羊栖菜多糖对老年痴呆模型大鼠Bcl-2和Bax基因表达的分析

目的:探讨羊栖菜多糖提取物(SFPS)对阿尔茨海默病(AD)大鼠模型行为的干预作用及脑皮质Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法:制作D-半乳糖阿尔茨海默病大鼠模型,设计正常对照组、模型组、吡拉西坦片、羊栖菜多糖提取物不同剂量组,观察大鼠行为学及脑皮质Bcl-2和Bax基因表达指标的改变。结果:与正常对照组相比,模型组学习记忆能力显著下降(P0.05),其Bcl-2/Bax值下降;与模型组相比,0.8g/kg、1.6g/kg羊栖菜多糖提取物治疗组均能较好的改善学习记忆能力,且具有一定剂量依赖性,其Bcl-2/Bax值增加。结论:SFPS能调节海马组织Bcl-2和Bax的表达,显著提高Bcl-2/Bax值,抑制海马神经元的凋亡,改善AD大鼠学习记忆能力。     

艾灸对衰老模型大鼠海马神经元凋亡蛋白Bcl-2及Bax的影响

目的研究艾灸对衰老模型大鼠海马区神经元中Bcl-2与Bax的影响,从细胞凋亡的角度探讨艾灸治疗衰老的部分作用机制。方法以D-半乳糖皮下注射造成的衰老模型大鼠为研究对象,艾灸神阙穴,每日1次,连续30d。以通道式水迷宫测试学习记忆能力的变化,评价艾灸对衰老的治疗效应;以免疫组化SP法检测海马神经元中Bcl-2和Bax表达。结果与模型组大鼠相比,艾灸组大鼠海马神经元中Bcl-2的阳性细胞数显著增加（P〈0.05）,而Bax的阳性细胞数显著降低（P〈0.05）。结论艾灸能有效改善衰老可能是通过促进衰老大鼠海马神经元Bcl-2的表达,降低Bax的表达,进而抑制细胞的凋亡,减少神经元的丢失来实现的。     

补肾方对自然衰老大鼠海马CA1区凋亡相关基因Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的:从自然衰老大鼠海马神经元凋亡角度探索补肾方的作用机制。方法:以自然衰老SD雄性大鼠(24月龄)为肾虚衰老模型,大鼠随机分老年组(模型)、左归组和右归组,另设青年组,共四组。大鼠自20月龄始,左归组和右归组分别给予左、右归丸,均按相当于生药7.5g/kg(成人临床用量的15倍)自由饮用稀释药液,每周停药2天,连续4个月;原位杂交检测海马区神经元Bax、Bcl-2 mRNA表达。结果:与青年组比较,老年组大鼠海马CA1区Bcl-2基因mRNA表达水平显著下降(P<0.05),Bax基因mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与老年组比较,左归组和右归组大鼠海马CA1区Bax、Bcl-2基因mRNA表达水平均有显著变化(P<0.05)。结论:自然衰老大鼠的海马CA1区神经细胞凋亡相关基因表达异常,补肾方可通过调节海马CA1区神经细胞Bax、Bcl-2基因mRNA的表达,降低海马神经细胞凋亡,进而改善海马功能、延缓衰老。     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠学习记忆力的改善及海马神经元的保护

目的:研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠的防治效果及其作用机理。方法:双侧脑室注射Aβ25-35复制阿尔茨海默病大鼠模型;Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力;免疫组织化学法(SABC法)检测大鼠海马Bcl-2、Bax及caspase-3的表达;HE染色光镜观察海马神经元损伤情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长,跨越虚拟平台的次数及在平台象限停留的时间明显减少;Bcl-2和Bax表达均有所增加,其平均光密度比值(Bcl-2/Bax)明显下降;Caspase-3阳性表达明显增高。与模型组比较,0.72mg/kg和1.44mg/kg脑舒胶囊可缩短大鼠逃避潜伏期,增加大鼠跨越虚拟平台的次数及在平台象限停留的时间;使Bcl-2阳性表达明显所增加,Bax阳性表达明显减少,升高Bcl-2/Bax值;明显降低Caspase-3的阳性表达;光镜观察发现模型大鼠海马神经元排列较紊乱、数量减少、体积变小,胞浆浓缩,胞核固缩深染,结构不清,各剂量的脑舒胶囊均能在一定程度上改善上述神经元损伤。结论:脑舒胶囊可改善阿尔茨海默病大鼠的记忆能力及Aβ25-35所致海马神经元损伤,其原因与其提高抗凋亡基因Bcl-2的表达,抑制促凋亡基因Bax表达和caspase-3表达,进而抑制海马神经元的凋亡有关。     

左归丸对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠ATP酶及Bcl-2 Bax和Caspase-3表达的影响

左归丸出自《景岳全书》,是公认的抗衰老古方,本研究旨在通过观察左归丸对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠ATP酶及细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响,从实验的角度探讨抗衰老古方左归丸的延缓衰老作用机制。结果显示D-gal可以造成大鼠肝、脑组织中ATP酶活力降低、脑海马区的Bcl-2、Bax和Caspase-3表达升高,给予左归丸后,大鼠Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-Mg2＋-ATPase活力表现出不同程度的升高,Bcl-2的表达上调而Bax和Caspase-3表达下调,提示左归丸的抗衰老作用可能与其提高ATP酶活力以维持细胞膜的稳定性和抑制细胞凋亡作用有关。     

清心开窍方有效成分对AD大鼠脑组织凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA及GFAP mRNA表达的影响

目的:探讨清心开窍方有效成分对AD大鼠学习记忆能力及脑组织细胞凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA表达的影响。方法:动物实验采用对照观察法。雄性SD大鼠56只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组、皂苷组、多糖组和挥发油组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35制造AD大鼠模型,造模后第2天起,分别灌胃给药安理申、清心开窍方水煎剂、皂苷、多糖、挥发油及双蒸水,2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过RT-PCR研究脑组织Bax、Bcl-2 mRNA及GFAP mRNA的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠大脑皮层、海马区Bax、GFAP mRNA表达水平降低,清心开窍方组、皂苷组皮质Bcl-2 mRNA表达水平升高,与模型组比较差异显著(P0.05,P0.01)。结论:清心开窍方能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Bax mRNA及GFAP mRNA表达,升高Bcl-2 mRNA表达发挥作用。     

补肾方药对D-半乳糖致衰大鼠心肌组织氧化应激和细胞凋亡的影响

目的:观察补肾方药对D-半乳糖致衰大鼠心肌组织氧化应激及细胞凋亡的影响。方法:2 months雄性SD大鼠40只,随机分为青年对照组、衰老组、左归丸组、右归丸组,每组10只。衰老组每日腹腔注射D-半乳糖400mg·kg-1,连续60天;青年对照组每日腹腔注射等体积生理盐水;左归丸组和右归丸组处理同衰老组,同时分别按每日相当生药量4.97g·kg-1和4.94g·kg-1灌胃给药。采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;采用Western Blot检测Bcl-2和Bax蛋白表达水平并测定组织Caspase-3相对活性。结果:与青年组对照组相比,D-半乳糖致衰组大鼠心肌组织SOD活性下降、MDA含量升高,Bcl-2蛋白表达下调、Bax蛋白表达上调,Caspase-3活性升高;给予左归丸、右归丸能显著改善D-半乳糖致衰大鼠心肌组织氧化应激水平,减少细胞凋亡。结论:补肾方药左归丸、右归丸可通过提高抗氧化能力和减少细胞凋亡而发挥其延缓心肌组织衰老的作用。     

白芍总苷对脑缺血大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元的保护作用

目的:研究白芍总苷对脑缺血大鼠学习记忆能力的影响以及对海马CA1区神经元的保护作用并初探其机制。方法:通过结扎双侧颈总动脉制备大鼠脑缺血模型,术后第二天开始连续28 d灌胃给药白芍总苷(50、100、200 mg·kg~(-1)),每天1次。28 d后,通过Morris水迷宫实验和跳台实验评价大鼠学习记忆能力;HE染色观察海马CA1区神经元形态,TUNEL染色观察海马CA1区神经元凋亡状况,免疫组织化学(IHC)法检测海马Bcl-2、Bax表达,检测抗氧化酶活性和MDA含量。结果:100、200 mg·kg~(-1)白芍总苷能够显著缩短脑缺血大鼠逃避潜伏期,显著缩短跳台潜伏期、增加跳台次数(P0.05或P0.01);明显改善海马CA1区神经元病理性形态结构变化和细胞凋亡状况,显著降低凋亡指数(Apoptosis Index,AI)(P0.01),显著上调海马Bcl-2表达、下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax值(P0.05或P0.01),显著改善抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)活性并降低MDA含量(P0.05或P0.01)。结论:白芍总苷具有改善脑缺血大鼠学习记忆能力的作用;可能与其抑制海马CA1区神经元病变、调节Bcl-2和Bax表达、抑制海马CA1区细胞凋亡有关。     

脑通汤对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡基因Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax比例变化的影响

目的观察脑通汤对血管性痴呆大鼠行为学、海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2、Bax表达及Bcl-2/Bax比例变化的影响。方法采用改良四血管法(4-VO)制备血管性痴呆(VD)模型,Morris水迷宫测定大鼠学习、记忆能力,免疫组化法检测海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2、Bax蛋白表达水平,计算Bcl-2/Bax比例。结果与模型组比较,脑通汤大、中剂量组逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增多,Bax表达降低,Bcl-2表达增高,Bcl-2/Bax比例升高。结论脑通汤可明显提高Bcl-2表达,减少Bax表达,升高Bcl-2/Bax比例,抑制神经细胞凋亡,从而减轻脑缺血对神经血管单元的损伤,改善VD大鼠学习、记忆能力,这可能是其治疗血管性痴呆的作用机制之一。     

调心方有效部位TX0201对类AD模型大鼠学习记忆和细胞凋亡相关基因的影响

目的：观察调心方有效部位TX0201对Aβ1-40双侧杏仁核注射所致的类阿尔茨海默病(AD)大鼠模型学习记忆和皮层、海马细胞凋亡相关基因的影响。方法：应用β-淀粉样蛋白1-40片段(Aβ_1-40)注射入大鼠双侧杏仁核建立类AD的动物模型；实验设正常对照组、类AD模型组、TX0201组、调心方组、阳性药安理申组,均采用灌胃给药20 d；用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力；RT-PCR法检测大鼠脑部皮层和海马的细胞凋亡相关基因Bax mRNA,Bcl-2 mRNA。结果：TX0201、调心方和安理申均能够改善类AD大鼠的学习记忆能力,调心方能全面改善模型鼠脑部皮层和海马异常表达的Bax mRNA和Bcl-2 mRNA,TX0201可改善模型鼠皮层和海马异常表达的Bax mRNA,安理申组改善模型鼠皮层异常表达的Bax mRNA。结论：TX0201可通过改善模型鼠脑内的Bax mRNA来抑制细胞凋亡,从而改善模型鼠的学习记忆。     

左归丸、右归丸对衰老大鼠海马学习记忆相关基因BDNF mRNA表达的影响

目的:观察左归丸、右归丸对衰老大鼠海马学习记忆相关基因脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic fac-tor,BDNF) mRNA表达的影响,探讨老年大鼠学习记忆功能减退的部分分子机理,以及左归丸、右归丸的改善作用。方法:以自然衰老SD大鼠为动物模型,随机分设4组:青年对照组、老年对照组、老年左归丸组、老年右归丸组。采用原位杂交技术,观察各组大鼠大脑切片海马各分区(DG、CA1、CA2、CA3)BDNF mRNA表达变化。结果:与青年对照组相比,衰老大鼠海马各分区的BDNF mRNA表达均明显减弱,而左归丸、右归丸能不同程度地提高老年大鼠海马DG、CA1、和CA3分区低下的BDNF mRNA的表达。结论:老年大鼠的学习记忆功能退化,与学习记忆相关的基因BDNF表达异常有关。而滋补肾阴方药左归丸、温补肾阳方药右归丸能通过提高BDNF基因的表达,进而改善老年大鼠的学习记忆功能。     

电针对阿尔茨海默病大鼠学习记忆力改善及海马神经元损伤保护的作用及机制

目的探讨电针保护海马神经元和改善阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠学习记忆力的作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组,采用Morris水迷宫检测空间学习和记忆能力的变化。Hoechest33342染色观察各组海马神经元的凋亡;Western blot检测Bcl-2和Bax的水平;免疫组织化学染色分析Caspase-3阳性神经元的个数和光密度值。结果电针治疗可明显提高AD大鼠学习和记忆功能,并可降低海马CA1区凋亡细胞的数目、上调Bcl-2的表达和下调Bax和凋亡执行蛋白Caspase-3的表达。结论电针可通过调节Bax和Bcl-2的平衡比值,降低Caspase-3的表达,对抗β-淀粉样蛋白诱导的神经元凋亡,改善AD大鼠学习和记忆功能。     

红景天对老年性痴呆大鼠行为学及海马区凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨红景天对老年性痴呆(AD)大鼠认知功能、海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白表达的影响及其治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法采用D-半乳糖 三氯化铝 氢溴酸东莨菪碱注射液法复制AD大鼠模型;采用Morris水迷宫法进行行为学检测,用免疫组化法检测海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白的表达水平的变化。结果模型组与空白组相比,认知能力显著下降,Bcl-2/Bax比值下降;治疗组与模型组相比,认知能力显著改善,Bcl-2/Bax比值增加。结论红景天对AD大鼠脑神经细胞的保护作用可能是通过上调Bcl-2蛋白、下调Bax蛋白的表达,抑制细胞凋亡而实现,从而改善AD大鼠的学习记忆能力。     

倒卵叶五加及复方佳蓉片对衰老大鼠睾丸间质细胞Bcl-2、Bax的作用

目的:探讨倒卵叶五加及复方佳蓉片对亚急性衰老大鼠睾丸间质细胞Bcl-2、Bax的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、倒卵叶五加组、佳蓉片组和维生素E组,每组12只。D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型,各组大鼠在腹腔注射D-半乳糖(正常组动物注射等量生理盐水)的同时,正常和模型组大鼠灌胃生理盐水(10mL/kg)、其他各组依次给予倒卵叶五加(1g/kg)、佳蓉片(6g/kg)、维生素E(20mg/kg),用药50d。放免法检测各组血清睾酮浓度,用免疫组织化学方法观察各组大鼠睾丸间质细胞Bcl-2、Bax表达的影响。结果:①D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清睾酮浓度明显下降;倒卵叶五加、佳蓉片和维生素E各组大鼠血清睾酮浓度显著较模型组明显升高,其差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。②模型组大鼠睾丸间质细胞中Bcl-2蛋白阳性表达为棕黄色;倒卵叶五加、佳蓉片和维生素E各组的阳性表达明显高于模型组,其差异均具有显著或非常显著意义(P<0.05或P<0.01)。Bax结果显示倒卵叶五加、佳蓉片和维生素E各组的阳性表达明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:倒卵叶五加及其复方"佳蓉片"可以上调D-半乳糖致亚急性衰老大鼠睾丸间质细胞中的Bcl-2蛋白的表达和下调Bax蛋白的表达,从而抑制睾丸间质细胞的凋亡,对抗D-半乳糖引起组织细胞的衰老。     

黄芪注射液抑制糖尿病大鼠海马神经元凋亡的机制研究

[目的]探讨黄芪注射液对糖尿病模型大鼠认知功能的影响及其作用机制。[方法]40只雄性SD大鼠,除空白组(n=10)外腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)复制Ⅰ型糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和黄芪注射液组(1.6 mg/kg),给药10周。以Morris水迷宫法进行学习记忆功能测试,随即处死大鼠分离血清及脑组织,分别测定空腹血糖、空腹胰岛素水平和乙酰胆碱酯酶含量,RT-PCR法测定海马Bcl-2及Bax mRNA表达情况,免疫蛋白印迹法(Western blot)测定海马乙酰胆碱酯酶和Caspase-3的蛋白表达及免疫组化法观察海马各区Caspase-3蛋白的阳性表达情况。[结果]黄芪注射液能显著提高糖尿病脑病大鼠学习记忆能力,降低糖尿病大鼠空腹血糖水平及AchE含量,升高血清胰岛素水平,减少海马AchE及Caspase-3蛋白的表达,升高海马抗凋亡基因Bcl-2的表达,降低促凋亡基因Bax的表达。[结论]黄芪注射液能够显著改善糖尿病大鼠学习记忆功能,其作用机制可能与减少AchE含量、抑制神经细胞凋亡有关。     

参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马CA1 区细胞凋亡 及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响

目的:探讨参芎化瘀胶囊对血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马CA1区细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2),Bax蛋白表达的影响。方法:采用反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时ip硝普钠制备大鼠血管性痴呆模型,应用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组织化学SABC法检测Bcl-2,Bax蛋白表达。结果:①与正常组及假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区凋亡细胞增多(P<0.01);与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组大鼠海马CA1区凋亡细胞减少(P<0.01)。②与正常组及假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区Bcl-2,Bax阳性细胞均增多(均P<0.01),Bcl-2/Bax降低(P<0.01);与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组大鼠海马CA1区Bcl-2阳性细胞增多(P<0.01),Bax阳性细胞减少(P<0.01),Bcl-2/Bax增加(P<0.01)。结论:参芎化瘀胶囊可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少细胞凋亡,从而改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。     

补肾方药对衰老大鼠海马学习记忆相关基因BDNF及其受体TrkB mRNA表达的影响

目的:观察补肾方药左归丸、右归丸对衰老大鼠海马学习记忆相关基因脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB mRNA表达的影响,探讨老年大鼠学习记忆功能减退的部分分子机理,以及左归丸、右归丸的改善作用。方法:以自然衰老SD大鼠为动物模型,随机分设4组:青年对照组、老年对照组、老年左归丸组、老年右归丸组。采用原位杂交技术,观察各组大鼠大脑切片海马各分区(CA1、CA2、CA3、DG)BDNF、TrkB mRNA表达变化。结果:与青年对照组相比,老年对照组大鼠海马各分区的BDNF、TrkB mRNA表达均明显减弱(P<0.05),而左归丸、右归丸能不同程度地提高老年对照组大鼠海马DG、CA1、CA2、和CA3分区低下的BDNF、TrkB mRNA的表达。结论:老年大鼠的学习记忆功能退化,与学习记忆相关的基因BDNF、Trk B表达异常有关。而滋补肾阴方药左归丸、温补肾阳方药有归丸能通过提高BDNF、TrkB基因的表达,进而改善老年大鼠的学习记忆功能,延缓机体衰老。     

补肾丹对衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的:研究补肾丹对衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因表达的影响。方法:将清洁级健康Wistar雄性大鼠,随机分为7组:正常对照组、金匮肾气丸组、补肾丹高、中、低剂量组、维生素E组及模型组。除正常对照组外,各组腹腔注射D-gal[250mg/(kg.d)]60天,采用D-半乳糖致亚急性衰老法[1],造成大鼠拟衰老动物模型。同时,正常对照组和模型对照组给等体积的生理盐水,金匮肾气丸组同时给予金匮肾气丸[0.72g/(kg.d)]灌胃,补肾丹高、中、低剂量组同时分别给予相当于生药2.7g/(kg.d)、1.35g/(kg.d)、0.675g/(kg.d)灌胃。维生素E组每日灌服维生素E0.027g/kg,每日1次,共60天。观察衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因的表达。结论:补肾丹具有改善衰老模型大鼠海马组织病理改变的作用,还可提高Bcl-2基因的表达,抑制Bax基因的过度表达,这有可能是其延缓衰老的作用机制之一。     

葛根素对Aβ25-35所致阿尔茨海默病模型大鼠脑内神经元凋亡的影响

目的:研究葛根素(Pue)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑内神经元凋亡的影响.方法:以β-淀粉样肽(Aβ25-35)右侧杏仁核注射制备AD大鼠模型,葛根素80mg/(kg·d)腹腔内注射7d后,用Y-型迷宫检测大鼠学习记忆能力,同时观察Pue对AD模型大鼠的空间学习能力、脑皮层与海马神经元Bcl-2、Bax表达的影响.结果:葛根素可显著改善AD模型大鼠的空间学习记忆障碍,提高其脑内神经元Bcl-2的表达,降低Bax表达(P＜0.05).结论:葛根素能对抗β-淀粉样肽的神经毒性,机制可能与抑制脑神经元凋亡有关.     

补肾生髓方对D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力及衰老相关蛋白P16、P21的影响

目的:探讨补肾生髓方对衰老大鼠学习记忆能力及衰老相关蛋白P16、P21的影响。方法:将50只实验大鼠随机分成D-半乳糖衰老模型组、正常组、补肾生髓方组、六味地黄丸组、维生素E组共5个组。采用颈背部皮下注射D-半乳糖400mg/kg,连续4个月,制备衰老模型,同时给予相应药物灌胃,正常组给予等剂量0.9%氯化钠注射液。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,Western blot检测大鼠海马中P16、P21蛋白的表达。结果:补肾生髓方能够缩短D-半乳糖衰老大鼠到达平台的时间,降低衰老模型大鼠海马中P16、P21的含量。结论:补肾生髓方能够提高衰老大鼠的学习记忆能力,通过降低大鼠体内P16、P21的含量从而达到延缓衰老的目的。