副泪腺有神经支配吗?--人副泪腺中神经末梢的超微结构研究

目的 探讨副泪腺的分泌机制,提供副泪腺神经支配的形态学证据。方法 １０例人眼标本,男性９人,女婿生１人,年龄２０－３８岁,用标准透射电技术对４２个Ｋｒａｕｓｅ腺Ｗｏｌｆｒｉｎｇ腺进行观察。结果 副泪腺间质中广泛存在大量无髓神经纤维,轴突终末与肌上皮细胞形成突结构,突触间隙１０￣３０ｎｍ;裸一突终末窗过上皮基膜,超产地于腺上皮细胞间并与之突触结构。轴突终末膨体内焦点有大量圆形清突触小泡及少量中央为致     

反射泪腺的神经支配及其病变的定位诊断

基础泪腺和反射泪腺(1～4) 泪由二类腺体分泌而来:(一)基础泪腺。包括3组腺体:(1)浆液腺,主要为Krause氏腺和Wolfring氏腺,为泡管状腺。与眶、睑部泪腺结构相似,又同为浆液腺,故历来称作付泪腺。(2)粘液腺,主要为结膜杯细胞(一种单细胞粘液腺,为粘液主要来源)、Henle氏腺(为结膜皱襞,非真腺)和Manz氏腺。     

兔泪腺分泌泪液的神经通路的实验研究

目的　探讨新西兰兔泪腺分泌泪液的神经通路。方法　在新西兰兔泪腺分四点注射微量假狂犬病毒（ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ,ＰＲＶ）１０μＬ,采用免疫荧光组织化学方法,观察实验兔存活３０ｈ、３８ｈ、４６ｈ后荧光标记神经元在脑中的分布。结果　ＰＲＶ注射到泪腺３０ｈ后,仅在脑桥上泌涎核出现阳性标记神经元;存活３８ｈ后,ＰＲＶ跨突触感染的第二级神经元可见上橄榄核群的上橄榄外侧核和上橄榄内侧核;存活４６ｈ后,在脑桥斜方体核也出现阳性细胞,且上橄榄外侧核和上橄榄内侧核的阳性细胞更为密集,下丘脑的室旁核也出现阳性细胞。结论　中枢神经系统与新西兰兔泪腺分泌泪液可能存在以下通路联系:下丘脑室旁核→脑桥上橄榄核群→脑桥上泌涎核→泪腺。     

泪腺作为潜在人免疫缺陷病毒储存库的分子机制研究

背景 获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的以全身免疫系统严重损害为特征的感染性疾病,目前主要的治疗方法是高效抗逆转录病毒疗法(HAART),但不能彻底清除患者体内的免疫缺陷病毒(HIV),目前认为是病毒潜伏于HIV储存库所致.研究证实HAART治疗后患者血浆中HIV载量检测阴性的AIDS患者的泪液中发现了HIV,因此探索其眼部储存库是非常重要的. 目的 探讨泪腺组织是否具有HIV储存库的分子基础以及HIV感染泪腺组织的发生机制.方法 收集2013年11月至2015年12月在北京协和医院因泪腺良性疾病行泪腺手术获得的泪腺组织标本14例,其中13例来自于HIV阴性患者,l例来自于HIV阳性患者.13例HIV阴性患者临床诊断为泪腺脱垂者9例和泪腺炎者4例,病理诊断为正常泪腺组织者12例和泪腺间质淋巴组织增生者l例.HIV阳性患者的临床诊断为泪腺炎,病理诊断为泪腺间质淋巴组织增生.将12例HIV阴性和1例HIV阳性患者的泪腺组织标本用石蜡固定切片,采用免疫组织化学法检测泪腺标本中HIV受体CD4及CXC趋化因子受体4(CXCR4)和CC趋化因子受体5(CCR5)分子的表达;1例HIV阴性患者的泪腺组织标本制备成新鲜冰冻切片,采用免疫荧光染色对泪腺标本中CD4及CXCR4和CCR5分子的表达进行验证. 结果 免疫组织化学染色显示,HIV阴性患者泪腺组织CD4分子染色背景强,为可疑阳性表达;各例标本中多数泪腺上皮细胞可见CXCR4表达,定位于细胞质和细胞核,少数泪腺上皮细胞不表达CXCR4;在各例标本中少数泪腺上皮细胞中CCR5呈局灶阳性表达,主要位于细胞质和细胞核,多数泪腺上皮细胞不表达CCR5.HIV阳性患者泪腺组织中CD4分子染色背景强,为可疑阳性表达;CXCR4及CCR5在泪腺上皮细胞中为阳性表达;间质组织中可见大量散在淋巴细胞,其CD4、CXCR4及CCR5均为阳性表达.免疫荧光染色显示,HIV阴性患者泪腺组织中CD4、CXCR4、CCR5均呈红色荧光,CD4呈线状及片状分布,主要定位于泪腺上皮细胞的细胞膜,而CXCR4和CCR5则呈现散在点状分布,定位于泪腺上皮细胞的细胞质. 结论 HIV相关分子受体CD4及其辅助受体CXCR4、CCR5在泪腺上皮细胞均呈阳性表达,泪腺上皮细胞具有受到HIV感染和成为HIV储存库的分子基础.     

对人胎儿晶状体上皮的超微结构研究

近三十年来,许多人应用电子显微镜对各种动物和成人的晶状体进行了研究。但是,他们所描述的重点都是晶状体纤维,至于上皮则很少提及。这可能是由于晶状体上皮只有一层,     

干燥综合征泪腺组织中细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的　探讨干燥综合征 (Sj gren′ssyndrome,SS)患者泪腺组织上皮细胞凋亡及其相关基因表达与SS组织损伤的关系。方法　采用原位末端标记及免疫组织化学的方法 ,对 12例SS患者及7例对照泪腺组织上皮细胞中的凋亡细胞及Fas、FasL、bcl 2和Bax等相关基因蛋白的表达进行检测。结果　 12例SS患者泪腺组织中上皮细胞凋亡数为 (8 83± 3 2 7)个 /高倍视野 ;对照为 (0 88± 0 5 2 )个 /高倍视野 (P =0 0 0 0 )。SS患者泪腺导管及腺泡上皮细胞中 ,Fas、FasL及Bax阳性表达的细胞数均明显高于对照组 (P =0 0 0 0 ) ,与凋亡细胞数呈正相关 (R =0 83,0 88,0 8;P =0 0 0 0 ) ;bcl 2阳性表达的细胞数明显低于对照组 ,与凋亡细胞数呈负相关 (R =- 0 6 9,P =0 0 0 1)。结论　SS患者泪腺组织中上皮细胞凋亡可能是导致腺体破坏进而功能丧失的原因之一 ;Fas、FasL及Bax增加以及bcl 2的减少皆与促进细胞凋亡有关     

人视网膜中神经干细胞样细胞的分离和体外培养

目的 分离培养发育基本成熟的人视网膜中神经干细胞样细胞。方法 取0～3岁猝死婴幼儿视网膜细胞，在干细胞选择性培养基中培养，观察原代和传代细胞的形态和增殖情况，并对其诱导分化。通过免疫细胞化学方法检测Nestin、MAP-2和GFAP的表达。结果 原代细胞可形成悬浮生长的致密球状细胞团，传代后能形成新的细胞球。部分细胞球表达Nestin，传代后阳性率增加。分化后细胞形态多样，每一团细胞相对一致，部分细胞表达MAP-2或GFAP。结论 0～3岁人视网膜中存在一种表现出神经干细胞特性的细胞。     

飞秒激光对活体人眼角膜组织瞬间作用后超微结构变化的研究

目的：探索飞秒激光光裂解作用对活体人眼角膜组织的早期损伤情况。方法采用Visu Max飞秒激光系统对25只近视眼进行小切口基质内透镜取出术,分别对取出的角膜透镜组织进行光学显微镜、扫描电镜和透射电镜的观察。结果在光学显微镜下,角膜透镜组织中部分胶原纤维有轻度水肿;边缘可见一薄层组织深染,成线状排列;中央区透镜组织浅层可见到少量气泡。在扫描电镜下,透镜的前表面较为光滑,未见明显的组织桥,透镜后表面较前表面略显不规则,可见散在组织桥及之间飞秒激光光爆破作用后残留的痕迹。在透射电镜下,角膜透镜基质中相邻胶原纤维板层相互交叉规则排列,未见明显的胶原纤维的断裂和板层的分离。角膜透镜一侧切割缘胶原纤维断口呈线状。角膜透镜中心部位的角膜基质细胞损伤较轻。而距离透镜边缘较近的角膜基质细胞破坏较为明显,部分角膜细胞被固化,并且断裂成若干碎块。被破坏的角膜基质细胞有的仅留有残骸,部分角膜细胞所占据的空间成为裂隙。结论飞秒激光与人眼角膜组织相互作用后的早期未发现明显的损伤作用,激光聚焦区边缘的组织有轻度热损伤和细胞结构的改变,而非聚焦区域的组织结构未见异常表现。（中华眼科杂志,2015,51：520-526）     

视网膜色素上皮病的临床类型及其电生理所见有其相关性吗?

目前,对于原发性视网膜色素上皮(RPE)损害所致的脉络膜毛细血管、Bruch膜、RPE及光感受器一类疾病的鉴别诊断仍较困难。可能由于:①对人类RPE和神经上皮关系的知识不完备。②难于比较动物与人的脉络膜视网膜营养不良性退行性变。③人类营养不良性退行性变的生物化学和组织学资料不足。④眼底镜与心理物理     

2005年《眼科》杂志的新起点--她值得您信赖吗?

我们正处在一个“信息爆炸”的时代，通常我们难以真正领会这个词的含义，但作为杂志这一信息载体的编者，我们深感其内在的挑战性。一本好的杂志应该对浩如烟海的信息进行去伪存真、去粗取精、画龙点睛、萃取精华。目前我国眼科界专业性学术期刊有10余种之多，如何让广大读者更加喜欢《眼科》、选择她、信赖她，《眼科》杂志应具备什么样的特点?从分析问题入手，才能提出有效的解决方案。     

噻吗心安对人角膜内皮细胞的影响作用研究

目的:揭示抗青光眼药物噻吗心安(timolol maleate)对体外培养人角膜内皮(HCE)细胞的影响作用,为其眼科临床安全用药提供实验依据。方法:用不同浓度噻吗心安处理体外培养的HCE细胞,在倒置显微镜下观察细胞的生长、增殖和形态变化,利用吖啶橙/溴化乙锭荧光双染色法检测质膜的通透性,利用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的断片化,利用透射电镜观察细胞的超微结构。结果:噻吗心安在0.15625～5g/L的浓度范围内均能不同程度地引起HCE细胞出现不同程度的生长缓慢、数量减少、胞质皱缩、胞内空泡化、变圆脱落、质膜通透性增大、染色质凝缩、DNA断片化和出现凋亡小体等典型的细胞凋亡特征,并具有浓度和时间依赖性。临床使用浓度2.5～5g/L的噻吗心安对HCE细胞的凋亡诱导作用最大,处理28h的凋亡率高达83.23%～96.71%。结论:噻吗心安在0.15625～5g/L的浓度范围内能显著诱导HCE细胞凋亡,临床使用浓度时对HCE细胞的毒性作用极大,在眼科临床中应谨慎使用。     

2005年《眼科》杂志的新起点--她值得您信赖吗?

我们正处在一个"信息爆炸"的时代,通常我们难以真正领会这个词的含义,但作为杂志这一信息载体的编者,我们深感其内在的挑战性。一本好的杂志应该对浩如烟海的信息进行去伪存真、去粗取精、画龙点睛、萃取精华。目前我国眼科界专业性学术期刊有十余种之多,如何让广大读者更加喜欢《眼科》、选择她、信赖她,作为主编我首先向读者回答的问题是《眼科》杂志应具备什么样的特点?从分析问题入手,才能提出有效的解决方案。     

大鼠视神经损伤后移植人胚胎神经干细胞的实验研究

目的 探讨异种神经干细胞注射到玻璃体腔后迁移到视网膜的存活及分化，为进一步研究重建视觉传导通路奠定基础。方法在近SD大鼠眼球后壁夹住视神经根部5min，造成视神经损伤，将起源于人胚胎大脑海马的神经干细胞悬浮液注射到SD大鼠的玻璃体腔中。移植的神经干细胞预先用荧光染料Hoechst标记。分别于手术后不同的时间处死，剥离出视网膜，进行免疫组织化学染色，在荧光显微镜下观察实验结果。结果宿主视网膜在荧光显微镜下可见Hoechst标记阳性的移植细胞，移植前移植细胞神经胶质原纤维酸蛋白（GFAP）阳性表达的，移植后为阴性表达。结论视神经损伤大鼠的玻璃体腔内注射起源于人胚胎大脑海马的神经干细胞，移植细胞可以迁移到视网膜组织中存活。     

人胎儿晶体中可溶性蛋白质的研究

本文使用Sepharyl S—300(superfine)分离人胎儿晶状体中(18周、21周、24周)可溶性蛋白质各组份,使用聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳(PAGE)及SDS—聚丙烯酶胺凝胶电泳(SDS—PAGE)对其各组份进行鉴定。在各组份晶体蛋白的百分含量中α和β_1晶体蛋白随胎龄增加而减少的负相关倾向(相关系数—0.9542;—0.9674)。β_2和γ晶体蛋白随胎龄增加而增加的正相关倾向(相关系统0.9666;0.9970)。在PAGE图谱中,除γ晶体蛋白随胚龄增加第二条区带变得明显外,其余均无明显变化,而在SDS—PAGE图谱中各组份晶体蛋白的多肽分子量在各胎龄组无变化。因此,我们推测在正常情况下晶体蛋白之间按照一定的比例关系处于动态平衡中,这对维持晶状体正常细胞结构和正常代谢功能起着一定的作用。这种关系被破坏,将导致晶状体代谢异常。但这种关系是由于蛋白质合成的改变引起的还是与蛋白质分子装配(Assembly)有关,值得进一步探讨。     

淫羊藿总黄酮对干眼症雄兔泪腺中Bax和Bcl-2表达的作用研究

目的观察淫羊藿总黄酮对干眼症雄兔泪腺中Bax和Bcl-2表达的作用。方法随机将80只雄性健康新西兰大耳白兔分为A组(空白组)、B组(手术组)、C组(淫羊藿总黄酮组)、D组(雄激素组),每组20只。A组以生理盐水进行灌胃,B、C、D三组建立干眼症模型后分别以生理盐水灌胃、淫羊藿总黄酮灌胃、丙酸睾酮肌肉注射进行干预。每组根据喂养时间不同又分为A1～D1组(喂养1个月)和A2～D2组(喂养2个月),每组10只。A1～D1组于造模前及造模后2周、4周时,A2～D2组于造模后6周及末次最后一次用药后对雄兔进行泪液分泌实验(SchirmerⅠtest,SIT)和泪膜破裂时间(BUT)检查;A1～D1组和A2～D2组分别在饲养1个月及2个月时处死雄兔,即刻摘取泪腺,应用Western blot检测凋亡相关因子Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果 SIT、BUT检查结果显示,B、C、D三组雄兔均在造模1个月后形成干眼症。C1组、C2组及D1组、D2组雄兔泪腺组织中的Bax相对含量均较B1组、B2组低,差异均有统计学意义(均为P<0.01);C2组Bax相对含量低于C1组,差异有统计学意义(P<...     

LASIK术中瞬时高眼压对视网膜超微结构影响的实验研究

目的探讨LASIK术中瞬时高眼压对兔视网膜超微结构的影响。方法32只健康新西兰大耳白兔随机分为正常对照组、实验对照组、负压吸引20s组和3min组。实验组于术后即刻,术后7d、4周和8周,在光镜和电镜下观察兔眼视网膜组织结构的变化。结果实验对照组与正常对照组相比,视神经和视网膜结构无改变。负压吸引20s组各时间点视神经和视网膜细胞改变轻微;3min组术后即刻至14d神经纤维和视网膜结构明显异常,至术后28d恢复正常。结论LASIK术中负压吸引致眼压急剧升高,可能会导致视网膜亚细胞结构的改变,但这种改变为可逆的,负压吸引持续时间越长改变越明显。     

人胚胎视网膜神经上皮移植于兔视网膜的初步实验研究

目的探讨人胚胎视网膜神经上皮移植于兔视网膜的方法和效果。方法将人胚胎(2.5～3.5mo)片状视网膜神经上皮移植于新西兰白兔视网膜脉络膜缺损区(后段外路移植法),共6例,20g     

常见泪腺上皮性肿瘤中EGFL7的表达及其与血管生成和细胞增殖活性的相关性研究

目的：检测常见泪腺上皮性肿瘤中类表皮生长因子结构域 7(EGFL7)、微血管密度(MVD)、Ki67的表达,探究EGFL7与MVD、Ki67之间的相互关系。

方法：应用免疫组化法,对10例正常泪腺组织(取自因炎性假瘤、Mikulicz病等良性泪腺肿瘤切除后,标本中的部分正常泪腺组织)、20例泪腺多形性腺瘤、12例多形性腺癌、14例腺样囊性癌组织中的EGFL7蛋白、Ki67进行检测,并应用CD34标记计数MVD。

结果：EGFL7主要在泪腺多形性腺癌、腺样囊性癌的肿瘤细胞的细胞浆中表达,免疫组化染色结果显示,在正常泪腺组织中EGFL7无阳性表达,泪腺多形性腺瘤组织中EGFL7的阳性率为5%(1/20),泪腺多形性腺癌中EGFL7的阳性表达率83%(10/12),泪腺腺样囊性癌中EGFL7的阳性表达率为86%(12/14),两种恶性肿瘤中的表达率明显高于多形性腺瘤和正常泪腺组织(P<0.001)。CD34可使肿瘤微血管染色呈棕黄色的单个或成簇细胞群。在泪腺多形性腺癌(32.58±14.46)及腺样囊性癌(43.43±4.60)中CD34的表达明显高于多形性腺瘤(4.20±1.19)(P<0.001); Ki67在具有增殖活性的细胞核呈棕褐色着色,在泪腺多形性腺癌(44.83±13.68)及腺样囊性癌(26.29±8.44)中Ki67的表达明显高于多形性腺瘤(2.80±3.14)及正常组织(0.40±0.70)(P<0.001)。在两种恶性肿瘤中EGFL7的表达分别与MVD、Ki67呈明显正相关(r_s=0.897,P<0.001; r_s=0.837,P<0.001)。

结论：EGFL7在泪腺上皮性肿瘤中的表达与MVD、Ki67呈正相关性,提示EGFL7不仅在泪腺上皮性肿瘤血管生成中起重要作用,而且参与泪腺上皮性肿瘤的增殖。     

糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α的表达与超微结构研究

目的 研究糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达与超微结构变化。方法 将132只SD大鼠随机分为对照组与糖尿病视网膜病变（DR）组，DR组采用链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射建立糖尿病模型。应用免疫组织化学SP法和RT-PCR技术分别于1、3、6个月检测视网膜中HIF-1α蛋白及其mRNA的表达，透射电镜观察视网膜的超微结构。结果 免疫组织化学与RT-PCR检测结果均显示，HIF-1α蛋白及其mRNA在对照组视网膜中不表达，在DR组中呈进行性表达增强（P〈0．05）；透射电镜观察：正常对照组大鼠视网膜血管未见异常，DR组随着病程发展逐渐出现视网膜血管内皮细胞肿胀，基底膜厚薄不均。结论 DR中HIF-1α的异常表达和超微结构改变与视网膜缺氧关系密切，两者与DR的发生发展密切相关。