,台盼蓝拒染法发现细胞存活率与姜黄素浓度间具有剂量和时间效应;流式细胞仪检测结果表明8.0μmol/L姜黄素诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡,并对细胞生长的S期有明显的阻滞作用。结论姜黄素在体外能阻滞HepG2细胞的生长增值,诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡。     

mLumin转染人肝癌HepG2细胞系的建立

目的:建立mLumin+的HepG2细胞系,为进一步建立肿瘤模型和小动物荧光成像观察奠定基础.方法:采用磷酸钙法,将pcDNA3.0-mLumin质粒转染至人肝癌细胞系HepG2,经G418筛选扩增后通过PCR检测mLumin基因在转染的肝癌细胞HepG2中的表达情况,同时应用荧光显微镜及流式细胞仪检测mLumin+的...     

L-选择素在肝癌细胞株HepG2中的表达

目的:观察L-选择素在人正常肝细胞株(L-02)和人肝癌细胞株(HepG2)中的表达。方法:应用RT-PCR法检测肝癌细胞株HepG2、正常肝细胞株L-02中L-选择素mRNA表达情况;应用流式细胞术检测HepG2细胞、L-02细胞中L-选择素的蛋白表达。结果:L-选择素mRNA在HepG2细胞中有表达,而在正常肝细胞株L-02细胞中无表达;HepG2细胞L-选择素的表达量为(10.09±0.51)%,而在L-02细胞中则无表达。结论:L-选择素在HepG2细胞中有表达而在L-02细胞中不表达。     

游离脂肪酸引起肝细胞胰岛素抵抗及其机制的研究

目的研究游离脂肪酸（FFA）诱导人肝癌细胞（HepG2）引起胰岛素抵抗及其分子机制.方法应用含0.25 mmol/L的软脂酸（PA组）或100 nmol/L胰岛素（Ins组）与不含软脂酸和胰岛素（正常组）的DMEM培养基培养HepG2细胞24 h,正常组和PA组中又分加与不加磷酯酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂Wort-mannin两个亚组,100 nmol/L胰岛素刺激后分别测定培养液中的葡萄糖浓度、细胞内的糖原含量、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）活性及胰岛素受体底物2（IRS-2）的蛋白水平.结果PA组和Ins组培养液中葡萄糖含量显著高于正常组（P＜0.01）,而细胞内糖原含量显著减少（P＜0.01）;PA组胰岛素刺激的PEPCK活性显著高于正常组（P＜0.01）,IRS-2蛋白水平显著低于正常组（P＜0.01）.无论应用Wortmannin处理与否,PA组中的PEPCK活性及IRS-2蛋白水平差异无显著性（P＞0.05）,而正常组中PEPCK活性及IRS-2蛋白水平的差异有显著性（P＜0.01）.结论加0.25 mmol/L的软脂酸培养24 h后,肝细胞可能由于胰岛素信号转导障碍产生胰岛素抵抗;胰岛素抵抗的形成可能与IRS-2及PI3K相关分子缺陷有关.     

杨梅素抗肝肿瘤细胞HepG2作用及其机制的研究

目的探讨杨梅素对肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡作用及其作用机制。方法应用甲基噻唑蓝（MTT）比色法,测定杨梅素对HepG2细胞株活性的影响,检测其抑制HepG2细胞株的时间效应和剂量效应;应用形态学观察、HE染色和AnnexinV—PI流式检测,测定杨梅素对HepG2细胞的凋亡作用。并进行细胞周期的分析．最后对杨梅素对细胞凋亡相关的蛋白p34^mk-2、CyclinB1、Bcl-2和PARP的影响进行了研究。结果杨梅素对HepG2细胞具有生长抑制及诱导凋亡作用,且呈时间依赖和剂量依赖性,表现为：细胞G2/M期阻滞,出现明显的凋亡峰;Bliss法测定杨梅素对HepG2细胞的IC如值为（32．18±2．31）μmol/L,30、50μmol.L杨梅素对GJM期细胞比率分别为（41．32±0．90）％和（80．07±0．90）％,差异有统计学意义（P〈0．05）;p34^ok-2之蛋白的表达量未见变化,而CyclinB1蛋白的表达量明显上升,Bcl-2蛋白的表达量锐减,并诱导半胱氨酸蛋白酶Caspase-3的底物PARP蛋白（113kD）水解为89kD的特异性水解产物。结论杨梅素通过激活Caspase家族蛋白实现对肝癌细胞HepG2细胞株的增殖抑制及诱导凋亡作用。     

人肝癌顺铂耐药细胞株 HepG2的建立

目的：体外建立顺铂（ DDP）诱导的人肝癌耐药细胞株（ HepG2／DDP）,研究其生物学特性。方法以采用药物大剂量冲击结合低剂量持续诱导方法诱导HepG2细胞株,建立人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2／DDP;MTT法检测顺铂对HepG2和HepG2／DDP的半数抑制浓度（IC50）和耐药系数（RI）,绘制细胞生长曲线及计算细胞倍增时间,并用流式细胞仪（ FCM ）检测细胞周期。结果历时5个月成功建成HepG2／DDP细胞株,MTT法检测DDP对HepG2的IC50为1．35μg／ml,HepG2／DDP的IC50为23．35μg／ml,RI达17生长曲线表明其增殖速度明显低于亲本HepG2人肝癌细胞,且倍增时间增加;细胞周期分析发现相对于亲本HepG2细胞,G0／G1期细胞减少、S期与G2／M期细胞增多。结论成功建立稳定耐药细胞株HepG2／DDP。     

半夏醇提取物对人肝癌HepG2细胞增殖与细胞周期的影响

目的:探讨半夏醇提物对人肝癌细胞(HepG2)的抑制作用及其机制。方法:用半夏醇提物(PTE)与体外培养的人肝癌HepG2细胞共培养,采用MTT比色法测定不同剂量组PTE对HepG2细胞生长的影响;采用流式细胞术分析PTE对其细胞周期分布的影响;免疫细胞化学法观察细胞周期调控相关蛋白cyclin D1、c-myc和β-catenin的表达。结果:PTE作用24 h、48 h和72 h对HepG2细胞的增殖均有显著抑制作用(P     

斑蝥酸钠对肝癌细胞HepG_2增殖抑制作用的研究

目的研究斑蝥酸钠（cantharidin,CTD）对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用和机制。方法采用免疫组化染色法（I mmunohistochemistry,I H）和33528染色法观察斑蝥酸钠对HepG2细胞增殖的抑制作用,并观察肝癌细胞凋亡的形态学变化及不同剂量斑蝥酸钠对HepG2细胞凋亡率的影响。结果 1.0 mg/L以上斑蝥酸钠对人肝癌细胞HepG2的增殖有显著抑制作用（P〈0.01）,最高凋亡率（47.24%）出现于高剂量组（5.0 mg/L）。结论斑蝥酸钠对人肝癌细胞HepG2的增殖有显著抑制作用,是治疗肝癌较理想的药物之一。