滇南小耳猪生长激素基因多态性研究

目的 探讨滇南小耳猪生长激素基因多态性,为滇南小耳猪的选育提供分子标记辅助选择的依据.方法 采用PCR-RFLP方法对滇南小耳猪GH基因的Apa Ⅰ酶切位点多态性进行了分析.结果 检测到两种基因型AA和AB,AB型的频率高子AA型.没有检测到BB基因型个体.等位基因A的基因频率高于等位基因B,等位基因A在群体中占优势.结论 滇南小耳猪群生长激素基因具有较丰富的多态性.     

滇南小耳猪血液生理生化部分指标测定

目的测定正常3～6月龄和8～12月龄封闭群滇南小耳猪血液生理与生化各项指标.方法常规方法检测滇南小耳猪18项血液生理指标、30项血液生化指标,统计各指标间的性别差异及两年龄段同类指标的对比分析.结果性别间绝大多数血液生理与生化指标差异不显著.3～6月龄血液生理与生化雌雄间比较,各指标差异均无统计学意义（P〉0.05）;8～12月龄血液生理雌、雄间HGB、RBC、HCT、MONO%和MONO有差异（P〈0.05）,雌雄间血液生化ALT、TBA、CHO、TG、LDL-C、APOB和CL有差异（P〈0.05）;两个年龄组雌雄合并相比,血液生理WBC、PLT、MPV、LY、MCHC、NEUT%和NEUT等7项指标有差异（P〈0.05）,生化指标ALB、UREA、HDL-C、GLU、APOA和FE等6项指标差异有统计学意义（P〈0.05）.结论滇南小耳猪两个年龄段之间以及雌、雄之间部分血液生理生化指标存在明显差异可为滇南小耳猪的标准化研究和相关实验研究提供基础资料和数据.     

云南滇南小耳猪与广西巴马小型猪mtDNA D-Loop的初步研究

目的研究封闭群滇南小耳猪与广西巴马小型猪线粒体DNA（mtDNA）的多态性,探索小型猪遗传监测的方法。方法用18种限制性内切酶对23头滇南小耳猪和21头广西巴马小型猪mtDNA D-loop的PCR产物进行RFLP分析。结果滇南小耳猪和广西巴马小型猪的mtDNA D—loop在品种内和品种间均表现出相同的酶切图谱,未见多态性。结论滇南小耳猪与广西巴马小型猪mtDNA D—loop的遗传多样性贫乏,mtDNA PCR—RFLP技术在其遗传监测中不具应用价值。     

初情期前云南滇南小耳猪超数排卵和原核期胚胎体外发育的研究

目的对初情期前云南滇南小耳猪超数排卵和原核期胚胎体外发育进行研究．方法对8头初情期前云南滇南小耳猪注射1000IUPMSG和500IUhCG诱导超数排卵,以自然交配和人工授精技术、手术或离体冲卵技术回收原核期胚胎,并进行胚胎体外培养研究．结果超排的激素处理方法可成功诱导超生理数量的卵子发育和排卵及受精,最多可得到31枚受精卵．受精卵的囊胚率可达到87．5％．经过比较研究,人工授精可能优于自然交配的授精方式;雌激素可作为初情期前小母猪的超排成败的重要标志．但是,手术法冲卵的技术较离体冲卵的还很低．结论初情期云南滇南小耳猪可用于体内胚胎生产,其原核期胚胎体外发育具有比较高的的发育潜能．     

滇南小耳猪原位心肺联合移植过程的手术配合

目的探讨滇南小耳猪同种原位心肺联合移植的手术配合方法。方法 2009年1月至2010年3月对14只实验用封闭群滇南小耳猪进行心肺联合移植的实验研究。结果手术过程顺利,供体心肺保护良好,7例手术成功,6例成功复跳,获得短期存活,达到研究目的。结论各组人员进行积极有效的手术配合是成功进行小耳猪原位心肺联合移植手术的重要因素。     

滇南小耳猪精液的直接冷冻保存

目的建立滇南小耳猪精液冷冻保存方法,加速云南省特有小型猪种的小型化选育。方法利用脉冲电刺激模式诱导公猪输精管自助收缩排精。利用直接冷冻新技术(DFM)研究不同冷冻方案对精子的运动度、精子顶体完整性和体内授精胚胎发育能力的影响。结果在直接冷冻方法中,3%甘油防冻剂的作用下,60 s植冰时间和1.5 mm/s的冷冻降温参数对精子运动度保护良好,精子运动复苏率达到61.7%。但是,3%乙二醇虽然与甘油一样对精子的顶体完整性都有很好的保护作用,对精子运动度保护能力较差。此外,3%甘油、60 s植冰、1.5mm/s冷冻速度的直接冷冻的冻精解冻,移植到超数排卵的母猪子宫颈口实施人工授精,获得卵的受精和胚胎发育潜能尚可。结论玻璃管直接冷冻可以完成滇南小耳猪精子的冷冻保存。     

前降支结扎构建滇南小耳猪心梗诱导的缺血性心肌病模型

［摘要］目的　建立心梗诱导的缺血性心肌病大动物模型．方法　选择雄性滇南小耳猪8只,体重（20±4）kg,全麻气管插管后,动态监测心电图和血压,取胸骨旁切口,左第4～5肋间进胸,打开心包,于前降支下1/4处结扎,术前、术后28 d和60 d行常规心脏彩色多普勒超声检查,60 d时对实验猪行安乐死,获取心脏,评估心梗情况并行H&E染色．结果　8只实验猪前降支结扎后均出现不同程度室性心律失常,其中2只死于难治性室颤,病死率为25%;彩超检查示左心功能受损,左室心尖部变薄,左心扩大;组织学检查提示梗死心肌局部纤维化,形成纤维瘢痕．结论　开胸直视下结扎前降支是制备滇南小耳猪心梗模型的可靠方法,实验猪逐步进展为缺血性心功能不全．     

西藏小型猪SLA-DQA基因外显子2的PCR-RFLP多态性分析

目的分析西藏小型猪SLA-DQA基因第2外显子不同酶切位点的基因型多态性以及等位基因的多态性,检验这些酶切位点上的基因频率是否达到Hardy-Weiberg平衡态。方法采用EcoRⅠ和AluⅠ两种限制性内切酶对西藏小型猪SLA-DQA目的基因的第1和第2内含子部分序列以及完整的外显子2进行PCR-RFLP分析。结果经EcoRⅠ酶切后,以纯合子BB基因型居多,BB、AB、AA基因型频率分布为45.000%、31.667%和23.333%,其中B为优势等位基因（60.833%）;经AluⅠ酶切后,MN基因型频率（50.000%）分别高于MM型（30.000%）和NN型（20.000%）,     

封闭群滇南小耳猪体重和脏器重量的测定及其相关性分析

目的测定5～6月龄滇南小耳猪体重、脏器重量,并对其进行相关分析.方法选用5～6月龄封闭群滇南小耳猪24只,雌雄各半,分别测定体重和17个脏器和腺体重量,计算脏器系数,通过SPSS软件进行脏器系数的性别间比较和脏器重量与体重间的相关性与回归分析.结果封闭群小耳猪脏器重量雌雄间仅肺脏差异有统计学意义(P<0.05);脏器系数雌雄间仅有肺系数和颌下腺系数差异有统计学意义(P<0.05).体重和脏器重量相关分析表明,雄性滇南小耳猪体重与心、脾、胰腺、腮腺有相关性(P<0.05);雌性的体重与心、膀胱有相关性(P<0.05),进一步的回归分析显示,雄性的心、脾、胰腺、腮腺,雌性的心、膀胱与体重呈线性相关(P<0.05).结论封闭群滇南小耳猪主要脏器系数性别间差异小,其体重与某些脏器重量存在一定的线性关系.     

西双版纳小耳猪群体遗传结构的RFLP分析

目的　对西双版纳小耳猪的群体遗传结构进行RFLP分析。方法　采用ECL核酸直接标记和检测系统，以HRP标记ɑ-珠蛋白-3’HVR多基因座小卫星探针，对西双版纳小耳猪的Hinf Ⅰ或HaeⅢ酶切片段进行Southern杂交，以化学发光法进行检测，获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图谱。结果　2　kb以上的谱带数在6～15条之间，HinfⅠ酶切产生的图带数低于HaeⅢ。JB亚系内805、807家系和JS亚系内111、121、121、151家系不同个体间的相似系数分别为0.94±0.09、0.85±0.08、0.84±1.7、0.78±1.6、0.83±0.42、0.87±0.07，显著高于各家系间的相似系数，JB亚系内的805家系和JS亚系内的151家系不同个体间相似系数较大，分别为0.94和0.87。结论　西双版纳小耳猪近交程度较高，个体间差异较小，均一性较强。     

广金钱草栽培品与野生品的质量比较

比较广金线草栽培品与野生品的质量。用薄层色谱法和紫外分光光度法对其主要质量指标进行定性与定量的研究,结果两者无明显差异。     

云南汉族人群VKORC1 1173C/T基因多态性与华法林抗凝治疗维持剂量的相关性研究

目的研究云南汉族人群维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1基因VKORC1 1173C/T多态性分布及与其他群体间的差异,并探讨其与华法林抗凝维持剂量的分子遗传关系.方法采集300名心脏机械瓣膜置换术后服用华法林抗凝已达稳定剂量、凝血酶原时间国际标准化比值在目的范围(1.5～3.0)病人的外周血,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,检测VKORC1 1173C/T基因位点的基因型和等位基因频率,探讨华法林抗凝维持剂量与该基因多态性的关系.结果在所有的样本中,VKORC1 1173C/T基因共检出C(10%)和T(90%)2种等位基因,纯合子TT(80%)和杂合子CT(20%)两种基因型,云南汉族人群中VKORC1 1173C/T基因多态性分布在性别和年龄上无差异;CT基因型病人所需华法林维持剂量最高(3.62±1.35)mg/d,其次是TT基因型病人(3.12±1.17)mg/d.结论与其他群体相比,云南汉族人群VKORC11173C/T基因位点具有自己的遗传多态性,其基因型在华法林抗凝治疗中具有非常重要的意义.     

云南城乡居民膳食结构的20年变迁

目的 :了解目前我省城乡居民膳食结构的变化趋势及存在问题 ,为我省制定相关营养改善政策提供科学的依据 .方法 :采用称重法和记帐法收集 3d内住户的食物消费数据 ;用 2 4h回顾法进行连续 3d个人食物摄入量调查 ;用食物频率法收集各种食物消费频率及消费量 .采用EPI2 0 0 2软件进行数据统计分析 ,结果与 1982年、 1992年营养调查进行比较 .结果 :改革开放 2 0a ,我省城乡居民膳食结构已发生明显改变 ,各种食物的每日标准摄入量较 1982年及 1992年有明显提高 ,能量及各种营养素摄入基本达到推荐摄入量的要求 .但膳食结构仍存在严重问题 ,农村地区蛋白质食物 (蛋类、奶类、水产品等优质蛋白质食物 )摄入严重不足 ;而城市膳食中含不饱和脂肪酸较多的畜肉类制品、植物油消费摄入增长过快 ,脂肪供热比已经超过WHO标准 .城乡居民膳食中钙、VitB2 均明显摄入不足 .结论 :我省城乡居民的膳食结构与 1982年、 1992年营养调查相比较 ,有一定改善 ,目前我省城乡居民中由于膳食结构的变化已形成诸多严重营养不平衡和慢性病 ,正成为日趋严重的公共卫生问题     

ARVCF基因多态性与精神分裂症的关系

目的 :探讨腭心面综合征中缺失的犰狳重复基因 ( ARVCF)的基因多态性与精神分裂症的关系。方法 :在 1 1 6个汉族精神分裂症核心家系中 ,以 PCR和限制性片段长度多态 ( RFLP)方法对 ARVCF基因编码区序列第 3675碱基 A/G单核苷酸多态性 ( SNP)进行检测。结果 :父母组和患者组 ARVCF等位基因和基因型分布无差异 ;单体型相对风险分析 ( HRR)结果显示 ARVCF基因A/G多态性与精神分裂症无关联 ;传递不平衡检验 ( TDT)结果提示杂合子父母传递给患病子女致病等位基因频率没有偏离 5 0 %;ARVCF基因型与精神分裂症的阴性症状情感迟钝淡漠有关 ( χ2 =1 0 .386,P<0 .0 5 )。结论 :对于中国汉族精神分裂症患者来说 ,本研究尚不能确定 ARVCF基因多态性与精神分裂症有关联及连锁 ,但不能排除它在精神分裂症症状中所起的作用     

多巴胺受体D2基因TaqI位点多态性与帕金森病的关系

目的探讨多巴胺受体D2（DRD2）基因TaqI酶切位点多态性与帕金森病（Parkinson’s disease,PD）遗传易感性的关系。方法选择PD患者166例和正常对照170人,利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术分析了TaqI位点A1/A1、A1/A2、A2/A2、B1/B1、B1/B2、B2/B2基因型在PD患者与正常对照组之间的分布情况。结果DRD2基因TaqI酶切位点在总体PD患者和总体对照组之间的分布差异无统计学意义（P〉0.05）;根据发病年龄和性别分组后,不管是早发还是晚发PD患者,无论男性还是女性,PD组和对照组的基因型和等位基因频率的差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论DRD2基因TaqI多态性与PD的遗传易感性无关。     

新疆维吾尔族乳腺癌中细胞色素P45019基因rs10046位点基因多态性与病理免疫组化指标表达状态的研究

目的 探讨应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测 112 例维吾尔族女性乳腺癌患者和 139 例维吾尔族正常女性细胞色素 P450（CYP）19 基因 rs10046 位点多态性,回顾性分析该位点多态性和乳腺癌免疫组化的关系。结果：细胞色素 P450 19 基因 rs10046 位点三种基因分型符合Hardy-Weinberg 平衡;细胞色素 P450 19 基因 rs10046 位点存在 C-T 的替换,等位基因 C、T 在病例组所占的比例分别为 48.2%、51.8%,对照组为 47.5%、52.5%,等位基因分布无统计学差异（P〉0.05）;CC、TC、TT 基因型在乳腺癌组分布频率分别为 26.8%、42.9%、30.4%,在对照组中分布频率分别为 18.0%、,57.6%、24.5%,两组间分布差异有统计学差异（P〈0.05）。细胞色素 P450 19 基因型与乳腺癌组织中的 ER、PR、Her-2、Ki-67 的表达差异及相关性均无统计学意义（P〉0.05）。结论新疆维吾尔族乳腺癌的CYP19基因rs10046位点多态性与对照组的分布差异有统计学意义,基因rs10046位点多态性与免疫组织化学指标表达的状态差异无统计学意义。     

eNOS基因G894T多态与云南省汉族高血压相关性

目的研究内皮一氧化氮合酶（eNOS）基因G894T多态与中国云南省汉族（n=304）人群原发性高血压（EH）的相关性.方法采用PCR-RFLP对150名正常个体和154名原发性高血压个体eNOS基因G894T多态进行基因分型.结果正常对照组和高血压组中GG基因型频率分别为0.773、0.636,GT分别为0.2、0.26,TT分别为0.027,0.104.eNOS基因G894T基因型频率分布在正常对照组和高血压组差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 eNOS基因G894T多态与中国云南汉族原发性高血压存在相关性.     

中青年动脉粥样硬化性脑梗死与载脂蛋白E、B基因多态性关系探讨

目的：探讨载脂蛋白E（apoliporotein E,ApoE)和载脂蛋白B（ApoB)基因多态性与中青年动脉粥样硬化性脑梗死（atherosclerotic cerebral infarction,ACI)的相关关系。方法：用PCR技术检测了100名健康中青年人和36例中青年ACI病人的ApoE和ApoB基因多态性及血脂、脂蛋白和载脂蛋白的含量。结果：（1）ACI组ε3／4型频率为36．1％，ε2／4型频率为27．7％，对照组为12％、7％，差异显著（P均＜0．05）；ε4等位基因频率为0．32，明显高于对照组。（2）ACI组甘油三酯（TG），总胆固醇（TC），脂蛋白a[liporprotein a,Lp(a)]含量明显高于对照组，高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）含量显著低于对照组（P＜0．001）；ε4等位基因与血清TG、TC、HDL－C、Lp(a)含量显著相关，发病风险率（relative risk,RR)依次为8．23，4．85，29．9，4．39（P＜0．01－0．001）。（3）ApoB基因XbaⅠX^ X^-型频率ACI组为14．7％，高于对照组（P＜0．05）；X^ X^-亚组的ApoAⅠ明显低于X^-X^-亚组（P＜0．025）。（4）ACI病人中ε4等位基因与X^-X^-基因并存时ACI的RR为2．85（P＞0．05）。结论：ApoE等位基因ε4是中青年ACI的一种遗传易感性因子；ApoBXbaⅠX^ X^-可能是另一种遗传标记：ε4与X^-X^-并存时与中青年ACI的关系需进一步研究。     

COLIA1基因-1997G／T多态性与中国女性骨密度关系分析

目的：研究COLIA1基因启动子区-1997G／T单核苷酸多态性与中国女性骨密度关系。方法：采用双能X线吸收仪对291名女性研究对象进行腰椎及股骨扫描，应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测COLIA1基因-1997G／T多态位点基因型，用广义线性模型分析与腰椎2～4及股骨骨密度关系。结果：在调整环境危险因素前后，均未发现COLIA1基因的-1997G／T位点的多态性与女性股骨颈、股骨柄和股骨三角区及腰椎2～4的骨密度呈显著相关。结论：在中国女性人群中COLIA1基因-1997G／T多态性与股骨及腰椎骨密度无显著性相关，与欧洲人群研究结果不同。     

健康人群IL-1α启动子(-889位点)基因多态性与血脂水平的关系

目的 :探讨白细胞介素 1α(IL 1α)基因多态性与健康人群血脂水平的关系。方法 :应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)的方法检测 184例湖北地区汉族健康人群IL 1α( 889位点 )基因多态性 ,同时检测血脂水平并进行比较。结果 :健康人群血脂 (TC、TG、HDL C、LDL C、apoA1 、apoB)水平在IL 1α( 889位点 )不同基因型间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :湖北地区汉族健康人群IL 1α( 889位点 )基因多态性与血脂水平间无相关性