雌激素激活血管平滑肌细胞钙激活钾通道的非基因组机制研究进展

大电导钙激活钾通道(BKCa)由形成孔道的α亚基及具有调节作用的β亚基组成,因其电导大,对调节平滑肌细胞功能起重要作用,从而成为近年来研究的热点。研究发现雌激素经细胞膜上的雌激素受体介导,通过胞内多种信号转导通路激活内皮型一氧化氮合酶进而产生NO直接或间接激活BKCa通道,产生快速血管效应。随着分子生物学及膜片钳技术的发展,人们在雌激素对BKCa调节机制方面进行了深入的研究,本文就此内容进行综述。     

动脉粥样硬化兔血管平滑肌大电导钙激活钾通道KCMB1基因的mRNA表达量的变化研究

目的 研究动脉粥样硬化(atheresderosis,AS)时动脉血管平滑肌细胞大电导的钙激活钾通道(Large-coeduc-tanee Ca2 -activated K channel,BKca)β1亚单位(KCMB1)基因mRNA定量表达,探讨KCMB1基因在AS发生中的作用.方法 建立兔AS模型,应用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR),检测AS时胸主动脉KCMB1基因的mRNA表达变化.结果 大电导的钙激活钾通道KCMB1基因在动脉粥样硬化组胸主动脉中表达明显减少.结论 大电导的钙激活钾通道β1亚单位调节血管平滑肌细胞的收缩,可能与AS的发生有一定的关系.     

钙激活钾通道α单位的研究现况

大电导钙激活钾通道(BKca)是血管紧张性的决定因素,在平滑肌细胞张力的维持和调节中起着重要的作用。而BKcaα亚单位是Bkca的基本功能单位,本综述着重α亚单位的结构、功能和作用机制。     

大鼠海马神经元大电导钙激活钾通道的全细胞电流记录

目的 探讨记录全细胞的大电导钙激活钾通道的技术方法。方法 首先酶解急性分离大鼠海马神经元；利用全细胞膜片钳技术记录大电导钙激活钾电流。结果 可记录到一系列快速的外向钾离子电流。结论 所记录到的外向钾离子电流中，快速出现并很快减小的呈尖峰样的瞬变外向电流主要由大电导的钙激活钾电流组成。     

妊娠期高血压疾病孕妇胎盘小动脉平滑肌大电导钙激活钾通道表达水平的定量测定

目的：观察妊娠期高血压疾病（HDCP）孕妇胎盘小动脉中大电导钙激活钾通道（BKCa）的蛋白表达,探讨BKCa在该疾病发生机制中的作用。方法取 HDCP孕妇（HDCP组,＝15）与健康孕妇（NT组,n＝15）胎盘小动脉平滑肌,用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测BKCa通道α亚基及β1亚基的蛋白水平。结果胎盘小动脉平滑肌检测显示,BKCa通道α亚基在NT组的蛋白相对表达量为1．0282±0．1806,HDCP组为1．0012±0．1698,差异无统计学意义（P＞0．05）;β1亚基在NT组的蛋白相对表达量为1．6168±0．0126,HDCP组为0．4181±0．0808,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 HDCP胎盘小动脉平滑肌BKCa通道α亚基蛋白表达无明显变化,β1亚基蛋白表达均明显下调。由此推测大电导钙激活钾通道可能参与了 HDCP的发生、发展,β1亚基的异常表达可能是导致HDCP血管舒缩功能障碍的一个重要基础。     

关于硫化氢对小电导钙激活钾通道效应的研究新进展

钙激活钾通道家族成员—小电导钙激活钾通道(SKCa),其分子结构、生理学特性和药理学作用独树一帜,在舒张血管、调节血压方面起重要作用,极有可能靶向治疗心血管方面相关疾病。硫化氢,一种生物效应多样的气体信号分子,研究发现其可能通过作用于SKCa通道起到调节血压、舒张血管的效应。深入研究两者的关系,可助于了解部分心血管疾病发病机制,给临床治疗提供有力依据。本文主要就硫化氢对SKCa通道血管舒张作用的研究新进展作一简要综述。     

中枢神经元钙激活钾通道的研究进展与缺血性脑损伤

钾通道广泛分布于生物体各种可兴奋细胞中 ,在中枢神经系统内存在多种类型的钾通道。其中由神经元细胞浆内 Ca2 浓度和动作电位决定其通道开放和关闭的一类钾通道称为钙激活钾通道 ( Kca能通道 )。在许多神经元中 ,动作电位的产生可导致 Ca2 内流 ,从而激活 Kca通道 ,产生钙激活钾电流 ( IKca)。自 1975年Meech等首次在神经细胞上证实了 IKca的存在后 ,先后在多种细胞上发现了一大类电导值不等 ,电压依赖性不同的 Kca通道。神经元表达多种 Kca通道 ,在调节神经元兴奋性 ,放电频率和膜振荡中起重要作用 [1] 。因此 ,对钙激活性钾通道…     

大电导钙激活钾通道(BKCa)在胃肠道平滑肌的研究

大电导钙激活钾通道(BKCa)属于钙激活钾通道的一种,因其电导值较大而区别于其它亚型.它接受细胞膜电位和胞内Ca2+浓度的双重调节,又可通过负反馈效应反向调节细胞膜电位及胞内Ca2+浓度.BKCa通道在较多细胞中都有表达如:平滑肌细胞、神经细胞、感觉细胞、上皮细胞,因此参与了体内一些重要的生理过程的调节,如:平滑肌细胞的收缩舒张、神经递质的释放、炎症的发生发展.近年,离子通道在胃肠道动力中所起的作用引起广泛关注,BKCa通道在胃肠道平滑肌的研究已有一定基础,本文将就相关方面做一综述.     

钙激活钾/氯通道对大鼠逼尿肌不稳定调节作用的实验研究

目的 研究钙激活钾／氯通道对逼尿肌不稳定的调节作用的变化，探讨其在逼尿肌不稳定(Detrusor instability，DI)发生中的作用。方法 采用Wistar大鼠DI模型，常规制备正常及DI逼尿肌条，体外张力测定其自发收缩频率和幅度，观察通道阻断剂及开放剂的作用。结果 DI组自发收缩频率与张力较对照组显著增加。大电导钙激活钾通道(Big conductance calcium activated potassium channel，BKca)阻断后，对照组频率降低而张力增加，DI组仅频率明显提高，开放后对照组频率与张力均降低，DI组仅频率明显下降。小电导钙激活钾通道(Sroall conductance calcium activated potassium channel，SKca)阻断后两组的频率与张力均明显增加，而开放后则对照组均降低，DI组仅频率下降。钾通道阻断或开放后对照组频率与张力的变化幅度明显高于DI组。钙激活氯通道(Calcium activated chloride channel，Clca)阻断后，DI组频率与张力下降，而对照组无明显改变。结论 钙激活钾／氯通道反馈调节逼尿肌的收缩，DI时Kca作用下调而Clca作用上调，提示钙相关的调节异常在DI的发生中具有重要作用。     

大电导钙激活钾通道功能特性、分子结构和氧化性调节研究进展

实验已证实大电导钙激活钾通道(BKCa)在很多组织中都有表达[1],在生理和病理过程中起到重要作用.许多细胞内外因素都可以调制BKCa通道的功能,而对通道氧化性调节这个影响通道功能的重要因素的研究却相对较少[2].本文拟在BKCa通道功能特性、分子结构及氧化性调节方面进行深人阐述.     

逼尿肌不稳定中钙激活钾/氯通道mRNA表达差异的实验研究

目的探讨钙激活钾/氯通道在正常和不稳定逼尿肌组织中的mRNA表达变化.方法雌性Wistar大鼠采用会阴部尿道结扎法制作成膀胱出口梗阻(bladder outlet obstruction,BOO)模型,经清醒状态膀胱测压确定逼尿肌不稳定(detrusorinstability,DI)后,提取正常与DI逼尿肌组织mRNA,以RT PCR方法研究组织中大电导钙激活钾通道(big conduc-tance calcium activated potassium channel,Bkca)、小电导钙激活钾通道(small conductance calcium activated potassium channel,Skca)、钙激活氯通道(calcium activated chloride channel,Clca)的mRNA表达,凝胶成像分析比较其差异性变化.结果大鼠尿道梗阻后DI发生率76.17%,膀胱容量及最大逼尿肌压显著增加(P＜0.01).钙激活钾/氯通道在两组大鼠逼尿肌中均有表达,其中Bkca、Skca2、Skca3明显降低,而Clca明显升高.结论钙激活钾/氯通道的表达改变可影响逼尿肌兴奋性的反馈调节,在逼尿肌不稳定的发病机制中有重要作用.     

大电导钙激活钾通道及其与高血压的关系

大电导钙激活钾通道广泛分布于人体组织,在平滑肌上尤为丰富。它在维持血管平滑肌细胞静息膜电位,调节平滑肌舒缩方面起着重要作用,并与高血压有着不容忽视的联系,但其联系机制迄今尚有争议。而一些药物能促进该通道的开放,于是对临床工作具有相当的指导意义。本文就近年来关于该通道的结构特征,动力学特征,与高血压的联系及其通道开放剂等方面的研究进展简要综述。     

大鼠肠系膜细动脉血管平滑肌大电导钙激活钾通道的特性

目的探讨肠系膜细动脉血管平滑肌细胞膜上大电导钙激活钾通道(large-conductance calcium-activated potassium channel, BKCa)的电生理特性及其与张力调节的可能机制。方法木瓜酶、胶原酶两步消化法急性分离大鼠肠系膜细动脉血管平滑肌细胞,膜片钳的内面向外式记录法记录BKCa。结果(1)在浴槽液和电极液均为高钾的条件下,BKCa通道的单通道电导为(221±6)pS,反转电位为-0.12 mV;(2)BKCa通道的电流幅度无细胞内钙依赖性,而开放概率(NPo)则同时具有电压依赖性和细胞内钙依赖性。在细胞内钙浓度为0.1 μmol/L时, 使NPo增加e倍的电压增加为(13±1)mV, 达到最大开放概率一半的电压(V1/2)为(22±2)mV;(3)在细胞内钙浓度为1 μmol/L时,可记录到通道长时间的关闭和失活现象,这种现象称为钙依赖性失活。结论肠系膜细动脉血管平滑肌细胞膜上的BKCa具有大电导、高钾选择性、强电压依赖性和高度的细胞内钙敏感性。BKCa高度的钙敏感性可能与血管平滑肌病理情况下的代偿调节有关。     

14,15-EET 通过 TRPV4-SKCa 复合物调节气管平滑肌收缩机制研究

目的：探讨花生四烯酸细胞色素 P450(CYP)表氧化酶代谢产物14,15-环氧化二十碳三烯酸(14,15-EET)对小鼠气管平滑肌收缩功能的影响及其机制。方法采用离体气管实验,通过运用特异性钙激活钾通道阻断剂和瞬时受体电位离子通道4(TRPV4)通道阻断剂,观察14,15-EET 对卡巴胆碱引起的小鼠气管收缩的影响;采用免疫共沉淀实验检测 TRPV4通道蛋白与小电导钙激活钾通道(SKCa )蛋白在小鼠气管平滑肌组织中的相互作用。结果与对照组相比,300 nmol/ L 14,15-EET 预处理小鼠气管后,卡巴胆碱引起的收缩显著减弱;大、中电导钙激活钾通道阻断剂 IbTX 和TRAM34没有显著影响14,15-EET 对卡巴胆碱引起的小鼠气管收缩的抑制效应;而 SKCa阻断剂 Apamin 和 TRPV4通道阻断剂 RN-1734都分别显著阻断了14,15-EET 对卡巴胆碱引起的小鼠气管收缩的抑制作用。免疫共沉淀结果显示TRPV4通道蛋白和 SKCa通道蛋白可以彼此相互共沉淀。结论在小鼠气管平滑肌中,14,15-EET 通过 TPRV4-SKCa钙信号复合物调节气管平滑肌的收缩。     

Mg~(2+)对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的激活作用的初步研究

目的：研究Mg2+对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的作用,以揭示Mg2+扩血管作用的电生理机制。方法：应用膜片钳制技术inside－out方式记录冠脉平滑肌上的单通道活动,经PCLAMP软件进行微机采样储存数据和数据的分析处理。结果：Mg2+对猪冠脉平滑肌钙激活钾通道具有明显激活作用：增强通道开放概率P0,增加膜片通道开放数目。结论：Mg2+对钙激活钾通道的激活作用可能为Mg2+调节心血管活动的重要机制之一。     

钙离子致神经细胞损伤中钙激活钾通道的应用研究

目的:采用膜片钳单通道记录法,对新生SD大鼠的皮层神经元中,钙激活钾通道(KCa)特征,及胞内不同游离钙水平,开放动力学的调节。结果:培养SD大鼠皮层神经元中,KCa以大电导活动占优势,胞内游离钙为10-8 mol/L时,通道几乎不开放,在10-6 mol/L时达最大激活。结论:神经元上KCa通道开放概率,依赖于胞浆中钙离子膜电位,KCa对胞内钙离子浓度敏感。钾通道的开放剂,有一定神经细胞保护作用。     

钙激活钾通道在钙离子致神经细胞损伤中的作用

采用膜片钳单通道记录方法,观察原代培养新生ＳＤ大鼠皮层神经元的钙激活钾通道比（Ｋｃａ）特征及胞内不同游离钙水平对通道开放动力学的调节,结果显示：培养ＳＤ大鼠皮层神经元的Ｋｃａ以大电导活动占优势,胞内游离钙为１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ时,通道几乎不开放,在１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时达最大激活。由此表明神经元上Ｋｃａ通道开放概率明显依赖于胞浆中钙离子和膜电位,Ｋｃａ对胞内钙离子浓度变化极为敏感,钾通道的开放剂可     

腺苷三磷酸对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾通道的作用

冠状动脉平滑肌细胞膜上存在许多大电导钙离子激活钾通道(BK通道),该通道具有电压依赖性和钙敏感性。研究发现,腺苷三磷酸可通过激活非选择性阳离子门控通道P2X受体使细胞外钙离子内流增加,也可以通过G蛋白偶联受体P2Y使细胞内三磷酸肌醇敏感钙库释放钙离子,升高细胞内钙浓度,从而激活BK通道,起到扩张冠状动脉的作用。     

钙激活钾通道在钙离子致神经细胞损伤中的作用

采用膜片钳单通道记录方法,观察原代培养新生ＳＤ大鼠皮层神经元的钙激活钾通道（ＫＣａ）特征及胞内不同游离钙水平对通道开放动力学的调节。结果显示：培养ＳＤ大鼠皮层神经元的ＫＣａ以大电导活动占优势,胞内游离钙为１０－８ｍｏｌ／Ｌ时,通道几乎不开放,在１０－６ｍｏｌ／Ｌ时达最大激活。由此表明神经元上ＫＣａ通道开放概率明显依赖于胞浆中钙离子和膜电位,ＫＣａ对胞内钙离子浓度变化极为敏感。钾通道的开放剂可能有一定的神经细胞保护作用。     

小电导钙激活钾通道与其调控因素研究进展

小电导钙激活钾通道(small conductance calcium-activated potassium channel,SK channel)为钙激活钾通道的一种[1.2],广泛分布于人体多种组织,如中枢与外周神经、骨骼肌、平滑肌、腺体等。近年对SK通道在心肌细胞、血管平滑肌细胞上的表达与功能的研究已成为新的热点,对SK通道的调控可能成为治疗某些疾病的新途径。本文对SK通道的基本性质