树突状细胞在肿瘤免疫治疗中的作用

现代肿瘤疫苗战略是建立在由肿瘤特异抗原细胞毒T细胞(CTL)介导的免疫应答在抗肿瘤过程中起主导作用的这一原则[1]基础上的。肿瘤免疫应答并不是由肿瘤直接传递抗原给T细胞,而是要先把肿瘤抗原递呈至一种特殊的细胞——专职抗原递呈细胞(APC),如树突状细胞(DC),递呈抗原给T细胞,使其能识别肿瘤细胞,从而消灭肿瘤。     

树突状细胞与肿瘤的免疫治疗

肿瘤免疫治疗作为恶性肿瘤综合治疗的重要手段日益受到人们的重视和关注，在几种免疫治疗中，利用以细胞为基础的疫苗进行的主动免疫疗法，近年来正逐渐成为免疫学家和肿瘤学家的研究热点，细胞疫苗的高免疫原性可以诱导宿主产生特异性的抗肿瘤免疫，阻止肿瘤的形成、生长、扩散和复发，甚至消除肿瘤。     

前列腺素E2对小鼠树突状细胞迁移能力及抗乳腺癌免疫作用的影响

目的观察前列腺素E2（PGE2）对体外培养的乳腺癌抗原负载小鼠树突状细胞（DC）迁移能力及抗乳腺癌免疫作用的影响.方法用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和重组小鼠白细胞介素-4培养BALB/c小鼠骨髓来源DC,负载乳腺癌抗原后加入PGE2,进行表型、CCR7mRNA及蛋白、同种异体混合淋巴细胞反应、特异性淋巴细胞（CTL）杀伤活性测定.将TM40D接种于小鼠左侧胸壁皮下制作乳腺癌动物模型,1周后皮下接种PGE2组及对照组DC,观察肿瘤抑制状况.结果体外实验显示,PGE2不影响DC的刺激淋巴细胞增殖能力和同种异体特异性杀伤活性.与对照组DC相比,PGE2培养组DC的CD80、CD86阳性细胞数增多,CCR7mRNA和蛋白表达上调（P＜0.05）.体外趋化试验显示,PGE2使DC对其配体CCL19和CCL21反应性增强（P＜0.05）.在乳腺癌动物模型中,PGE2培养组DC抑制肿瘤生长作用优于对照组.结论PGE2可以通过促进DC成熟并促进其体内迁移能力,提高抗乳腺癌DC疫苗的功效.     

肋骨骨髓树突状细胞的诱导及在肿瘤免疫治疗中的应用前景

树突状细胞 (ＤＣｓ)是专业性抗原递呈细胞 ,在肿瘤免疫中起重要作用。在临床实验研究中 ,大多利用患者外周血干细胞诱导扩增ＤＣｓ,我们从肾癌患者手术切除的肋骨骨髓中获得ＤＣｓ ,对诱导方法及ＤＣｓ特性鉴定报告如下。材料与方法　ＧＭ ＣＳＦ为美国先灵葆雅药厂产品 ;ＩＬ 4和ＴＮＦ α由军事医学科学院生物工程所惠赠 ;ＣＤ80、ＣＤ86和ＣＤ1ａ纯化单抗为Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ公司产品 ;标记抗体ＣＤ45、ＣＤ14、ＣＤ4、ＣＤ8、ＣＤ3、ＨＬＡ ＤＲ为Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ公司产品。树突细胞的获得和培养 :从肋骨冲出的细胞 ,经密度梯…     

基于树突状细胞的前列腺癌的免疫治疗

近年来，肿瘤的免疫治疗日益受到人们的重视。其中树突状细胞(DC)更是成为研究热点。迄今为止，免疫治疗已应用于黑色素瘤和肾癌等肿瘤的治疗中。有关DC疫苗治疗前列腺癌的动物实验及临床应用已有大量文献报道。本文就有关方面的新进展进行综述。     

树突状细胞与泌尿系肿瘤免疫治疗研究进展

树突状细胞 (DC)是目前发现的功能最强的抗原提呈细胞。近来对DC在肿瘤治疗中的作用研究成为热点。本文对DC应用于泌尿系肿瘤免疫治疗方面的研究进行综述 ,包括DC的生物学特性、抗泌尿系肿瘤的机理与泌尿系肿瘤的发生发展的关系、DC与肿瘤耐受、各种形式肿瘤疫苗体外冲击致敏的DC诱导产生抗泌尿系肿瘤免疫反应功能等 ,并对DC在应用于临床治疗泌尿系肿瘤的可行性及其他一些注意事项进行探讨。     

树突状细胞与肿瘤免疫治疗研究进展(文献综述)

以树突状细胞 (DC)为基础的肿瘤免疫治疗日益受到人们重视 ,正逐步走入临床。本文就近年在DC对肿瘤抗原的提呈、肿瘤细胞对 DC成熟的影响、以 DC为基础的肿瘤免疫治疗方法以及 DC的回输途径等方面的研究进展作一综述     

树突状细胞与肿瘤免疫治疗研究进展（文献综述）

以树突状细胞（DC）为基础的肿瘤免疫治疗日益受到人们重视，正逐步走入临床。本文就近年 在LC对肿瘤抗原的提呈、肿瘤细胞对DC成熟的影响、以DC为基础的肿瘤免疫治疗方法以及DC的回输途径等方面的研究进展作一综述。     

树突状细胞肿瘤疫苗研究进展

人类肿瘤疫苗治疗的目标是诱导肿瘤特异性和长期的免疫应答,以清除体内肿瘤。树突状细胞(dendriticcells,DC)是一类专职的抗原提呈细胞,在诱导、调节、维持机体抗肿瘤免疫中起核心作用[1]。本文就DC的肿瘤疫苗研究进展作一综述。树突状细胞概述1.DC生物学特性人DC发育经历4个阶段:①骨髓干细胞;②在血液、淋巴液和淋巴样组织中循环的DC前体;③定居于组织中的未成熟DC;④次级淋巴样器官中的成熟DC。CD34+造血干细胞经粒鄄巨噬细胞集落刺激因子(GM鄄CSF)和肿瘤坏死因子(TNF)诱导可产生髓样DC、表皮朗格罕细胞和间质DC。表皮朗格罕…     

小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导培养及功能分析

目的:建立小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)体外培养和扩增方法,为以DCs为靶点的免疫治疗研究提供基础。方法:从C57BL/6小鼠股骨和胫骨中提取骨髓细胞,以含重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF,400U/ml)和IL-4(200U/ml)的RPMI 1640(含10%FBS)进行诱导培养,于培养第4天加入脂多糖(LPS)继续培养2d。利用倒置相差显微镜和透射电子显微镜观察细胞生长状态和超微结构,流式细胞术鉴定培养第6天时DCs纯度及免疫表型,流式细胞微球捕获芯片技术检测第2、4、6天培养上清中细胞因子IL-6、IL-10、巨噬细胞趋化因子-1(MCP-1)、干扰素-1(IFN-1)、TNF-α、IL-12p70含量。结果:重组小鼠GM-CSF和IL-4诱导培养小鼠骨髓细胞4d,加入脂多糖(LPS)继续培养2d,近90%细胞高表达DCs特征性标志物CD11c,高表达抗原提呈分子MHC-Ⅱ和共刺激分子CD86、CD80,具有典型的树突状形态学特征和分泌炎症性细胞因子IL-6、IL-10、MCP-1、TNF-α和IL-12p70的功能。结论:小鼠骨髓细胞以重组小鼠GM-CSF和IL-4体外诱导培养的DCs具有较高的纯度,保持了体内的形态学、免疫表型及功能特征。     

未成熟树突状细胞联合雷帕霉素诱导小鼠肤移植免疫耐受

状细胞组、联合组的皮肤移植物存活时间分别为(6.9±1.9)、(10.3±3.0)、(17.0±3.4)、(20.8±3.6)d.方差分析提示组间差异有统计学意义(P＜0.05);S-N-K检验提示各组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 供者骨髓来源未成熟树突状细胞可诱导小鼠皮肤移植免疫耐受;联合使用雷帕霉素可延长免疫耐受的持续时间.     

雷帕霉素对大鼠髓源性树突状细胞表型和功能的影响

目的 观察雷帕霉素(RAPA)对树突状细胞(DC)表型和功能的影响.方法 诱导分化Lewis大鼠骨髓源性DC,第6天同时加入脂多糖(LPS)和10μg／L或100 μg/L RAPA,48 h后检测共刺激分子、细胞凋亡、上清液白细胞介素(IL) -10和IL-12水平;混合淋巴细胞培养观察DC刺激Brown Norway大鼠T淋巴细胞增殖能力.结果 RAPA能抑制DC成熟,共刺激分子的上调显著受抑,细胞凋亡增加,100 μg/L RAPA组DC凋亡率达53％.DC在脂多糖作用下分泌IL-10、IL-12上升至( 1533±117)、(2575 ±58) ng/L,但同时加入100μg/L RAPA后,两者下降至(330±159)、( 245±63) ng/L.RAPA处理的DC对T淋巴细胞增殖有抑制作用.结论 雷帕霉素能抑制DC成熟并诱导其凋亡,RAPA处理的DC分泌细胞因子降低,且抑制T淋巴细胞增殖.     

抗原致敏树突细胞增强细胞因子诱导杀伤细胞抗胃癌的效应

目的 观察抗原致敏树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养体内外抗胃癌(SCC-7901)的效应.方法 取健康供者外周血体外诱导培养DC和CIK,应用噻唑蓝(MTT)法测定比较(每组n=3)单纯CIK(CIK组)、DC诱导CIK(DC-CIK组)和经胃癌抗原致敏的DC诱导CIK(抗原-DC-CIK组)体外对SGC-7901的杀伤活性,并利用SGC-7901建立胃癌裸鼠模型,设立PBS对照组,比较各组(每组n=5)瘤体体积、抑瘤率和肿瘤坏死面积评分.结果 成熟DC与CIK共培养第7天时,DC-CIK扩增倍数为17.8±2.0,约为单纯CIK扩增倍数(10.9±1.8)的1.63倍(P＜0.05);抗原-DC-CIK组、DC-CIK组、CIK组,体外实验中效靶比为20:1时对SGC-7901的杀伤活性分别为:(72.3±0.5)%、(53.9±0.7)%、(46.4±0.4)%(P均＜0.01);体内动物实验中抑瘤率分别为30.02%、18.11%、15.94%(P均＜0.01).结论 SGC-7901抗原致敏DC能增加CIK的扩增数量,增强CIK对SGC-7901的杀伤作用.     

趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-1α基因和B7-1基因共转染诱导大鼠的抗乳腺癌免疫效应

目的观察共转染巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-α）和B7-1诱导免疫应答的能力和抗乳腺癌免疫治疗的作用。方法7d龄SD大鼠接种乳腺癌细胞后，每天观察有无肿瘤形成；转基因细胞接种荷瘤SD大鼠，观察肿瘤体积的变化及生存期；流式细胞仪检测外周血T细胞亚型，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测白细胞介素（IL）-2及1-干扰素（IFN-1）的含量。结果SHZ-88、B7-1、MIP-α和MIP-α＋B7-1细胞接种10d后致瘤性分别为100％、30％、20％和0；荷瘤大鼠的生存天数分别为53．404±1．14、63．804±1．64、64．204±1．92及（89．004±2.55）d及外周血的CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋比值、IL-2及IFN-1的含量，MIP-1d＋B7-1组均高于其它组（P〈0．05）；接种14、28及40d后，MIP-1α＋B7-1组大鼠的肿瘤体积均小于其它组（P〈0．05）。肿瘤中心或对侧腋窝接种肿瘤细胞，诱导的抗肿瘤效应差异无统计学意义（P〉0．05）。结论共转染MIP-1α和B7-1，可产生协同抗乳腺癌效应。     

17β-雌二醇通过雌激素受体途径上调骨髓源性内皮祖细胞CXCR4表达增强其迁移功能

目的 探讨17β-雌二醇对小鼠骨髓源性内皮祖细胞(BM-EPCs)迁移功能的影响及其机制.方法 培养卵巢切除BALB/C小鼠BM-EPCs.分别采用0、1、10、100 nmol/L 17β-雌二醇或相应浓度17β-雌二醇和雌激素受体拮抗剂ICI182 780与BM-EPCs共培养.48 h后,Transwell小室检测BM-EPCs经或未经CXCR4抑制剂AMD3100处理后向基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的迁移功能.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术检测各组BM-EPCs CXCR4的表达.结果 17β-雌二醇呈剂量依赖性促进BM-EPCs迁移(0 nmol/L:80.33±6.02;1 nmoL/L:110.67±7.51;10 nmol/L:139.67±9.50;100 nmol/L:168.00±10.00/400倍视野,P<0.05)以及CXCR4 mRNA(CXCR4/β-actin:0 nmol/L:0.091±0.007;1 nmol/L:0.189±0.009;10 nmol/L:0.208±0.006;100 nmol/L:0.235±0.009,P<0.05)和蛋白[CXCR4阳性率:0 nmol/L:(29.57±4.20)%;1 nmol/L:(49.23±6.01)%;10 nmol/L:(64.69±4.46)%;100 nmol/L:(75.59±4.88)%,P<0.05]的表达,但被雌激素受体拮抗剂ICI182 780完全阻断(P>0.05).结论 17β-雌二醇通过雌激素受体途径上调BM-EPCs CXCR4的表达而增强其迁移功能.     

大鼠骨髓来源树突状细胞体外培养体系的优化

目的 探讨优化大鼠骨髓来源树突状细胞(DC)体外培养体系的方法.方法 应用重组大鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant rat GM-CSF,rrGM-CSF) 20 μg/L和重组大鼠白介素(recombinant rat interleukin,rrIL)- 4 10 μg/L诱导分化Lewis大鼠...     

趋化因子RANTES快速募集DCs及DCs疫苗的抗结肠癌作用

目的 观察RANTES促进小鼠外周血Des前体细胞动员及DCs疫苗对结肠癌细胞的体外杀伤作用.方法 C57BL/6J(B6)小鼠静脉注射RANTES,不同时间间隔(0、4、8、16、24、48、72 h)采集外周血分离单个核细胞(PBMNCs),通过流式细胞仪分选出F4/80-B220-CD11c+细胞并其进行检测.反复冻融法制备结肠癌可溶性抗原,将其与RANTES动员的DCs共同培养,制备成DCs疫苗以激活T细胞,MTT法检测活化的T细胞在体外对结肠癌细胞的杀伤作用.γ干扰素(IFNγ)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测IFNγ的分泌情况.结果 B6小鼠外周血中F4/80-B220-CD11c+细胞数量随着注射时间的延长逐渐增多,大约在24 h达到高峰,占PBMNCs(13.45±1.25)%.新鲜分离的F4/80-B220-CD11c+细胞为DCs前体细胞.负载结肠癌抗原的DCs激活的T细胞表现出对结肠癌细胞的特异性杀伤作用,产生高水平的IFNγ(1595.00±38.03)ng/L,而对B16黑色素瘤细胞没有杀伤作用,不产生高水平的IFNγ(175.44±6.55)ng/L.结论 RANTES动员的DCs在体外可以诱导出针对结肠癌细胞的特异性杀伤作用.     

肿瘤提取物冲击致敏树突状细胞治疗脑胶质瘤的研究

目的　研究肿瘤细胞提取物体外冲击致敏的树突状细胞 (DC)回输对颅内荷瘤小鼠的免疫治疗效应。方法　将 72只昆明种小鼠随机分 4组 ,分别进行磷酸盐缓冲液 (PBS)、未经致敏的DC、G42 2肿瘤细胞提取物、DC疫苗皮下接种 ,每组各取 6只小鼠脾细胞进行细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)体外诱导及活性检测。其余 48只颅内接种G42 2胶质母细胞瘤。另取 48只昆明种小鼠颅内荷瘤后 ,随机分 4组 ,分别进行PBS、未经致敏的DC、G42 2肿瘤细胞提取物、DC疫苗皮下接种。观察各组小鼠的生存时间 ,小鼠死亡后行病理学检查。结果　疫苗能诱导产生针对G42 2肿瘤抗原特异性CTL ,差异具有非常显著性 (P <0 .0 1)。接种疫苗后荷瘤 ,PBS、未经致敏的DC、G42 2肿瘤细胞提取物组、DC疫苗组生存期分别为 ( 2 1.42± 1.86)d、( 2 4.0 0± 2 .3 6)d、( 2 2 .75±1.89)d、( 3 2 .42± 3 .80 )d ,疫苗组小鼠能明显抵抗G42 2的再次攻击 (P <0 .0 1) ;DC疫苗回输免疫接种至荷瘤小鼠 ,PBS、未经致敏的DC、G42 2肿瘤细胞提取物组、DC疫苗生存期分别为 ( 17.0 0±1.62 )d、( 17.5 8± 1.80 )d、( 16.92± 2 .2 0 )d、( 2 2 .0± 3 .12 )d ,疫苗组生存期明显较对照组延长(P <0 .0 5 )。结论　DC疫苗免疫接种至颅内荷瘤小鼠能显著地诱导机体产生抗原