高效液相色谱法测定人血浆中那格列奈的含量

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中那格列奈含量。方法:使用固相C18提取柱,将那格列奈和双氯芬酸钠(内标)从血浆中提取,在ODS 5μm,4.6mm×150mm柱上,以流动相0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-乙腈(16:10;用1 mol·L-1氢氧化钠溶液调节pH 6.3)进行分离,流速1 mL·min-1,210nm波长检测。结果:血药浓度线性范围0.05-20μg·mL-1(r=0.9996),血浆中最低检测浓度0.05 μg·mL-1,萃取回收率在82.4％-92.2％,相对回收率98.4％-99.7％,日内及日间RSD分别为4.3％-8.2％和4.0％-8.6％。结论:本法简便、准确,精密度高,重现性好,可应用于那格列奈人体药代动力学研究和生物等效性研究。     

PLC法测定血浆中喷昔洛韦浓度

目的 :建立泛昔洛韦人体内活性代谢产物—喷昔洛韦血浆浓度测定方法。方法 :采用C18反相色谱柱 ,以0 0 2mol·L-1高氯酸 -甲醇 (4 5 0∶8)为流动相 ,荧光检测波长为λex=2 70nm ,λem=375nm ,内标物为阿昔洛韦 ,血浆样品采用 6mol·L-1高氯酸液沉淀蛋白。结果 :喷昔洛韦血浆浓度在 0 12 5～ 16mg·L-1范围内 ,与面积呈良好的线性关系 (r=0 9998) ;本试验最低检测浓度为 0 0 5mg·L-1,日内及日间RSD均小于 8% ,喷昔洛韦的方法回收率大于 90 %。结论 :该方法简便、准确、灵敏 ,可用于泛昔洛韦人体药代动力学及生物利用度的研究     

生物分析法测定人血浆D-聚甘酯

目的:建立测定人血浆中D-聚甘酯的生物分析法。方法:应用 aPTT试剂盒,采用免疫荧光比浊法在 ACL futura plus全自动血凝仪上进行自动定量分析,aPTT来检测血浆中D-聚甘酯浓度,考察其线性范围、精密度及回收率等。结果:D-聚甘酯在0.05～10.0 mg·L~(-1)血浆浓度范围内线性关系良好(r=0.9957,n=10),最低检测浓度为 0.05 mg·L~(-1)。1.0,5.0,10.0 mg·L~(-1)3个浓度的回收率分别为 91.48％,97.56％,105.67％,RSD均小于 14％。这 3个浓度日内及日间 RSD(n=5)分别为 10.63％,5.73％,1.58％和12.91％,9.42％,7.19％。结论:建立的D-聚甘酯生物测定方法操作简便,结果灵敏、准确、可靠,可进一步用于该药的药代动力学研究。     

毛细管柱气相色谱法测定血浆中的丙戊酸浓度

目的　建立测定血浆中VPA浓度的毛细管柱气相色谱法。方法　血浆样品在 6mol·L-1H2 SO4条件下 ,用CHCl3 萃取 ,萃取液于DB -FFAP毛细管柱 ,FID检测器中进行分析。结果　最低检测浓度为 0 .78mg·L-1,线性范围 1.5 6～ 4 0 0mg·L-1,加样回收率 91.2 %～ 10 1.0 % ,日内RSD为 3.2 2 %～ 4 .77% ,日间RSD为 3.93%～ 6 .4 3%。结论　该方法简便快速 ,准确可靠 ,适用于临床的常规监测。     

高效液相色谱法测定血浆中消旋卡多曲的浓度及其药动学

目的建立高效液相色谱法测定血浆中消旋卡多曲活性代谢物thiorphan(TP)的浓度.方法血浆样品通过固相萃取技术处理后,采用Waters sunfireC18色谱柱(150mm×4.6 mm,5μm),以0.02 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(用磷酸调至pH 2.6)-乙腈(74∶26,V/V)为流动相;检测波长为210,进行样品测定.结果血药浓度线形范围为0.05～4 mg·L-1(r=0.999 9),最低检测浓度为0.05 mg·L-1.提取回收率为93.50%～98.20%,方法学回收率为92.80%～96.60%,日内及日间RSD＜8.365%.结论该方法灵敏,快速,准确.     

HPLC测定大鼠血浆中的莽草酸

目的 采用HPLC法测定大鼠血浆中莽草酸的含量.方法 大鼠血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,采用HPLC法测定血浆中莽草酸的含量.色谱柱为WondaCract ODS-2 (250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(3 mmol·L-1四庚基溴化铵)-5mmol· L-1磷酸(用1 mol· L-1 NaOH调pH5.8)(60∶40),检测波长220 nm,流速0.8 mL· min-1,柱温35℃.结果 血浆中莽草酸的线性范围为0.525 ～ 10.50 μg· mL-(r=0.9998),平均回收率为97.7％ ～ 101.6％,日内、日间RSD均＜15％.结论 所用方法简便、灵敏、结果准确,适用于测定生物样品中莽草酸的浓度.     

SPE-HPLC法检测病毒灭活血浆中的残留亚甲蓝

目的建立SPE-HPLC法检测病毒灭活血浆中亚甲蓝浓度的方法并对病毒灭活血浆中的残留亚甲蓝进行质控检测。方法血浆样品经Waters Oasis HLB固相萃取柱提取,采用迪马DiamonsialC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.1%乙酸(45∶55,V/V)为流动相,流速为1.0mL·min-1,柱温30℃,检测波长651nm。结果亚甲蓝在0.05～5μmol.L-1范围内线性良好(r=0.9998),最低检出浓度为0.05μmol·L-1。日内、日间RSD均小于8%。结论SPE-HPLC法具有灵敏度高、特异性强的特点,用此法检测的病毒灭活血浆样品中的残留亚甲蓝均达到要求。     

高效液相色谱法测定氟康唑血药浓度

目的优化氟康唑血药浓度测定方法.方法采用高效液相色谱(HPLC)法,以非那西丁为内标,Nova-Pak(R) C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以0.1 mol·L-1磷酸-磷酸二氢钾缓冲液-甲醇(50∶50,v/v,pH 7.0)为流动相,在210nm处测定其含量.结果线性范围为0.312 5～20mg·L-1,提取回收率＞86.40%(n=5),方法回收率为92.6%～102.6%,日内RSD≤3.46,日间RSD≤5.71%,且稳定性良好.结论方法可靠、简便、快速.     

高效液相色谱法测定小儿体内利多卡因、布比卡因的浓度

目的建立测定人血浆中利多卡因、布比卡因浓度的高效液相色谱方法.方法色谱柱Waters Spherisorb C8(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-1/15 mol·L-1磷酸盐缓冲液(2179,v/v),紫外检测波长230 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果利多卡因在0.112～2.973 mg·L-1范围内,浓度与峰面积之比线性关系良好(r=0.999 8),最低检测限为2ng,平均回收率为100.78%～102.65%,日内、日间RSD分别小于4.7%和6.7%.布比卡因在0.102～2.555 mg·L-1范围内,浓度与峰面积之比线性关系良好(r=0.998 7),最低检测限为2ng,平均回收率为100.73%～102.01%,日内、日间RSD分别小于5.8%和7.3%.结论本方法适用于利多卡因、布比卡因的临床药动学研究.     

HPLC-MS法测定人血浆中那格列奈浓度

目的 建立人血浆中那格列奈浓度的HPLC-MS测定法.方法 血浆中加入含内标液地西泮,用0.3 ml乙腈沉淀离心后,采用选择性离子检测(SIM)方法测定其血药浓度.色谱柱:Teknokroma C18(5 μm,2.1 mm×100 mm);流动相:乙腈-0.1%甲酸(60∶40,V/V);流速0.2 ml·min-1;柱温:25 ℃.结果 标准曲线线性范围为0.05～15 mg·L-1,标准曲线线性关系良好,回归方程为:As=0.7167C-0.0094,(r=0.996 8).高、中、低三种浓度的日内和日间变异均小于10.0%,绝对回收率在87.7%～92.7%,相对回收率在91.1%～105.7%.结论 本方法操作简便,灵敏度高,样品稳定性良好,适用于那格列奈的临床血药浓度检测及药动学研究.     

那格列奈—2-羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其理化性质

目的考察2-羟丙基-β-环糊精(HPCD)对那格列奈的增溶作用;研究那格列奈-HPCD包合物的制备工艺;考察包合物的光谱表征及包合物胶囊的体外释放行为。方法考察不同pH值、不同浓度的HPCD对那格列奈的增溶作用;通过研磨法和冷冻干燥法制备包合物;采用X-射线衍射及差示扫描热量法2种技术手段确证包合物的形成;在不同介质中考察不同方法制备的包合物的溶出度。比较不同环糊精用量比例的包合物、混合物及普通原料药的溶出度。结果不同pH条件下HPCD对那格列奈的增溶作用不同;差热分析及X-射线衍射证明了那格列奈与HPCD形成了包合物;那格列奈-HPCD包合物的水溶性好,在水介质中溶出度较高,在那格列奈与HPCD摩尔比为1∶2的情况下,冷冻干燥法制备的包合物,在pH 1.0的条件下体外溶出度达到100%,研磨法制备的包合物溶出度大于85%,而原料药溶出度仅为20%,显示出了那格列奈包合后的优势。结论包合物的光谱表征同那格列奈有明显不同;经包合后那格列奈的溶解度明显增大;用包合物制的胶囊体外溶出速度快,溶出度高。     

Effect of rifampicin on the pharmacokinetics and pharmacodynamics of nateglinide in healthy subjects

AIMS: Our aim was to investigate the effects of rifampicin on the pharmacokinetics and pharmacodynamics of nateglinide, a novel short-acting antidiabetic drug. METHODS: In a randomized crossover study with two phases, 10 healthy volunteers took 600 mg rifampicin or placebo orally once daily for 5 days. On day 6 of both phases, they ingested a single 60 mg dose of nateglinide. Plasma nateglinide and blood glucose concentrations were measured for up to 7 h postdose. RESULTS: Rifampicin decreased the mean AUC(0,7 h) of nateglinide by 24% (range 5-53%; P = 0.0009) and shortened its half-life (t(1/2)) from 1.6 to 1.3 h (P = 0.001). However, the peak plasma nateglinide concentration (Cmax) remained unchanged. The AUC(0,7 h) of the M7 metabolite of nateglinide was decreased by 19% (P = 0.002) and its t(1/2) was shortened from 2.1 to 1.6 h by rifampicin (P = 0.008). Rifampicin had no significant effect on the blood glucose-lowering effect of nateglinide. CONCLUSIONS: Rifampicin modestly decreased the plasma concentrations of nateglinide probably by inducing its oxidative biotransformation. In some patients, rifampicin may reduce the blood glucose-lowering effect of nateglinide.     

HPLC-MS法测定那格列奈的血药浓度

目的建立高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）法测定那格列奈血药浓度。方法血浆样品采用乙腈沉淀后,以地西泮为内标。色谱柱为AgilentZorbaxSB-C18（100mm×2.1mm,5μm）柱,流动相为5mmoL·L^-1醋酸铵-乙腈（45∶55,v/v）,流速为0.3mL·min^-1,离子检测方式设为选择性离子检测（SIM）,检测离子极性为正离子,采用气动辅助电喷雾离子化（ESI）的离子化方式,检测对象为那格列奈（M＋H离子,m/z318.43）,内标地西泮（M＋H离子,m/z285.30）。结果线性范围：0.05～15mg·mL^-1（r=0.9997）,定量限为10μg·L^-1。方法回收率90.1%～95.8%,日内、日间精密度分别小于4.9%和6.1%。结论该方法选择性好,灵敏度高,简便易行,适用于那格列奈药物动力学和生物等效性研究。     

反相高效液相色谱法测定那格列奈含量

目的:建立了那格列奈原料药高效液相色谱法的含量测定方法,为其质量控制提供快速、有效的分析手段。方法:色谱柱为 Kromasil C_(18)柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇-水相(磷酸氢二钠8.5 g,溶解于1000 mL水中,用磷酸调节至pH 6.5)(67:33),流速1.0 mL·min~(-1),柱温30 ℃,检测波长210 nm,进样量10 μL。结果:以峰面积计算那格列奈在0.2～2μg范围内呈良好线性关系(r=0.9999),RSD=0.98％,平均回收率为99.61％,最低检测限为1ng。相关杂质、中间体与那格列奈分离良好。结论:该法专属性强,灵敏度高,重现性好,可作为那格列奈含量测定和杂质控制方法。     

那格列奈胶囊在健康志愿者的药代动力学和生物等效性

目的　研究健康志愿者口服那格列奈胶囊后的药代动力学及生物等效性。方法　用开放随机交叉给药方案,20名男性健康志愿者分别单剂量口服那格列奈90mg试验制剂或参比制剂,用HPLC法测定健康受试者血药浓度,计算那格列奈的药代动力学参数。结果　经3P97药动学计算程序处理拟合,药时曲线符合口服给药一室开放模型,试验制剂与参比制剂的药代动力学参数:AUC0-10分别为(12.38±1.9)和(12.78±2.72) mg.h.L-1, Cmax分别为(4.93±1.08)和(4.88±1.06) mg.L-1, tmax分别为(2.40±0.31)和(2.32±0.34) h,t1/2ke分别为(2.065±0.702)和(2.08±0.76) h,那格列奈胶囊的相对生物利用度为(100.6±22.8)%。结论　那格列奈胶囊试验制剂和参比制剂具有生物等效性。     

那格列奈的合成

目的：合成抗2型糖尿病药物那格列奈。方法：以对异丙基苯甲醛为原料，经氧化、催化氢化、在高温高压碱性条件下，将顺式-对异丙基环己甲酸异构化为反式-异构体，然后与D-苯丙氨酸甲酯盐酸盐缩合、水解，合成那格列奈。结果：反应中间体以及目标产物的化学结构均经过了光谱分析确证，反应总收率为28．7％。结论：本方法步骤简单，易于工业化生产。     

国产那格列奈和进口瑞格列耐治疗2型糖尿病随机双盲平行对照多中心临床试验

目的比较国产那格列奈和进口瑞格列耐治疗2型糖尿病的疗效和安全性。方法用双盲双模拟随机平行方法,210例患者经14周治疗,评价组内和组间的糖化血红蛋白、餐后血糖和安全性。结果治疗后,2组糖化血红蛋白和餐后2h血糖均显著降低。糖化血红蛋白:国产那格列奈组为(9.06±1.54)%vs(7.85±1.00)%(P<0.05);进口瑞格列耐组为(8.95±1.56)%vs(7.76±1.04)%(P<0.05)。餐后2h血糖:国产那格列奈组为(14.17±3.44)mmol·L-1vs(10.90±2.97)mmol·L-1(P<0.05);进口瑞格列耐组为(14.14±3.11)mmol·L-1vs(10.89±3.09)mmol·L-1(P<0.05)。治疗后,空腹血糖和胰岛素水平均有不同程度下降,但无统计学差异。药物不良反应主要为轻度低血糖。结论国产那格列奈与进口瑞格列耐均显著降低餐后血糖且无严重药物不良反应。     

那格列奈胶囊和片剂的人体药物动力学及生物等效性研究

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中那格列奈浓度的方法,研究那格列奈胶囊和片剂的药物动力学及生物等效性。方法以迪马C18(250 mm×1.5 mm,5μm)为分析柱,乙腈-0.02 mol.L-1乙酸胺缓冲液(40∶60)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,紫外检测波长为214 nm,柱温为40℃,瑞格列奈为内标,测定人血浆中那格列奈的浓度。结果在浓度0.187 5~12μg.mL-1,那格列奈和内标峰面积比值与浓度呈良好的线性关系(r2=0.995 47),最小检出浓度为0.093 75μg.mL-1。那格列奈的平均回收率为103%±7%,日内、日间RSD均≤6.8%,那格列奈体内过程符合二室模型,tmax、Cmax、t1/2β、AUC0~∞h分别为(1.36±0.40)h、(6.42±0.30)μg.mL-1、(1.36±2.26)h、(16.10±1.54)μg.h.mL-1。结论本方法简便、灵敏、准确,可用于那格列奈血药浓度检测和药物动力学研究。经统计学分析,试验制剂(胶囊剂)和参比制剂(片剂)具有生物等效性。