γ-氨基丁酸类抗癫痫药

1引言尽管大量抗惊厥药是有效的，但是目前使用的这些药物不仅不能控制占病人比例很大的几种类型的癫病发作，而且经常引起不同程度甚至严重的副作用。对于这些化学上各不相同的抗惊厥药，人们已经提出了许多作用机理，但最新的知识表明它们基本上要么是通过阻断神经元高频率重复后动起作用，要么是通过作用于钠或钙离子转运的过程而起作用。总之，人们迫切需要改进的抗惊厥药物，新颖机制的药物的开发将为癫病发作尚未得到控制的患者带来希望。在抗癫病药物经验开发方法占统治地位几乎将近一个世纪之后，建立在对中枢神经系统（＊N勾病理…     

丙泊酚对大鼠海马突触体释放谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

目的观察丙泊酚对大鼠海马突触体谷氨酸和γ氨基丁酸(GABA)Ca2+依赖性释放和非Ca2+依赖性释放的影响。方法制备突触体后用人工脑脊液(aCSF)孵育,分为7组,应用丙泊酚(propofol)的浓度分别为3(Pro3组)、10(Pro10组)、30(Pro30组)、100(Pro100组)和300μmol·L-1(Pro300组),脂肪乳剂对照组加入脂肪乳(Intralipid组),空白对照组(Control组)不加入任何药物。在观察Ca2+依赖性释放时,加入二氢海人藻酸和哌啶酸;在观察非Ca2+依赖性释放的时候,去除aCSF中的Ca2+。在37℃的条件下,应用20μmol·L-1藜芦定或30mmol·L-1KCl诱发递质释放。应用反相高效液相色谱法测定aCSF中谷氨酸和GABA的浓度。结果①Ca2+依赖性递质释放:应用藜芦定时,Pro30、Pro100和Pro300组的谷氨酸和GABA释放量低于Intralipid组(P<0.01或P<0.05);应用KCl时,各组的谷氨酸和GABA释放量无差异(P>0.05)。②非Ca2+依赖性释放:各组应用藜芦定和KCl诱发的谷氨酸和GABA释放量无差异(P>0.05)。结论丙泊酚可以抑制Ca2+依赖性谷氨酸和GABA的释放,而对非Ca2+依赖性谷氨酸和GABA释放无影响。     

HPLC测定大鼠海马中谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量

目的建立了邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生高效液相荧光色谱法检测大鼠海马中谷氨酸（GLU）、γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。方法采用AlltimaC18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为50mmol·L^-1乙酸钠（pH6.8）、甲醇、四氢呋喃梯度洗脱,流速1.0mL·min^-1。激发波长（λEx）338nm,发射波长（λEm）425nm。结果GLU、GABA线性范围分别为1.03～20.6μg·mL^-1（r=0.9992）和1.13～22.6μg·mL^-1（r=0.9997）;当信噪比为3时,GLU和GABA的检出限分别为5.27×10-4μg·mL^-1和7.35×10-4μg·mL^-1;测得精密度RSD分别为3.4%和3.5%;加样回收率分别为90%～96%,85%～91%。结论本方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,适用于海马中GLU和GABA的含量测定。     

HPLC测定大鼠海马中谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量

目的 建立了邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生高效液相荧光色谱法检测大鼠海马中谷氨酸(GLU)、γ-氨基丁酸(GABA)含量的方法。方法 采用Alltima C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为50 mmol·L^-1乙酸钠(pH 6.8)、甲醇、四氢呋喃梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1。激发波长(λ_Ex)338 nm,发射波长(λ_Em)425 nm。结果 GLU、GABA线性范围分别为1.03~20.6 μg·mL^-1(r=0.999 2)和1.13~22.6 μg·mL^-1(r=0.999 7);当信噪比为3时,GLU和GABA的检出限分别为5.27×10^-4μg·mL^-1和7.35×10^-4 μg·mL^-1;测得精密度RSD分别为3.4%和3.5%;加样回收率分别为90%~96%,85%~91%。结论 本方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,适用于海马中GLU和GABA的含量测定。     

全氟辛磺酸对大鼠中枢神经系统谷氨酸含量的影响

目的　探讨全氟辛磺酸 (PFOS)对大鼠中枢神经系统谷氨酸能神经元的影响 ,以探讨PFOS对神经系统的毒作用机制。方法　成年雄性Wister大鼠用PFOS经口 1次染毒 ,实验组剂量分别为 5 0、10 0和 2 0 0mg kg ,对照组给予等体积的体积分数为 2 %的吐温 80溶液。 2 4h后用体积分数为 10 %的中性缓冲甲醛灌流处理并利用免疫组织化学方法和显微图像分析技术 ,分析大鼠脑组织切片中谷氨酸反应阳性细胞的阳性面积比、平均积分吸光度。结果　PFOS染毒 2 4h后大鼠大脑皮层、海马、小脑中阳性面积比、平均积分吸光度与对照组相比 ,明显升高且有显著性 (P <0 0 1)。结论　中枢神经系统中谷氨酸含量的升高可能在PFOS引起大鼠神经毒性的机制中起重要作用。     

硫喷妥钠对大鼠前额皮层突触体谷氨酸和γ-氨基丁酸释放的影响

目的　观察硫喷妥钠对大鼠前额皮层突触体谷氨酸和γ 氨基丁酸 (GABA)Ca2 + 依赖性和Ca2 + 非依赖性释放的影响。方法　制备大鼠前额皮层粗突触体。用人工脑脊液(aCSF)孵育 ,分为 5组 :基础释放组 (Base)、硫喷妥钠 10μmol·L-1组 (THS10 )、硫喷妥钠 30 μmol·L-1组 (THS30 )、硫喷妥钠 10 0 μmol·L-1组 (THS10 0 )、硫喷妥钠 30 0 μmol·L-1组 (THS30 0 ) ,每组含 8份突触体。向每组各等份突触体反应液中加入不同浓度的硫喷妥钠 (Base组不加入 ) ,于 37℃条件下应用 30mmol·L-1KCl或 2 0 μmol·L-1veratridine诱发谷氨酸和GABA释放。应用反相高效液相色谱法 (RP HPLC)测定各反应液中的谷氨酸和GABA浓度。观察谷氨酸和GABACa2 + 非依赖性释放时 ,aCSF中不含Ca2 + 。结果　硫喷妥钠 30、10 0、30 0 μmol·L-1可显著抑制KCl或vera tridine诱发的Ca2 + 依赖性谷氨酸释放 (P <0 0 1,P <0 0 1,P <0 0 1) ,IC50 分别为 2 5 6 μmol·L-1和 2 6 3μmol·L-1;THS10与THS30组 ,THS30与THS10 0组之间差异有显著性 (P <0 0 1,P <0 0 1)。硫喷妥钠各浓度组中 ,Ca2 + 依赖性GABA释放及Ca2 + 非依赖性谷氨酸和GABA释放水平与Base组比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　硫喷妥钠可剂量依赖性地抑制大     

三硝基甲苯对大鼠血和睾丸δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶和非特异性酯酶的影响

大鼠灌胃给予TNT(50、100、200mg/TNT/kg/日×6天/周),在染毒2、4、6和8周杀鼠观察有关指标。染毒2至8周全血δ-ALAD活性明     

酸性肽对大鼠脑内谷氨酸和酸性肽含量的影响

目的研究大鼠口服酸性肽后脑内谷氨酸和酸性肽的含量变化。方法通过纸电泳、茚三酮显色、分光光度法和标准曲线法测定脑内谷氨酸和酸性肽的含量。结果正常对照组大鼠脑内的谷氨酸含量(mg/g脑组织)为0.7101±0.1347。服用酸性肽1、2、3、4、5h后各组大鼠脑内谷氨酸的含量(mg/g脑组织)分别为1.2591±0.1446,1.0595±0.1195,0.8798±0.1158,0.7400±0.0992,0.7600±0.0992。正常对照组大鼠脑内的酸性肽的含量(mg/g脑组织)为1.7789±0.2078。服用酸性肽1、2、3、4、5h后各组大鼠脑内酸性肽的含量(mg/g脑组织)分别为1.4662±0.1511,3.8377±0.2778,3.2253±0.2733,1.8701±0.1822,1.7398±0.1822。结论大鼠口服酸性肽后1~2h内能升高脑内的谷氨酸水平,并且在3~4h内能升高脑内的酸性肽水平。     

三硝基甲苯对大鼠血和睾丸δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶和非特异性酯酶活性的影响

三硝基甲苯(TNT)为氧化应激毒物。研究表明,TNT染毒使大鼠睾丸睾酮水平下降。已知非特异性酯酶可能参与睾酮合成,而卟啉在体内生物转化可参与血中血红素和睾丸中的细胞色素合成。为此,我们观察了TNT染毒对大鼠全血和睾丸中δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶(δ-ALAD)和非特异性酯酶活性的影响。     

白松片对慢性应激大鼠海马单胺类神经递质含量的影响

目的:观察中药白松片对应激大鼠海马单胺类神经递质含量的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠42只,随机分为正常对照组、模型对照组、氟西汀对照组(1.8mg·kg-1)及白松片3个剂量(4.32,13.0,21.6g·kg-1,生药量)组。每只大鼠每日灌胃给药1次,连续14d。给药d6始,通过强迫游泳建立应激大鼠模型。用高效液相色谱-电化学法测定大鼠海马单胺类神经递质及其代谢产物的含量。结果:模型对照组大鼠海马去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量及多巴胺/3,4-二羟苯乙酸(DA/DOPAC)和5-羟色胺/5-羟吲哚乙酸(5-HT/5-HIAA)的比值分别为(4.7±s1.3)nmol·g-1,(47±12)nmol·g-1,(0.97±0.22)nmol·g-1,19±4,0.23±0.06,低于正常对照组(P<0.05或P<0.01);NE/5-HT比值(4.9±0.9)高于正常对照组(P<0.01);用白松片预防给药可使模型大鼠海马NE,DA和5-HT含量及NE/5HT,DA/DOPAC和5-HT/5-HIAA的比值恢复至正常水平(P<0.05或P<0.01)。结论:白松片可能通过提高NE,DA及5-HT的含量并降低其代谢率来发挥其抗抑郁作用。     

绞股蓝皂甙XL Ⅲ对小鼠脑内谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

目的研究绞股蓝皂甙ＸＬⅢ（ｇｙｎｏｓａｐｏｎｉｎ，ＧｙｎＸＬⅢ）对小鼠学习记忆获得的影响和其作用机制—对小鼠脑内谷氨酸（Ｇｌｕ）／γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）的影响。方法跳台法研究ＧｙｎＸＬⅢ对小鼠的学习记忆获得过程的影响；薄层层析法测试小鼠脑内谷氨酸和γ－氨基丁酸的含量。结果Ｇｙｎ－ＸＬⅢ１５ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ对小鼠的学习记忆获得过程无影响（Ｐ＞０．０５），３０ｍｇ·ｋｇ－１可增强小鼠的学习记忆获得过程１９９７－０８－０６收稿，１９９７－１０－０５修回＊广东药学院科研基金资助课题，Ｎｏ９５１０３３作者简介：冯冰虹，男，３４岁，讲师；杜淇璋，男，６３岁，教授，中国药理学会理事，广东省药理学会专家委员会副主任（Ｐ＜０．０５），并显著提高脑内Ｇｌｕ水平（Ｐ＜０．０５），明显降低ＧＡＢＡ水平（Ｐ＜０．０５）；东莨菪碱（Ｓｃｏｐ）０．３ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ的结果相反，显著降低Ｇｌｕ水平（Ｐ＜０．０１），提高ＧＡＢＡ水平（Ｐ＜０．０５）；预先ＧｙｎＸＬⅢ３０ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ，５ｍｉｎ后ｉｐ东莨菪碱０．３ｍｇ·ｋｇ－１，结果显示，ＧｙｎＸＬⅢ扭转Ｓｃｏｐ的升高ＧＡＢＡ作用，使之显著下降（Ｐ＜０．０５），对Ｇｌｕ的影响?     

电针水沟穴对全脑缺血昏迷大鼠脑组织谷氨酸转运体-1γ-氨基丁酸转运体-1的影响

目的观察电针水沟穴对全脑缺血昏迷模型大鼠脑组织内谷氨酸转运体1(EAAT-1)和γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)表达的影响。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组、药物组和针药组;制备全脑缺血性昏迷模型大鼠,针刺组和针药组于造模成功后30min进行首次电针水沟穴治疗,直至处死时间段为止每6h针1次,每次留针时间5min;同时药物组和针药组,于造模成功后30min每只腹腔注射胞磷胆碱钠注射液0.1g,每6h1次。24h后断头取脑,使用计算机图像分析系统测定经免疫组织化学染色处理的大鼠脑组织EAAT-1、GAT-1的平均吸光度(A)值,比较各组之间的差异。结果①各组与模型组和假手术组标本内EAAT-1的A值比较差异均有统计学意义(P<0.05),而模型组和假手术之间差异无统计学意义(P>0.05);针刺组与针药组比较差异无统计学意义(P>0.05),但2组分别与药物组比较差异有统计学意义(P<0.05);②针刺组及针药组与其他各组标本内GAT-1的A值比较差异有统计学意义(P<0.05),模型组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),但模型组与药物组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针水沟穴可以提高全脑缺血昏迷模型大鼠脑组织内EAAT-1和GAT-1的表达。     

氯诺昔康对慢性疼痛大鼠脑脊液谷氨酸含量的影响

目的在大鼠慢性疼痛模型上,观察氯诺昔康对大鼠脑脊液谷氨酸含量的影响,探讨氯诺昔康治疗慢性疼痛的机制。方法制作大鼠慢性关节炎疼痛模型,腹腔内注射氯诺昔康用药2周,测定用药前后屈、伸关节疼痛试验评分疼痛评分、用高效液相色谱-异硫氰酸苯酯衍生法测定用药前后脑脊液谷氨酸含量的变化。结果（1）氯诺昔康用药2周屈、伸关节疼痛试验评分显著低于非用药组（P〈0．05）;（2）氯诺昔康用药2周脑脊液谷氨酸含量显著低于非用药组（P〈0。05）。结论氯诺昔康可治疗慢性疼痛,降低脑脊液谷氨酸合成是其治疗机制之一。     

2,3-吲哚醌对大鼠脑内单胺类神经递质含量与释放的影响

目的研究2,3-吲哚醌对大鼠脑内单胺类神经递质含量与释放的影响。方法给予Wistar大鼠2,3-吲哚醌(50,200 mg.kg-1,ip),2h后测定其纹状体Ach,DA含量;在脑片灌流液中加入2,3-吲哚醌(50,200μmol.L-1),测定其对纹状体及皮质脑片DA,5-HT,NE释放的影响。结果大鼠腹腔给予2,3-吲哚醌,其纹状体Ach和DA的浓度均有增加(P<0.05和P<0.01);脑片灌流液中加入2,3-吲哚醌促进皮质和纹状体内DA释放(P<0.01)。结论2,3-吲哚醌具有调节脑内DA和Ach两种神经递质功能平衡的作用。     

三七总皂苷对痴呆模型大鼠大脑皮质内神经递质含量的影响

目的 :观察三七总皂苷 (PNS)对痴呆模型大鼠大脑皮质内去甲肾上腺素 (NE)、多巴胺 (DA)和 5 羟色胺 (5 HT)含量的影响。方法 :以鹅膏蕈氨酸注入大鼠Meynert基底核建立痴呆模型。 30只实验大鼠随机分为NS组 ;5 0mg·kg-1PNS组和 10 0mg·kg-1PNS组。采用高效液相电化学法测定NE ,DA和 5 HT含量。结果 :10 0mg·kg-1PNS组中 3种递质的含量均高于 5 0mg·kg-1PNS组 (P <0 0 5 ) ,而 5 0mg·kg-1PNS组又高于NS组 (P <0 0 5 )。结论 :PNS能够提高痴呆模型大鼠大脑皮质内NE ,DA和5 HT含量     

慢性铝暴露对成年大鼠海马LTP及谷氨酸含量的影响

目的采用慢性铝暴露大鼠模型来研究铝暴露对谷氨酸介导的神经传递的影响,进而从递质释放角度阐明在此阶段中铝影响LTP的机制。方法成年Wistar大鼠按体重随机分为3组,分别自由饮用:蒸馏水(对照组),0.2%AlCl3水溶液,0.4%AlCl3水溶液,染毒3个月后测定各项指标。结果随铝暴露剂量增大,大鼠海马齿状回群体峰电位幅值增强率逐渐减小,并呈剂量依赖性。免疫组化结果显示与对照组相比,铝暴露组的谷氨酸活性受到明显抑制,并且随着暴露剂量增大,谷氨酸活性降低,呈剂量依赖性。结论慢性铝暴露可损害成年大鼠海马LTP的诱导与维持,这可能与大鼠海马中谷氨酸的活性降低有关,对正常的学习记忆过程产生不利影响。     

氨基胍对大鼠缺血再灌注视网膜超氧化物歧化酶含量的影响

目的观察氨基胍在大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型中对视网膜超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影响。方法Wistar大鼠54只,随机分为对照组、缺血组和给药组,每组又分为6h,24h,72h组。每组采用大鼠视网膜缺血再灌注模型。眼压升高60min后,腹膜腔内注射氨基胍溶液(给药组)/或等量生理盐水(缺血再灌注组)。测定视网膜组织中SOD、MDA的含量。结果大鼠视网膜缺血再灌注6h时,SOD水平下降(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01),此时给药组SOD、MDA水平与对照组相似(P>0.05)。结论氨基胍可能通过对抗氧自由基途径来对抗大鼠视网膜缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡。     

钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响

目的:观察钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响。方法:采用条件性位置偏爱实验和脑电超慢涨落分析技术。结果:氯胺酮和钩藤碱均能消除苯丙胺导致的位置偏爱效应;苯丙胺使大鼠呈现完全偏离的“脑功能平衡图”,氯胺酮和钩藤碱可使其恢复至平衡态;苯丙胺导致大鼠脑内抑制性氨基酸含量明显下降(P<0.01),兴奋性氨基酸含量明显上升(P<0.01),氯胺酮和钩藤碱均可恢复其至正常水平,钩藤碱本身对这些均无影响。结论:钩藤碱可调整苯丙胺引起的大鼠脑内氨基酸神经递质含量的异常变化。