全自动生化分析仪理论K值的检查和校正

本文介绍一种在已糖激酶法测定葡萄糖的反应体系中，加入已知摩尔浓度的葡萄糖标准液，测定反应最终产物之一，ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ＋Ｈ＋在３４０ｎｍ的摩尔吸光系数来检查和校正ＴｅｃｈｎｉｃｏｎＲＡ－１０００或ＩＬＭｏｎａｒｃｈ－２０００全自动生化分析仪在３４０ｎｍ波长理论Ｋ值的方法。实验测得ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ＋Ｈ＋在ＲＡ－１０００和Ｍｏｎａｒｃｈ－２０００３４０ｎｍ波长的摩尔吸光系数分别为６．１９６６×１０３和６．２０８２×１０３。实际Ｋ值和理论Ｋ值之间的误差分别为０．３８％和０．１９％，均可忽略不计，无需校正。     

高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液相色谱测定孕妇尿内总雌三醇的方法，尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ３，蒸于乙醚，残留物用流动相重组，标本成分用Ｃ８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１．２％－１．５％批间ＣＶ分别为２．３％和４．０％本法在４．３３－１３８．７１μｍｏｌ／Ｌ（１．２５－４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．８μｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

导数同步荧光法测定血清色氨酸

为了排除酷氨酸、苯丙氨酸对荧光法测定色氨酸的干扰，建立了色氨酸导数－同步荧光测定法。结果表明，当△λ为９０ｎｍ时，色氨酸的一个阶导数－同步荧光峰在２８５ｎｍ时不受酪氨酸、苯丙氨酸的干扰；色氨酸浓度在０～４００μｍｏｌ／Ｌ与导数－同步荧光值成线性，Ｙ＝０．２８７Ｘ±０．０９６，ｒ＝０．９９９；批内、批间ＣＶ分别为２．５７％、３．４２％；回收率９３．８％～９７．２％；血红蛋白含量在０．２５～５．０ｇ／     

导数—同步荧光光谱法测定尿液肾上腺素和去甲肾上腺素

为了解决肾上腺素（Ｅ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）氧化产物的荧光光谱严重重叠难题，将同步荧光与导数光谱两种技术结合起来用于尿液Ｅ、ＮＥ测定。结果发现，在激发波长与发射波长相差Δλ＝４０ｎｍ时获得的Ｅ、ＮＥ二阶导数－同步荧光光谱中，４５０ｎｍ处Ｅ的荧光强度的导数信号不受ＮＥ的干扰；４３２ｎｍ处，ＮＥ的荧光强度的导数信号不受Ｅ的干扰，Ｅ、ＮＥ含量在１～２００ｎｇ／ｍｌ范围内成线性关系；最低检测限为０．５ｎｇ／ｍｌ；批内ＣＶ３．２１％～３．９５％，批间ＣＶ４．２６％～５．１０％，Ｅ和ＮＥ的回收率分别为９４．９％～９５．４％、９４．７％～９６．３％；该法操作简单、快速、成本低廉，适合于％批量测定，是测定尿液Ｅ、ＮＥ较为理想的常规方法。     

偶氮胂Ⅲ比色法测定血清（浆）钙

对偶氮肿Ⅲ（ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ）比色法测定血清（浆）钙的方法学作了系统研究。结果表明：反应混合液的吸收光谱呈Ｍ型，两个吸收峰分别为６００ｎｍ和６５０～６６０ｎｍ，但以６６０ｎｍ为适。试剂中ＡｒｓｅｎａｚｏＩＩＩ的最适浓度为１５０μｎｏｌ／Ｌ，试剂空白Ａ（吸光度曾称光密度ＯＤ）受ｐＨ的影响，当ｐＨ为７．０　时Ａ值最低。本法批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．８％～２．９６％、３．１５％～３．３７％，平均回收率为９９．３％，线性高达６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１７Ａ。本法Ｙ与ＥＤＴＡ自动滴定法Ｘ比较：Ｙ＝１．００５９Ｘ－０．０１４１，ｒ＝０．９９８５、Ｐ＜０．００１、ｎ＝２０。Ｍｇ￣（２＋）、Ｃｕ￣（２＋）、Ｆｅ￣（２＋）、Ｚｎ￣（２＋），Ｈｂ、Ｂｉｌ均不干扰测定。     

紫外分光光度法对洗必泰含量的测定

在洗必泰有特征吸收峰的２５８ｎｍ波长下，以紫外分光光度法测定洗必泰含量．与高氯酸滴定法相比，对洗必泰量≤２１０μｇ的稀释液，测定误差为０．９％～４．７％．     

连续监测法测定胆红素氧化酶

为了建立连续监测法测定胆红素氧化酶活性的方法。该文以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ为缓冲体系，酶促反应的最适ｐＨ为８．２，底物浓度为３４μｍｏｌ／Ｌ，胆红素的最大吸收波长在４４０ｎｍ，摩尔吸光系数为５．６３×１０＾４Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１；在最佳条件下测定ＢＯＤ的线性范围是０－８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ〈３．８１％，批间ＣＶ〈４．６７％。     

血清冲胆汁酸酶法测定及其临床应用

为了建立酶法测定血清叫胆汁酸的方法并评价其临床应用价值，对试剂配方和测定条件进行优化实验，并作临床观察。结果，本法灵敏度：５０μｍｏｌ／Ｌ Ａ５００ｎｍ为０．１，线性为０－２００μｍｏｌ／Ｌ精密度；总ＣＶ〈６．０％，批内ＣＶ〈３．０％。本法和日本一化试剂的比较：Ｙ＝０．９７３Ｘ＋２．７２，ｒ＝０．９９６３。     

黄嘌呤氧化酶比色法测定血清无机磷

目的 建立一种酶学分析法以测定血清无机磷的含量。方法 血清无机磷与次黄嘌呤核苷在嘌呤核苷磷酸化酶（ＰＮＰ）的催化下，生成次黄嘌呤和核糖－１－磷酸，黄嘌呤氧化酶氧化次黄嘌呤生成尿酸和过氧化氢，过氧化氢与４－氨基安替比林和２，４，６－三溴－３－羟基苯甲酸在过氧化物酶的作用下，生成红色产物，在５０５ｎｍ有最大吸收。结果 线性范围为０．２５￣５．０ｍｍｏｌ／Ｌ，批内和批间平均变异分别为１．１７％和２．７９     

胸水中多胺的高效液相色谱测定

本文采用丹酰氯试剂作为柱前衍生剂，用反相高效液相色谱法检测胸水中多胺的浓度。实验条件：荧光激发波长３４０ｎｍ，发射波长５１５ｎｍ。液动相为甲醇－水，本法测得多胺的回收率为：腐胺９３％￣１０７％，精脒８９％￣１０３％，精胺９８％￣１０５％。变异系数分别为：腐胺７．４％￣９．５％，精脒４．３％￣６．１％，精胺３．３％￣４．２％，方法稳定，可靠。     

薄层扫描法测定血浆中盐酸氟桂利嗪浓度及药物动力学

血浆中盐酸氟桂利嗪经硼酸缓冲液酸化后，正戊烷－异丙醇（９８：２）提取其原型，加酸使成盐溶于无机相中，再加碱后用二氯甲烷提取，样品点于硅胶ＧＦ２５４薄层板上，以环己烷－丙酮－氯仿（９：３：５）为展开剂。氟桂利嗪在２５４ｎｍ紫外灯下呈紫色斑点，Ｒｆ＝０．５４，于ＣＳ－９３０薄层扫描仪上测定，λｓ＝２１５ｎｍ、λｇ＝３１０ｎｍ，线性范围０．３￣８μｇ，平均回收率９０．０２％。用此法测定了氟桂利嗪血药浓度     

nm23—H,p53的表达与大肠癌浸润转移关系的研究：———附128例分析

应用ＳＰ免疫组织化学技术检测了１２８例大肠癌标本中的ｎｍ２３－Ｈ１,ｐ５３的表达情况,并探讨它们的表达与肿瘤浸润转移的关系,结果显示大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１,ｐ５３的表达分别为７３．４％,５３．１％。ｎｍ２３－Ｈ１的表达与淋巴细胞转移有关（Ｐ〈０．０２５）,Ｐ５３的表达与肿瘤浸润转移有关（Ｐ〈０．０５）。提示ｎｍ２３－Ｈ１主要作用于大肠癌转移过程,Ｐ５３的表达在肿瘤浸润转移及细胞增殖中有重要作用。     

nm23-H1,p53的表达与大肠癌浸润转移关系的研究--附128例分析

应用ＳＰ免疫组织化学技术检测了１２８例大肠癌标本中的ｎｍ２３－Ｈ１,ｐ５３的表达情况,并探讨它们的表达与肿瘤浸润转移的关系,结果显示大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１,ｐ５３的表达分别为７３．４％,５３．１％。ｎｍ２３－Ｈ１的表达与淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０２５）,ｐ５３的表达与肿瘤浸润转移有关（Ｐ＜０．０５）。提示ｎｍ２３－Ｈ１主要作用于大肠癌转移过程,ｐ５３的表达在肿瘤浸润转移及细胞增殖中起重要作用。     

酶偶联法测定血清血管紧张素转换酶

目的 建立一种测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的酶偶联法，方法 血清与底物马尿酸双甘肽（Ｈｉｐ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）混合温育３０分钟，生成马尿酸（Ｈｉｐ）与双甘肽（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）再加入Ｌ－γ－谷氨酰－３－羧基－４－硝基苯胺（ＧＧＣＮ）和γ－谷氨酰基转移酶（ＧＧＴ），催化ＧＧＣＮ与Ｇｌｙ－Ｇｌｙ偶联，产生的３－羧基－４－硝基苯胺于４１０ｎｍ波长测定其吸收度，结果 当底物ｐＨ８．０，ＧＧＣＮ１．０ｍｍｏｌ     

酶循环法测定血清总胆汁酸

采用氧化型β－硫烟酰胺腺苷二核苷酸（Ｔｈｉｏ－ＮＡＤ）底物酶循环法测定血清总胆汁酸（ＴＢＡ）,对其方法学进行初步研究。该法灵敏度：试剂空白△Ａ４０５ｎｍ（１ｃｍ）０．００４／ｍｉｎ;５０μｍｏｌ／Ｌ△Ａ４０５ｎｍ（１ｃｍ）０．０５０／ｍｉｎ;平均回收率９９．２％;线性０￣１５０μｍｏｌ／Ｌ;精密度：批内ＣＶ〈１．０％;批间ＣＶ〈４．５％;该法（Ｙ）和偶联黄递酶比色法（Ｘ）比较：Ｙ＝０．８８Ｘ－１．     

比色法快速检测血清鸟嘌呤酶活性

血清鸟嘌呤酶的测定是反映肝细胞功能受损的灵敏而特异的指示。本法采用８－氮鸟嘌呤为基质，用测定氨生成量法，直接用酚一次氯酚盐反应，在６３０ｎｍ比色测定血鸟嘌呤酶活性。该法线性范围为０－４８．４Ｕ／Ｌ，最适ｐＨ６．４，鸟嘌呤米氏常数（Ｋｍ）为０．１７ｍｍｏｌ／Ｌ。高低鸟嘌呤酶活力的批内变速，反应灵敏，呈色稳定。１２０名健康成人鸟嘌活性结果呈正态分布，９５％参考值范围是０－８．００Ｕ／Ｌ。对２００名不同     

3，5－二氯邻羟基苯磺酸钠的合成及其临床应用

目的制备３，５－二氯邻羟基苯磺酸钠（ＤＣＨＢＳ）以取代Ｔｒｉｎｄｅｒ′ｓ反应中所用的苯酚及四氯酚。方法２，４－二氯苯酚和浓硫酸在１００℃进行磺化反应，制得ＤＣＨＢＳ；将其和过氧化物酶、尿酸酶、４－氨基氨替比林等组成尿酸检测试液，进行灵敏度、精确度、回收率、干扰试验、稳定性考查，并与苯酚和四氯酚法及与进口试剂进行对比，作相关试验。结果ＤＣＨＢＳ使用浓度为６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，检测波长为５１０ｎｍ，尿酸浓度在２４０ｍｇ／Ｌ范围内线性关系良好，检测极限５ｍｇ／Ｌ，高、中、低浓度的质控血清，其批内变异系数分别为１．１０％，１．６８％和２．３０％；批间变异系数分别为３．２０％，１．２０％和２．０７％。回收率为９９．８％～１００．７％，检测范围５～２４０ｍｇ／Ｌ，当血清中胆红素含量小于６１．８ｍｇ／Ｌ，维生素Ｃ小于１５ｍｇ／Ｌ时，用该试剂测定尿酸含量误差小于５％；该试剂与进口试剂相关试验γ＝０．９９４５。结论合成的ＤＣＨＢＳ试剂，完全可以替代苯酚和四氯酚，用于尿酸、胆固醇、甘油三酯等多种临床生化项目检测中     

偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究

本文对偶氮氯磷Ⅲ（ＣｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｎａｚｏⅢ）比色法测定血清钙的实验方法作了系统性研究。结果表明：显色剂中偶氮氯磷Ⅲ浓度以１２０μｍｏｌ／Ｌ为宜，反应最适ｐＨ为２．８～３．２，最佳检测波长为６２０ｎｍ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１６４Ａ，线性为４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．０８％和２．２６％，平均回收率为１００．２％。本法（Ｙ）与ＡＡＳ法（Ｘ１）及ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ法（Ｘ２）结果比较：Ｙ＝０．９８５６Ｘ１＋０．０３７０、ｒ＝０．９９１２，Ｙ＝０．９５４０Ｘ２＋０．１３６５、ｒ＝０．９８８７．溶血、脂血、黄疸不干扰测定，当标本中Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋分别达５ｍｍｏｌ／Ｌ、２ｍｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ时也不影响测定结果。     

低能量铜蒸气激光对脐带血造血细胞的增殖作用

应用三组不同波长的低能量铜蒸气激光照射脐带血造血干／祖细胞，结果显示：经５１０．６ｎｍ（绿光）及５７８．２ｎｍ（黄光）激光照射的二组脐血造血细胞，经体外培养，造血细胞集落（ＧＭ－ＣＦＵｃ）较对照组显著增多（Ｐ＜０．００１－０．０２），而经这两种波长激光同时混合照射的脐血造血细胞（混合光组）培养后增殖不显著（Ｐ＞０．０５）。提示低能量铜蒸气激光对脐带血造血细胞有显著增殖作用，并与其对胎鼠和人胎骨髓造     

用Triton X－100作加速剂测定胆红素

本文应用Ｔｒｉｔｏｎｘ─１００作为加速剂，利用重氮试剂配制成单一测定Ｔ．Ｂｉｌ试剂。该试剂能适用于自动生化分析仪和手工测定Ｂｉｌ，最大吸收波长５４８ｎｍ，摩尔吸光系数ε＝７１．６×１０￣３，胆红素在３０７．８μｍｏｌ／Ｌ内线性良好，平均回收率１００．８５％，批内ＣＶ＝１．１０４％，血清中Ｈｂ≥５ｇ／Ｌ时，ＴＧ≥８ｍｍｏｌ／Ｌ时对Ｂｉｌ测定产生明显影响。经与Ｔｒａｃｅ试剂实验对照，γ＝０．９９８７．ｔ＝０．０２９４，Ｐ＞０．０５。γ＝０．９２２２．ｔ＝０．０９１．Ｐ＞０．０５。