聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对S180肿瘤细胞杀伤作用的研究

采用频率为2.2MHz及不同强度的聚焦超声激活原卟啉对小鼠腹水型S180肿瘤细胞的杀伤作用进行研究。台盼蓝拒染法检测了不同处理后细胞的相对存活率,通过扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构的变化。实验结果表明:单纯原卟啉对S180肿瘤细胞几乎没有影响,单纯超声和超声结合原卟啉对细胞均有一定的损伤,肿瘤细胞受损程度随着声照强度的增加而加剧,并且在一定范围内随着原卟啉剂量浓度的加大,细胞受损也逐渐增强。当原卟啉浓度为120μM时,超声激活原卟啉对腹水型S180肿瘤细胞的协同杀伤效应表现最为明显。     

聚焦超声激活原卟啉Ⅸ对S180肿瘤细胞的杀伤作用

目的初步研究超声激活原卟啉IX(PPIX)对S180肿瘤细胞的杀伤作用,并探讨其作用的生物学机制。方法采用频率为2·2MHz,强度为3W/cm2的聚焦超声,结合120μmol/L的PPIX作用于S180肿瘤细胞,通过台盼蓝拒染法检测细胞的存活率;扫描电镜观察细胞膜表面超微结构变化;活性氧试剂盒检测细胞悬液中活性氧的生成量;酶化学方法检测细胞内几种抗氧化物酶活性的变化。结果同等条件下,超声结合PPⅨ对细胞的损伤显著高于单纯超声组,而单纯PPⅨ表现出无明显的细胞毒作用;酶化学方法显示,超声激活PPⅨ后细胞内的丙二醛(MDA)含量显著增加,而细胞内的抗氧化物酶类均有不同水平的下降,并且与处理后细胞悬液中活性氧的生成量相关。结论超声激活原卟啉Ⅸ产生的活性氧自由基作用于细胞膜,增加膜脂质过氧化水平,降低细胞内的抗氧化物酶的含量,可能是其损伤S180肿瘤细胞的主要因素之一。     

超声结合原卟啉Ⅸ对腹水型S180肿瘤细胞的损伤作用

目的：根据原卟啉Ⅸ（PpⅨ）在S180肿瘤细胞内的含量变化及亚细胞定位分析,研究聚焦超声结合PpⅨ对S180肿瘤细胞的损伤作用。方法：应用荧光分光光度法测定PpⅨ存S180肿瘤细胞内的富集;激光共聚焦扫描显微镜观察PpⅨ的亚细胞定位;台盼蓝拒染法检测超声结合不同浓度的PpⅨ作用后细胞的存活率;环境扫描电镜观察细胞膜表面超微结构变化。结果：PpⅨ在S180肿瘤细胞内的富集是一个动态变化过程．45 min达到最高点,此时为最佳声照处理时间点,且此时PpⅨ主要定位于细胞膜;超声激活PpⅨ对S180肿瘤细胞的杀伤作用明显大于单纯超声组,其膜损伤程度也更为严重。结论：细胞膜可能是超声激活PpⅨ作用的一个主要靶点。     

聚焦超声激活原卟啉IX对S180 肿瘤细胞的杀伤作用

目的 初步研究超声激活原卟啉IX(PPIX)对S180肿瘤细胞的杀伤作用,并探讨其作用的生物学机制.方法 采用频率为2.2 MHz,强度为3 W/cm2的聚焦超声,结合120 μmol/L的PPIX作用于S180肿瘤细胞,通过台盼蓝拒染法检测细胞的存活率;扫描电镜观察细胞膜表面超微结构变化;活性氧试剂盒检测细胞悬液中活性氧的生成量;酶化学方法检测细胞内几种抗氧化物酶活性的变化.结果 同等条件下,超声结合PPIX对细胞的损伤显著高于单纯超声组,而单纯PPIX表现出无明显的细胞毒作用;酶化学方法显示,超声激活PPIX后细胞内的丙二醛(MDA)含量显著增加,而细胞内的抗氧化物酶类均有不同水平的下降,并且与处理后细胞悬液中活性氧的生成量相关.结论 超声激活原卟啉IX产生的活性氧自由基作用于细胞膜,增加膜脂质过氧化水平,降低细胞内的抗氧化物酶的含量,可能是其损伤S180 肿瘤细胞的主要因素之一.     

超声结合原卟啉IX对腹水型S180肿瘤细胞的损伤作用

目的:根据原卟啉IX(PpIX)在S180肿瘤细胞内的含量变化及亚细胞定位分析,研究聚焦超声结合PpIX对S180肿瘤细胞的损伤作用.方法:应用荧光分光光度法测定PpIX在S180肿瘤细胞内的富集;激光共聚焦扫描显微镜观察PpIX的亚细胞定位;台盼蓝拒染法检测超声结合不同浓度的PpIX作用后细胞的存活率;环境扫描电镜观察细胞膜表面超微结构变化.结果:PpIX在S180肿瘤细胞内的富集是一个动态变化过程,45 min达到最高点,此时为最佳声照处理时间点,且此时PpIX主要定位于细胞膜;超声激活PpIX对S180肿瘤细胞的杀伤作用明显大于单纯超声组,其膜损伤程度也更为严重.结论:细胞膜可能是超声激活PpIX作用的一个主要靶点.     

原卟啉Ⅸ介导的声动力疗法对S180 肿瘤细胞膜损伤研究

探讨频率为1.1 MHz、强度为3 W/cm2的聚焦超声,结合1 μg/mL的原卟啉Ⅸ（PpⅨ）对S180肿瘤细胞膜结构和功能的损伤作用。超声联合PpⅨ作用于S180肿瘤细胞后,通过酸性磷酸酶活力检测细胞生长活力;扫描电子显微镜观测细胞膜表面超微结构;生化分析方法检测Na⁺-K⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase活性,细胞膜唾液酸 (SA)及细胞内谷胱甘肽（GSH）含量;通过荧光酶标仪检测细胞线粒体膜电位及细胞色素C氧化酶含量。实验结果显示：与对照组（Control）、原卟啉Ⅸ组（PpⅨ）、超声组相比,超声联合PpⅨ处理组的细胞生长明显受到抑制,其酸性磷酸酶活力（OD值）由对照组063±003下降至0.34±0.01;细胞膜结构严重破坏,表现为微绒毛消失和胞质部分成分流失;膜表面重要成分如Na⁺-K⁺-ATPase和Ca²⁺-ATPase活性明显下降（P<0.05）,细胞膜唾液酸含量及胞内GSH水平急剧降低（P<0.01）。研究表明：超声联合PpⅨ作用于S180肿瘤细胞后,细胞膜蛋白受到严重破坏,部分膜蛋白流失。研究结果还提示：声动力处理后细胞线粒体膜电位水平显著降低（Rhodamin 123平均荧光强度由对照组14 082.78 ± 840.44下降至7 801.53± 409.15）;细胞色素C氧化酶活性由对照组的（0.015 6 ± 0.002 0）U/min/mg降低至（0.008±0.000 0）U/min/mg,提示线粒体也可能是超声联合PpⅨ对S180肿瘤细胞的作用靶点。     

超声激活原卟啉Ⅸ对S180肿瘤细胞膜功能的损伤研究

探讨超声结合原卟啉Ⅸ(PPⅨ)对S180肿瘤细胞膜功能的影响及其作用机制。采用频率为1.1 MHz,强度为3 W/cm2的聚焦超声,结合1μg/mL的PPⅨ作用于S180肿瘤细胞,借助于流式细胞仪,采用荧光探针DCFH-DA(2',7'-二氯双氢荧光素双乙酸酯)、FD500(异硫氰酸荧光素钠标记的右旋糖酐)、DiBAC4(3)和Fluo3-AM分别检测胞内活性氧生成量、细胞膜通透性、质膜电位及胞内游离Ca2+的浓度变化。研究结果表明,超声结合PPⅨ比单纯超声或单纯PPⅨ对细胞膜功能损伤作用都强,这种损伤作用可能与影响质膜功能的活性氧含量、细胞膜通透性、质膜电位以及胞内游离Ca2+浓度变化相关。     

聚焦超声结合血卟啉对S180肿瘤细胞的杀伤作用

初步研究聚焦超声激活血卟啉对S180肿瘤细胞的杀伤作用,并探讨其作用的生物学机制。通过台盼蓝拒染法检测频率为2.2MHz的聚焦超声激活血卟啉作用于S180肿瘤细胞的存活率,筛选出最佳的超声处理参数,采用自由基清除剂检测超声激活血卟啉产生的起主要作用的活性氧成分,通过丙二醛含量测定法检测细胞内脂质过氧化含量变化。单纯血卟啉组表现出无明显的细胞毒作用;同等条件下,超声结合血卟啉组对细胞的损伤显著高于单纯超声组,且这种协同杀伤作用可以被组氨酸和甘露醇所抑制,而不被SOD抑制;同时,超声激活血卟啉后细胞内的脂质过氧化含量显著增加。超声结合血卟啉对S180肿瘤细胞有协同杀伤作用,可能由于声动力学处理过程中产生的活性氧自由基作用于细胞膜,增加膜脂质过氧化水平,最终导致细胞死亡。     

声化学激活血卟啉对S180肿瘤作用的研究

声化学激活血卟啉对Ｓ＿（１８０）肿瘤作用的研究马玉英，张伊立，张军平（陕西师范大学应用声学研究所，西安７１００６２）关键词：声化学；血卟啉；Ｓ１８０瘤细胞；抗肿瘤效应血卟啉是一种有机光敏剂，具有优先在肿瘤组织聚集的特点，用激光激活血卟啉的光动力学疗法...     

大蒜乳剂抗实体型S180肿瘤细胞的组织细胞化学研究

注射大蒜乳剂后小鼠S180实体瘤体积缩小,抑瘤率为70.3%。肿瘤细胞呈致死性损伤,肿瘤细胞核固缩、细胞质空泡化、细胞崩解。瘤块内出现大量的中性粒细胞和少量的巨噬细胞,中性粒细胞多与肿瘤细胞紧密接触,细胞内有大量的过氧化氢酶阳性颗粒,提示大蒜乳剂既有对实体型S180肿瘤细胞的直接杀伤作用,又能调动中性粒细胞和巨噬细胞间接杀伤肿瘤细胞。     

体内不同生长期腹水瘤细胞对NK结合、杀伤的敏感性

NK细胞能在体内外杀伤各种瘤细胞,但并非所有的肿瘤对NK的杀伤都敏感。许多肿瘤.特别是由体内原发肿瘤部位及转移灶中分离的瘤细胞对NK的结合及杀伤表现出不同程度的抗性。不同的瘤细胞对NK杀伤敏感性上的差异与这些细胞表面“NK靶细     

Experimental Study on Inhibition of S180 Tumor Cells by Agrimonia Pilosa Extract

We evaluated the in vitro and in vivo inhibition of S₁₈₀ tumor cell growth of the water extract of Agrimonia pilosa. Inhibitory effect of Agrimonia pilosa on in vitro-cultured S₁₈₀ cell proliferation was measured by MTT assay; mice model of transplanted tumor was established, after 8 days of continuous administration, the tumors were removed, weighed, and compared with the control group, and the in vivo anti-tumor effect of Agrimonia pilosa on mouse sarcoma S₁₈₀ was compared using inhibition rate. The in vitro anti-tumor experiment indicated that the inhibition rate gradually increases with the increase of extract concentration and the extension of time, with IC50 175.64, 90.59, and 71.74 µg/ml at 24 h, 4 h, and 72 h respectively. In this study, the in vitro MTT assay was used to determine the inhibitory effect of Agrimony pilosa water extract on S₁₈₀ tumor cells, the method is simple, reliable, and practical; mice model of in vivo transplanted S₁₈₀ tumor was established, which allowed direct observation of tumor inhibitory effect, and thus found out that the water extract of Agrimonia pilosa has inhibitory effect on S₁₈₀ tumor cells.     

香菇多糖对荷瘤鼠垂体-肾上腺轴的实验形态学影响

目的:探讨荷瘤S180小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的反应性和形态学改变以及香菇多糖对其的影响.方法:免疫组织化学显色和形态计量技术.结果:荷瘤小鼠肾上腺质量增加,肾上腺皮质束状带和网状带、髓质细胞均增生.肾上腺皮质厚度、皮质截面积和髓质截面积均明显增加.香菇多糖组肾上腺结构与正常组比较无明显形态学变化.荷瘤对照组的促肾上腺皮质激素(ACTH)阳性反应细胞百分比、平均光密度值和阳性反应颗粒面积比均增高,与正常对照组比较,其差异有统计学意义.应用香菇多糖后,上述各数值均回归接近正常.结论:香菇多糖可通过影响HPA的功能活动,减轻由ACTH引起的糖皮质激素分泌增加出现的免疫抑制,最终达到抗肿瘤之目的.     

Lymphocyte Activating Alloantigens on Human Epidermal Cells

Human epidermal cells dissociated by repeated trypsinization of skin explants were stimulatory to allogeneic lymphocytes in mixed lymphocyte skin-cell cultures. After elimination of the lymphocytes proliferating in response to a particular allogeneic lymphocyte donor by a "hot" pulse of ³H-thymidine of high specific activity, the viable lymphocytes remaining in culture were still capable of responding to stimulation by epidermal cells from the same donor. The response towards allogeneic epidermal cells could only partially be eliminated by ³H-thymidine treatment. This treatment, however, also partially eliminated the secondary stimulation response towards lymphocytes from the epidermal cell donor used initially, but did not alter the response to lymphoid or epidermal cells from an unrelated third party donor. In addition, HL-A antisera, which specifically inhibited the stimulatory capacity of mitomycin-treated lymphocytes that carried the relevant HL-A antigen also inhibited the stimulatory properties of epidermal cells from the same donor.     

电穿孔法转染GFP标记H22和S180的实验研究

采用电转染法将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入小鼠肝癌H22和肉瘤S180细胞,通过G418筛选,建立了稳定表达该蛋白的小鼠肝癌H22细胞株和肉瘤S180细胞株;光镜和电镜观察其细胞形态、超微结构及生长状况没有发生显著改变;建立相应的皮下和腹腔荷瘤动物模型,观察到其皮下和腹腔成瘤时间与腹腔荷瘤生存时间无显著改变(P＞0.05),在活体荧光成像系统能观察到其荷瘤部位荧光.期望利用gfpH22和gfpS180阳性细胞株,运用免疫荧光技术、活体荧光成像系统和激光共聚焦系统对肿瘤进行体内外直观、可视和半定量的深入研究.     

Protoporphyrin IX fluorescence photobleaching increases with the use of fractionated irradiation in the esophagus

Fluorescence measurements have been used to track the dosimetry of photodynamic therapy (PDT) for many years, and this approach can be especially important for treatments with aminolevulinic-acid-induced protoporphyrin IX (ALA-PpIX). PpIX photobleaches rapidly, and the bleaching is known to be oxygen dependent, and at the same time, fractionation or reduced irradiance treatments have been shown to significantly increase efficacy. Thus, in vivo measurement of either the bleaching rate and/or the total bleaching yield could be used to track the deposited dose in tissue and determine the optimal treatment plans. Fluorescence in rat esophagus and human Barrett's esophagus are measured during PDT in both continuous and fractionated light delivery treatment, and the bleaching is quantified. Reducing the optical irradiance from 50 to 25 mWcm did not significantly alter photobleaching in rat esophagus, but fractionation of the light at 1-min on and off intervals did increase photobleaching up to 10% more (p value=0.02) and up to 25% more in the human Barrett's tissue (p value<0.001). While two different tissues and two different dosimetry systems are used, the data support the overall hypothesis that light fractionation in ALA-PpIX PDT esophageal treatments should have a beneficial effect on the total treatment effect.