ELISA检测HBsAg影响因素的探讨

本文以ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法检测ＨＢｓＡｇ为例 ,从边缘效应、“ＨＤ ＨＯＯＫ”效应、内源物质 (包括溶血、脂浊、补体、ＲＦ、ＡＦＰ、自身抗体等 )的干扰和外源物质 (如血液抗凝剂等 )的干扰等方面探讨ＥＬＩＳＡ的影响因素。1　材料与方法1 1　材料　ＨＢｓＡｇＥＬＩＳＡ试剂盒由新创公司提供 ,批号0 5 0 1;ＨＢｓＡｇ标准品由卫生部临床检验中心提供 ,批号991。1 2　方法　参照《全国临床检验操作规程》ＥＬＩＳＡ双抗夹心法 ,按照试剂盒说明书进行操作。2　结果2 1　边缘效应　以 2 μｇ/ＬＨＢｓＡｇ标准品作为样品 ,采用 37℃…     

微量快速ELISA检测HBsAg的探讨

<正> 目前 ELISA 检测 HBsAg 已是国内外公认的方法之一。但该法检测流程所需时间较长,对门诊患者和献血者检测以及普查工作都很不方便。为便于日常工作,我们参照有关文献摸索出一种简便而快速的操作方法,同原法的符合率达99%以上。现介绍如下。     

ELISA检测HBsAg复检结果的分析

由于酶联免疫吸附试验(ELISA)测定过程中影响因素较多，为了提高乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测质量，我院已经对HBsAg初检临界状态的标本建立了复检制度，现就积累的实验结果作分析。     

ELISA法检测HBsAg的影响因素分析

本以ELISA双抗体夹心法检测HBsAg为例,从边缘效应,内源物质(包括溶血、乳糜血清、补体、AFP、相关自身抗体等)的干扰和外源物质(如EDTA、肝素等)的干扰等方面探讨ELISA法的影响因素。     

微波快速ELISA检测献血者HBsAg

<正> 微波(MW)能使极性物质分子发生高速震动(每秒约24亿次),可加速分子间(包括抗原、抗体间)的化学反应。已用于免疫细胞(组织)化学,使一般需2～3小时的免疫组织化学染色在20～30分钟内完成。我们在单克隆技术中,创用MW快速ELISA筛选、检测杂交瘤细胞     

血清标本的质量对ELISA法检测HBsAg结果的影响

ELISA法检测HBsAg是目前常用的方法之一。但实验操作中各个环节对实验结果影响较大。我们通过对大批量标本进行HBsAg的筛查，发现血清标本的质量对检测结果的影响较大，特别是对弱阳性结果的影响更为明显。本文通过对弱阳性结果标本的重新测试，探讨标本质量对ELISA结果的影响。     

ELISA检测献血者HBsAg的改良及初步应用

<正> 目前全国各血站对献血者检测 HBsAg 普遍使用反向间接血凝法(RPHA)。此法灵敏低,使一些血液中 HBsAg 效价较低的携带者漏检。采用 ELISA 法,灵敏度高,特异性强,但整个试验过程长,不适应我国公民义务献血的大量人群体检。为解决这个矛盾,我们对 ELISA 检测 HBsAg 的常规法进行研究,     

ELISA定性检测HBsAg的室内质控探讨

目前国内检测HBsAg的ELISA大多参照生化的质控方法,即选弱阳性标本为质控物,以X图法控制日常工作的精密度,判断实验的有效性。我们改用临界值法进行室内质控,简便易行,现特予介绍。一、室内质控物　高值质控物为10μg/ml,低值质控物为1ng/ml,阴性质控物则取A值在0.04～0.08间的样本20份以上混匀后分装。二、室内质控方法　实验除用试剂盒内的质控品外,同时也检测高值、低值和阴性三种质控物,并将质控结果算出S/CO值点入质控图中(S/CO值:S为样本A值,CO为临界(CutOff)值,即阴性对照A值×2.1。如阴性对照小于0.05时,以0.05计)。参…     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和KLISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg:用ELISA一步法和二步法检测经ECLlA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标本：①HBsAg光放射强度(COI)在1-20，20例；②HBsAg COI在21-4000、160例；③HBsAg COI大于4000、6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例；结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml．二步法灵敏度为0．2ng／ml、ECLIA灵敏度为0．05ng／m1；在190例临床标本中。ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％．ECLIA阳性检出率为97，4％：结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低。HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钓状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高．受HOOK效应影响较小、HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。     

两种HBsAg ELISA试剂检测关键性能指标回顾性比较分析

目的 对血站常规使用的2种乙肝表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂关键性能指标进行回顾性分析,从试剂的实验室使用性能角度为试剂选择提供依据.方法 对本中心2016～ 2019年使用的2种HB-sAgELISA试剂的检测结果、初试反应率、复试反应率、复检符合率以及单试剂反应性与核酸检测(NAT)结果的...     

滤纸血斑ELISA法检测HBsAg与抗HBc及其临床应用

滤纸干燥血斑1924年由Chapman首次用于血清学试验中，随着免疫检测方法的进步，近几年来滤纸干燥血斑已广泛用于ELISARIA等检测血液中的多种抗原抗体及激素。此法的主要优点不仅只在于采集外周血（手指、耳垂血）简单方便，价格低廉；而且更便于储存与运输，特别适应于婴幼儿与静脉采血困难者。我们应用国产新华滤纸干燥血斑直接用于ELISA法分别检测乙肝病人血液中HBsAg、抗HBc结果满意，现报道如下。1材料与方法1．1滤纸与采血新华滤纸（杭州双圈牌）裁成3cm×6cm纸条，常规采集患者手指或耳垂血二滴。测HBsAg血斑直径10～15mm（…     

8种国产HBsAg试剂盒检测变异HBsAg的效果评价

目的：评价国内8种HBsAg诊断试剂检测体外表达的18种变异HBsAg的效果。方法：用8种ELISA试剂检测真核细胞表达的18种变异HBsAg的免疫反应性。结果：8种试剂盒检测变异HBsAg的能力不同,漏检率为16．7％～44.4％。K122I、T123N、C124R和G145R变异的HBsAg漏检率最高。结论：8种HBsAg检测试剂盒都不能很好地检出部分变异HBsAg,应改进试剂性能,提高对变异HBsAg的检出率。     

ELISA检测HBsAg“后带现象”的探讨

本文采用ＥＬＩＳＡ法检测５２８例乙肝五项指标，共检出ＨＢｓＡｇ阳性标本３３２例，其中有１６份检测结果为乙肝标志物少见模式，为避免和消除这一现象，作者将此１６份标本进行不同稀释后再次测定，同时采用ＲＰＨＡ法做对照检测结果均为阳性，即为乙肝标志物常见模式，提示采用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ存在着不同程度的“后带现象”ＨＢｓＡｇ阳性漏检率可达４．８２％。     

ELISA法同孔联合检测HBsAg与抗—HBs

在ＥＬＩＤＳ法制ＨＢｓＡｇ的同时，根据夹心法和竞争性中和反应的原理，加入一定量的中和ＨＢｓＡｇ血清对ＨＢｓＡｇ和抗ＨＢｓ进行同孔联合检测，如杯本中含有ＨＢｓＡｇ，则其Ａ值增高，如标本中含有抗－ＨＢＳ，则抗ＨＢｓ与加入的中和ＨＢｓＡｇ特异性地进行中和反应，其Ａ值减小。     

ELISA法HBsAg诊断试剂的质量评价

目的评价HBsAgEIASA诊断试剂盒的质量。方法应用ELISA法考评HBsAg诊断试剂盒质量。结果 6厂家试剂均符合国家标准品血清盘判读标准,均能检测出1IU/ml定值质控血清,但S/CO比值的差异很大;用临床科研血清盘检测,其试剂的灵敏度、特异性、总符合率的差异有统计学意义（χ^2=4.21,P〈0.05）。结论不同厂家试剂质量仍存在差异,使用前应进行抽检;优选2种匹配较好的试剂,以提高HBsAg检出率。     

室温对ELISA定性测定HBsAg检测能力的影响

目的 研究显色温度对酶免实验结果的影响.方法对18℃～30℃范围内不同显色温度时,HBsAg试剂盒阳性检出能力进行测试.结果显色温度低于21℃时试剂盒对于质控物的检出能力下降.结论显色温度对酶免实验结果有明显的影响,应严格控制检测条件,满足质量需求.     

ELISA法检测HBsAg灰区设置的探讨

目前国内对献血者血液HBsAg的检测多采用酶联免疫吸附试验即ELISA法。该试验以临界值(cut off值,简称CO值)作为判断阴阳性的界定标准。理想的实验结果是只有阳性或阴性两种情况。但实际检测工作中常会遇到一些献血者血液标本的OD值接近临界值,其结果难以判断,即灰区标本。在HBsAg感染人群中,部分血清(浆)HBsAg呈     

ELISA一步法HBeAg阳性HBsAg阴性标本的分析

乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性的样品,其乙肝病毒表面抗原(HBsAg)大多数阳性,但也有少数样品因HBsAg浓度过高致钩状(hook)效应出现HBsAg假阴性,造成HBsAg漏检。我们用ELISA二步法和胶体金免疫层析法(GICA)检测HBeAg阳性HBsAg阴性样本中的HBsAg,同时将此类标本倍比稀释后用一步法推测HBsAg含量以证实hook现象的产生及其对策。     

ELISA法检测HBsAg出现"花板"问题的解决

在使用某公司ELISA HBsAg试剂进行血液检测过程中,有时会出现空白和阴、阳性对照以及室内质控孔的结果正常(Cut off=0.105),而血液标本孔的OD值却较高的情况(大多数OD值≥0.060),标本的阳性率很高(每板88份标本中有10～20份阳性,且大多数可疑标本都出现弱阳性结果(0.105≤OD值≤0.500),这就是ELISA HBsAg试剂的“花板”问题.笔者经过仔细分析并采取相应措施,最终消除了ELISA HBsAg试剂的““““花板““““现象,现报告如下.