慢性丙型肝炎感染期间肝内CD8~+T细胞的衰竭

丙型肝炎病毒(H CV)持续感染期间,用以控制病毒的肝内特异性CD8+T细胞发生衰竭的确切机制目前尚未完全阐明。作者利用4种事先确定的H LA-A2-限制型丙肝病毒抗原表位,对CD8+T细胞在27例H LA-A2阳性患者中的反应性进行研究。在其中一些患者体内确定了相应的HCV序列,并对肝内H CV特异性CD8+T细胞的反应进行了比较。研究结果表明:①肝内H CV特异性CD8+T细胞存在于大多数慢性H CV感染者体内,其免疫反应显著重复发生在这些患者的外周血中;②大部分肝内H CV特异性CD8+T细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)的能力受到损伤,因为肝内流感特异…     

慢性HCV感染者肝内功能不良性CD8^＋T细胞的聚集机制

背景与目的：HCV的慢性感染可导致肝纤维化和癌变。细胞毒性T淋巴细胞（CTL）介导的免疫反应与病毒清除或持续感染有关，并因此决定疾病的进程。方法：采集32例慢性HCV感染肝内和外周血的CD8^＋T细胞，应用流式细胞仪分析CD3激发后的细胞表面分化标记、IFN-γ和TNF—α的生成、脱颗粒能力及穿孔素的成分。同时采集13例非病毒性肝病患的CD8^＋T细胞作为对照。结果：无论其终末期前和终末期的分化因子（CCR7^-CD45RA^-／＋）表型如何，HCV感染肝内CD8^＋T细胞对T细胞受体（TCR）介导的刺激反应均弱于未感染，这种缺陷与肝纤维化程度相关。与ALT〉1．5倍正常值的患相比，在ALT〈1．5倍正常值的患中这种缺陷更为突出，而经分裂原刺激后则不明显。     

急性HBV感染期或感染后对肝内HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞的分析

背景与目的:由于考虑到常规肝活检后相关并发症的风险性,对急性乙型肝炎病毒(H BV)感染者的肝内病毒特异性T细胞反应的特点尚无明确研究。该研究旨在应用细针抽吸活组织检查(FNAB)法对急性H BV感染者肝脏内的病毒特异性CD8+T细胞反应进行分析。方法:对H LA-A2阳性的急性H BV感染者分别于初次接诊时、H BsA g血清转换时、H BsAg血清转换3个月后进行FNA B。在FNA B抽吸出的细胞和外周血(PB)中应用H LA-A2四聚体识别H BV特异性CD8+T细胞。结果:在初诊时,肝内CD8+T细胞的存在与肝脏损伤的程度具有相关性。在每次FNAB后的…     

丙型肝炎病毒性肝纤维化的肝内基因表达谱与α-平滑肌肌动蛋白着色模式

为了研究丙型肝炎病毒(H CV)性肝脏纤维化介导肝脏损害的发病机制,本文对H CV感染者肝纤维化不同时期的肝内基因表达与α-平滑肌肌动蛋白(α-SM A)的着色模式进行了对比。研究了21例肝活检标本:5例无纤维化(Ludwig-Batts0期);10例早期肝门或门静脉周围纤维化(1期和2期);6例晚期肝纤维化(3期和4期),无1例肝细胞性肝癌。基因转录情况由高浓度的低聚核苷酸微阵列确定。A N OV A确定了157个基因转录丰度与纤维化进程有关。这些可以明确患者的3个分级情况。大部分0期纤维化患者m RN As转录丰度的升高与糖脂类代谢有关。PD GF作为一种潜…     

调节性T细胞对肝纤维化小鼠肝脏免疫细胞的影响

目的 观察肝纤维化小鼠肝内调节性T细胞(regulatory T cell,Tregs)对具有杀伤能力的免疫细胞的影响.方法 将实验小鼠分为肝纤维化组、肝纤维化+CD25抗体组、对照组3组.实验组用四氯化碳诱导小鼠肝纤维化,4周后给予小鼠腹腔注射纯化的CD25单克隆抗体(PC61培养上清),下调体内Tregs水平.对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水.流式细胞分析检测肝脏Tregs水平以及CD8+T细胞(细胞毒性T细胞表面标志)、Kupffer细胞(F4/80)以及NK细胞的表达.实时荧光定量检测不同亚型的Kupffer细胞及IFN-γ在不同组小鼠肝脏的表达.结果 肝纤维化小鼠肝脏Tregs明显高于对照组,注射CD25抗体下调Tregs 50％以上.CD8+T细胞、Kupffer细胞在肝纤维化小鼠肝内表达升高,下调Tregs后均无明显改变;但NK细胞和IFN-γ在肝纤维化小鼠肝内表达明显下降,下调Tregs后表达显著上升,其中M1型Kupffer细胞在肝纤维化组表达略有降低,下调Tregs后表达升高;M2型变化不明显.结论 Tregs参与对肝纤维化小鼠肝脏的免疫调控,其中对M1型Kupffer细胞和NK细胞抑制作用明显,对CD8+T细胞抑制作用不显著.     

狼疮性肾炎感染与非感染患者之间淋巴细胞亚群的差异

目的:了解系统性红斑狼疮-狼疮性肾炎(SLE-LN)患者感染者与非感染者之间外周血T淋巴细胞亚群、B细胞及自然杀伤细胞(NK细胞)的差异。方法:应用流式细胞仪对25例SLE-LN合并感染患者及25例SLE-LN不合并感染患者的外周血淋巴细胞亚群进行检测。结果:与未感染组相比,感染组患者的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、NK细胞显著降低,B细胞显著升高。SLE-LN患者感染者与非感染者之间的淋巴细胞亚群水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:免疫活性细胞介导的免疫机制在SLE-LN合并感染中起重要作用。     

乙型肝炎病毒感染患者T细胞亚群及IL-6水平的表达及临床意义

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者T细胞亚群及白细胞介素-6(IL-6)水平的表达及其临床意义。方法:选择2012年1月至2017年1月本院收治的HBV感染者286例,同时选取同期体检健康者60例作为对照组,实时荧光定量PCR法测定HBV感染者血液中HBV-DNA载量,应用流式细胞仪检测各组T细胞亚群分布,应用酶联免疫吸附法测定各组血清IL-6水平。结果:对照组、急性乙型肝炎组、慢性乙型肝炎组、乙型肝炎肝硬化组的CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+细胞/CD8+细胞、HBV-DNA载量及IL-6之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析显示,HBV感染者CD3+细胞、CD4+细胞、CD4+细胞/CD8+细胞、HBV-DNA载量与IL-6呈正相关,CD8+细胞与IL-6呈负相关。结论:HBV感染者随疾病进展CD3+细胞、CD4+细胞和CD4+细胞/CD8+细胞显著降低,CD8+细胞、IL-6显著升高,T细胞亚群和IL-6水平与疾病类型和HBV-DNA载量有密切关系。     

HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞活化亚群与病毒载量的相关性

目的 探讨HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞活化亚群与病毒载量相关性。方法 2012年6-8月选择河南省某AIDS高发地区HIV感染者322例和AIDS患者87例为研究对象,分别采用流式细胞仪和全自动病毒载量仪检测HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞及其活化亚群和血浆病毒载量,根据病毒载量水平将研究对象分为Ⅰ～Ⅳ组。结果 HIV感染者与AIDS患者CD+3T细胞相对值、CD+28/CD+4比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。HIV感染者淋巴细胞绝对值和相对值、CD+3T细胞绝对值、CD+3CD+8T细胞绝对值、CD+3CD+4T细胞绝对值和相对值、CD+3CD+4CD+8T细胞绝对值均高于AIDS患者,CD+3CD+8T细胞相对值低于AIDS患者,辅助性T细胞与抑制性T细胞比值（H/S）、CD+28/CD+8高于AIDS患者,CD+38/CD+8低于AIDS患者,差异均有统计学意义（P＜0.05）。各组淋巴细胞绝对值和相对值、CD+3T细胞相对值、CD+3CD+8T细胞相对值、CD+3CD+4T细胞绝对值和相对值及H/S、CD+28/CD+4、CD+28/CD+8、CD+38/CD+8比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。CD+3T细胞相对值、CD+3CD+8T细胞相对值及CD+38/CD+8与病毒载量水平呈正相关（rs=0.128、0.291、0.409,P＜0.05）;CD+3CD+4T细胞绝对值和相对值、H/S、CD+28/CD+4、CD+28/CD+8与病毒载量水平呈负相关（rs=-0.246、-0.318、-0.297、-0.184、-0.204,P＜0.05）。结论 HIV感染者和AIDS患者T淋巴细胞活化过程发生变化|随着病毒载量水平变化,HIV感染者和AIDS患者的T淋巴细胞活化亚群水平也不同。     

HBV感染对人体T细胞免疫功能影响的研究

目的:通过检测乙型肝炎病毒(HBV)感染后外周血及感染肝组织内CD4 T和CD8 T细胞的数量及功能,探讨HBV对人体T细胞免疫的影响及其可能机制.方法:(1)用流式细胞仪检测36例HBV感染者和20例正常人外周血中T细胞亚群的数量.(2)用免疫组化S-P法检测64例慢性肝病的肝脏标本的HBsAg和HBcAg,将HBsAg和(或)HBcAg阳性的50例作为HBV感染组,而将肝组织HBsAg和HBcAg及血清病原学检查均为阴性的10例作为非HBV感染组(HBV阴性组).检测其中CD4、CD8、CD25表达情况.结果:(1)HBV感染组外周血T细胞亚群测定值中,CD4 T细胞和CD4 T/CD8 T比值明显低于对照组(Pb＜0.05);CD8 T细胞升高,明显高于对照组(Pb＜0.05);(2)肝组织内浸润的淋巴细胞主要聚集在汇管区和小叶坏死区,免疫组化结果显示HBV感染组肝组织内的CD8 T和CD4 T细胞数量多于非HBV感染组,统计学上其差异有非常显著意义(Pc＜0.01).HBV感染组肝组织内与T细胞活性有关的CD25 T细胞数量与对照组相比有所减少,但统计学上无显著意义.结论:乙型肝炎病毒感染者外周血和肝内的T细胞亚群紊乱,且活性可能有下降,免疫功能受损.     

单独HIV感染与HIV/HCV共感染患者肝脏功能及免疫状态分析

目的:探讨单独HIV感染及HIV合并HCV感染患者血清肝功能指标,外周血T淋巴细胞亚群计数及肝纤维化结果变化。方法:采集2017年1-6月门诊单纯性HIV感染患者(40例),HIV,HCV共感染患者(15例)的标本,用全自动生化分析仪检测肝功能,流式细胞仪检测CD3+,CD4+,CD8+T淋巴细胞。全自动免疫分析仪检测肝纤维化指标。并采用SPSS20软件进行统计学分析。结果:HIV/HCV共感染组ALT,ASTGGT,CG水平高于HIV单独感染者(P0.05)。而CD4+计数及CD4+/CD8+低于HIV单独感染者(P0.05)。HIV/HCV共感染组HA高于HIV单独感染组(P0.05)而层粘连蛋白(LN),IV型胶原(IVC),Ⅲ型前胶原(PCⅢ)虽均增高但P0.05,差异无显著性。结论:HCV合并HIV感染加重HIV病程,加重肝脏损伤。     

感染HCV妇女生育的儿童的CD4~+淋巴细胞对丙型肝炎病毒的特异性反应

背景与目的:T淋巴细胞对病毒抗原的特异性反应可能是宿主感染病毒后的免疫学标志。本文目的是研究垂直感染丙型肝炎病毒(H CV)是否会激活H CV特异性的T细胞反应,从而做为以前接触过该病毒的生物标记,这可能对解释H CV低垂直传播率有作用。方法:本文研究了28例由慢性H CV感染妇女生育的儿童。在培养的外周血单核细胞(PBM Cs)经H CV多肽刺激后,评估了H CV特异性的CD4+淋巴细胞的活化、增殖及细胞因子的产生。结果:在28例儿童中发现20例H CV特异性CD4+淋巴细胞反应。儿童H CV特异性CD4+淋巴细胞增殖比其母亲更频繁、更活跃。儿…     

急性感染期HCV特异性T细胞早期增殖受损可致病毒清除失败

背景与目的:细胞介导的免疫(CM I)一直都被认为在原发性丙型肝炎病毒(H CV)感染的病毒清除中发挥了关键作用。然而,一些转为慢性感染的个体在急性感染阶段,体内也产生了CD4+和CD8+T细胞应答,这提示它们引发了一种有缺陷的CM I。在一个大样本受试人群队列中进行该研究目的是,通过检测CM I的幅度、强度、功能及持续时间,以确认在急性H CV感染的自然病程中,这些免疫功能障碍是否存在及其产生的时间。方法:为了综合研究CM I,对31例在其感染出现即被纳入该项前瞻性研究的急性H CV感染个体进行取样,并中位随访1年。结果:研究结果显示,…     

HIV-1慢性感染者CD8+Tscm异常免疫活化对T细胞耗竭的影响

目的 探讨HIV-1慢性感染者CD8+干细胞样记忆性T细胞(stem memoryT cell,Tscm)免疫活化水平的变化特点及其活化对CD8+T细胞功能耗竭的影响.方法 选取24例未经治疗的HIV-1慢性期感染者和41名健康对照者,采用流式细胞术分别检测健康对照者和HIV-1感染者CD8+Tscm的比例、CD8+Tscm的免疫活化水平、CD8+T细胞表面抑制性分子(CD160、PD-1、TIGIT、TIM-3和LAG-3)表达水平及CD8+T细胞功能(分泌细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的能力);分析CD8+Tscm的免疫活化水平与CD8+T细胞抑制性分子表达及CD8+T细胞功能的相关性.结果 与健康对照者相比,HIV-1慢性期感染者CD8+ Tscm的比例显著下降,CD8+ Tscm免疫活化水平(CD38+HLA-DR+CD8+ Tscm比例)显著升高.HIV-1慢性期感染者CD8+ Tscm免疫活化水平与CD8+T细胞分泌IL-2和TNF-α水平呈负相关.HIV-1慢性感染引起CD8+T细胞抑制性分子(CD160、PD-1、TIGIT和LAG-3)上调,但活化的CD8+Tscm仅与CD8+T细胞抑制性分子TIGIT表达水平呈正相关.CD8+T细胞抑制性分子TIGIT表达水平与CD8+T细胞分泌IL-2和TNF-α水平呈负相关.结论 HIV-1慢性感染引起CD8+Tscm的异常免疫活化,活化的CD8+ Tscm通过上调CD8+T细胞抑制性分子TIGIT抑制CD8+T细胞功能.     

探讨外周血淋巴细胞亚群改变与HCV感染者病情及临床治疗的关系

目的探讨丙型肝炎感染者外周血淋巴细胞亚群与HCV基因型、肝脏炎症以及与IFN-α治疗的相互关系。方法采用流式细胞仪对41例丙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群百分比进行测定。同时对HCV采用限制性片段长度多态性(RFLP)进行基因分型。结果未经治疗感染者的激活T细胞(CD3+HLA-DR+)、激活CD4+T细胞(CD4+HLA-DR+、CD4+CD25+)及NK细胞(CD3-CD16/CD56+)均低于正常(P0.05);CD8+T(CD8+CD3+)细胞、激活CD8+T细胞(CD8+HLA-DR+、CD8+CD38+)及B细胞(CD19+)均高于正常(P0.05);在使用干扰素-α(INF-α)对有症状感染者治疗后:INF-α能显著提高受治者外周血激活T细胞(CD3+HLA-DR+)、激活CD4+T细胞(CD4+HLA-DR+、CD4+CD25+)及NK细胞(CD3-CD16/CD56+)的百分比(P0.05);同时降低CD8+T(CD8+CD3+)细胞、激活CD8+T细胞(CD8+HLA-DR+、CD8+CD38+)及B细胞(CD19+)的百分比(P0.05)。另外,还发现在伴有肝脏炎症的患者中,CD8+(CD8+CD3+)细胞、激活CD8+T细胞(CD8+HLA-DR+、CD8+CD38+)要明显高于不伴有炎症的者(P0.05),而NK细胞(CD3-CD16/CD56+)则要显著低于不伴有炎症者(P0.05);不同HCV基因型感染者外周血淋巴细胞亚群百分比差异均无统计学意义(P0.05)。结论丙型肝炎患者细胞免疫功能存在着较严重的失调;CD8+细胞可能在丙型肝炎患者肝脏的炎症发生中起着重要作用;而INF-α的抗病毒作用的机理之一可能是通过调节机体的细胞免疫功能来实现的。不同HCV基因型感染者的细胞免疫功能未见差异。     

对539例HIV感染者皮肤黏膜表现的临床分析

目的通过研究H IV感染者/AIDS患者皮肤黏膜表现的种类数及严重程度及其与CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值的关系,评估皮肤黏膜病变作为预测和评估患者免疫状态的临床指标的可行性。方法对北京佑安医院2001年5月~2006年4月收集的539例住院及门诊H IV感染者/AIDS患者的临床资料作回顾性研究,采用流式细胞仪技术检测350例出现不同皮肤黏膜表现及189例无皮肤黏膜表现患者的CD4+T细胞计数、CD4+/CD8+比值,观察H IV感染人群中各种皮肤病的发生率,并研究出现皮肤病的种类数、严重程度与艾滋病患者免疫功能的相关性。结果H IV阳性患者的皮肤病发生率为65%,其中口腔黏膜念珠菌感染最常见。H IV阳性有皮肤黏膜表现组CD4+T细胞计数的平均数与CD4+/CD8+比值(分别为53.04个/μL与0.202 4)明显低于无皮肤黏膜表现组(分别为281.97个/μL与0.312 9),2组间比较差异具有明显的统计学意义(P<0.05),且CD4+T细胞计数与所患皮肤病的种类数及严重程度呈负相关。结论H IV感染者/AIDS患者的常见皮肤病临床表现,即患者皮肤疾病的种类数、发生率及严重程度与CD4+T细胞计数呈负相关,某些皮肤黏膜表现可以作为预测和评估资源有限国家患者免疫状态的临床指标。     

终末期肾病患者腹膜透析和血液透析对自然杀伤细胞和T细胞亚群的影响

目的:探讨终末期肾病患者腹膜透析和血液透析对自然杀伤细胞和T细胞亚群的影响。方法:按随机数字表法将100例终末期肾病患者分为对照组和观察组,每组各50例。对照组采取血液透析治疗,观察组采取腹膜透析治疗,分别于治疗前、治疗6个月后测定两组自然杀伤细胞(NK细胞比例、NK细胞活性)和T细胞亚群(包括CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4/CD8)水平变化。结果:治疗后,观察组CD3~+、CD8~+水平高于对照组,CD4~+、CD4/CD8水平低于对照组(P<0.05);治疗后,观察组NK细胞比例、NK细胞活性均低于对照组(P<0.05)。结论:两种透析方式均可改善终末期肾病患者的细胞免疫功能,但腹膜透析较血液透析方式更为显著。     

趋化因子受体CXCR3及初始/记忆T淋巴细胞在原发性胆汁性肝硬化患者肝脏和外周血中的变化

目的 通过研究原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者与非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者外周血和肝脏内淋巴细胞及其活化状态(分子标记:HLADR+CD3+)、初始T细胞(CD45RA)、记忆T细胞(CD45RO)及趋化因子受体CXCR3,了解肝内淋巴细胞活化状态及其影响因素.方法 流式细胞法检测两种肝病患者外周血和肝内淋巴细胞分子标记CD3、CD4、CD8、HLADR+CD3+、CD45RA、CD45RO、CXCR3,进行统计分析.结果 PBC患者在外周血中以CD4+T淋巴细胞为主,肝内浸润淋巴细胞CD8+T和CD4+T淋巴细胞无明显差异;肝内与外周血比较:CD4+T淋巴细胞明显减少,CD4/CD8比例明显降低, HLADR+CD3+T淋巴细胞差异无显著性,CD45RA明显低于外周血,CD45RO则差异无显著性,CXCR3高于外周血中.与NASH患者比较:PBC患者肝内CD4+T细胞增多,CD4/CD8上升,HLADR+CD3+增高,CD45RO、CD45RA减少,CXCR3增多;外周血T淋巴细胞及HLADR+CD3+两组间差异无显著性,CD45RA减少,CXCR3两组间差异无显著性.结论 PBC患者外周血淋巴细胞及其活化状态与肝内免疫状况有关;肝内CD4+T淋巴细胞较NASH患者增多,提示CD4+T的活化和增殖是PBC发生和发展的关键环节;记忆性T淋巴细胞数量(CD45RO)控制在一定范围内可能是自身免疫反应得以不断进行的原因;CXCR3与T淋巴细胞向肝脏定向迁徙有关.     

男男性接触者HIV早期感染CD4+T细胞亚群的动态分析

目的 分析北京市男男性接触(men who have sex with men,MSM)人群人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)早期感染者CD4+T细胞及其亚群的动态变化规律.方法 选择HIV阴性对照组12例和HIV急性期感染者18例,均来自于北京佑安医院所建的MSM队列和HIV急性期感染者队列.取HIV急性期感染者随访第4,12,24和48周外周血,监测CD4+T细胞的变化.流式细胞术检测CD4+T细胞表面CCR7和CD45RA分子的表达.结果 与HⅣ阴性对照组相比,HIV急性期感染者CD4+T细胞的数量、效应记忆CD4+T细胞(effector memoryT cell,Tem)的比例和绝对数均显著减少,两组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).CD4+ Tem绝对数的变化与CD4+T细胞绝对数呈显著正相关(r=0.5768,P=0.0001),而与血浆病毒载量呈负相关(r=-0.2962,P=0.0296).结论 效应记忆性CD4+T细胞数量的下降也可作为HIV早期感染者疾病进展的早期预测指标.     

HIV-1慢性感染者外周血中CD8~+干细胞样记忆型T细胞变化以及对疾病进展的影响

目的观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)慢性感染者外周血中CD8+干细胞样记忆型T细胞(CD8+stem memory T cells,CD8+TSCM)随治疗的动态变化,分析其与疾病进展的关系。方法观察25例经抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的慢性HIV-1感染者(治疗方案为替诺福韦+依非韦伦+拉米夫定)以及36例健康对照者,对样本外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)分别用CD3-APCCy7、CD4-FITC、CD8-Per CPCy5、CD45RAPECy7、CCR7-APC、CD27-PE、CD95-Pacific Blue抗体和CD38-PE、HLA DR-APC抗体进行细胞表面染色并通过流式细胞仪检测CD8+TSCM细胞比例。比较HIV-1慢性感染者和健康者CD8+TSCM细胞比例的差异,并分析其与疾病进展指标(CD4+T细胞计数、HIV病毒载量以及免疫活化指标)的关系。结果 HIV-1慢性感染组的CD8+TSCM细胞比例小于健康对照组;CD8+TSCM细胞比例与CD4+T细胞计数呈正相关,与HIV-1病毒载量以及免疫活化指标CD38+HLA-DR+CD8+T细胞呈负相关;随着ART治疗,CD8+TSCM细胞比例在144周后升至健康对照水平。结论 CD8+TSCM在慢性HIV-1感染中发挥一定的保护作用,HIV-1相关特异性CD8+TSCM细胞可能是未来T细胞疫苗设计的靶点。     

胸腺外CD4~+CD8~+(DP)T淋巴细胞

T细胞在胸腺内的分化发育经历CD4 -CD8-双阴 (DN)T细胞的早期阶段、CD4 +CD8+(DP)细胞的中期阶段、经过阳性选择和阴性选择分化发育成只表达CD4 +或CD8+的单阳 (SP)细胞的后期阶段。SP细胞为成熟的T细胞 ,从胸腺迁出后移居到血液和周围淋巴器官中。既往认为在成熟的T细胞上 ,CD