当归多糖与阿糖胞苷联合注射对人白血病模型小鼠骨髓单核细胞的影响

目的 探讨当归多糖(ASP)与阿糖胞苷(Ara-C)联合注射对移植性人白血病模型小鼠骨髓单个核细胞(BMMCs)的影响,并探讨其调控白血病细胞衰老的可能机制.方法 每只小鼠尾静脉移植2×10⁷个K562细胞,建立移植性人白血病NOD/SCID小鼠模型,模型建立后随机分为模型组、ASP组、Ara-C组和ASP+Ara-C组,移植K562细胞第31天开始分别ip ASP(200 mg/kg)、Ara-C(2.5 mg/kg)和ASP(200 mg/kg)+Ara-C(2.5 mg/kg)治疗,共14 d,模型组注射等量生理盐水.药物注射完成第2天眼球取血检测外周血白细胞总数与分类计数,取股骨测定每只股骨BMMCs细胞数;CCK8测定BMMCs增殖能力,流式细胞术分析BMMCs增殖周期,混合集落(CFU-Mix)培养检测BMMCs形成集落能力;衰老β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老细胞百分率;Western blotting检测衰老相关蛋白P16、Rb、CDK4及CyclinD1表达.结果 与模型组比较,无论是ASP、Ara-C单独注射或ASP+Ara-C联合用药均能有效降低白血病模型小鼠外周血白细胞总数,降低中性粒细胞百分率,提高淋巴细胞百分率;降低股骨BMMCs细胞数,明显抑制BMMCs增殖,降低CFU-Mix产率,提高G₁期细胞比例,减少S期细胞比例;显著提高SA-β-Gal染色阳性细胞百分率;上调P16、Rb表达,下调CDK4、CyclinD1表达,且联合用药组效果更为明显.结论 ASP与Ara-C可能通过调节衰老相关蛋白P16、Rb、CDK4及CyclinD1表达,进而促进移植小鼠白血病细胞衰老,为临床治疗白血病提供了新思路.     

白花蛇舌草多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

目的:探讨白花蛇舌草多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法:健康昆明小鼠80只,随机分为正常对照(灌胃生理盐水)、免疫抑制模型组(灌胃生理盐水)及白花蛇舌草多糖低、中、高(分别灌胃白花蛇舌草多糖50、100、200 mg/kg)剂量组5组。除正常对照组外,模型组和白花蛇舌草多糖组连续腹腔注射环磷酰胺(CTX 100mg/kg)3 d,建立免疫抑制模型。造模后各组小鼠分别灌胃相应药物,1次/d,连续15 d后,测定免疫器官系数、血清溶血素、脾淋巴细胞增殖、脾脏NK细胞活性及小鼠血清细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α含量等免疫指标。结果:与正常对照组比较,模型组脾脏系数、胸腺系数、血清溶血素、脾淋巴细胞增殖能力、脾脏NK细胞及血清IL-2、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P0.05或P0.01);与模型组比较,白花蛇舌草多糖中、高剂量组能显著提高小鼠的免疫器官系数和血清溶血素(P0.05或P0.01),白花蛇舌草多糖各剂量组对Con A诱导的脾淋巴细胞转化有显著的促进作用(P0.05或P0.01),白花蛇舌草多糖中、高剂量组对LPS诱导的脾淋巴细胞增殖和NK细胞活性具有显著的促进作用(P0.01),白花蛇舌草多糖各剂量组能显著提高免疫抑制小鼠血清IL-2、IL-6、TNF-α含量(P0.01)。结论:白花蛇舌草多糖能提高免疫抑制小鼠的免疫功能。     

黄精多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠抑瘤及免疫调节作用

目的探讨黄精多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠抑瘤及免疫调节作用。方法用BALB/c小鼠建立MFC胃癌荷瘤小鼠模型,随机分为对照组、模型组、环磷酰胺组(20 mg/kg)及黄精多糖高、低(400、100 mg/kg)剂量组,灌胃给药21 d。检测抑瘤率,脏器指数,采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定脾淋巴细胞增殖刺激指数及NK细胞活性,ELISA检测血清TNF-α、IL-2、IL-6水平,RT-PCR法检测脾脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达。结果与模型组比较,黄精多糖高、低剂量组瘤重降低(P0.05),脾脏指数、脾淋巴细胞增殖刺激指数、NK细胞活性均增加(P0.05);除黄精多糖低剂量组小鼠血清TNF-α、IL-6水平无变化外(P0.05),其余各组TNF-α、IL-2、IL-6水平均增加(P0.05);黄精多糖高、低剂量组小鼠脾脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达均降低(P0.05)。结论 TLR4/NF-κB信号通路的激活受阻可能是黄精多糖在MFC胃癌荷瘤小鼠体内发挥抑瘤作用及免疫调节作用的潜在机制。     

红景天多糖对宫颈癌U14模型小鼠的治疗作用及机制的实验研究

目的:探讨红景天多糖对宫颈癌U14模型小鼠的治疗作用及潜在机制。方法:分别采用腹腔及前肢腋下接种U14细胞建立小鼠U14腹水瘤及实体瘤模型,随机分为模型组、环磷酰胺(25 mg/kg)阳性对照组及红景天多糖低(75 mg/kg)、中(150 mg/kg)、高(300 mg/kg)剂量组,红景天多糖组灌胃给药,环磷酰胺组腹腔注射给药,1次/d,共10 d;检测各组U14腹水瘤小鼠生命延长率及U14实体瘤小鼠抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数、脾淋巴细胞增殖能力及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)水平。结果:与模型组比较,各剂量红景天多糖均能显著延长U14腹水瘤小鼠平均存活天数,增加U14实体瘤小鼠抑瘤率及血清TNF-α、IFN-γ、IL-2水平和胸腺指数(P0.05或P0.01);红景天多糖中、高剂量组小鼠脾脏指数较模型组显著升高(P0.05或P0.01);与模型组比较,红景天多糖各量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力在12、24、48 h三个时间点均显著升高(P0.05或P0.01)。结论:红景天多糖具有抑制宫颈癌U14模型小鼠肿瘤生长的作用,其机制与提高免疫力有关。     

密蒙花多糖对免疫低下小鼠的免疫调节作用

目的探索密蒙花多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法 120只昆明小鼠分3批,每批40只(10只×4组),各批次随机分成正常对照组(生理盐水)、模型组(生理盐水)及密蒙花多糖低(300 mg/kg)、高(600 mg/kg)剂量组,灌胃15 d,除正常对照组外,其他各组于第3、4、5天腹腔注射环磷酰胺(50 mg/kg)。流式细胞术检测小鼠脾细胞周期分布;MTT法评价小鼠脾脏细胞体内转化活力及体外增殖活性;碳粒廓清实验评价巨噬细胞吞噬活力;分光光度法检测血清溶血素含有量;观测小鼠脾脏、胸腺指数。结果密蒙花多糖能显著提高脾脏细胞处于分裂期的比例,刺激脾细胞体外增殖并上调脾细胞转化活力;巨噬细胞活性与溶血素含有量也得到了明显的提高。同时,密蒙花多糖还能提高小鼠的脾脏指数和胸腺指数。结论密蒙花多糖能显著增强免疫低下小鼠的免疫功能。     

十全大补汤多糖成分抑瘤及免疫调节作用的初步研究

目的:研究十全大补汤总多糖抗肿瘤及对脾细胞功能的调节作用。方法:40只昆明种小鼠,以皮下接种H22细胞的方法制备荷瘤小鼠模型,24 h后随机分为5组,即阴性对照组、顺铂(1 mg/kg)化疗组、顺铂联合高(168.4 mg/m L)、中(84.2 mg/m L)、低(42.1 mg/m L)剂量十全大补汤总多糖组。十全大补汤总多糖采取灌胃给药,0.5 m L/只,1次/d,10 d后眼球放血处死小鼠,称取体质量和瘤质量,计算抑瘤率;分离血清,并分别制备肿瘤细胞和脾细胞悬液,流式细胞仪检测肿瘤细胞和脾细胞的凋亡;ELISA法检测血清中IL-2,IFN-γ和TNF-α含量。结果:顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组小鼠体质量均高于单纯顺铂组,而中、高剂量多糖组的瘤质量均低于单纯顺铂组;顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组肿瘤细胞的凋亡率明显高于单纯顺铂组,而脾细胞的凋亡率均明显又低于单纯顺铂组(P0.05);顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组IL-2,IFN-γ和TNF-α的分泌水平均明显高于单纯顺铂组(P0.05)。结论:十全大补汤总多糖可促进顺铂诱导肿瘤细胞凋亡,并能保护顺铂对脾细胞的损伤作用、促进荷瘤小鼠IL-2,IFN-γ和TNF-α的分泌,与顺铂联合应用具有减毒增效作用。     

当归多糖对顺铂化疗H22腹水瘤小鼠所致肝脏损伤的影响

目的:研究当归多糖对顺铂化疗H22腹水瘤小鼠所致肝脏损伤的影响。方法:从90只雄性SPF级昆明小鼠中随机选取12只小鼠设为空白组,剩余小鼠全部腹腔注射H22细胞,7天后腹水瘤模型制备成功,剔除腹水过多和过少的腹水瘤小鼠后,随机分为模型组、顺铂治疗组、顺铂联合当归多糖低剂量组(25mg/kg)、顺铂联合当归多糖中剂量组(50mg/kg)、顺铂联合当归多糖高剂量组(100mg/kg),每组12只。每3天腹腔注射一次0.2ml/只顺铂(2.0mg/kg),当归多糖每天灌胃1次,每只0.4ml;每2天测量并记录各组小鼠体重,3周后,采血并处死小鼠。检测各组小鼠肝脏指数、肝脏功能、血常规的变化,倒置显微镜观察各组小鼠肝脏病理变化,并进行病理评分,Western Blot检测各组小鼠肝脏组织中凋亡相关蛋白Bax以及Bcl-2的表达情况。结果:与空白组和模型组小鼠比较,顺铂治疗组小鼠的体重及肝脏指数降低,AST、ALT含量升高,WBC、RBC、PLT明显降低,Bax表达明显上调,Bcl-2的表达显著下调;HE染色可见肝细胞核固缩,肝细胞核缩小、部分消失。与顺铂治疗组小鼠比较,顺铂联合当归多糖低剂量组(25mg/kg)、顺铂联合当归多糖中剂量组(50mg/kg)、顺铂联合当归多糖高剂量组(100mg/kg)小鼠的体重及肝脏指数有所升高,AST、ALT含量降低,WBC、RBC、PLT明显升高,Bax表达下调,Bcl-2表达升高;HE染色可见到固缩的肝细胞核减轻,细胞排列逐渐接近正常。结论:当归多糖可减轻顺铂化疗H22腹水瘤小鼠时所致的肝脏损伤,其机制可能是通过升高WBC、RBC、PLT来改善肝脏功能、并降低蛋白Bax、升高Bcl-2的表达来实现的。     

当归多糖对染铅小鼠学习记忆及海马区bcl-2基因表达的影响

目的:观察当归多糖对染铅小鼠学习记忆的保护作用。方法:健康昆明种小鼠50只,随机分为空白对照组,染铅模型组,高中低当归多糖剂量组,每组10只,将醋酸铅溶于蒸馏水中按40mg/kg体重腹腔注射。当归多糖大剂量组(3.6g/kg),当归多糖中剂量组(1.8g/kg),当归多糖小剂量组(0.9g/kg)分别灌胃给药,其余各组灌服等量生理盐水,实验连续给药共6周。参照Morris水迷宫实验,观察小鼠短期学习记忆和长期记忆变化情况。结果:模型对照组和空白对照组到达避难台的时间差异有显著意义(P<0.01);当归多糖对照组到达避难台的时间随剂量的增加而减少,除高剂量组在训练1h后与模型组差异有显著意义(P<0.01)外,其余各组间差异无显著性意义。模型对照组的bcl-2蛋白阳性表达率与空白对照组相比差异有非常显著意义(P<0.01);当归多糖治疗组bcl-2蛋白阳性表达率与剂量成正相关。结论:当归多糖可能通过影响海马区神经元细胞凋亡从而改善染铅小鼠学习记忆能力。     

基于IL-7的甘草多糖抗肿瘤机制的研究

[目的]明确甘草多糖抗肿瘤作用及其作用机制。[方法]建立CT-26细胞荷瘤小鼠动物模型,随机分为正常组、模型组、甘草多糖组(甘草多糖灌胃500mg/kg)、香菇多糖组(阳性药组,香菇多糖灌胃195mg/kg)和白细胞介素-7(IL-7)抗体阻断组(甘草多糖灌胃500 mg/kg,IL-7抗体与0、5、10 d腹腔注射0.4 mg/kg)。连续给药14 d,计算小鼠肿瘤质量、抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数;检测小肠黏膜上皮细胞IL-7m RNA表达情况和血清中IL-7含量。[结果]灌胃给予甘草多糖14 d后,甘草多糖可以显著降低荷瘤小鼠肿瘤质量,其抑瘤率为21.56%;显著提高小鼠体质量和胸腺指数,改善其生活质量;提高小肠黏膜上皮细胞IL-7m RNA表达和血清中IL-7含量;IL-7抗体阻断后,其抑瘤率和胸腺指数显著降低,小肠黏膜上皮细胞IL-7m RNA虽高表达,但血清中IL-7含量低于试剂盒检测限。[结论]甘草多糖具有显著的抗肿瘤作用,其抗肿瘤机制可能与提高小肠黏膜上皮细胞分泌IL-7有关。     

山奈酚干预对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭的保护作用

目的探讨山奈酚对D-氨基半乳糖(D-Ga IN)/脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝衰竭(acute hepatic failure,AHF)的干预作用。方法 37只C57 BL/6小鼠按完全随机分组法分为正常对照组(10只)、AHF模型组(13只)、山奈酚干预组(14只)。AHF模型组小鼠腹腔注射D-Ga IN(700 mg/kg)/LPS(10μg/kg),作用6 h,建立AHF模型;山奈酚干预组小鼠于建模前2 h尾静脉注射5 mg/kg的山奈酚,后腹腔注射D-Ga IN(700 mg/kg)/LPS(10μg/kg),作用6 h,建立AHF模型。正常对照组腹腔注射等量生理盐水。检测血清ALT、AST水平,观察肝脏组织病理学变化,检测肝脏组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达,检测NF-κB通路相关分子表达及肝细胞凋亡情况。结果与AHF模型组比较,山奈酚干预组小鼠的生存率提高(P0.05)。与正常对照组比较,AHF模型组血清ALT和AST水平升高(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达升高(P0.05),肝脏组织中NF-κB信号通路相关分子IκB-α表达降低(P0.05),p-NF-κBp65表达升高(P0.05),肝脏病理损伤严重,细胞凋亡增多;与AHF模型组比较,山奈酚干预组血清ALT和AST水平降低(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达降低(P0.05),肝脏组织中NF-κB信号通路相关分子IκB-α升高(P0.05),p-NF-κBp65表达降低(P0.05),肝脏病理损伤减轻,细胞凋亡减少。结论山奈酚干预通过抑制炎症反应对D-Ga IN糖/LPS诱导的小鼠AHF发挥保护作用。     

谈人参在《伤寒论》中的应用

人参为五加科植物人参的根。最早见于《神农本草经》,列为上品,书云:“人参味甘微寒,主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪,明目,开心,益智。”其味甘、微苦,性微温。归脾(胃)、肺、心经。具有大补元气,补脾益肺,益气生津,宁心安神之功效。在《伤寒论》中,仲景应用人参共40次,入     

阴阳升降理论探析与启迪

通过梳理《内经》及相关医家关于阴阳升降的论述,探讨阴阳升降的内容及阴阳升降的不同内涵。从阐述人体生理变化和脏腑特点、阐述疾病的病机、解释治则治法和方药配伍应用等方面分析阴阳升降对临床的启迪作用。     

非酒精性脂肪肝诊治的问题及对策

目的探讨非酒精性脂肪肝临床治疗中有效对策。方法结合近代非酒精性脂肪肝治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治非酒精性脂肪肝。结果中西医结合防治此病有效。结论中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》虚劳病精气神调治原则与方法

从中医精气神辨识角度认识虚劳病,总结虚劳病病因病机。通过观察面容、形态、神色、五官、舌象、脉象等辨识精气神状态,确立虚劳病精气神调治原则。在精气神辨识理论指导下,对《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》相关条文、方药进行解析,总结虚劳病相关治则治法。根据精气神调养原则,为虚劳病临床应用提供指导。     

五脏补血法理论及临床应用探讨

血液的生成与五脏关系密切,据此确立五脏补血法:养心补血法、健脾补血法、润肺补血法、滋肝补血法、益肾补血法。     

全蝎配伍蜂房之祛风攻毒作用探析

通过梳理古本草文献中全蝎、蜂房的有关记载和现代临床对该药对的配伍应用,探讨并阐释该药对祛风攻毒增效的作用机制,认为全蝎配蜂房,药力迅捷,内走脏腑,外达肢节,透骨搜风,既可祛风通络止痛,又可攻毒散结消痈.尤其适宜于治疗风湿顽痹、痈疽恶疮、癌肿等.     

丹栀逍遥散及其提取物镇静催眠作用研究

目的探讨丹栀逍遥散原方及提取物镇静催眠作用。方法将小鼠分为14组,正常对照组、原方组及各组分低中高剂量组,通过测定小鼠自主活动次数,采用戊巴比妥钠延长睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量镇静催眠协同作用实验观察丹栀逍遥散原方及各提取物镇静催眠作用。结果丹栀逍遥散原方及提取物均无改变小鼠自主活动的功能,表明均无中枢兴奋性作用;丹栀逍遥散石油醚提取液高、中剂量具有显著延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的作用(P<0.01或P<0.05),石油醚提取液高剂量能明显增加阈下剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠个数(P<0.01)。结论丹栀逍遥散石油醚提取部位可能为丹栀逍遥散的中枢抑制作用的有效部位。     

从“方药离合”看中医学的方药共荣

通过对历代方剂与本草的应用演变和发展过程的论述,揭示了中医方药共荣关系,并以黄柏、升麻等药为例,强调方药配伍运用是方药共荣的核心环节.随后,结合中医发展的现实环境,分析了坚持方药共荣的正确方向,对于防止重药轻方的错误倾向,提高中医临床疗效,启迪现代研究思路,均具有重要的学术价值和现实意义.     

小青龙汤因机证治浅析

小青龙汤为温阳宣肺、蠲痰涤饮之剂,凡见哮喘、咳嗽、痰、饱胀、喘息和四肢水肿等因"外感风寒,内有寒饮"所致者,均可辨证应用小青龙汤。临证应用时注意:①寒邪不必拘泥外感;②"三水"的变化要审清;③但见寒饮,有无表证均可用此方;④注意痰饮在临床上的变化;⑤临床见喘未必治喘,要临证辨别。用此方,要抓住以下临床指征:①面色:"三水"之面色--黧黑之色;②脉象:弦脉或浮紧;③舌象:舌苔多水滑;④痰涎:咳痰较爽,痰涎清稀,泡沫状。以上"但见一证便是,不必悉俱",有效之后,应中病即止。     

高脂血症诊治研究中问题及策略

目的:探讨高脂血症诊临床治疗中有效对策。方法:结合近代高脂血症诊治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治高脂血症。结果:中西医结合防治此病有效。结论:中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。