E-cadherin/β-catenin和LYVE-1在人肺癌细胞、血管及淋巴管的表达

目的 观察E-cadherin和β-catenin在人肺癌细胞的表达,探讨E-cadherin/β-catenin复合体在癌细胞淋巴道转移机制中的作用.方法 取肺癌手术材料30例,用免疫组化法观察E-cadherin、β-catenin和LYVE-1在癌细胞、血管及淋巴管的表达.结果 癌细胞的E-cadherin、β-catenin呈阳性表达;低分化组、有淋巴结转移组E-cadherin表达减弱.淋巴管的LYVE-1阳性表达,E-cadherin阴性表达,β-catenin弱阳性表达.各分子在血管均为阴性表达.结论 LYVE-1在淋巴管特异性表达;E-cadherin表达与肿瘤分化程度和有无转移呈负相关;E-cadherin/β-catenin复合物在肿瘤细胞与淋巴管内皮细胞的黏附过程中不起主要作用.     

人结肠癌组织中VM、EMT及Wnt通路关键蛋白表达的相关性分析

目的：本研究探讨结肠癌组织中VM、EMT和Wnt通路关键蛋白表达的相关性。方法：选取200例结肠癌患者的组织标本,利用免疫组化测定VM、EMT的两种标记蛋白（Vimentin、E-cadherin）及Wnt通路调节蛋白β-catenin的表达,并探讨其相关性。结果：200例人结肠癌组织中有45例VM表达阳性,VM阳性患者肿瘤分化更差、分期更晚,更易发生复发转移,差异有统计学意义（P＜0.05）。VM阳性时Vimentin高表达（66.7%）,E-cadherin低表达(15.5%),差异有统计学意义(P<0．05)。同时VM阳性β-catenin为高表达（60.0%）,VM阴性β-catenin为低表达（8.4%）,差异具有统计学意义（P<0．05) 。β-catenin阳性的结肠癌组织中,Vimentin为高表达（72.5%）,而E-cadherin低表达（30.0%）,差异具有统计学意义(P<0．05)。结论：在结肠癌组织内存在VM现象,VM与EMT存在相关性。VM与Wnt通路存在相关性。结肠癌中Wnt通路活化可能促进EMT发生。     

TRIB3通过激活β-catenin信号通路促进鼻咽癌细胞增殖和侵袭迁移

目的 探讨TRIB3对鼻咽癌细胞增殖和侵袭迁移的影响,并研究其作用机制。方法 使用荧光定量PCR检测鼻咽癌组织和正常癌旁组织中TRIB3的相对表达量,并检测正常鼻咽上皮细胞(N69)和鼻咽癌细胞(HNE-1、CNE-2Z、5-8F)中TRIB3的相对表达量。体外培养人鼻咽癌细胞HNE-1、CNE-2Z,每株细胞分2组：即阴性对照组(NC组)和敲低TRIB3组(sh-TRIB3组)。荧光定量PCR和Western blot法检测转染后各组细胞TRIB3的表达水平。敲低TRIB3后,CCK-8实验和集落克隆实验检测鼻咽癌细胞增殖能力,Transwell实验和划痕实验检测鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测EMT相关蛋白Snail、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin和β-catenin信号通路相关蛋白GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin和p-β-catenin的相对表达水平。结果 荧光定量PCR结果显示,与癌旁组织相比,鼻咽癌组织中TRIB3表达高度上调(P<0.001);与正常鼻咽上皮细胞(N69)相比,鼻咽癌细胞(HNE-...     

上皮间质转化标记物在大肠癌中的表达及意义

目的:探讨上皮间质转化(EMT)标志物在大肠癌组织中的表达情况及与大肠癌恶性程度的关系.方法:采用免疫组化SP法检测131例大肠癌组织及癌旁组织EMT标志物上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)的表达情况.结果:大肠癌组织E-cadherin、β-catenin的阳性表达率明显低于癌旁组织,Vimentin的阳性表达率明显高于癌旁组织(P＜0.05).低分化大肠癌组织E-cadherin、β-catenin的阳性表达率明显低于高-中分化,Vimentin的阳性表达率明显高于高-中分化,不同分化程度大肠癌比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:EMT与大肠癌的发生发展及分化程度有关.     

肝细胞生长因子及其受体c-Met和β-catenin在鼻咽癌中的表达

目的 检测鼻咽癌及鼻咽癌颈部淋巴结中肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met和β-连接素(β-catenin)的表达和意义.方法 采用免疫组化SP法检测鼻咽黏膜慢性炎28例、鼻咽癌35例和鼻咽癌颈部淋巴结转移25例中HGF、c-Met和β-catenin的表达.结果 鼻咽癌淋巴结转移组中的HGF阳性表达率明显高于黏膜慢性炎和鼻咽癌组;鼻咽癌及其淋巴结转移组中c-Met阳性表达率和β-catenin异常表达率均显著高于黏膜慢性炎组.鼻咽癌及其淋巴结转移组中c-Met分别与HGF和β-catenin表达均呈显著正相关性;而HGF与β-catenin表达在鼻咽癌组中呈显著正相关性,而在其淋巴结转移组中未呈显著相关性.结论 HGF、c-Met与β-catenin基因表达异常可能共同参与了鼻咽癌的侵袭和转移,而HGF过表达可能起着更为重要的作用.c-Met过表达和β-catenin异常表达与鼻咽的良、恶性病变有关.     

β-catenin在硬皮病皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化的影响

  目的  探讨β-连环蛋白(β-catenin)在系统性硬皮病(SSc)患者皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。  方法  采用免疫组织化学SP法检测45例SSc患者皮损组织及20例健康成人皮肤组织中β-catenin、Snail1、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达情况。采用不同质量浓度Wnt10b〔0(空白对照)、2、4 ng/mL〕处理人表皮角质形成细胞HaCaT 48 h,免疫荧光实验检测β-catenin在HaCaT细胞中的定位;实时荧光定量PCR检测HaCaT细胞中Snail1、Snail2 mRNA水平;Western blot法检测HaCaT细胞中β-catenin、波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、E-cadherin蛋白表达。  结果  β-catenin、Snail1、E-cadherin阳性率在SSc患者皮损组织中依次为100%、88.89%和2.22%,在健康成人皮肤组织中依次为0%、10.00%和95.00%,两组比较差异均有统计学意义(P < 0.05)。与空白对照组比较,不同质量浓度Wnt10b(2、4 ng/mL)处理可诱导HaCaT细胞中β-catenin表达上调并促进β-catenin由细胞质向细胞核中转位,同时还可以提高HaCaT细胞中Snail1和Snail2 mRNA表达(P < 0.05),并上调Vimentin、N-cadherin蛋白表达和下调E-cadherin蛋白表达(P < 0.05)。  结论  SSc皮损中存在异常活化的Wnt/β-catenin信号通路及异常表达的EMT相关蛋白,且激活Wnt/β-catenin信号通路可促进HaCaT细胞EMT的发生。     

Hedgehog信号通路调控胰腺癌细胞上皮间质转化的作用机制

目的 观察特异性阻断hedgehog(Hh)信号通路对胰腺癌Panc-1细胞上皮间质转化(EMT)过程的影响,探讨其分子机制.方法 设计并合成针对Smoothened (SMO)基因特异性的RNA干扰靶点,运用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默SMO基因表达以阻断人胰腺癌Panc-1细胞Hh信号通路.应用Matrigel/Transwell法检测阻断Hh信号通路后胰腺癌细胞侵袭能力的变化,应用实时PCR及Western印迹方法检测阻断Hh通路后Panc-1细胞EMT标志物E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、Vimentin、Fibronectin等的表达变化;并检测EMT调控因子Snail、Slug等的表达变化.结果 稳定干扰SMO基因表达阻断Hh信号通路后,人胰腺癌Panc-1细胞侵袭能力明显降低,p=0.020;上皮表型标志物E-cadherin表达明显上调,而间质表型Vimentin、Fibronectin、N-cadherin等的表达水平显著下调,P值分别为0.020、0.001、0.031和0.022;与对照组相比,SMO干扰组细胞中转录因子Snail、Slug的表达水平均显著下调,P值分别为0.018和0.016.结论 应用慢病毒介导的RNA干扰技术特异性沉默SMO基因阻断人胰腺癌细胞中Hh通路活性,可显著抑制Panc-1细胞EMT过程,其机制与下调转录因子Snail及Slug表达有关.     

卵泡刺激素对上皮性卵巢癌细胞株β-黏连蛋白、E-钙蛋白表达的影响

目的 研究卵泡刺激素(FSH)对上皮性卵巢癌细胞株β-黏连蛋白(β-catenin)、E-钙蛋白(E-cadherin)表达的影响.方法 不同浓度 FSH分别作用SKOV3细胞和HO 8910细胞48 h后,分别用免疫荧光及免疫组化方法检测β-catenin、E-cadherin的表达情况.结果 FSH可以增强上皮性卵巢癌细胞株SKOV3和HO 8910内β-catenin表达阳性的细胞数增多,差异有统计学意义(P＜0.05).FSH作用后,SKOV3细胞内E-cadherin表达阳性的细胞数无明显变化(P＞0.05);HO8910细胞内E-cadherin表达阳性的细胞数减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 FSH可能通过与受体结合或通路作用于上皮性卵巢癌细胞,并引起其β-catenin表达的增强及E-cadherin表达的减弱,从而增强卵巢癌细胞的侵袭转移能力.     

鼻咽癌中E-cadherin、TGF-β1和Vimentin蛋白的表达及其与颈部淋巴结转移的关系

目的：探讨E-钙黏附蛋白（E-cadherin）、转化生长因子（TGF-β1）、Vi mentin在鼻咽癌的表达及其与颈部淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组织化学S-P染色法检测36例鼻咽原发癌和30例鼻咽颈部淋巴结转移癌和20例鼻咽黏膜慢性炎症组织中E-cadherin、TGF-β1、Vi mentin蛋白的表达水平。结果：E-cadherin在鼻咽颈部淋巴结转移癌中的阳性表达率为46.7%,显著低于鼻咽原发癌80.6%（P〈0.05）和鼻咽黏膜慢性炎症90%（P〈0.05）,TGF-β1、Vi mentin在鼻咽颈部淋巴结转移癌中阳性表达率均高于鼻咽黏膜慢性炎症（P〈0.05）,但与鼻咽原发癌无明显差异;在鼻咽原发癌、鼻咽颈部淋巴结转移癌中E-cadherin与TGF-β1、Vi mentin的表达呈负相关（P〈0.05）。结论：E-cadherin表达下调在鼻咽癌侵袭转移中起重要作用,鼻咽癌中E-cadherin表达下调及转化生长因子TGF-β1表达增多可引发上皮—间叶细胞转化（EMT）,EMT可能与鼻咽癌侵袭转移相关。     

Snail在非小细胞肺癌中的表达与上皮-间质转化的相关性及临床意义

目的 研究转录因子Snail、上皮-间质转化（EMT）的标记分子在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与肺癌发生、侵袭、转移的相关性,探讨它的临床意义.方法 采用免疫组织化学的方法检测64例NSCLC组织和15例癌旁正常肺组织中Snail、上皮源性标记物E-cadherin、间质源性标记物Fibronectin的表达,并与患者临床病理资料作对照分析.结果 NSCLC组织中Snail表达阳性率为40.6％ （26/64）,癌旁肺组织中Snail表达阳性率13.3％（2/15）（P＜0.05）.肺癌组织中30例观察到E-cadherin表达的缺失（46.8％）,12例观察到胞浆内Fibronectin的阳性表达.Snail、E-cadherin、Fibronectin的表达与肺癌的淋巴结转移、远处转移外侵（P＜0.01）有关.结论 Snail在NSCLC组织中阳性表达,并与EMT的标记蛋白密切相关,可能通过调控上皮-间质转化而在肺癌发生、侵袭、转移过程中发挥作用.