实验用五指山小型猪选育

目的培育符合生物医学研究需要、标准化程度高的实验用五指山小型猪。方法常规遗传育种技术与现代遗传育种技术相结合,对现有五指山小型猪资源进一步选育和实验动物标准化研究,以建立遗传多样性丰富的封闭群和基因纯合度高的近交系。结果利用我国特有的五指山小型猪资源及其已有的保种选育成果,在保持其体小特性的前提下,在封闭群引种群遗传多样性丰富,近交选育群引种群基因纯合度高的基础上,形成实验用封闭群和两个近交选育群。结论形成的封闭群和近交选育群保持了体型矮小的特性,标准化程度提高,生理、生化、遗传等生物学特性稳定,生产繁殖性能较高,具有广泛的环境适应性,是理想的实验动物资源,可满足多种研究领域的需要,有着重要的应用价值和广阔的发展前景。     

三品种实验用小型猪繁殖性能测定

目的 选取饲养于上海地区的巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪,分别测定三品种母猪和公猪的繁殖性能.方法 采用场内结合实验室测定的方法,分别测定初情年龄、初配年龄等母猪繁殖性能指标及性行为年龄、初配年龄等公猪繁殖性能指标.结果 用单因素方差分析比较.结果对比巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪的母猪繁殖性能10个指标,贵州小型猪和版纳小型猪的初生窝重和断奶成活率存在显著差异(P＜0.05).分析三品种的公猪繁殖性能,群体间性行为年龄存在显著差异(P＜0.05);三品种初配年龄比较接近;比较初配年龄和初配体质量,表明三品种的小型猪在相同初配年龄时,巴马小型猪个体偏小,版纳小型猪的体质量最大.结论 系统测定了雌性和雄性巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪的繁殖性能,为实验用小型猪提供了遗传育种工作的基础,也为小型猪实验动物化提供了背景数据.     

实验用五指山小型猪生长发育测定

目的 对初生至12月龄的实验用五指山小型猪的生长发育进行测定和分析.方法 按常规育种要求的方法,测定普通级实验用五指山小型猪生长发育相关的表型特征,并通过SAS软件进行统计分析.结果 五指山小型猪生长缓慢,体重轻,体型矮小,6月龄体重、体高、体长、胸围、腹围、臀长、管围、胸深、胸宽、臀宽、头长、额宽、颌距、尾长和尾围分别为：12.11±2.99kg、50.93±5.02 cm、32.64±3.81 cm、52.13±5.43 cm、50.64±5.77 cm、58.30±5.88 cm、18.77±2.29 cm、8.51±0.74 cm、16.80±2.09 cm、13.95±1.61 cm、11.95±1.31 cm、17.75±1.47 cm、7.93±0.54 cm、9.74±0.90 cm、14.90±2.40 cm和5.10±0.68 cm.结论 五指山小型猪生长发育稳定,对不同的气候条件有较大的适应性,适合在华南乃至我国广大地区饲养繁育.     

五指山小型猪高脂血症模型的建立

目的本研究通过给与五指山小型猪高脂饲料，旨在诱发小型猪的高脂血症。方法将30头小型猪随机分成3组：①对照组（n=6），喂正常猪饲料；②1．5％胆固醇组（n=12），饲喂含1．5％胆固醇、10．0％的牛油、6．0％花生油和0．5％胆盐的饲料；③3％胆固醇组（n=12），饲喂含3．0％胆固醇、10．0％的牛油、6．0％花生油和0．5％胆盐饲料。高脂饮食6个月。每月测定体重和血脂（TG、TC、HDL-C、LDL-C）。结果和结论五指山小型猪对高脂饮食反应敏感，高脂饮食一个月内，高脂饮食组TC、HDL-C和LDL-C从极低水平迅速升高，随后逐月缓慢升高。至高脂饮食4个月时，TC达到15．5～17．7mmol／L，LDL-C达到12～13mmol／L，HDL-C达到4．45～5．76mmol／L，与基线相比，TC升高约10倍，LDL-C升高约15倍，HDL-C升高约7倍，4个月后变化趋于稳定，而对照组没有变化，TG没有明显变化趋势，形成了典型的高胆固醇血症。1．5％胆固醇组和3％胆固醇组血脂指标差异不明显（P〉0．05），提示1．5％的胆固醇含量就足以获得高脂血症模型。     

五指山小型猪冠状动脉球囊损伤术

目的本研究旨在建立完善的五指山小型猪的冠状动脉硬化疾病模型实验方案，为心血管疾病研究提供理想的疾病模型。通过进行冠状动脉内皮损伤术，可以加速小型猪在高胆固醇饮食条件下的动脉粥样硬化进程。方法采用8头五指山小型猪进行冠状动脉内皮损伤术，术前饲喂3．0％高胆固醇饲料约20～25d，在冠状动脉前降支中段进行球囊扩张，压力为6～10atm，扩张次数3次。结果除1头小型猪，在经过扩张压力10个大气压，扩张3次手术后存活外，其余小型猪在术后6～24h内死亡。结论本研究应用五指山小型猪行冠状动脉内皮损伤属于首次报道，从结果分析，五指山小型猪冠状动脉扩张后，极易出现室颤，表明该品种小型猪经过高度近交后耐受这种手术的能力较差。     

利用微卫星标记对五指山小型猪近交群的遗传分析

目的 分析五指山小型猪近交群的遗传变异及近交程度.方法 利用26个微卫星基因座对五指山小型猪近交群进行了遗传多样性检测,统计了各位点等位基因组成,并计算它们的平均基因纯合率、平均多态信息含量和平均杂合度.结果 近交群26个基因座的共检测到180个等位基因,平均等位基因数为6.92,平均基因纯合率为56.57％,平均多态信息含量为0.6042,平均杂合度为0.4478.结论 五指山小型猪近交群具有较高的纯合度,保持了一定的遗传稳定性.     

五指山小型猪腹腔粘连模型的建立

目的 建立五指山小型猪的腹腔粘连模型.方法 五指山小型猪术前禁食不禁水过夜,手术前用速眠新Ⅱ、戊巴比妥钠联合麻醉,然后采用浆膜物理损伤、化学损伤、血管结扎、腹膜壁层结扎等多因素方法建立五指山小型猪腹腔粘连模型.结果 术后1d即可观察到五指山小型猪形成了腹腔粘连,粘连程度评分可达2分,粘连面积评分也达到2～3分;术后3d观察发现形成较为严重的粘连,粘连程度和面积评分达到3～4分;腹腔粘连维持时间较长,术后12个月仍可见粘连,粘连程度和面积评分达到2～3分.性别间比较,腹腔粘连的程度及面积差别并不明显.结论 采用多因素方法成功建立了五指山小型猪腹腔粘连模型.     

催乳素受体基因多态性对西藏小型猪繁殖性能的影响

目的了解催乳素受体（PRLR）基因AIuI位点在西藏小型猪中的多态性分布情况;研究其在西藏小型猪上的遗传效应,为生长繁殖性状的分子遗传标记辅助选择提供实验依据。方法收集44头西藏小型猪母猪窝产仔数及离乳仔数数据,测定所产仔猪的初生重和离乳重,采用PCR-RFLP方法测定PRLR基因AIuI位点多态性,并与上述生长繁殖性能指标进行相关性分析。结果西藏小型猪PRLR侯选基因AIuI位点表现出多态性,分为AA、AB、BB,频率分别为0.273、0.500、0.227。经产母猪的仔猪初生重在不同基因型间存在显著性差异,而初产和经产母猪的其他生长繁殖指标在不同基因型间均未达到显著性水平。结论本研究中PRLR基因AIuI位点多态性AA、AB、BB不同基因型之间窝产仔数和离乳仔数差异不显著。     

五指山小型猪糖耐量试验及血脂分析

目的 确定五指山小型猪的正常糖耐量水平,并检测血脂,筛查糖、脂代谢异常小型猪.方法 选择未去势的五指山小型猪,禁食不禁水12h后按1.2 ml/kg体重的剂量静脉注射50％葡萄糖注射液,并分别在注糖前、注糖后10、30、60、90和120 min采血测定血糖值.同时采取空腹血清送实验室检测血糖（Glu）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）等生化指标.结果 静脉注糖后血糖水平出现显著性波动,注糖后10 min内血糖水平达到峰值,随后逐渐下降,直至注糖后90 min恢复到给糖前水平.有7头小型猪的糖耐量部分血糖值超过95％置信度上线值,有12头小型猪部分相关的血清生化指标值超过95％置信度上线值.相关性分析发现Glu与TG、TC、HDL-C、LDL-C这4个指标都存在显著的相关性,多因素分析表明TG、HDL-C与Glu显著相关.结论 筛选出糖代谢或脂代谢异常,以及糖耐量减低的小型猪.     

不同月龄近交系五指山小型猪免疫器官的组织形态学

目的对不同月龄近交系五指山小型猪免疫器官组织特点进行观察,为其用于建立人类免疫相关疾病模型提供基础形态学资料。方法2、4和12月龄小型猪免疫器官被分别固定,常规石蜡切片、HE染色,光镜观察。结果4月龄前,胸腺内胸腺细胞和胸腺小体的数量均随年龄的增长逐渐增多;12月龄时,胸腺细胞数量有所减少,排列比较疏松,胸腺小体的数量和体积基本没有变化;2月龄时胸腺小体周围可见许多大小不同的空泡状细胞和细胞碎片。4月龄前,脾白髓动脉周围组织淋巴鞘和脾小结在也随年龄增长而逐渐增多增大,但12月龄时有所减少并维持在一定水平,其变化与大鼠和鸡的基本一致。2月龄淋巴结皮质靠内,髓质靠外,4月龄两者分界不明显,12月龄淋巴小结较大,淋巴细胞排列疏松,髓质内淋巴细胞较少,毛细血管增多。结论从整体结构上观察,近交系五指山小型猪免疫器官的组织学结构与人和其它哺乳动物之间没有明显的差异。     

封闭群五指山小型猪主要脏器重量与体重的相关性分析

目的对盐酸多西环素（DOX）进行了药物动力学及残留研究,为临床合理用药提供理论依据。并阐明盐酸多西环素在猪的组织中消除规律,为休药期的制定提供参考。方法建立DOX在猪血浆及组织中的提取方法及反向高效液相色谱（RP—HPLC）检测法。猪单次口灌5mg／kg体重剂量给药后,于不同时间采血样和组织样,用反相高效液相色谱法测定血浆及组织中DOX的浓度;用3P97药物动力学软件处理血浆药物浓度-时间数据。结果所建立的标准曲线相关性好,相关系数均达0．9990以上,血浆、肌肉、皮脂、肝脏和肾脏中最低检测限分别为0．075μg／ml、0．010μg／g、0．010μg／g、0．020μg／g、0．0120μg／g;血浆及各组织中的平均回收率均在69％以上;目内变异系数小于10％,日间变异系数小于15％。房室模型分析表明,其药物时间曲线符合有吸收二室模型,动力学方程为：C=5．37e^-0.15t6．02e^-0.115t-11．39e^0.25t。主要药物动力学参数为：吸收速率常数Ka0．25±0．02／h;消除半衰期t1/2β6．02±0．83h;药时曲线下面积AUC17．07±2．80μg·ml^-1h·^-1;表观分布容积Vd／F2．26±0．48L／kg;清除率CLb0．29±0．05L·h^-1kg·^-1;达峰时间Tp5．42±0．25h;峰浓度Cmax1．09±0．26μg／ml。通过药物动力学试验得知,以5mg／kg体重的剂量单次口灌给药后,药物在体内吸收速度快,分布广,可以达到明显的抑菌效果;通过药物残留试验得知,药物在组织中消除速度较快。     

五指山小型猪下颌骨的测量及分析

目的研究不同性别、不同年龄核因子相关因子2（Nrf2）基因敲除小鼠（ICR-Nrf2）主要脏器重量和脏器系数。方法分别取1、3、6月龄Nrf2敲除及正常ICR小鼠雌雄各15只,用Sartorius电子天平分别测定体重和主要脏器重量,计算脏器系数,并进行多因素分析分析。结果基因型、年龄和性别因素分别对体重的影响和两两交互作用均有差异（P〈0．05）。基因型和年龄分别对几乎所有脏器的重量和系数都有影响（P〈0．01或0．05）,而性别因素的影响则因脏器而不同。结论Nrf2可能在ICR小鼠的生长和发育过程中起着重要作用。     

B：CBWR兔主要生产性能

对Ｂ：ＣＢＷＲ兔的有关资料进行统计分析，结果表明：其外貌特征和主要生产性能各代间无明显差异，遗传性较稳定。其主要生产指标为：一次交配受孕率８１．５６％，妊妊期３１．１９±０．１３ｄ，窝均产仔数８．００±０．０６只，２１日龄仔兔窝重１７６５．１７±２７．０７ｇ，４５日龄每窝离乳数５．３８±Ｏ．０９只，４５日龄仔兔离乳体重１２６３．２９±１３．２７ｇ，离乳后５周内日增重３１．０３±７．１４ｇ；６月龄后备公母种兔体重分别为３９３０．００±３３６．５３ｇ和４０１２．５０±３２５．００ｇ，体躯指数６６．０７±３．４８。     

巴马小型猪肝大部切除术的麻醉管理

目的探讨巴马猪肝大部切除术的麻醉管理策略。方法健康雄性巴马猪30头,采用肌肉注射氯胺酮12mg／kg镇静后,戊巴比妥钠24mg／kg诱导气管内插管,行肝左三叶切除术,术中异氟醚维持麻醉。术中依据循环波动适时调整麻醉用药,依据脉氧饱和度和呼气末二氧化碳分压调整机械通气参数。结果实验所用30例巴马猪中,26例安全度过围手术期,手术过程中平均动脉压（MAP）变化幅度均〈20％,颈静脉压（JVP）维持在3～6mmH2O,脉氧饱和度（SpO2）均保持在95％以上,3例发生不良事件。结论小型猪肝大部切除术的麻醉要求用药适当、监测完善、液体管理良好、生理指标异常的及时妥善处理,尤其重视在肝大部切除前后维持循环稳定,妥善保护剩余肝脏功能。     

巴马小型猪大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性试验

目的分离鉴定引起巴马小型猪腹泻的细菌并筛选出对其敏感的特效药物。方法通过常规细菌学检测、分子生物学鉴定、生化试验等方法对疑似细菌感染的巴马小型猪进行分析,同时选用呋喃妥因、美满霉素、庆大霉素等25种药物对分离的细菌进行药敏实验。结果通过以上实验判定巴马小型猪为大肠埃希菌感染引起的腹泻,血清型为O138;药敏试验分析结果表明,该菌株仅对青霉素、链霉素、头孢曲松和呋喃妥因4种药物敏感,对磷霉素、磺胺脒、左氟沙星等高度耐药。结论大肠埃希菌广泛存在耐药性,该研究结果为防治相关实验动物大肠埃希菌感染提供理论依据。