大鼠肝细胞癌变过程中Survivin与Apollon的动态表达研究

目的：探讨大鼠肝细胞癌变过程中survivin和apollon的动态表达及意义。方法：以改良型间断饮用二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）诱导大鼠原发性肝癌模型,观察大鼠肝脏在不同诱癌阶段的病理变化,采用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测大鼠HCC不同时期survivin和apollon的蛋白及mRNA表达。结果：改良型间断饮用DEN成功诱导了大鼠肝癌模型,诱癌结束时实验组大鼠自然死亡4只,死亡率5.88%（4/68）。实验组存活的16只大鼠15只形成肝癌,诱癌率93.75%（15/16）。免疫组化结果显示：survivin和apollon阳性表达率逐渐升高,各组间阳性率比较差异有统计学意义（P〈0.05）,survivin和apollon在肝癌组中表达呈正相关关系（r=0.515,p=0.003〈0.05）。RT-PCR检测结果显示,survivin mRNA和apollon mRNA表达,随着肝癌程度的加重而增加,与对照组肝组织比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：survivin、apollon在肝癌组织中呈高表达,提示二者在HCC的发生发展中起重要作用,可作为肝癌早期诊断的潜在标志物。     

Survivin与p21waf-1在大鼠肝细胞癌变过程中的动态表达及其相关性的研究

目的:动态观察黄曲霉毒素B1(AFB1)在诱发大鼠肝细胞癌(HCC)过程中survivin 及p21waf-1表达的变化及它们在HCC发生发展中的关系.方法:用免疫组化及RT-PCR检测24只用AFB1诱发出的大鼠肝癌及癌旁肝组织、6只未诱发出肝癌的大鼠及11只对照大鼠不同时期肝活检组织中的survivin与p21waf-1基因和蛋白表达.结果:①HCC组织中survivin阳性率41.67%、癌旁肝组织54.17%;未发生肝癌及对照组大鼠活检肝组织,均未检出survivin蛋白(P<0.01);②HCC及癌旁肝组织中survivin mRNA的表达水平显著上调(P<0.01);③HCC及癌旁肝组织p21waf-1蛋白阳性率明显低于58周未出癌及对照组大鼠肝组织(P<0.01);④出癌大鼠p21waf-1 mRNA表达水平在HCC形成过程逐渐下调(P<0.01);⑤在HCC形成中,survivin与p21waf-1表达呈负相关.结论:在HCC形成的早期p21waf-1mRNA表达的下调逐渐失去抑制细胞增殖、促进细胞分化功能,使细胞增殖,而survivin mRNA表达上调,抑制细胞凋亡,两者在HCC形成过程中可能发挥协同作用.     

蛋白激酶PRKX在肝癌组织中的表达及意义

目的 研究PRKX在肝癌组织中的表达和临床意义. 方法 收集36例肝癌患者肝癌组织(肝癌组)和癌旁肝组织(对照组).分别采用RT-PCR和Western blot的方法检测PRKX mRNA和蛋白在肝癌组和对照组中的表达. 结果 RT-PCR和Western blot结果显示,PRKX mRNA和蛋白在人肝组织有表达,且在肝癌组的表达显著高于对照组(mRNA肝癌组／mRNA对照组=1.48;蛋白肝癌组／蛋白对照组=1.14). 结论 PRKX在肝癌组织表达高于癌旁肝组织,可能与肝癌发生、发展相关.     

凋亡抑制蛋白livin在人胃癌中的表达以及和survivin表达的关系

目的:探讨胃癌组织中凋亡抑制蛋白livin表达情况及其与各临床病理因素的关系,以及和凋亡抑制蛋白survivin表达的相关性。方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌组织中livinα、livinβ和survivin的mRNA的表达,并用westernblot分析livin和survivin蛋白的表达。结果:40例胃癌组织中livin表达阳性率为47.5%、survivin为60%,而在正常和癌旁组未检出阳性结果;livin的表达与组织分化和淋巴结转移有关,组织分化差,淋巴结转移者livin表达率高(P<0.05);24例survivin阳性样本中有14例livin呈阳性。结论:livin在胃癌组织中表达增高,可作为胃癌的分子标志物,可能成为胃癌治疗的新分子靶点,livin表达和survivin表达在本实验中结果显示没有相关性(P>0.05)。     

Hepcidin在大鼠酒精性肝病发生发展中的作用

目的 构建大鼠酒精性肝病动物模型,探讨Hepeidin在酒精性肝病发生发展中的作用.方法 健康SD大鼠40只,随机分为两组,每组20只.对照组和模型组分别用生理盐水(10 mL/(kg·d)]和56%酒精[10 mL/(kg·d)灌胃,连续12周.检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及铁含量,肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量,RT-PCR检测肝Hepcidin mRNA的表达,取大鼠肝组织行HE染色、免疫组化、苏丹N染色.结果 模型组大鼠血清ALT、AST及铁含量高于对照组(P<0.01),肝组织SOD活力低于对照组、MDA含量高于对照组(P<0.01).模型组大鼠肝肿大,表面粗糙呈灰黄色,肝细胞大量变性坏死,胞质内可见大量脂滴空泡,脂肪变细胞所占比例高于对照组(P<0.05).肝组织苏丹IV染色,对照组大鼠肝组织见极少量的肝细胞胞浆内橘红色染色,模型组大鼠肝细胞内见大量大小不等的橘红色染色.肝组织肿瘤坏死因子-P(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的阳性表达率模型组高于对照组(P<0.01).半定量RT-PCR结果显示模型组大鼠肝组织Hepcidin mRNA的表达低于对照组(P<0.01).结论 酒精性肝病大鼠肝组织TNF-a、IL-6表达增加,但Hepcidin mRNA的表达下降.     

survivin基因在人原发性肝癌组织中的表达及其意义

目的： 探讨survivin基因在人原发性肝癌发生发展中的作用及可能的机制。方法：应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测15例原发性肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织及肝正常组survivin基因及相关基因c-myc、p53、STAT3和VEGF的mRNA表达水平，应用Western blotting法及免疫组织化学染色法检测上述组织中survivin基因的蛋白表达水平及其定位。结果： 肝癌组织及癌旁组织中survivin基因mRNA的表达量均显著高于正常肝组织（P<0.01）, 肝癌组织中survivin基因mRNA的表达量明显高于癌旁组织（P<0.01），肝癌及癌旁组织中c-myc、 STAT3、VEGF基因mRNA的表达量均显著高于正常肝组织（P<0.01），而p53基因mRNA的表达量显著低于正常肝组织（P<0.01）。肝癌组织及癌旁组织中survivin基因的蛋白表达水平均显著高于正常肝组织（P<0.01），且肝癌组织中survivin基因的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）。结论:survivin基因的异常表达在肝癌的发生发展中起促进作用，可作为治疗的理想靶点。     

单酰甘油脂肪酶在原发性肝细胞肝癌中的表达及意义

目的探讨单酰甘油脂肪酶(monoacylglycerol lipase,MAGL)在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义。方法应用Real-Time PCR、免疫组织化学和Western blot检测50例肝癌及癌旁组织、16例正常肝组织标本中MAGL的表达,比较MAGL在癌组织、癌旁组织及正常肝组织中表达的差异,并分析其与临床病理特征的关系。结果 (1)免疫组织化学检测结果显示,MAGL在癌组织主要表达于细胞核中,而在癌旁组织和正常组织主要表达在细胞质中;MAGL在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织三组中差异有统计学意义(P<0.05);MAGL在低分化肝癌中的表达阳性率明显高于高分化肝组织(P<0.05)。(2)Real-Time PCR结果显示,高分化、低分化以及癌旁组织中MAGL的mRNA水平均较正常肝组织中显著增高(P<0.01);(3)Western blot结果显示,癌组织中MAGL蛋白呈强阳性表达,而癌旁组织和正常组织中呈弱阳性表达;高分化及低分化癌组织中MAGL的蛋白水平较癌旁组织和正常肝组织中显著增高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MAGL表达水平与原发性肝细胞肝癌的恶性表型呈正比,它可能在癌细胞侵袭和转移过程中发挥重要作用。     

黄曲霉毒素诱发大鼠肝细胞癌过程中P38 mRNA表达水平的动态变化

目的：了解P38 mRNA在黄曲霉毒素相关肝细胞癌发生发展过程中的变化情况。方法：取雄性4周龄SD大鼠77只为研究对象,随机分为实验组66只,对照组11只。实验组应用黄曲霉毒素B1诱发肝细胞癌,对照组按正常饲养方法饲养,两组大鼠分别于实验第12、20、36、46周进行肝组织活检,第58周时处死取肝。所有组织标本均进行常规病理组织学检测,并应用RT-PCR检测P38 mRNA的表达水平。结果：实验组存活至实验结束并发生肝细胞癌的大鼠共24只（出癌组）,6只无任何肿瘤发生（未出癌组）,对照组11例均未发生肿瘤。各组大鼠均可检出不同程度的P38 mRNA表达,其表达水平与黄曲霉毒素B1作用时间无明显关系,但肝癌组织较癌旁组织及其正常肝组织明显增强（P〈0.05）。结论：黄曲霉毒素B1诱发大鼠肝细胞癌组织P38 mRNA的表达水平明显上调,P38 MAPK通路在黄曲霉毒素B1相关肝细胞癌发生时可能处于异常激活状态。     

RUNX3在人类原发性肝细胞癌中的表达

目的探讨RUNX3基因在人类肝细胞性肝癌中的表达差异。方法采用免疫组化法和蛋白免疫印迹（WesternBlot）及逆转录-多聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对临床肝细胞性肝癌50例石蜡标本和43例新鲜标本及其癌旁组织中RUNX3基因的表达进行检测。结果免疫组化结果表明RUNX3在肝细胞性肝癌组织中的表达率显著低于癌旁组织,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;WesternBlot结果显示RUNX3蛋白在肝癌组织标本中的光密度值明显低于在癌旁组织中的光密度值,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;RT-PCR结果显示RUNX3mRNA在肝癌组织表达率低于癌旁组织表达率,两者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。RUNX3蛋白及mRNA的表达与肿瘤分化程度有关（P〈0.05）,而与患者性别、年龄、HBsAg、AFP均无明显关系（P〉0.05）。结论 RUNX3的表达下调与HCC的发生密切相关,可能作为抑癌基因在肝癌的发生发展中起作用。     

Shh和Gli1蛋白在大鼠肝细胞癌中的表达研究

目的探讨在SD大鼠肝细胞癌中Shh和Gli1蛋白的表达及其意义。方法取体质量为170～200g雄性SD大鼠30只,随机分为实验组(20只)和对照组(10只),实验组采用0.01%二乙基亚硝胺(DEN)自由喂养16周,对照组常规标准喂养,诱导大鼠肝细胞癌成功后,应用免疫组化检测肝癌组织和正常肝组织中Shh和Gli1表达情况。结果免疫组化检测实验组肝癌组织中Shh和Gli1的阳性表达率分别为87.5%(14/16)和75.0%(12/16),对照组肝组织中检测Shh和Gli1的阳性表达率分别为30.0%(3/10)和20.0%(2/10);两种蛋白质在肝癌组织中的表达与正常组织中的表达比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在人工诱导的SD大鼠肝癌模型中,Hedgehog信号通路处于激活状态。     

凋亡抑制基因Livin与Survivin在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨Livin与Survivin基因在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达情况及其与临床和病理参数的关系。方法采用RT-PCR法检测44例NSCLC患者手术切除后的标本（其中腺癌30例,鳞癌14例）和44例癌旁正常肺组织中Livin与Survivin基因的表达情况,并分析其与NSCLC临床和病理参数的关系。结果NSCLC肺组织中的Livin与Survivin基因阳性表达率（分别为68.2％和88.6％）均显著高于癌旁正常组织（分别为22.7％和27.2％）,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;Livin与Survivin基因在NSCLC中的表达和患者性别、年龄及肿瘤大小、分化程度、组织学类型、淋巴结是否转移、病理TNM分期的差异均无统计学意义（均P〉0.05）,且Livin与Survivin基因在NSCLC组织中的分布也无相关性（r=0.157,P〉0.05）。结论Livin和Survivin基因在NSCLC组织中呈高度表达,但其表达与NSCLC的性别、年龄及肿瘤大小、分化程度、组织学类型、淋巴结是否转移、病理TNM分期无关。     

Survivin和PTEN在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的：探讨survivin和PTEN在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况及其与NSCLC临床生物学行为的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测survivin和PTEN在78例NSCLC组织、46例癌旁组织和12例非癌肺良性病变组织中的表达情况,并将结果进行相关性分析。结果：Survivin在非癌良性病变组织、癌旁组织、非小细胞肺癌中的阳性表达率分别是0、10．9％、67．9％．其蛋白表达逐渐增强（P〈0．05）;非小细胞肺癌中的survivin表达显著高于癌旁肺组织及非癌良性病变组织中的表达（P〈0．05）。PTEN在非癌良性病变组织、癌旁组织、非小细胞肺癌中的阳性表达率分别是100％、91．3％、47．4％,其表达逐渐减弱（P〈0．05）：非小细胞肺癌中的PTEN表达低于癌旁肺组织及非癌良性病变组织中的表达（P〈0．05）。survivin蛋白的表达与NSCLC的病理学分级、淋巴结转移、TNM分期有关（P〈0．05）。PTEN蛋白的表达与NSCLC的病理学分级、淋巴结转移、TNM分期有关（P〈0．05）。Survivin与PTEN表达呈负相关（P〈0．05）。结论：Survivin和PTEN在NSCLC中的异常表达与其生物学行为密切相关,survivin在非小细胞肺癌中过度表达,PTEN在非小细胞肺癌中表达降低,并且二者的表达呈负相关,二者可作为NSCLC判断病情和评价预后的参考指标。     

Survivin在原发性肝癌组织中的表达

目的 探讨原发性肝癌组织中Survivin的表达与临床病理特征的相互关系。方法 用ABC免疫组化法测定50例原发性肝癌组织及癌旁组织中Survivin的表达水平。结果 50例原发性肝癌组织中Survivin的阳性表达率62．0％明显高于癌旁组织中Sunrivin 14．O％的阳性表达率（P＜0．05）；Survivin的表达情况与原发性肝癌组织的分化程度、肿瘤有无转移、肿块直径、门静脉、肝静脉癌栓关系密切（P＜0．05）。结论 Survivin的表达可能与原发性肝癌的发生、发展密切相关。     

肝癌组织survivin的表达及其与HBV感染的关系

目的:研究肝癌组织中的survivin的表达与HBV感染的关系. 方法:应用免疫组化法检测原发性肝癌组织45例,癌旁肝硬化组织25例,肝硬化组织18例,肝炎组织5例,正常肝组织10例中survivin的表达,同时检测原发性肝癌中HBsAg的表达. 结果:在45例肝癌组织中survivin阳性34例(75.5%),阳性率高于癌旁肝硬化组织(44.4%),肝硬化组织(0),肝炎组织(0)和正常肝组织(0,P＜0.001). 肝癌中survivin的表达在Edmondson分级Ⅲ～Ⅳ级高于Ⅰ～Ⅱ级(P=0.014),而在年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、是否有门脉转移方面无统计学差异(P＞0.05),survivin与HBsAg的表达呈正相关(P=0.014). 结论:肝癌组织中survivin高表达说明其在肝癌发生发展中起重要作用,同时HBV感染对于survivin表达上调有一定作用.     

来曲唑对EM大鼠Survivin表达的影响

目的探讨来曲唑对子宫内膜异位症（endometriosis,EM）大鼠在位、并位内膜生存素（Survivin）表达的影响，为EM的临床治疗提供舞验依据。方法将EM模型大鼠随机分为对照组和来曲唑组，测定用药前后异位囊肿体积变化，应用SP法检测各组在位及异位内膜中Survivin的表达。结果①采曲唑组治疗后异位囊肿体积明显缩小（P〈0．05）。②对照组中异位内膜Survivin表达强度高于在位内膜（P〈0．05）；来曲唑组中异位内膜Survivin表达强度低于在位内膜（P〈0.05）；③在位内膜中Survivin表达强度来曲唑组低于对照组（P〈0.05）；异位内膜中Survivin表达强度来曲唑组明显低于对照组（P〈0．01）。结论来曲唑可以有效缩小EM大鼠异位囊肿，可能通过降低Survivin的表达而起到治疗作用。     

Survivin和MUC2在萎缩性胃炎和胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨生存素（Survivin）和黏蛋白2（mucin 2,MUC2）的表达与萎缩性胃炎伴肠化生及胃癌的关系。方法构建含30例正常胃黏膜、30例萎缩性胃炎伴肠化生和41例胃癌的组织芯片,用免疫组化方法（ S-P法）检测组织芯片中Survivin和MUC2的表达。结果 Survivin和MUC2表达阳性率在正常胃黏膜组织中为7．14％和0％;在萎缩性胃炎伴肠化生胃黏膜中为21．43％和75．00％;在胃癌中为77．78％和13．89％。二者在不同胃黏膜阳性表达率总体差异有显著性意义（P＜0．001）。胃癌组织中Survivin表达与Lauren分型、浸润深度、TNM分期有关（P＜0．05）。 MUC2表达与Lauren分型、分化程度有关（P＜0．05）。二者表达均与患者性别、年龄、淋巴结转移、病变部位、肿瘤大小无关（P＞0．05）。 Survivin与MUC2表达间无明显相关性（r=0．215,P=0．209）。结论 Sur-vivin和MUC2表达在胃黏膜肠化生及胃癌发生中发挥一定作用。     

乳腺癌组织中Survivin及C—erB-2的表达及临床相关性

目的：探讨乳腺癌组织中Survivin及C—erB-2的表达及临床相关性。方法：采用免疫组织化学SP法检测156例乳腺癌组织石蜡切片中Survivin及C—erB-2的表达。结果：乳腺癌中Survivin及C—erB-2阳性表达与肿瘤病理分型、肿瘤大小无关（P〉0．05）,但其与组织学分级、临床分期、淋巴结转移数目相关（P〈0．05）。乳腺癌中Survivin和C—erB-2的表达呈正相关（P〈0．05）。结论：Survivin及C—erB-2可作为判断乳腺癌生物学行为和预后的重要指标。     

HIF-1α、2α和Survivin蛋白在结肠腺癌中的表达及临床意义

目的探讨缺氧诱导因子（HIF-1α、HIF-2α）和生存素蛋白（Survivin）在结肠正常粘膜、结肠腺瘤、结肠腺癌组织中的表达,初步分析缺氧诱导因子、生存素蛋白与结肠腺癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组织化学（SP）方法,分别检测结肠正常粘膜、结肠腺瘤和结肠腺癌组织中HIF-1α、HIF-2α和Survivin的表达。结果（1）HIF-1α、HIF-2α和Survivin在结肠正常粘膜组织中不表达,在结肠腺瘤组织中低表达,在结肠腺癌中高表达;结肠不同组织分型中三者表达比较有显著性差异（P〈0．01）,随正常粘膜-腺瘤-癌的次序三者表达呈逐渐升高趋势。（2）HIF-1α、HIF-2α和Survivin在结肠腺癌组织中表达越强,淋巴结转移率越高（P〈0．01）、组织分化程度越低（P〈0．05）、Dukes分期越晚（P〈0．05）。（3）结肠腺癌中HIF—1α、HIF-2α表达与Survivin表达呈正相关（P〈0．01）。结论（1）HIF—1α、HIF-2α和Survivin过度表达对结肠腺癌的发生、发展起正性协同作用,三者与结肠腺癌的浸润、转移密切相关。（2）检测结肠腺癌组织中Survivin的表达对判断肿瘤的发生、进展具有重要意义。Survivin可望成为诊断和治疗结肠腺癌的新靶点。     

Livin在原发性肝癌组织中的表达及与微血管密度的关系

目的研究原发性肝癌组织中Livin的表达及其与微血管密度（microvessel density,MVD）的关系,探讨它们之间及其与原发性肝癌临床病理特征的相互关系。方法用免疫组化SP法测定72例原发性肝癌组织及癌旁组织中Livin的表达水平及MVD。结果72例原发性肝癌组织中livin的阳性表达率（65.5%）和MVD计数均值（58.43±5.72）个/HP,明显高于癌旁组织中livin的阳性表达率（11.1%）及MVD计数均值（20.04±3.56）个/HP（P值均〈0.05）,原发性肝癌组织中livin表达评分与MVD之间存在正相关关系（P〈0.01）。结论livin和MVD的表达可能与原发性肝癌的发生、发展及血管生成密切相关。