早期胃癌的还氧合酶-2、抑癌基因P16和肝细胞生长因子表达

[目的]探讨还氧合酶-2(COX-2)、抑癌基因P16和肝细胞生长因子(HGF)在早期胃癌中表达的意义.[方法]用免疫组化方法检测正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜、早期胃癌组织COX-2、P16和HGF蛋白表达情况.[结果]在由正常胃黏膜到不典型增生,再到早期胃癌的演进过程中,COX-2和HGF蛋白表达呈上升趋势,P16蛋...     

乳腺癌细胞中COX-2、MMP-9蛋白表达与其淋巴道转移的关系

[目的]探讨环氧化酶-2（COX-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与乳腺癌浸润和转移的关系。[方法]采用免疫组织化学sP法检测74例乳腺浸润癌（有淋巴结转移者39例，无淋巴结转移者35例）中COX-2和MMP-9蛋白的表达情况，并用多因素Cox比例风险模型分析患者的预后。[结果]COX-2和MMP-9蛋白表达在淋巴结转移组乳腺癌肿瘤细胞中的平均秩次分别为42．90和44．58，在无淋巴结转移组乳腺癌肿瘤细胞中的平均秩次分别为31．49和29．61，二者在淋巴结转移组与无转移组的表达差异均具有显著性意义（P〈0．05），与乳腺癌淋巴结转移呈正相关。COX-2蛋白的表达随着乳腺癌病理分级的增高而增强。[结论]乳腺癌细胞中COX-2和MMP-9蛋白表达与其淋巴道转移相关，检测这两种蛋白表达将有助于判断乳腺癌的转移潜能及预后。     

COX-2和iNOS在肺癌组织中的表达及其临床意义

[目的]研究诱导型环氧化酶(COX-2)和一氧化氮合酶(iNOS)在肺癌组织中的表达及其临床意义.[方法]用免疫组化法检测42例肺癌组织中COX-2和iNOS蛋白表达.[结果]COX-2和iNOS表达的阳性率分别为31%和33%;COX-2表达与术后生存期的长短呈负相关;iNOS与肿瘤组织的分化程度密切相关,分化越低,iNOS表达越强;COX-2与iNOS表达之间未见相关性.[结论]COX-2和iNOS在肺癌中表达与否与患者的预后相关.     

链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达

[目的]探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达情况.[方法]多次小剂量腹腔注射STZ诱导1型糖尿病小鼠模型,实验分为两组:正常对照组(NC)和糖尿病组(DM).ELISA法检测血清和尿液中前列腺素E2(PGE2)的表达水平;RT-qPCR法检测肾组织环氧合酶-2(COX-2)、膜结合型前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)、各型EP受体(EP1、EP2、EP3、EP4)的mRNA表达水平;Westemblot法检测相应蛋白表达水平.[结果]随着周龄增加,DM组小鼠逐渐出现明显多饮、多尿、体质量下降等糖尿病消耗症状;与NC组小鼠相比,DM组小鼠空腹血糖(FBG)和24 h尿蛋白排泄量均显著增加(P＜0.05);肾脏COX-2和EP4表达水平明显上调(P＜0.05)、而mPGES-1、EP1、EP2、EP3 mRNA表达无显著变化(P＞0.05);同时,DM组小鼠24 h尿PGE2定量显著高于NC组(P＜0.05).[结论]1型糖尿病小鼠肾脏组织中,早期即可检测到COX-2和EP4表达上调,伴24 h尿PGE2定量增加,提示COX-2/PGE2/EP4信号轴激活可能参与了糖尿病肾病的发生发展.     

食管鳞癌神经组织浸润与临床病理学意义及其与COX-2蛋白的关系

[目的]研究食管鳞状细胞癌发生神经组织浸润的临床病理意义及其与COX-2蛋白表达的关系.[方法]复习91例食管鳞状细胞癌的组织常规切片,并通过免疫组织化学染色检测肿瘤组织中COX-2蛋白的表达,研究食管鳞状细胞癌的神经组织浸润与性别、组织学分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移和临床分期等生物学行为以及COX-2蛋白表达的关系.[结果]食管鳞状细胞癌神经组织浸润的发生率为45%.神经组织的浸润与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和临床分期均呈正相关(P分别为0.013、0.000和0.004,r分别为0.29、0.41和0.30),与性别、组织学分化程度和COX-2蛋白的表达均无关(P分别为0.119、0.097和0.861).[结论]食管鳞状细胞癌的神经组织浸润与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和临床分期等生物学行为密切关系,可能与COX-2蛋白的表达无关.     

术前静脉化学治疗对口腔鳞状细胞癌组织中COX-2蛋白表达及淋巴管密度的影响

[目的]探讨术前平阳霉素静脉化学治疗对高分化口腔鳞状细胞癌组织中COX-2蛋白的表达及淋巴管密度(LVD)的影响.[方法]选择45例口腔鳞状细胞癌患者术后完整包埋的石蜡标本,其中30例为单纯手术患者,15例为术前平阳霉素静脉化学治疗联合手术患者,用免疫组织化学PV-6000通用型二步法检测口腔鳞状细胞癌组织中COX-2蛋白表达与D2-40标记的LVD.[结果]静脉化学治疗组口腔鳞状细胞癌组织中COX-2蛋白阳性表达率明显低于未化学治疗组(P<0.05),静脉化学治疗组癌周平均LVD明显低于未化学治疗组(P<0.05),两组癌组织内平均LVD间差异无统计学意义(P>0.05),术前未化学治疗组COX-2蛋白表达阳性组癌周LVD与阴性组相比较差异有统计学意义(P<0.05),术前未化学治疗组COX-2蛋白表达及癌周LVD与淋巴结转移呈正相关(P<0.05).[结论]术前平阳霉素静脉化学治疗通过降低COX-2蛋白表达与抑制癌周淋巴管形成来减少淋巴结转移.     

基于NF-κB信号通路探讨通管助孕方治疗输卵管阻塞性不孕症大鼠的作用机制

[目的]基于核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨通管助孕方治疗输卵管阻塞性不孕症的作用机制。[方法]将140只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、中成药组、西药组及通管助孕方高、中、低剂量组,每组20只。除正常组外,其余各组采用金黄色葡萄球菌建立输卵管阻塞性不孕症大鼠模型,造模后第7天,各组分别给予生理盐水、丹黄祛瘀胶囊混悬液、人胎盘组织液、通管助孕方高、中、低剂量治疗21 d后,药效组大鼠取材处理,生殖组大鼠进行雌雄合笼实验。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠血清中NF-κB、核因子κB抑制蛋白（IκB）、环氧合酶2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)的水平,采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法和实时定量荧光聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测输卵管组织中NF-κB、IκB、COX-2、PGE2的蛋白和基因表达情况。采用肉眼观察以及光镜下观察输卵管组织病理形态学变化。观察并记录生殖组大鼠受孕及产仔情况。[结果] 1）与正常组比较,模型组大鼠NF-κB、COX-2、PGE2蛋白和基因表达升高,IκB蛋白和基因表达降低（P<0.05）;与模型组比较,...     

胃癌Survivin、COX-2蛋白的表达及其相关性分析

[目的]探讨胃癌中Survivin蛋白表达与胃癌生物学行为及凋亡相关蛋白COX-2和凋亡指数(AI)的相关性.[方法]应用免疫组化SP法检测51例胃癌组织、47例非癌胃黏膜组织中Survivin和COX-2的表达,应用TUNEL法检测AI.[结果]Survivin蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为70.58%较非癌胃黏膜组的36.17%明显增高(P＜0.05),COX-2在胃癌组织中的阳性表达率为68.63%较非癌胃黏膜组的30.04%明显增高(P＜0.05).Survivin蛋白在有淋巴结转移组阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(94.59%vs 28.57%,P＜0.05),侵及浆膜组阳性表达率明显高于未及浆膜组(78.04%vs 40.00%,P＜0.05),且在Ⅲ-Ⅳ期胃癌病人Survivin阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期(88.57%vs 31.25%,P＜0.05),COX-2蛋白在淋巴结转移组阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(78.38%vs28.57%,P＜0.05),且Ⅲ-Ⅳ期病人阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期(77.14%vs 37.50%,P＜0.05).Survivin阳性表达与COX-2阳性表达呈正相关(rs=0.32,P＜0.05).Survivin阳性组的平均AI明显低于阴性组(P＜0.05),而COX-2阳性组的平均AI明显高于阴性组(P＜0.05).[结论]Survivin和COX-2蛋白与胃癌的发生及其恶性演变有关,检测Survivin和COX-2蛋白有利于判断胃癌的恶性程度和预后.     

白及对阿司匹林致大鼠胃溃疡的治疗作用研究

[目的]研究白及对阿司匹林诱导的胃溃疡的治疗作用。[方法]将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、白及高、中、低剂量组和阳性对照组。除正常组外,余各组大鼠均以阿司匹林溶液灌胃建立胃溃疡模型。8周后,阳性对照组以奥美拉唑灌胃,白及高、中、低剂量组以白及混悬液灌胃治疗。4周后评价各组大鼠胃溃疡指数,HE染色观察胃组织病理变化,ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及胃黏膜前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、内皮素(endothelin,ET)的表达水平;荧光定量PCR、Western blot分别检测胃黏膜环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因和蛋白表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠溃疡指数增加(P0.01),血清TNF-α、IL-6表达增加(P0.01),胃黏膜PGE2表达减少(P0.01)、ET表达增加(P0.01),COX-1基因和蛋白表达减少(P0.01)、COX-2基因和蛋白表达增加(P0.01,P0.05),胃组织病理损伤明显。与模型组比较,白及各剂量组溃疡指数降低(P0.01,P0.05),血清TNF-α、IL-6表达减少(P0.01,P0.05),胃黏膜PGE2增加(P0.01,P0.05)、ET减少(P0.01,P0.05),COX-1基因和蛋白表达均增加(P0.01,P0.05)、COX-2基因和蛋白表达均减少(P0.01,P0.05),胃黏膜组织病理损伤减轻,其中,白及高剂量组的治疗效果最明显。[结论]白及能够有效减轻阿司匹林对大鼠胃黏膜的损伤,该作用与降低血清TNF-α与IL-6,调节胃黏膜COX-1、COX-2的表达水平,从而升高PGE2、减少ET有关。     

不同逆转录酶的RT-PCR反应体系影响COX-2 mRNA表达的检测结果

[目的]探讨用于环氧化酶-2（COX-2）mRNA检测的逆转录酶RT-PCR反应体系的差别.[方法]分别用含有MMLV和AMV逆转录酶的RT-PCR反应体系检测新生鼠缺氧缺血性损伤（HIBD）脑组织COX-2的mRNA表达,并比较二者的检测效果.[结果]用含MMLV的反应体系不能在理论预期位置检测到COX-2mRNA产物的条带;而用含AMV的反应体系则能够在理论预期位置检测到COX-2的mRNA产物的条带.[结论]检测COX-2的mRNA表达应选用AMV逆转录酶的RT-PCR反应体系;应根据该产物特点选择逆转录酶RT-PCR反应体系检测mRNA.     

环氧合酶-2与核因子-κB在人动脉粥样硬化病变中的表达及机制探讨

【目的】了解环氧合酶-2与核因子-κB在人动脉粥样硬化病变不同阶段的表达和相关性以及环氧合酶-2可能通过核因子-κB途径促进动脉粥样硬化病变的进程。【方法】用免疫组化法检测环氧合酶-2与核因子-κB在动脉粥样硬化不同阶段中的细胞定位及阳性面积百分比。在培养的人脐动脉平滑肌细胞中，用逆转录聚合酶链法和细胞免疫化学染色法检测核因子-κB特异性阻断剂PDTC作用后血管紧张素Ⅱ诱导的环氧合酶-2 mRNA和蛋白的表达。【结果】环氧合酶-2与核因子-κB可见于AS病变中的巨噬细胞、平滑肌细胞和内皮细胞，在斑块肩部尤明显；早期和晚期病变环氧合酶-2与核因子-κB的阳性面积百分比均明显高于正常（P〈0．05），晚期病变表达最高；晚期病变中易损斑块环氧合酶-2与核因子-κB的表达又明显高于稳定斑块；二者的表达存在相关性（r=0.296，P〈0．05）；在细胞实验中，PDTC可明显阻断血管紧张素Ⅱ诱导的人血管平滑肌细胞中环氧合酶-2 mRNA和蛋白的表达（P〈0．05）。【结论】环氧合酶-2参与动脉粥样硬化病变过程，而这一过程至少部分由核因子-κB途径介导；环氧合酶-2抑制剂与核因子-κB阻断剂均可能成为治疗动脉粥样硬化的新方法。     

Survivin、COX-2蛋白在肺腺癌中的表达及意义

目的探讨肺腺癌组织中Survivin、COX-2蛋白表达与临床病理特征的关系及其相关性。方法用SP免疫组化法检测38例肺腺癌组织和16例良性病变肺组织中Survivin、COX-2蛋白的表达。结果Sur-vivin、COX-2蛋白的阳性率在38例肺腺癌中分别为55.3%、71.1%,与良性病变肺组织相比,差异有显著性(P值均<0.01)。Survivin蛋白的阳性率在III IV期肺腺癌高于I II期(P<0.05),其表达与患者的年龄、性别、肿块大小、分化程度及淋巴结转移与否无关(P>0.05)。COX-2蛋白表达与患者临床病理特征均无关。Survivin、COX-2蛋白在肺腺癌中的表达呈正相关。结论Survivin、COX-2蛋白在肺腺癌组织中表达上调且呈正相关,二者在肺腺癌的发生发展中可能具有协同作用,有望作为靶点用于肺腺癌的靶向治疗。     

白介素1-β对人肺腺癌细胞COX-2表达的作用及调节机制

目的 探讨细胞因子白介素-1β（IL-1β）对人肺腺癌细胞株A549细胞环氧合酶2（COX-2）表达的影响及调节机制。方法 A549细胞培养达80％融合后，用不同浓度的IL-1β（0、0.1、1、5和10ng／mL）干预或用5ng/mL IL-1β干预不同时间（0、3、6、9、12和24h）观察白介素-1β（IL-1β）对A549细胞COX-2表达的影响；用5ng／mL IL-1β与有丝分裂原激活的细胞外调节激酶（ERK）抑制剂PD098059、P38有丝分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）抑制剂SB203580、蛋白激酶C（PKC）抑制剂H-7共同干预A549细胞观察IL-1β诱导A549细胞COX-2表达的信号传导途径；用COX-2系列报告基因质粒及对照质粒转染A549细胞后予以IL-1β干预，以不加IL-1β干预的细胞为对照组观察IL-1β对COX-2启动子的影响；westem blot检测COX-2蛋白表达，RT—PCR检测COX-2 mRNA表达。COX-2报告基因活性应用荧光素酶活性分析法测定。结果 A549细胞COX-2蛋白表达和mRNA表达呈IL-1β浓度依赖性表达增加，干预9h表达达高峰；SB203580、H-7可明显抑制IL-1β诱导A549细胞COX-2表达，PD098059对IL-1β诱导A549细胞COX-2表达无影响；IL-1β对COX-2报告基因无影响。结论 PKC途径和P38 MAPK途径参与IL-1β诱导A549细胞COX-2蛋白表达。     

COX-2基因在非小细胞肺癌中的表达及其与VEGF、CD105的关系

目的探讨环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)和CD105的关系。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测64例NSCLC组织及相对应的正常组织中COX-2mRNA的表达,免疫组织化学法检测VEGF、CD105蛋白的表达,以CD105计数微血管密度(MVD)。结果NSCLC组织COX-2mRNA表达阳性率为67.2%,相应正常组织则为14.1%(P<0.01);NSCLC组织COX-2mRNA表达强度高于相应正常组织(P<0.01)。COX-2mR-NA的表达与VEGF的表达显著相关(P<0.01),COX-2阳性癌组织的MVD高于COX-2阴性表达者(P<0.05)。结论NSCLC组织中COX-2表达上调且微血管被激活,COX-2可能通过诱导VEGF表达或与VEGF、CD105协同作用而促进肿瘤血管形成。     

复方银黄微型灌肠剂对发热大鼠下丘脑中COX-1、COX-2蛋白表达的影响

目的:研究复方银黄微型灌肠剂(compound of Yinhuang micro-enema,YHCE)对发热大鼠下丘脑中环氧化酶-1(cyclooxygenase,COX-1)、环氧化酶-2(cyclooxygenase,COX-2)蛋白表达的影响,探讨YHCE的解热作用机制.方法:用酵母混悬液复制发热大鼠模型,采用免疫组化ElivisionTM plus二步法观察下丘脑中COX-1、COX-2蛋白表达的情况.结果:YHCE能明显抑制发热大鼠的体温上升,且能抑制下丘脑中COX-2蛋白表达,而对下丘脑中COX-1蛋白表达无明显影响.结论:YHCE有明显的解热作用,其解热作用机制可能与抑制发热大鼠下丘脑中COX-2蛋白表达有关.     

环氧合酶-2在星形细胞肿瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨COX-2的表达与星形细胞肿瘤发生、发展的关系。方法应用免疫组化技术和RT-PCR技术检测各级别星形细胞肿瘤组织及非肿瘤组织中COX-2蛋白和mRNA的表达水平。结果COX-2蛋白在各组中的表达强度(IODA值)分别为:非肿瘤组织(2.19±0.88),肿瘤组织(6.38±3.68);COX-2mRNA在各组中的表达阳性率分别为:非肿瘤组织(33.3%),肿瘤组织(83.3%);COX-2mRNA的相对含量分别为:非肿瘤组织(43.49±19.73),肿瘤组织(119.67±46.56);COX-2在肿瘤组织中的表达显著高于其在非肿瘤组织中的表达(P<0.05)。结论COX-2的过表达与星形细胞肿瘤的发生、发展关系密切,是引起肿瘤细胞恶性表型的相关基因之一;毛细胞型星形细胞瘤与弥漫性浸润性星形细胞肿瘤的遗传基础不同,是一种在生物学和形态学上所发生的基因改变不同于其它胶质瘤的星形细胞肿瘤;COX-2除参与肿瘤形成、炎症的发生等病理过程外,在人体器官发育及正常生理功能的维持过程中也起到比预期更为复杂的作用。     

悬铃木属花粉的纯化及免疫活性分析

目的对悬铃木属花粉变应原进行初步纯化并对其主要成分进行免疫学活性分析。方法悬铃木属花粉变应原粗制浸液经过凝胶过滤层析，收集主要蛋白质，SDS-PAGE检测各段蛋白质分子量，并用免疫印记法分析7例悬铃木属花粉过敏的支气管哮喘患者血清。结果悬铃木属花粉变应原粗制液经层析柱洗脱得两个洗脱峰，第一峰及第二峰升段富含蛋白，而第二峰降段蛋白含量甚微，收集各段进行SDS—PAGE。出现6条蛋白区带，分子量分别为7、50、35、39、22和16kd。第一峰主要含22-71kd蛋白质，峰2升段以14-16kd之蛋白质为主。对7例花粉过敏的支气管哮喘患者血清免疫印记分析可见4条sIgG反应带，蛋白分子量为50、39、22和16kd，病人血清结合百分比分别为100％、28．57％、57．14％和14．29％。结论悬铃木属花粉变应原含有6种主要蛋白成分，第一峰的50、39和22kd的蛋白质为主要致敏组分，第二峰升段的16kd蛋白质为次要致原。     

亚低温降低创伤后脑组织炎症反应的实验研究

【目的】研究亚低温在外伤致脑组织炎症反应中的治疗作用。【方法】液压冲击法建立实验动物脑创伤模型，分创伤组和亚低温治疗组两组，亚低温治疗组动物接受冰袋全身降温处理；RT-PCR及Western blotting法检测环氧化酶-2（COX-2）mRNA及蛋白水平表达，ELISA法检测前列腺素E2（PGE2）水平。【结果】创伤组脑组织COX-2 mRNA、蛋白表达水平于伤后早期明显升高，第3天达高峰，此后逐渐降低，其反应产物PGE2出现相同变化趋势。亚低温治疗组脑组织COX-2 mRNA、蛋白表达，及其产物PGE2水平与创伤组伤后同时期比较降低明显，差异具有统计学意义（P〈0．05）。【结论】亚低温可明显降低外伤后脑组织炎症因子的产生和释放，降低炎症反应程度。     

胃癌组织中的环氧化酶-2的表达与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）在胃癌组织中的表达及与幽门螺杆菌（H-pylori）感染的关系。方法采用免疫组化EnVision两步法检测47例胃癌组织及相应的20例癌旁组织COX-2的表达；用western blot方法检测10例胃癌组织和相应的癌旁组织中COX-2蛋白的表达；用快速尿素酶诊断法和^13C呼气试验两种方法检测胃癌患者H-pylori感染状况。结果免疫组化检测胃癌组织中COX-2的阳性表达率明显高于癌旁组织（P〈0.01）；有H-pylori感染的胃癌组织中COX-2的阳性表达率较未感染的胃癌组织中高（P〈0．01）。Western blot方法检测胃癌组织中COX-2的蛋白表达高于癌旁组织（P〈0.05）。结论COX-2在胃癌组织中高表达，H-pylori感染可能上调胃癌组织中COX-2的表达。     

环氧合酶-2在卵巢浆液性肿瘤中的表达与其致瘤性的研究

目的研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白和Fas、FasL以及血管内皮生长因子受体2(vescular endothelium growth factor receptor-2,又称KDR)在正常卵巢和卵巢浆液性肿瘤中的表达及其临床意义.方法应用免疫组化法检测COX-2蛋白和FFas、FasL、KDR在56例卵巢浆液性肿瘤(其中良性9例,交界性9例,癌38例)及8例正常卵巢组织的新鲜标本中的表达.结果 COX-2在卵巢浆液性癌(ovarian serous carcinoma,OSC)及交界性瘤中表达阳性率分别为84%和89%,明显高于正常组织及良性瘤组织,差异有显著性(P<0.05).在OSC中,Fas表达明显降低,FasL表达上升,而KDR表达明显升高,与COX-2表达有协同性.结论 COX-2蛋白与卵巢浆液性肿瘤发生发展密切相关,COX-2蛋白可能通过导致肿瘤细胞凋亡异常以及促血管生成而促进肿瘤发生、发展.