白介素—1受体相关激酶—2反义寡核苷酸对IL—1和TNF诱导PGI …

目的：研究白介素－１受体相关激酶－２（ＩＲＡＫ－２）反义寡核苷酸对白介素－１（ＩＬ－１）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）诱导前列腺环素（ＰＧＩ２）合成的不同影响。方法：白介素－１受体相关激酶－２反义寡核苷酸导入脐静脉内皮细胞以阻断白介素－１受体相关激酶－２的表达,用白介素－１及肿瘤坏死因子刺激细胞后,用免疫ＥＬＩＳＡ方法检测ＰＧＩ２的合成。结果：白介素－１受体相关激酶－２反义寡核苷酸可显著降低白介素－１诱     

LPS及IL-3对人骨髓基质细胞分泌IL-6的调节效应

骨髓造血微环境主要由基质细胞和细胞外基质（ＥＣＭ）构成,基质细胞包括多种细胞成分,如成纤维细胞、内皮细胞、脂肪细胞、巨噬细胞等,可分泌多种造血调控因子,调节造血干、祖细胞的增殖分化和自我更新［１］。基质细胞可以合成ＩＬ６参与造血调控,已为许多学者证实［２］。近来报道显示,ＬＰＳ和ＩＬ３可以促进基质细胞合成ＩＬ６、ＩＬ８、ＳＣＦ等,进而促进造血干、祖细胞的增殖分化［２,３］。我们拟建立人骨髓基质细胞层,探讨各种条件下ＩＬ６的合成情况。１　材料与方法１．１　材料　试剂：ＬＰＳ北京邦定公司。…     

蓖麻毒素诱导U937细胞分泌IL-6和IL-8的作用

目的：进一步研究蓖麻毒素是否具有诱生Ｕ９３７细胞分泌细胞因子作用。方法：采用ＭＴＴ法检测了蓖麻毒素对Ｕ９３７细胞的毒性，并采用ＥＬＩＳＡ法测定细胞２上清中的Ｉ－６和ＩＬ－８。结果：蓖麻毒素对Ｕ９３７细胞的生具有时间效应及剂量效应。随着作用时间的延长。诱生２种细胞因子的量逐渐增加；随蓖麻毒素剂量的增加，诱生２种细胞因子的量均减少。结论：蓖麻毒素诱导２种细胞因子的产生为其抗癌应用或其它作用提供理论依据     

冠心病患者TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8的变化研究

目的 :对冠心病患者血清中肿瘤坏死因子 (TNF -α)、白介素 - 1β(IL - 1β)、白介素 - 6 (IL - 6 )、白介素 - 8(IL - 8)含量进行分析 ,以探讨它们在冠心病发病过程中的意义。方法 :研究对象为正常对照组 36例 ,稳定型心绞痛组 32例 ,心肌梗塞组 39例 ,采用化学发光酶分析法检测其血清TNF -α、IL - 1β、IL - 6、IL - 8水平。结果 :与正常组比较 ,冠心病患者中TNF -α、IL - 1β、IL - 6、IL - 8水平均有不同程度升高 ,尤以心肌梗塞组升高明显 ,其差别有显著临床意义。心绞痛组TNF -α(p <0 0 5 ) ,IL - 6 (p <0 0 1) ,IL - 8(p <0 0 5 )。心肌梗塞组TNF -α(p<0 0 1) ,IL - 1β(p<0 0 5 ) ,IL - 6 (p <0 0 0 1) ,IL - 8(p <0 0 0 1)。 结论 :TNF -α、IL - 1β、IL - 6、IL- 8与动脉粥样硬化和冠心病的发生有密切关系 ,这些细胞因子可通过相互诱导、相互协同共同参与冠心病的发生、发展过程     

白塞病患者血清IL-1β、IL-2与TNFα水平的变化

研究白塞病患者血清中IL - 1β、IL - 2、TNFα水平的变化及其临床意义 ,用RIA检测了 16例完全型、31例不完全型白塞病患者和 34名健康对照组血清中IL - 1β、IL - 2与TNFα含量的变化。结果表明 ,完全型和不完全型白塞病患者血清IL - 1β、IL - 2与TNFα含量明显高于对照组 (P <0 .0 1)。提示 :白塞病患者血清中过高的IL - 1β、IL - 2、TNFα与其发病有关     

睾丸局部感染时Sertoli细胞IL-1、IL-6、TGF-β和FasL的变化

目的：研究大鼠Sertoli细胞在抗感染中的免疫调节作用。方法：以溶脲脲原体(UU)和致病性大肠杆菌(E．coli)直接注入大鼠膀胱模拟上行性感染的途径，分别在1周、2周、3周处死大鼠，分离取得睾丸组织作组织切片观察病理变化及从大鼠睾丸组织中分离获得高纯度的Sertoli细胞，用免疫组化方法比较正常组与UU感染组、致病性大肠杆菌组之间：IL-1,IL-6,TGF-β和FasL表达的差异。结果：与正常组相比，UU和E .coli感染后，其IL-1分泌升高，IL-6分泌下降，TGF-β分泌升高，FasL表达也升高，结论：大鼠Sertoli细胞在抗感染免疫中，可通过IL-1，IL-6，TGF-β和FasL的表达来发挥免疫调节作用。     

白介素-1受体相关激酶-2反义寡核苷酸对IL-1和TNF诱导PGI2合成的不同影响

目的研究白介素-1受体相关激酶-2(IRAK-2)反义寡核苷酸对白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)诱导前列腺环素(PGI2)合成的不同影响。方法白介素-1受体相关激酶-2反义寡核苷酸导入脐静脉内皮细胞以阻断白介素-1受体相关激酶-2的表达,用白介素-1及肿瘤坏死因子刺激细胞后,用竞争ELISA方法检测PGI2的合成。结果白介素-1受体相关激酶-2反义寡核苷酸可显著降低白介素-1诱导的PGI2合成,此效应强度存在时间和浓度依赖性,但白介素-1受体相关激酶-2反义寡核苷酸对肿瘤坏死因子诱导的PGI2合成无影响。结论白介素-1受体相关激酶-2反义寡核苷酸对IL-1和TNF诱导PGI2合成有不同影响。白介素-1受体相关激酶-2在IL-1诱导的PGI2合成中起重要作用。     

IL-6、IL-1β、TNFα对人胎大脑神经细胞c-fos、c-jun的表达调控

目的：探讨ＩＬ－６、ＩＬ－１β、ＴＮＦα在大脑神经细胞体外发育过程中对原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ的表达调控规律。方法：应用人胎大脑神经细胞无血清原代培养模型。通过ＤＮＡ－ＲＮＡ斑点杂交,采用计算机图像分析系统测定杂交点的平均灰度值。结果：ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ的表达均在ＩＬ－６、ＩＬ－１β、ＴＮＦα作用后１５～３０ｍｉｎ开始上调,１ｈ达高峰,而后下降。结论：这些细胞因子均在转录水平上促进神经细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ的表达。为分析其生物学效应的分子机制奠定基础。     

IL-6表达增高及TNFα下调参与bcl-2反义寡脱氧核苷酸诱导的细胞凋亡的调控

目的 探讨bcl-2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸（antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,AS-PS-ODN)诱导细胞凋亡的调控机理。方法 合成bcl-2 AS－PS－ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI－H446，流式细胞仪DNA倍体分析和脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡；多重半定量逆转录－聚合酶链反应检测bcl-2 AS－PS－ODN处理前后bcl-2，c-myc,survivin,bax,s100A2,TNFα，TGFβ1及IL－6等基因mRNA表达的变化。结果 bcl-2 AS－PS－ODN能够诱导NCI－H446细胞凋亡，随着bcl-2 mRNA水平的下降，IL－6表达增高72．71％（P＜0．05），TNFα表达下调65．90％（P＜0．05），而c-myc,survivin,bax,s100A2,TGFβ1等基因的表达无明显变化。结论 IL－6表达增高及TNFα下调参与bcl-2反义寡脱氧核苷酸所诱导的细胞凋亡的调控。     

PGE2抑制LPS诱导腹腔巨噬细胞产生MIP-1α和MIP-1β

目的:在离体情况下,研究PGE2能否抑制脂多糖(LPS)诱导腹腔巨噬细胞MIP1α和MIP1β的产生。方法:制备腹腔巨噬细胞,应用夹心酶联免疫分析法(SandwichELISA)检测MIP1α和MIP1β的浓度,并应用实时逆转录聚合酶链反应(realtimeRTPCR)法检测MIP1α和MIP1βmRNA的表达。结果:PGE2抑制腹腔巨噬细胞产生MIP1α和MIP1β,呈时间依赖性和浓度依赖性,抑制发生在mRNA和蛋白质水平,PGE2对巨噬细胞的抑制作用通过EP4和EP2介导。结论:PGE2能抑制MIP1α和MIP1β产生而调节免疫反应。     

IL—1受体相关激酶1和2协同调控IL—1诱导的NF—？…

目的 研究细胞介素１受体相关激酶１（ＩＲＡＫ－１）和ＩＲＡＫ－２在白细胞介素１（ＩＬ－１）诱导核因子－кＢ（ＮＦ－кＢ）活化中的作用。方法 Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导反义和ＩＲＡＫ－１寡核苷酸和反义ＩＲＡＫ－２寡核苷酸转染ＨｅｐＧ２细胞。用逆转录ＰＣＲ法检测ＩＲＡＫ－１ ｍＲＮＡｔ ＩＲＡＫ－２ ｍＲＮＡ表达水平,以夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＮＦ－кＢ的活化。结果 （１）反义ＩＲＡＫ－１寡核苷酸和反义ＩＲ     

TF口服液诱导T细胞IL-2、IL-6及CD分子的表达

转移因子 (ｔｒａｎｓｆｅｒｆａｃｔｏｒ,ＴＦ)是介导细胞免疫的重要因子之一 ,其ＴＦ口服液具有协同诱导人Ｔ淋巴细胞ＩＦＮ γ和ＨＬＡ ＤＲ/ＤＱ分子的表达[1] ,促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能 ,促进人Ｔ淋巴细胞增殖发挥良好的免疫调节作用[2 ] 。为进一步了     

NF-κB"decoy"寡核苷酸对LPS诱导巨噬细胞TNF-α和IL-6表达的影响

目的 :研究NF -κB“decoy”寡核苷酸 (ODNs)对LPS诱导小鼠巨噬细胞株J774 1细胞的TNF -α和IL - 6表达的影响 ,探讨F -κB“decoy”寡核苷酸防治LPS诱导急性炎性损伤的可行性。方法 :巨噬细胞株J774 1细胞接种于 6孔板中 ,4× 10 5个细胞/孔 ,37℃、5 %CO2 培养过夜 ,待细胞汇合至 80 % ,用无血清、无抗生素 16 4 0培养液洗涤细胞两次后随机分为 4组。内毒素刺激组 :用含 1mg/LLPS的培养液刺激 ,不加治疗 ;NODN治疗组 :用含 1mg/LLPS的培养液刺激 3h ,然后用脂质体介导 1μmol/L(终浓度 )NF -κB“decoy”ODNs治疗 ;SO…     

共刺激分子B7-1与IL-6协同诱导T细胞活化的研究

目的：探讨Ｂ７－１单独或者与ＩＬ－６联合体外诱导Ｔ细胞活化的能力。方法：在混合淋巴细胞肿瘤细胞培养（ＭＬＴＣＳ）后,测定淋巴细胞增殖指数和ＣＴＬ杀伤活性。结果：Ｂ７－１＾＋的Ｂ１６细胞能够较有效地刺激淋巴细胞增殖,诱导特导ＣＴＬ杀伤活性,当与ＩＬ－６结合时效更加显著。结论：Ｂ７－１基因在肿瘤细胞中表达可增强其免疫原性在体外有效诱导Ｔ细胞活化;在此过程中ＩＬ－６与Ｂ７－１分子存在协同效应。     

2型糖尿病患者血清IL-1β、IL-6水平检测

近年来研究代谢类疾病的发病机理发现，代谢类疾病的发生是一个慢性炎症过程。2型糖尿病的发生同样如此。本文对反映2型糖尿病患者炎症病变的白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）进行检测，结果报道如下。     

Aβ1-42通过TLR4影响小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症因子IL-1β和IL-6释放

目的探讨Aβ1-42对小鼠巨噬细胞RAW264.7向炎症性细胞转变的影响及机制。方法 RAW264.7细胞分别经过LPS与Aβ1-42刺激,RT-PCR和Western blot检测GM-CSF受体CSF2RA和CSF2RB的表达水平,ELISA检测在Aβ1-42刺激下的炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平;采用TLR4抑制剂分别干预LPS和Aβ1-42处理后的RAW264.7,检测CSF2RA与CSF2RB受体的表达变化,炎症因子IL-1β、IL-6的释放。结果 RAW264.7细胞表面GM-CSF受体CSF2RB在LPS与Aβ1-42处理后表达水平均比对照组升高(P0.05),而CSF2RA表达没有显著性改变;炎症因子IL-6与IL-1β在Aβ1-42刺激后分泌增加,同时TLR4抑制剂抑制LPS和Aβ1-42对细胞的刺激。结论 Aβ1-42通过TLR4促进小鼠RAW264.7细胞炎症因子IL-6、IL-1β的分泌。     

广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2—1的表达

将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2—1(APLA2—1)基因克隆至表达载体pET28a( )，转化入大肠杆菌BL21，经过诱导，SDS—PAGE检测，重组质粒pET28a—APLA2—1在18 KD有一明显的表达条带，表达产物APLA2—1约占细菌总量30％，并以包涵体的形式存在，将产物变复性后用Sephadex G—75纯化，产物经过SDS—PAGE检测只有单一条带，通过Western—blot检测，证实纯化产物是酸性磷脂酶A2、对表达的APLA2进行酶活性和药理活性的测定、至此我们在大肠杆菌中表达了广西眼镜王蛇毒APLA2，这将为以后对PLA2的结构与功能的研究打下了良好的基础。     

包载缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸纳米粒子的制备和特性评价

目的制备一种包载缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)纳米粒子,并评价其理化特性。方法应用复乳化-溶剂挥发法制备包载HIF-1α反义寡核苷酸PLGA纳米粒子,并固定其他因素,选择不同的聚乙烯醇(PVA)浓度(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)和乳化速度(17 500、21 500、24 000 r/min),观察其对制备的纳米粒子粒度和载药量的影响;应用电子显微镜和粒度测定仪对制得的纳米粒子进行形态观察和粒径测定;应用高效液相色谱法测定纳米粒子的载药量和包封率并进行体外释药实验。结果制得的载HIF-1α反义寡核苷酸PLGA纳米粒子外观呈圆形或介于圆形与椭圆形之间,表面光滑圆整,粒径分布范围较窄,平均粒度为320 nm(标准差50 nm),纳米粒子载药量为(0.930±0.015)%,包封率为(79.14±1.78)%;纳米粒子中HIF-1α反义寡核苷酸在24 h突释期内累积释放率为31.2%,10 d内呈缓慢线性稳定性释放,释放量达81.5%。结论应用复乳化-溶剂挥发法制备包载HIF-1α反义寡核苷酸PLGA纳米粒子,方法实用有效,工艺稳定,重复性好。     

睾丸局部感染时Leydig细胞IL-1、IL-6、TGF-β和Fas、FasL转录水平的变化

目的：研究Leydig细胞在抗感染中的免疫调节作用。方法：以溶脲脲原体（UU）直接注入大鼠膀胱拟上行性感染的途径，制备大鼠睾丸感染的动物模型，分别在UU感染的1周、2周、3周处死大鼠，分离取得睾丸组织，观察组织的病理变化，并分离获得高纯度的Leydig细胞，抽提总RNA，用RT-PCR方法比较UU感染组与正常对照组之间IL-1、IL-6、TGF-β和Fas、FasL mRNA表达的差异。结果：与正常对照组相比，UU感染的大鼠睾丸组织发生明显的病理改变，IL-1、IL-6、TGF-β均升高，Fas表达下降、FasL表达升高。结论：大鼠Leydig细胞在抗感染免疫中，可通过改变IL-1、IL-6、TGF-β和Fas、FasL转录表达格局来发挥抗UU的免疫调节作用。     

血管活性肠肽对leydig细胞分泌的IL-1、IL-6和TGF-β的影响

目的研究血管活性肠肽（VIP）对感染时的leydig细胞分泌的细胞因子IL-1、IL-6和TGF-β的影响。方法SD大鼠的睾丸经Ⅱ型胶原酶消化、过滤及Pereoll分离获得高纯度、高活率的leydig细胞,经不同剂量的VIP作用后,再感染溶脲脲原体（UU）,观察在UU感染时,不同剂量VIP对leydig细胞分泌的IL-1（MTT法）、IL-6、TGF-β（ELISA法）的影响。结果UU感染时,VIP对leydig细胞分泌的细胞因子有明显的影响：能促进leydig细胞分泌IL-1（活性）、抑制IL-6（含量）分泌;同时既能促进（高剂量VIP）又能抑制（低剂量VIP）TGF-β分泌。结论在UU感染时,VIP能改变大鼠leydig细胞细胞因子的分泌格局,表明VIP在抗感染免疫中具有一定的免疫调节作用。