热休克蛋白70对幼鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的研究川芎嗪（TMP）诱导热休克蛋白（HSP）70对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其干预心肌缺血再灌注损伤的作用机制及合理用药途径,为临床使用提供理论依据。方法建立幼鼠在体心肌缺血再灌注模型。将96只体重60-75g SD幼鼠（〈21d）,随机分为3组：（1）假手术（SC）组,（2）缺血再灌注（IR）组,（3）TMP预处理后缺血再灌（TMP＋IR）组;每组再随机分为4个亚组：12h亚组、24h亚组、36h亚组、48h亚组,各亚组分别于腹腔药物注射[TMP＋IR组腹腔注射TMP（100mg／kg）,SC组与IR组腹腔注射等量0．9％氯化钠溶液]后12h、24h、36h、48h制作心肌缺血再灌注模型。测定血清中肌酸激酶同工酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）两种酶的含量,测定幼鼠心肌内HSP70的含量．应用电镜观察幼鼠心肌细胞超微结构的病理改变。结果IR组和TMP＋IR组各时间点血清中CK-MB、LDH含量明显高于SC组（P〈0．01）;IR组心肌中HsP70表达量较SC组略增加,TMP＋IR组HSP70的表达明显增加;电镜心肌细胞超微结构观察：SC组心肌细胞结构基本正常,IR组损伤最严重,TMP＋IR组心肌细胞损伤较IR组有明显改善。结论HSP70的表达可以减轻未成熟心肌的缺血再灌注损伤,可以提高未成熟心肌对损伤性应激的耐受能力。     

热休克预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌P-选择素表达的影响

目的观察热休克预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌P-选择素(PS)表达的影响。方法成年雌性Wistar大鼠40，只，随机分为3组。热休克组予全麻后高热处理致肛温达42士O．5℃维持15min制成热休克动物模型，24小时后热休克组及对照组结扎左冠状动脉前降支(LAD)1小时，再灌注2小时制成心肌缺血再灌注损伤动物模型，假手术组只于LAD处穿线。术毕测血清CK-MB、心梗范围、热休克蛋白70(HSP70)、PS。结果热休克组HsP70表达高于对照组及假手术组(P＜O．05)，后两组比较差异无显著意义(P＞O．05)；热休克组心梗范围、血清CK-MB、PS表达皆少于对照组(P＜O．05)；HSP70的表达与Ps的表达成负相关(r=-O．560)。结论热休克预处理对心肌缺血再灌注损伤有保护作用；Ps参与了心肌缺血再灌注损伤；HSP70可能有抑制缺血再灌注损伤心肌Ps表达的作用，这或许是热休克预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的另一保护机制。     

热休克预处理在大鼠脊髓损伤后细胞凋亡中的作用

目的探讨大鼠脊髓损伤后热休克蛋白70(HSP70)和氧化氮合酶(iNOS)在细胞凋亡中的作用。方法将96只大鼠分为对照组、损伤组和热休克预处理组。采用静压型脊髓损伤模型,分别在伤后6h,12h,1天,2天,3天,1周,2周和3周处死动物。用原位杂交技术检测HSP70mRNA在以上各时点的表达。同时用免疫组化法检测HSP70、iNOS在各时点的表达。运用TUNEL法检测凋亡细胞。另外,用CBS评分来评估神经功能。结果CBS评分显示,热休克预处理组的神经功能明显好于损伤组(P<0.05)。凋亡细胞数在损伤组显著高于热休克预处理组(P<0.05)。通过原位杂交和免疫组化发现,HSP70mRNA和蛋白水平在热休克预处理组明显高于损伤组(P<0.05)。免疫组化的结果还显示,iNOS的量在热休克预处理组明显低于损伤组(P<0.05)。结论热休克预处理能减轻脊髓损伤后的细胞凋亡,其机理可能同HSP70合成增加,并进一步抑制iNOS的表达有关。     

热休克蛋白70在牙髓中的作用的研究进展

热休克蛋白又称应激蛋白,是普遍存在于生物体细胞中在热休克状态下启动的一系列特殊基因编码合成的蛋白质。它是由真核细胞产生的,在正常生理条件下低水平表达,当细胞暴露于特殊环境下时表达增高。因其在体内与多种多肽和蛋白质形成复合体,生理状态下在蛋白质的折叠与伸展,多肽     

热休克蛋白70在脑梗死中的作用

目的 通过观察VEGF基因治疗大鼠脑梗死前后HSP70表达的变化，进一步研究HSP70在脑梗死中的作用。方法 采用改进的线栓法制成Wistar大鼠永久性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，将质粒载体与VEGFl65基因构成的重组DNA经颅骨注入到梗死区，7d后断头取脑，用免疫组化的方法显示脑中的HSP70的表达情况：用HE染色显示梗死区，用图像分析仅测定梗死面积。结果 治疗组HSP70表达显增高，梗塞体积明显缩小。结论 VEGF基因可诱导HSP70的表达，HSP70在脑梗死中起着一中神经保护作用。     

热休克预处理对大鼠胰腺移植后缺血性再灌注损伤的抑制作用

摘要 目的：通过热休克预处理（HPC）,探讨减轻大鼠胰腺移植后缺血再灌注损伤的发生机制。 方法：热休克预处理后动态检测大鼠胰腺组织热休克蛋白表达。建立大鼠胰腺移植缺血再灌注模型,选择表达热休克蛋白高峰时段供体大鼠胰腺移植作为实验组,未预处理的供体大鼠胰腺移植作为对照组。胰腺移植后6h,检测静脉血及移植胰腺。Western blot法检测胰腺组织中热休克蛋白70（HSP70）的表达,免疫组化法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达。碘淀粉比色法检测血淀粉酶水平。光镜观察胰腺病理改变。 结果：HPC后供体大鼠胰腺中HSP70的表达在12h 达到高峰,与其它各时段比较具有显著差异（P<0.05）,与未预处理组比较差异也显著（P<0.01）,48h恢复到原来水平。对照组胰腺组织中TNF-α、中性粒细胞、血淀粉酶的水平明显升高,与假手术组相比差异显著（P<0.01）。实验组降低了胰腺组织中TNF-α、中性粒细胞、血淀粉酶的水平,与对照组比较差异具有统计学意义。（P<0.05）。实验组胰腺间质水肿及出血明显低于对照组。 结论：热休克预处理可以减轻大鼠胰腺移植后缺血再灌注损伤, 热休克预处理的延迟保护作用与HSP70的诱导生成有关。     

热休克蛋白70对缺血性脑卒中的保护作用

热休克蛋白70（heat shock protein 70, Hsp70）是生物体产生的一种可增强细胞对损伤的耐受程度、维持细胞正常代谢功能并提高细胞生存率的高度保守的应激蛋白。本文回顾了近几年有关Hsp70与缺血性脑卒中相关的报道,发现Hsp70可能通过提高细胞抗氧化应激能力、抑制炎症反应以及抑制细胞凋亡,在缺血性脑卒中发挥保护作用。本文对Hsp70在缺血性脑卒中进程中的保护作用及其机制进行了概述。     

脑缺血缺氧后大鼠外周血淋巴细胞热休克蛋白70的表达

目的 研究大鼠缺氧缺血性脑损伤后海马区脑组织病理学损伤变化和外周血单个核细胞的热休克蛋白(HSP)70的表达.方法 建立大鼠脑缺氧缺血模型,苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察脑组织病理学损伤的变化,采用流式细胞术(FCM)检测外周血淋巴细胞HSP70.结果 在缺氧缺性脑损伤后, 外周血淋巴细胞的HSP70水平迅速升高,24 h达到高峰51.05±2.27,其后逐渐降低14.13±1.04至正常水平(P＜0.01),与脑组织病理损伤的时序变化相一致.结论 运用FCM检测外周血淋巴细胞HSP70水平可以作为反映缺氧缺血后脑损伤的辅助指标.     

热休克蛋白与未成熟心肌保护的研究进展

随着先天性心脏病外科手术的发展,患者日趋低龄化使得未成熟心肌保护课题的研究日益重要。然而,临床上一些婴幼儿先天性心脏病,尤其是缺氧紫绀型心脏病,即使已成功地做了畸形矫治手术,但术后仍出现心功能不全等并发症,预后较差。这使人们逐渐意识到广泛应用于临床,并对成人心肌有良好保护作用的冷晶体停跳液,     

热休克蛋白27在脊髓缺血再灌注中表达的实验研究

目的探讨热休克蛋白27在脊髓缺血再灌注机体组织中的保护性机制。方法利用RT-PCR及免疫组化方法检测各实验组HSP27mRNA及HSP27蛋白表达情况。结果缺血再灌注4h与8h组表达最高与其余缺血再灌注组比较差异有统计学意义,两组之间无统计学意义。结论脊髓缺血再灌注后HSP27mRNA与HSP27蛋白表达均随再灌注的时间延长而升高,至4h与8h表达量达最高峰,后随着再灌注时间的推移而降低。     

热休克蛋白70与急性心肌梗死后心室重构的关系

目的：探讨热休克蛋白70(HSP70)与急性心肌梗死(AMI)后心室重构的相关性。方法78例急性心肌梗死患者,根据6个月后左室舒张末期容积指数是否较基线值增加20%将其分为左室重构(LVR)组和非左室重构(NLVR)组。入院后第2天清晨空腹测静脉血中的HSP70,发病第3天和6个月分别行心脏超声心动图测定左室舒张末期容积(LVEDV)。结果 LVR组中HSP70水平高于NLVR组,差异具有统计学意义(P<0.05), LVR组中HSP70水平与LVEDV呈正相关(P<0.05)。结论 AMI后HSP70的表达参与了左室重构的发生,对左室重构有一定的预测价值。     

Oral bimoclomol elevates heat shock protein 70 and reduces myocardial infarct size in rats.

Bimoclomol has been shown to increase an inducible member of the heat shock protein 70 family (HSP70) and cytoprotect in vitro. Here, we addressed whether oral pretreatment of rats with bimoclomol could elevate myocardial HSP70 and reduce infarct size in a rat model of ischemia and reperfusion. Rats were pretreated with bimoclomol at 3, 6 or 18 h or with 42 degrees thermal stress 24 h before ischemia. Infarct size was significantly decreased 6 h after oral administration of bimoclomol and 24 h after thermal stress. Left ventricles from a separate group of rats were examined for HSP70 levels. Western blots showed a significant increase in HSP70 6 h after oral administration of bimoclomol and 24 h after thermal stress. There was a significant correlation (P<0.05) between HSP70 induction and infarct size reduction, whether produced by thermal stress or oral administration of bimoclomol. Thus, bimoclomol can increase HSP70 and reduce infarct size in a rat model of ischemia and reperfusion.     

热休克蛋白70在哮喘小鼠气道炎症模型中的表达及意义

目的 观察哮喘小鼠肺组织中热休克蛋白70(HSP70)的表达及其在哮喘中的作用.方法 将32只BALB/c小鼠随机分为N(正常对照组)、A(急性哮喘组I)、B(急性哮喘组II)和C(慢性哮喘组)4组,每组8只;卵蛋白致敏和激发建立哮喘小鼠模型;支气管肺泡灌洗液(BALF)分析和HE染色鉴定哮喘模型;免疫组化及Western blot法测定各组小鼠肺组织中HSP70的表达和定位.结果 哮喘组BALF嗜酸性粒细胞绝对计数及分类计数较N组皆有显著增高(P＜0.05),HE染色提示哮喘组与N组相比出现嗜酸性粒细胞浸润增多、纤毛脱失、平滑肌细胞层增厚等改变.HSP70在哮喘各组小鼠中主要定位在支气管上皮细胞、部分肺泡上皮细胞和炎症细胞中,而在N组中表达呈阴性结果;HSP70在哮喘组表达量较N组为高(P＜0.05),B组表达量显著高于A组(P＜0.05).结论 哮喘小鼠肺组织中HSP70主要表达于支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞和炎症细胞中,参与哮喘发病.     

腹部手术病人术后血清细胞因子和HSP70水平的变化

目的 比较上腹部和下腹部手术病人血清细胞因子白细胞介素6（IL-6）和IL-10及热休克蛋白70（HSP70）水平变化的趋势及差异。方法 27例ASAⅠ～Ⅱ级病人随机分为两组：Ⅰ组,下腹部硬膜外神经阻滞麻醉下行择期子宫切除术病人（n=12）;Ⅱ组,上腹部静脉全麻下行择期胃癌根治术的病人（n=15）。所有病人术后均以曲马多静脉自控镇痛。观察麻醉前、手术后2、24、48和72h五个时点病人血清细胞因子IL-6、IL-10和HSP70水平的变化。结果两组病人血清IL-6、IL-10和HSP70水平从术后2h起均显著升高（P〈0．05）,至术后72h,除Ⅰ组血清IL-10恢复到麻醉前水平外,余各组血清IL-6、IL-10及HSP70值仍处于较高的水平（P〈0．05）。术后24h,Ⅰ组血清IL-6和IL-10水平低于Ⅱ组（P〈0．01）;术后48h和72h,Ⅰ组血清IL-6和HSP70水平显著低于Ⅱ组（P〈0．01）。结论 下腹部手术病人术后血清IL-6、IL-10及HSP70水平上升幅度小于上腹部手术病人,提示上述变化的差异与手术创伤大小有关。     

Pentylenetetrazol-kindling in mice overexpressing heat shock protein 70

Kindling induced by the convulsant pentylenetetrazol (PTZ) is an accepted model of primary generalized epilepsy. Because seizures represent a strong distressing stimulus, stress-induced proteins such as heat shock proteins might counteract the pathology of increased neuronal excitation. Therefore, the aim of the present study was to determine whether PTZ kindling outcome parameters are influenced by heat shock protein 70 (Hsp70) overexpression in Hsp70 transgenic mice as compared to the respective wild-type mice. Kindling was performed by nine intraperitoneal injections of PTZ (ED₁₆ for induction of clonic–tonic seizures, every 48 h); control animals received saline instead of PTZ. Seven days after the final injection, all mice received a PTZ challenge dose. Outcome parameters included evaluation of seizure stages and overall survival rates. In addition, histopathological findings such as cell number in hippocampal subfields CA1 and CA3 were determined. The onset of the highest convulsion stage was delayed in Hsp70 transgenic mice as compared to wild-type mice, and overall survival during kindling was improved in Hsp70 transgenic mice as compared to wild-type mice. In addition, a challenge dose after termination of kindling produced less severe seizures in Hsp70 transgenic mice than in wild-type mice. PTZ kindling did not result in significant subsequent neuronal cell loss in CA1 or CA3 neither in wild-type mice nor in the Hsp70 transgenic mice. The results of the present experiments clearly demonstrate that overexpression of Hsp70 exerts protective effects regarding seizure severity and overall survival during PTZ kindling. In addition, the decreased seizure severity in Hsp70 transgenic mice after a challenge dose suggests an interference of Hsp70 with the developmental component of kindling.     

热休克蛋白70在侵袭性葡萄胎化疗子宫内膜的表达及其与预后的关系

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在侵袭性葡萄胎化疗子宫内膜中的表达及其与预后的关系。方法采用免疫组织化学法,分别检测34例侵袭性葡萄胎患者的子宫内膜标本中化疗前后HSP70的表达,并进行定期随访追踪检测。结果HSP70在侵袭性葡萄胎患者子宫内膜中过度表达,其表达与病理分期呈正相关(P<001),与化疗后近期疗效呈正相关(P<001),但高表达组与低表达组相比,无病生存期显著降低(P<001)。结论子宫内膜中HSP70表达水平可作为侵袭性葡萄胎转归及化疗疗效判定的指标。     

The 70-kDa heat shock protein (Hsp70) as a therapeutic target for stroke

Introduction: The 70-kDa heat shock protein (Hsp70) is a cytosolic chaperone which facilitates protein folding, degradation, complex assembly, and translocation. Following stroke, these functions have the potential to lead to cytoprotection, and this has been demonstrated using genetic mutant models, direct gene transfer or the induction of Hsp70 via heat stress, approaches which limit its translational utility. Recently, the investigation of Hsp70-inducing pharmacological compounds, which, through their ability to inhibit Hsp90, has obvious clinical implications in terms of potential therapies to mitigate cell death and inflammation, and lead to neuroprotection from brain injury.

Areas covered: In this review, we will focus on the role of Hsp70 in cell death and inflammation, and the current literature surrounding the pharmacological induction in acute ischemic stroke models with comments on potential applications at the clinical level.

Expert opinion: Such neuroprotectants could be used to synergistically improve neurological outcome or to extend the time window of existing interventions, thus increasing the numbers of stroke victims eligible for treatment.     

白藜芦醇对兔急性高眼压视网膜热休克蛋白70表达的影响

目的 观察白藜芦醇 (resveratrol,Res)对兔急性高眼压条件下视网膜节细胞(retinal ganglion cells,RGC)热休克蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)表达的影响.方法 将新西兰大白兔随机分成处理组、对照组和正常组.处理组于急性高眼压模型建立前7天,每天给予腹腔注射白藜芦醇30mg/kg (3ml),第8天经前房灌注升高眼压达90mmHg(1kPa=7.5mmHg),持续90min,24h后取材;对照组用等剂量的生理盐水代替白藜芦醇腹腔注射,余同处理组;正常组不做上述处理直接取材.观察兔视网膜组织病理学结果,免疫组化检测视网膜节细胞HSP70表达.结果 与正常组相比,处理组和对照组表达在视网膜节细胞的HSP70明显增加(P<0.05);与对照组相比,处理组HSP70的表达明显增加(P<0.05).结论 白藜芦醇通过增加兔急性高眼压视网膜神经节细胞HSP70的表达,减轻RCC的损伤,对视网膜具有一定的保护作用.     

冠心病患者外周血热休克蛋白70表达的临床意义

目的探讨冠心病患者外周血单核细胞热休克蛋白70（HSP70）阳性表达率和血清高敏C反应蛋白（hsCRP）浓度的变化与冠状动脉病变稳定性及病变程度的关系。方法选择冠状动脉造影（CAG）确诊并分层冠心病60例[急性冠脉综合征（ACS）38例,稳定性心绞痛（SAP）22例]和非冠心病患者（对照组）20例,以流式细胞术测定单核细胞HSP70阳性表达率,同期ELISA法测定血清hsCRP浓度。结果ACS组HSP70阳性表达率及血清hsCRP浓度明显高于SAP组及对照组（P〈0．05）;冠脉多支血管病变（MV）组HSP70表达水平及血清hsCRP浓度高于双支病变（DV）及单支病变（SV）组（P〈0．05）;而两项指标与患者冠脉病变形态类型无关（P〉0．05）;外周血单核细胞HSP70阳性表达率与血清hsCRP浓度呈显著正相关（P〈0．01）。结论HSP70和hsCRP两项指标与冠脉病变程度及发病性质有关,而与病变形态无关。