食源性肥胖大鼠下丘脑弓状核NPY表达上调

目的:通过观察食源性肥胖(diet-induced obese,DIO)大鼠的摄食量、体重变化和下丘脑弓状核神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)的表达,探讨NPY在大鼠发展为D IO中的作用。方法:SD大鼠给予高能饲料喂养14周后,根据体重筛选出D IO组和肥胖抵抗(diet-resistant,DR)组,记录体重和摄食量,利用免疫组织化学方法半定量分析下丘脑弓状核NPY的表达。结果:约50%的SD大鼠发展为DIO,DIO大鼠的摄食量明显增加,下丘脑弓状核N PY的表达上调,明显高于DR组(P<0.001)和对照组(P<0.05),具有显著性差异。结论:在长期高能饲料喂养下,D IO大鼠下丘脑弓状核N PY的表达上调可能是导致其摄食量和体重增加的重要原因之一。     

肥胖大鼠血浆摄食相关肽和血脂水平变化

目的 :研究高能饲料对大鼠体重和摄食量的影响 ,探讨食源性肥胖的发生机制。方法 :(1)通过高能饲料喂养 ,建立食源性肥胖大鼠模型 ,分为 :①食源性肥胖 (DIO)组。②肥胖抵抗 (DR)组。③对照组。(2)每日观察体重及摄食量 ,共4周。(3)ELISA方法检测血浆MCH和α_MSH水平。结果 :(1)高能饲料喂养下的大鼠体重高于普通饲料喂养大鼠 ,并有50%大鼠发育为DIO。(2)与对照组和DR组相比 ,DIO组体重和摄食量明显增加 (P<0.001)。(3)与对照组相比 ,DIO组血浆MCH水平升高 ,α_MSH水平降低 ,并伴有高脂血症。结论 :高能食物可以导致具有肥胖倾向的大鼠体重增加 ,而DR鼠通过完善的代偿调节机制 ,维持正常体重 ;DIO鼠的血浆MCH水平升高以及α_MSH水平降低可能是导致其肥胖的外周发病机制之一 ;提示肥胖的发生即受环境因素影响 ,又与遗传因素密切相关。     

不同膳食对大鼠下丘脑弓状核NPY表达的影响

目的:研究不同膳食对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)表达的影响。方法:以高能饲料饲养大鼠建立膳食诱导肥胖(DIO)大鼠模型,采用SP免疫组织化学染色法观察大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白的表达。结果:DIO组大鼠、饥饿组大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白的表达明显高于对照组大鼠(P<0.01,P<0.05);DIO组大鼠与饥饿组大鼠比较,下丘脑弓状核NPY蛋白的表达无明显差别(P>0.05)。结论:禁食和高能饲料喂养均可上调大鼠下丘脑弓状核NPY的表达。     

INFLUENCE OF DIFFERENT DIET ON NPY EXPRESSION IN ARCUATE NUCLEUS OF RATS HYPOTHALAMUS

目的:研究不同膳食对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)表达的影响.方法:以高能饲料饲养大鼠建立膳食诱导肥胖(DIO)大鼠模型,采用SP免疫组织化学染色法观察大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白的表达.结果:DIO组大鼠、饥饿组大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白的表达明显高于对照组大鼠(P＜0.01,P＜0.05);DIO组大鼠与饥饿组大鼠比较,下丘脑弓状核NPY蛋白的表达无明显差别(P＞0.05).结论:禁食和高能饲料喂养均可上调大鼠下丘脑弓状核NPY的表达.     

电针上调食源性肥胖大鼠下丘脑弓状核内CART的表达

目的:观察电针对食源性肥胖大鼠的中枢性作用中,能否上调其弓状核内CART的表达。方法:对DIO大鼠进行电针刺激,3次/周,共4周。用免疫组化法检测弓状核内CART的表达,ELISA法检测血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)的水平。结果:电针能减少DIO大鼠的体重和能量摄入,增加弓状核内CART的表达。束缚应激导致血浆ACTH水平升高,但是电针不会导致ACTH进一步增高。结论:电针能上调DIO大鼠CART的表达,进而引起摄食减少和体重减轻。这可能是电针治疗肥胖症的机制之一。     

缺氧对大鼠下丘脑Ⅰ型大麻素受体表达和摄食量的影响

目的 研究缺氧大鼠下丘脑Ⅰ型大麻素受体(cannabinoid receptor type Ⅰ,CB1)的表达变化及其与摄食量的关系.方法 54只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组(每组18只):平原对照组、缺氧1d组和缺氧7d组.缺氧组大鼠置模拟海拔5000m低压舱中,平原对照组大鼠置平原饲养.记录各组大鼠摄食量,蛋白免疫印迹法和免疫组化法观察各组大鼠下丘脑CB1受体和c-Fos蛋白表达变化.结果 与平原对照组[(15.5±2.7)g]大鼠相比,缺氧1d组大鼠摄食量[(4.9±0.7)g]显著减少(P＜0.05),同时大鼠下丘脑CB1和c-Fos阳性细胞数量和蛋白表达量显著减少;缺氧1d组大鼠弓状核(arcuate nucleus,ARC)、下丘脑腹外侧区(later hypothalamic area,LH)和下丘脑腹内侧核(ventromedial hypothalamic nucleus,VMH)CB1受体、c-Fos表达较平原对照组显著降低;随着缺氧时间的延长,动物摄食量逐日增加,缺氧3～7d时的摄食量与平原对照组大鼠相当;缺氧7d组大鼠下丘脑CB1受体和c-Fos阳性细胞数量和蛋白表达量与平原对照组大鼠比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 急性缺氧大鼠摄食减少可能与弓状核、下丘脑腹外侧区和下丘脑腹内侧核CB1受体和c-Fos表达减少相关.     

电针对代谢综合征大鼠下丘脑nNOS、NPY表达的影响

目的:观察电针对代谢综合征大鼠下丘脑神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、神经肽Y(NPY)表达的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组。采用高脂、高糖饲料喂养,制备代谢综合征模型大鼠。电针组取足三里和中脘穴给予电针刺激,频率2 Hz,持续30 min,每天1次,连续14 d。观察大鼠血糖、甘油三酯和胆固醇的变化,免疫组织化学方法检测下丘脑nNOS、NPY的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖、甘油三酯和胆固醇增高(P<0.05),与模型组比较,电针组大鼠血糖、甘油三酯和胆固醇降低(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠下丘脑室旁核nNOS、弓状核NPY免疫阳性细胞数均增加(P<0.05),平均灰度值降低(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠下丘脑室旁核nNOS、弓状核NPY免疫阳性细胞数均减少(P<0.05),平均灰度值增高(P<0.05)。结论:电针对代谢综合征大鼠有治疗作用,可能与其下调下丘脑室旁核nNOS、弓状核NPY的过表达有关。     

吴茱萸碱对大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白表达的影响

目的:研究吴茱萸碱(Evo)对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)蛋白表达水平的影响。方法:选用雄性5周龄Sprague-Dawly大鼠36只,分为对照组、Evo 4mg/kg组、40mg/kg组。Evo灌胃25d后取材;采用免疫组织化学和蛋白免疫印迹的方法,观察Evo对下丘脑弓状核中NPY免疫阳性产物的表达和NPY蛋白水平的影响。结果:吴茱萸碱40mg/kg干预后,下丘脑弓状核NPY-IR阳性细胞数显著减少,同时NPY蛋白表达水平显著降低。结论:Evo可显著降低大鼠下丘脑弓状核促食欲肽NPY蛋白水平,提示下丘脑可能是Evo调节摄食行为的重要中枢。     

食源性肥胖对大鼠免疫功能的影响

目的：利用食源性肥胖（DIO）大鼠模型研究肥胖对脾脏CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞含量的影响,并探讨其是否与脾细胞内JAK／STAT通路相关联。方法：（1）通过高能饲料喂养建立DIO大鼠模型。（2）利用流式细胞术检测大鼠脾脏CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞含量。（3）利用Western blot检测大鼠淋巴细胞长型的leptin受体（Ob—Rb）以及活化的STAT3蛋白的表达。结果：（1）高能饲料喂养的大鼠体重高于普通饲料喂养大鼠,发育为DIO大鼠。（2）DIO大鼠脾脏CD8^＋T淋巴细胞含量高于肥胖抵抗（DR）组以及对照组的大鼠,CD4^＋／CD8^＋细胞比值低于DR组以及对照组的大鼠。（3）各组大鼠脾脏淋巴细胞Ob—Rb以及活化的STAT3蛋白的表达没有统计学差异。结论：DIO大鼠脾脏CD8^＋T淋巴细胞含量高于非肥胖大鼠,CD4^＋/CD8^＋细胞比值低于非肥胖大鼠,其处于免疫抑制状态;这一变化与DIO大鼠脾脏淋巴细胞的Ob—Rb—STAT3信号转导通路并没有直接的关系。     

AMPK／mTOR信号通路在DIO与DR大鼠胰腺中的表达

目的通过比较DIO大鼠和DR大鼠胰腺中AMPK／mTOR通路的变化探讨其对整个机体能量和代谢过程中的作用。方法建立食源性肥胖大鼠模型：100只体重均衡的大鼠随机分为①高脂饮食组（n=80）和②对照组（n=20）,前者14周后根据体重分为肥胖（DIO）和肥胖抵抗（DR）两个亚组。通过免疫组化和免疫荧光的方法检测DIO和DR大鼠胰腺中AMPK／mTOR通路的表达变化。结果①14周后,高脂饮食组体重高于对照组体重（P〈0．001）,DIO与DR组之间体重相比有明显差异（P〈0．001）;②与DIO组相比,DR组大鼠胰腺的AMPK表达水平降低,mTOR下游的两个经典靶标S6K和4E-BP1表达水平明显增加。结论DR大鼠胰腺AMPK水平降低,S6K和4E-BP1水平升高,说明AMPK抑制mTOR通路功能下降,导致胰岛α细胞分泌胰高血糖素增加,这可能是DR大鼠维持正常体重的原因之一。     

电针对食源性肥胖大鼠下丘脑自噬相关蛋白7表达的影响

【目的】探讨电针对食源性肥胖大鼠下丘脑自噬相关蛋白7(Autophagy-related protein 7,Atg7)表达的影响。【方法】将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组8只和饮食诱导肥胖(Diet-induced obesity,DIO)造模组32只,造模组给予高脂饲料饲养14周制备DIO大鼠肥胖模型,取造模成功的16只大鼠随机分为肥胖模型组和针刺干预组,每组各8只。针刺干预组选取中脘、足三里、天枢、三阴交穴进行治疗,每天1次,每周连续针刺5 d,共针刺干预4周。观察各组大鼠体质量的变化,Western blot法检测大鼠下丘脑Atg7蛋白质的表达。【结果】高脂喂养14周后肥胖模型组和针刺干预组大鼠体质量均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P 0.05)。电针干预4周后,针刺干预组大鼠体质量显著低于肥胖模型组(P 0.05)。肥胖模型组大鼠下丘脑Atg7蛋白质含量明显低于正常对照组(P 0.05),电针干预组大鼠下丘脑Atg7蛋白质含量高于肥胖模型组(P 0.05)。【结论】电针干预可减轻肥胖大鼠体质量,可能与调控下丘脑自噬水平变化有关。     

谷氨酸钠诱导大鼠肥胖对下丘脑弓状核NPY、Ob-R表达的影响

目的 探讨谷氨酸钠诱导大鼠肥胖后对下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)、瘦素受体(Ob-R)表达的影响.方法 给新出生雌性Wistar大鼠皮下注射谷氨酸钠,连续5 d,以建立肥胖模型.动物存活至90日龄时,经左心室-升主动脉插管,行4%多聚甲醛灌注固定,取下丘脑进行冰冻切片并行ABC法免疫组织化学染色,观察NPY、Ob-R在其下丘脑弓状核的表达情况.结果 80%的注射谷氨酸钠大鼠呈能量失衡致肥胖状态;下丘脑弓状核NPY表达较对照组增强(P<0.05),而Ob-R表达较对照组减弱(P<0.05).结论 谷氨酸钠诱导大鼠肥胖可引起下丘脑弓状核NPY表达上调,而Ob-B表达下调.     

α-MSH对下丘脑葡萄糖敏感神经元活动的调制作用

目的观察α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)对下丘脑葡萄糖敏感神经元放电活动的影响。方法在麻醉状态下,观察α-MSH对大鼠下丘脑不同核团葡萄糖敏感神经元放电活动的调制作用。结果在下丘脑外侧区共记录到78个神经元,其中有46.15%(36/78)的神经元被鉴定为葡萄糖抑制型(GI)神经元,36个GI神经元中有27个被α-MSH抑制。对12个被α-MSH抑制的GI神经元预先给予MC4R的拮抗剂SHU9119,α-MSH的抑制效应部分被阻断。在腹内侧核共记录到56个神经元,39.28%(22/56)的神经元被鉴定为葡萄糖兴奋型(GE)神经元,22个GE神经元中20个被α-MSH兴奋。对10个被α-MSH兴奋的GE神经元预先给予SHU9119处理后,α-MSH的兴奋效应部分被阻断。在下丘脑室旁核共记录到68个神经元,29.41%(20/68)被鉴定为GI神经元,39.71%(27/68)被鉴定为GE神经元。20个GI神经元中14个被α-MSH抑制,27个GE神经元中24个被α-MSH兴奋。对7个被α-MSH抑制的GI神经元和18个被α-MSH兴奋的GE神经元均预先给予SHU9119,α-MSH效应亦部分被阻断。结论下丘脑的葡萄糖敏感神经元可能是α-MSH参与中枢摄食调控的作用靶点之一。     

高脂饮食诱导的肥胖大鼠下丘脑及肝脏组织中Toll样受体4的表达

目的 探讨在高脂饮食诱导下Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)在肥胖大鼠下丘脑及肝脏组织中的表达.方法 建立高脂饮食诱导的肥胖(DIO)大鼠模型,应用免疫组化染色和Real Time PCR方法检测下丘脑及肝脏组织中TLR4的蛋白及mRNA的表达.结果 喂养8周后,DIO组平均体重为(456.38±19.20)g,高于正常饮食对照组平均体重(372.10±22.47)g,两组间比较差异有显著性意义(P＜0.01);DIO组饮食量为(1229.23±57.29)g,高于正常饮食对照组饮食量(905.50±52.17)g,两组大鼠饮食量比较差异有显著性意义(P＜0.01).Real Time PCR方法显示,DIO组大鼠下丘脑组织TLR4 mRNA含量(0.56±0.16),高于正常饮食对照组TLR4 mRNA (0.39±0.10),P＜0.05; DIO组大鼠肝脏组织TLR4 mRNA含量(0.87±0.24),高于正常饮食对照组TLR4 mRNA(0.54±0.16),两组间差异也有显著性意义(P＜0.01).免疫组化染色肥胖组大鼠下丘脑及肝脏TLR4表达呈强阳性.结论 Toll样受体4在肥胖大鼠下丘脑及肝脏中的表达增多,提示下丘脑及肝脏的炎症反应参与了高脂饮食诱导肥胖的发生.     

吴茱萸碱对大鼠下丘脑弓状核NPYmRNA的影响

目的 研究吴茱萸碱(evodiamine,Evo)对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y (neuropeptide Y, NPY)基因表达水平的影响.方法 采用荧光实时定量PCR(Real-Time PCR)的方法 ,观察Evo干预后下丘脑弓状核促食欲肽NPY mRNA的表达,探讨吴茱萸碱在大鼠体重控制中的可能机制.结果 吴茱萸碱40mg/kg灌胃干预后,下丘脑弓状核NPY基因水平显著降低.结论 Evo可降低大鼠下丘脑弓状核促食欲肽NPY mRNA水平,提示下丘脑可能是Evo调节摄食行为的重要中枢.     

食源性肥胖大鼠弓状核神经肽Y和GnRH的变化及对卵泡发育的影响

目的观察食源性肥胖大鼠弓状核神经肽Y和促性腺激素释放激素（GnRH）的变化及对卵泡发育的影响,为肥胖所致不孕提供实验依据。方法刚断乳SD雌性大鼠,饲以自制高能饲料,喂养14周后,根据Lee’s指数及连续阴道涂片,筛选出肥胖不孕模型;另有饲普通饲料组为对照组。观察神经肽Y（NPY）、瘦素受体（ob-R）及促性腺激素释放激素（GnRH）在其下丘脑弓状核的表达情况,并测定血清雌二醇（E2）、睾酮（T）、瘦素（leptin）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）的水平。结果肥胖不孕大鼠血清E2、T、leptin水平较对照组明显升高（P（0.05）,FSH、LH水平较对照组明显降低（P（0.05）;下丘脑弓状核NPY表达较对照组增强（P（0.05）;ob-R及GnRH表达较对照组均减弱（P（0.05）。结论食源性肥胖大鼠由于神经内分泌-代谢失调引起NPY表达增强GnRH水平降低,导致下丘脑-垂体-卵巢轴功能失调性无排卵引起不孕。     

细菌感染后大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素样和β－内啡肽样免疫反应阳性细胞的相应变化

采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雌雄兼用，老龄鼠（２０个月）９只，壮龄鼠（８个月）１０只。经腹膜腔注入致病量福氏痢疾杆菌Ｆ１ｂ（活菌４９２×１０４·ｇ－１），２４ｈ后，处死取材，应用石蜡切片，ＡＢＣ法染色，ＤＡＢ显色。光镜观察下丘脑弓状核促肾上腺皮质激素样和β－内啡肽样免疫阳性细胞形态、分布和计数。采用图像分析仪测其灰度值。结果发现多数感染鼠第三脑室室周层出现许多β－内啡肽样免疫反应强阳性细胞。弓状核促肾上腺皮质激素样免疫阳性细胞数量老龄组显著低于壮龄组；β－内啡肽样免疫阳性细胞数量老、壮龄组相近。两类阳性细胞的灰度值老龄组均高于壮龄组。与正常大鼠相比较，感染老龄鼠弓状核促肾上腺皮质激素免疫阳性细胞灰度值显著上升，壮龄鼠则下降；感染组老、壮龄鼠弓状核β－内啡肽免疫阳性细胞灰度值均高于正常组之相应龄鼠。提示：促肾上腺皮质激素和β－内啡肽与抗感染密切相关。     

电针与双歧杆菌对不同性别肥胖大鼠脑肠肽及TNF-α的影响

目的:观察电针与双歧杆菌对不同性别肥胖大鼠体质量、Lee’s指数、摄食量及血清中PYY、CCK、GLP-1、Ghrelin和TNF-α含量的影响，探讨电针与双歧杆菌治疗肥胖症的作用机制。方法:高脂饮食成功诱导肥胖大鼠模型后，随机平均分为模型组(M组)、电针组(E组)、双歧杆菌组(B组)和电针+双歧杆菌组(E+B组),另设普通饲料喂养空白组(A组),每组均8只，雌雄各4只。在造模前、造模后和干预后，测量并记录大鼠体质量、Lee’s指数和摄食量。干预后，采用ELISA法检测大鼠血清中PYY、CCK、GLP-1、Ghrelin和TNF-α的水平。结果:与A组比较，M组雄性大鼠与雌性大鼠PYY、CCK、GLP-1和Ghrelin水平均显著下降(P<0.01),TNF-α的水平显著升高(P<0.01)。干预治疗后，与M组比较，E组、B组与E+B组雌性大鼠的体质量均明显减少(P<0.05),雄性大鼠的体质量均显著减少(P<0.01)。E组雄性大鼠与雌性大鼠和E+B组雄性大鼠的摄食量均明显减少(P<0.05),B组雄性大鼠与雌性大鼠和E+B组雌性大鼠的摄食量均显著减少(...     

高脂膳食对大鼠肝组织腺苷酸活化蛋白激酶表达的影响

目的 研究膳食对大鼠肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)mRNA及蛋白表达的影响.方法 用高脂饲料喂养雄性SD大鼠15周,诱导肥胖(DIO)和肥胖抵抗(DIO-R)后将DIO组半数改用基础饲料喂养(DIO-HF/LF),另一半继续高脂膳食(DIO-HF),DIO-R组膳食不变继续喂养至23周;用基础饲料喂养作对照组(CF).用RT-PCR方法检测AMPKα1、α2 mRNA水平,Western blot方法检测肝组织AMPKα及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α亚基(p-AMPKa)蛋白表达水平.结果 ①DIO-HF/LF组体重高于对照组而低于DIO-HF组(均P<0.05);②DIO-HF组AMPKα2 mRNA水平显著降低(P<0.05),而AMPKα1的mRNA水平未见明显改变,③DIO-HF组AMPKα及p-AMPKα的蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05),而其余3组之间差异无统计学意义.结论 长期高脂饮食下调AMPKα2 mRNA的表达以及AMPKα和p-AMPKα蛋白的表达.肥胖敏感大鼠改用基础膳食可降低体重,纠正高脂膳食导致的AMPK下调.肥胖抵抗可能与AMPK维持正常表达有关.     

升清与健脾理气药物抗高脂饮食诱导肥胖大鼠的作用及对脂联素和炎症因子的影响

目的 观察升清和健脾理气药物对饮食诱导肥胖(DIO)大鼠肥胖程度及对脂联素和炎症因子的影响.方法 Wistar大鼠120只,10只作为空白对照组,给予基础饲料,其余110只给予高脂高营养饲料17周,按照体重,得到DIO大鼠40只和肥胖抵抗(DIO-R)大鼠10只,将DIO大鼠又分为DIO模型组、西布曲明组、健脾理气组和升清组,每组10只,分别以生理盐水(2 mL/d)、西布曲明1.6 mg/(kg·d)、健脾理气药物3.2 g/(kg·d)、升清药物3.2 g/(kg·d)灌胃,空白对照组与DIO-R组予生理盐水(2 mL/d)灌胃.灌胃期间空白对照组予基础饲料,余5组继续高脂饲料.灌胃16周后,测量体重、身长,取腹腔内全部脂肪,测量肥胖程度及脂肪含量.取血测定胰岛素抵抗指数(IRI)、血糖、甘油三酯、胆固醇、肿瘤坏死因子(TNF-α)、脂联素.取脂肪匀浆测定TNF-α、脂联素.结果 DIO模型组比正常大鼠体重、体重指数、脂肪系数、胆固醇、IRI明显升高(P＜0.05,P＜0.01);血清和脂肪中脂联素均下降(P＜0.05),TNF-α均升高(P ＜0.05,P＜0.01).与DIO模型组比较,DIO-R组体重、体重指数、脂肪系数、IRI均降低(P ＜0.05,P＜0.01);血清和脂肪中脂联素升高(P＜0.01),TNF-α降低(P ＜0.05,P＜0.01).健脾理气药物可降低脂肪匀浆中TNF-α水平(P＜0.05);升清药物可以升高血清及脂肪匀浆中脂联素水平,降低TNF-α(P＜0.05,P＜0.01).结论 升清药物能抑制高脂饲料诱导的肥胖和胰岛素抵抗,其机制与促进脂联素分泌,降低TNF-α水平有关.“脾不升清”可能是肥胖的病机关键之一.