鼻咽癌组织中c-Fos和Cyclin D1蛋白表达的检测及意义

目的:检测鼻咽癌组织中c-Fos、Cyclin D1的表达,并探讨其与鼻咽癌临床病理特征及预后的关系.方法:收集1996年4月至1998年6月在中山大学肿瘤防治中心鼻咽癌科行鼻咽活检的鼻咽癌患者的标本55份.采用免疫组化LSAB法对55例鼻咽癌组织中c-Fos、Cyclin D1的表达进行检测,用统计学软件SPSS10.0进行数据处理.结果:c-Fos及CyclinD1阳性表达率为分别为94.5%和78.2%,阳性表达部位均为细胞核;两种蛋白的表达与鼻咽癌92'临床分期、T分期、N分期、年龄、性别皆无显著相关性;c--Fos的表达时鼻咽癌患者的预后无显著性影响:Cyclin D1阴性患者的总生存期(OS)、至疾病进展时间(TTP)显著低于阳性患者.COX多因素相关分析年龄＞50岁、Cyclin D1阴性是不良预后因素.结论:鼻咽癌组织中存在c-Fos、Cyclin D1高表达,Cyclin D1阴性是独立的不良预后因素.     

应用间期FISH技术探讨cyclinD1基因在鼻咽癌中的扩增

目的：检测ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因在鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＮＰＣ）细胞中的扩增情况,探讨ｃｙｃｌｉｎＤ１基因在ＮＰＣ发生及发展中的作用。方法：应用间期Ｍｉｃｒｏ－ＦＩＳＨ技术。结果：８３例ＮＰＣ病例可见２３例（占２７．７１％）出现ｃｙｃｌｉｎＤ１扩增;其中Ⅰ、Ⅱ期病例扩增的有５例,Ⅲ、Ⅳ期病例扩增的有１８例;２３例扩增中１６例（６９．５６％）伴有颈淋巴结转移。结论：     

周期蛋白D1在鼻咽癌细胞系中功能及意义的深入研究

目的 深入研究周期蛋白D1在鼻咽癌细胞中的表达特征及生物学功能。以Western blot方法确定D型周期蛋白在鼻咽癌细胞系中的表达谱及表达水平;利用流式细胞术双参数法,确定cyclin D1在鼻咽癌细胞中的表达分布模式;结合反义硫代磷酸化寡聚脱氧核苷酸和抗体剔除实验,分别从mRNA及蛋白质水平抑制、中和cyclinD1的表达,探讨其在鼻咽癌细胞中的生物学功能。结果 在鼻咽癌细胞中,D型周期蛋白的表达谱为D1、D2、D3均表达型,cyclinD1在两株鼻咽癌细胞均有过表达。cyclinD1在鼻咽癌细胞系中的表达呈细胞周期依赖性,在G0／G1期表达最高,S期及G2／M期下降,但仍可检测到。反义cyclinD1硫代磷酸化寡聚脱氧核苷酸和抗体剔除实验可以有效抑制蛋白质表达,抑制细胞进入S期。结论 鼻咽癌细胞系中,D型周期蛋白的表达谱为D1、D2、D3均表达型,cyclinD1在鼻咽癌细胞中有过表达,且表达呈细胞周期依赖性,cyclinD1可能是鼻咽癌细胞G1／S期进行中必不可少的细胞周期调节因子。     

ERK-1与Cyclin D1在肝细胞肝癌组织中的表达

 目的 探讨ERK-1与Cyclin D1在肝细胞肝癌组织中表达的临床意义、相关性及对预后的影响。 方法 应用免疫组织化学方法检测50例肝细胞肝癌组织、17例癌旁硬化肝组织及14例正常肝组织ERK-1与Cyclin D1的表达。 结果 1.ERK-1与Cyclin D1在肝细胞肝癌组织中的表达显著高于癌旁硬化肝组织和正常肝组织;2.ERK-1表达与临床分期、病理分级、年龄、肿瘤大小、癌栓等明显相关;3.Cyclin D1的表达与病理分级有关;4.ERK-1与Cyclin D1表达-~+者平均生存时间较短,生存率较低,预后较差;ERK-1与Cyclin D1表达++~+++者平均生存时间较长,生存率较高,预后较好;5.在肝细胞肝癌组织中ERK-1与Cyclin D1的表达呈正相关。 结论 ERK-1、Cyclin D1的表达水平的升高在肝癌的发生发展中发挥协同、促进的作用,监测它们的表达能为肝癌早期诊断及评价肝癌患者的预后提供帮助。     

中国儿童急性淋巴细胞白血病患者Cyclin D1基因多态性的探讨

目的:探讨细胞周期蛋白CyclinD1外显子4(870A/G)多态性与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的相关性。方法:采用聚合酶链反应(PCR)和PCR-RFLP方法,分析183例儿童ALL患者和190例健康对照者的CyclinD1基因型。结果:与健康对照组相比,携带AA基因型者患ALL的相对风险度增加3.2898(P=0.0207);携带AA型的T-ALL患者显著高于B-ALL患者(P=0.047);携带AA型的ALL高危患者显著高于标危患者(P=0.011)。结论:Cy-clinD1基因多态性与中国儿童ALL的发生、发展及预后密切相关。     

小鼠胃癌Cyclin G1和其它相关基因表达及凋亡研究

目的:探讨胃癌中Cyclin G1、Cyclin D、p21、p16、p53、bcl-2等基因的表达水平、细胞周期变化和凋亡情况.方法:建立胃癌模型;免疫组化法检测小鼠胃癌中Cyclin G1、Cyclin D、p21、p16、p53、bcl-2等基因蛋白表达,RT-PCR技术检测Cyclin G1mRNA的表达;流式细胞术检测小鼠胃癌细胞的凋亡率和细胞周期.结果:阳性组的CvclinG1、Cyclin D表达明显高于正常组和化疗组(P＜0.05),p16则相反;各组p21、bcl-2的表达无明显差异;阳性组p53的表达为阴性,而化疗组与正常组表达无明显差异(P＞0.05);阳性组中Cvclin G1mRNA的表达水平明显高于正常组和化疗组(P＜0.05);化疗组和阳性组的细胞凋亡率均较正常组增高(P＜0.05),且化疗组的凋亡率比阳性组明显增高(P＜0.01).结论:CyclinG1、Cyclin D高表达、p16低表达可能与胃癌的发生、发展有关.     

Acquired resistance to temsirolimus in human renal cell carcinoma cells is mediated by the constitutive activation of signal transduction pathways through mTORC2

Background:

The objective of this study was to characterise the mechanism underlying acquired resistance to temsirolimus, an inhibitor of mammalian target of rapamycin (mTOR), in renal cell carcinoma (RCC).

Methods:

A parental human RCC cell line, ACHN (ACHN/P), was continuously exposed to increasing doses of up to 20 μM of temsirolimus, and a cell line resistant to temsirolimus (ACHN/R), showing a sixfold higher IC₅₀ than that of ACHN/P, was developed.

Results:

Following treatment with temsirolimus, phosphorylation of S6 kinase in ACHN/P was markedly inhibited, whereas there was no detectable expression of phosphorylated S6 in ACHN/R before and after temsirolimus treatment. However, AKT and p44/42 mitogen-activated protein kinase (MAPK) were constitutively phosphorylated even after temsirolimus treatment in ACHN/R, but not in ACHN/P. There was no significant difference between the sensitivities of ACHN/P and ACHN/R to KU0063794, a dual inhibitor of mTOR complex 1 (mTORC1) and mTORC2. Similar sensitivities to temsirolimus in ACHN/P and ACHN/R could be achieved by additional treatment with specific inhibitors of AKT- and MAPK-signaling pathways.

Conclusion:

The activation of signal transduction pathways via mTORC2, but not via mTORC1, may have an important role in the acquisition of a resistant phenotype to temsirolimus in RCC.     

鼻咽癌相关基因NAG7对鼻咽癌细胞周期及凋亡的影响

背景与目的NAG7基因是我室克隆的鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因,其功能与作用机制目前尚不清楚.研究鼻咽癌相关的潜在抑瘤基因NAG7对鼻咽癌细胞系(HNE1)细胞周期和细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法采用脂质体转染技术将NAG7基因导入HNE1细胞,建立稳定表达NAG7的细胞株,Northernblot分析转染细胞NAG7基因的表达,并采用流式细胞技术检测细胞周期、细胞周期素及细胞凋亡的改变,并用westernblot验证.结果NAG7基因重表达的HNE1细胞与空载体转染的HNE1和HNE1细胞相比G0/G1期细胞数增加(P<0.05),S期细胞数减少;细胞凋亡数目增加(P<0.05);细胞周期素A、D1、E表达明显降低(P<0.05),细胞周期素B1表达降低,Westernblot检测亦证实cyclinD1和cyclinE表达明显下调.结论NAG7的重表达导致细胞周期素表达下调,从而延缓细胞经G1期进入S周期及诱导细胞凋亡增加进而抑制NPC细胞的过度增殖.     

凋亡抑制基因 Survivin在肝癌细胞中的表达及其与PTEN、cyclin D1蛋白表达的关系

目的:探讨Survivin基因的表达在肝癌发生、发展中的作用及其与PTEN、cyclin D1蛋白表达的相互关系.方法:采用流式细胞术对肝细胞癌(48例)、癌旁肝硬化(32例)、肝硬化(6例)、正常肝组织(6例)Survivin、PTEN、cyclin D1基因蛋白的表达进行定量检测.结果:Survivin和cyclin D1蛋白表达的FI值明显高于癌旁组织、肝硬化和正常肝组织,而肝细胞癌的PTEN蛋白的FI值明显低于癌旁组织、肝硬化和正常肝组织.Survivin和PTEN蛋白的表达量与分化程度、预后有关,与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝内转移无关.随着肿瘤恶性程度加重,Survivin与PTEN蛋白表达呈显著负相关;Survivin蛋白与cyclin D1蛋白表达之间呈显著正相关.结论:Survivin、PTEN及cyclin D1基因在肝细胞癌的发生、发展中起着不同的作用,联合检测Survivin和PTEN对判定肝细胞癌预后可提供一定的依据.     

胃癌组织NGX6和Cyclin D1表达及其生物学意义的探讨

目的:探讨胃癌组织中NGX6和Cyclin D1的表达及其生物学意义.方法:采用免疫组化SP法检测89例胃癌组织和53例正常胃黏膜组织中NGX6和Cyclin D1蛋白的表达情况.结果:NGX6蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为51.69％,胃癌组织中阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织的83.02％,P＜0.05;而Cyclin D1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为74.16％,胃癌组织中阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织的0,P＜0.05;免疫组织化学结果显示,胃癌组织中NGX6和Cyclin D1蛋白的阳性表达呈负相关,两者均与胃癌的临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P＜0.05),而与组织学分级无关.结论:NGX6和Cyclin D1蛋白表达异常可能共同参与了胃癌的发生、发展、侵袭和转移;联合检测2种蛋白对于评价胃癌的恶性程度、判断其转移潜能和预后可能具有重要的临床意义.     

黏蛋白MUC1和Cyclin D1在胰腺癌组织中的表达意义

目的探讨胰腺癌组织中黏蛋白MUC1和周期蛋白Cyclin D1的表达及其意义。方法采用免疫组化方法对47例胰腺癌和15例正常胰腺组织中的MUC1和Cyclin D1进行检测。结果 47例胰腺癌组织中有39例（82.98%）MUC1表达阳性和32例（68.09%）Cyclin D1表达阳性,15例正常胰腺组织中3例（2.00%）MUC1表达阳性和0例（0）Cyclin D1表达阳性;MUC1的表达和Cyclin D1的表达呈正相关;且MUC1的阳性表达在胰腺癌分期较晚和淋巴结转移的组织中明显高于分期较早和无淋巴结转移的组织（P〈0.05）;Cyclin D1在有淋巴结转移的胰腺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移的胰腺癌组织（P〈0.05）。结论 MUC1和Cyclin D1参与胰腺癌的发生发展,MUC1是胰腺癌诊断和治疗靶点的理想标志物。     

细胞周期蛋白CyelinD1和CDK4在新疆维吾尔族妇女宫颈癌中的表达及意义

目的：探讨CyclinD1和CDK4在新疆维吾尔族妇女宫颈癌发生、发展中的作用及相互关系。方法：采用免疫组化方法,检测100例宫颈癌组织和50例正常宫颈组织中CyclinD1和CDK4蛋白的表达情况。结果：宫颈癌组织中CyclinD1蛋白阳性表达率为75％,高于正常对照组的30％（P〈0．01）;CDK4蛋白阳性表达率（87％）,高于正常对照组（44％）（P〈0．01）。结论：CyelinD1和CDK4在新疆维吾尔族妇女宫颈癌中高表达,且与新疆维吾尔族妇女宫颈癌的发生、发展有关。     

复发鼻咽癌局部治疗

复发鼻咽癌目前仍以再程放射治疗为主,常规外照射的放疗后遗症发生率较高,适形调强放疗及立体定向放疗在降低靶区周围重要器官和正常组织的照射剂量的同时也提高了局部控制率,近距离放疗和手术治疗在早期病例中也显示出良好疗效.     

Cyclin D1 expression is associated with poor prognostic features in estrogen receptor positive breast cancer

Cyclins D1 and E play an important role in breast carcinogenesis. High cyclin E expression is common in hormone receptor negative and high grade aggressive breast cancer, whereas cyclin D1 in hormone receptor positive and low grade breast cancer. Experimental data has suggested that cyclin D1 and E mediate cell proliferation by different mechanisms in estrogen receptor (ER) positive and negative breast cancer. To test this hypotheses in large breast cancer material and to clarify the histopathological correlations of cyclin E and D1, especially the association with proliferation, we analyzed cyclin E and D1 immunohistochemical expression on breast tumour microarrays consisting of 1348 invasive breast cancers. High cyclin D1 expression was associated with high grade (P < 0.0005), high cyclin A (P < 0.0005) and Ki67 (P < 0.0005) expression among ER positive but with low grade (P = 0.05) and low Ki67 (P = 0.01) expression among ER negative breast cancers. Cyclin E and D1 expression correlated positively in ER positive (P < 0.0005) but had a negative correlation in ER negative tumours (P = 0.004). Cyclin E associated with high grade among all tumours (P < 0.0005). In conclusion, the findings of this study show that cyclin D1 has separate roles, and proliferation is driven by different mechanisms in ER positive and negative breast cancers.     

Expression and significance of cyclin D1 in human hepatocellular carcinoma

Cyclin D1 is closely correlated with G1 phase of cell cycle. In normal human tissues, cyclin D1 distributes mainly in proliferating region of epithelial tissues and its expressional level is low[1]. Recently, it has been found that the expression of cyclin D1 is abnormally high in a variety of tumor tissues, and cylin D1 has considered as one of the generally acknowledged oncogenes[2-5]. There have been only few reports about the expression of cyclin D1 and itsrelationship with pathological …     

EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞凋亡的影响

背景与目的:已证实EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latentmembraneprotein,LMP1)具有转化致瘤作用,在鼻咽癌的发生发展中起重要作用。LMP1的转化致瘤作用可能与细胞凋亡有关,本实验目的是观察EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞凋亡的影响,探索LMP1在鼻咽癌发生发展中的可能机制。方法:用电转染的方法将带有绿色荧光蛋白GFP报道系统的EB病毒LMP1基因真核表达质粒导入CNE1,用荧光显微镜检测报道基因GFP的表达情况;用免疫组化法及Westernblot法检测目的基因LMP1的表达情况;用流式细胞仪、荧光染色及DNA片段分析等方法检测在有地塞米松磷酸钠或无血清饥饿诱导的情况下LMP1对CNE1细胞凋亡的影响。结果:CNE1G细胞(转染空载质粒PAT-GFP的CNE1细胞)及CNE1GL(转染目的基因质粒PAT-GFP-LMP1的CNE1细胞)有绿色荧光蛋白表达,CNE1细胞(未经转染的CNE1细胞)无绿色荧光蛋白表达;CNE1GL细胞LMP1呈阳性表达,而CNE1及CNE1G细胞均为阴性。CNE1、CNE1G及CNE1GL3组细胞分别用地塞米松磷酸钠或无血清1640培养液处理后均有凋亡出现,且两种诱导方法均能使CNE1GL组细胞的凋亡指数(apoptosisindex,AI)较CNE1及CNE1G组明显增高(P<0.05),而CNE1与CNE1G组的凋亡指数无明显差别。3组细胞常规培养下则无凋亡出现。结论:LMP1基因成功导入CNE1细胞     

细胞周期蛋白Cyclin D1 和CDK 4在新疆维吾尔族妇女宫颈癌中的表达及意义

目的:探讨Cyclin D1和CDK 4在新疆维吾尔族妇女宫颈癌发生、发展中的作用及相互关系.方法:采用免疫组化方法,检测100例宫颈癌组织和50例正常宫颈组织中Cyclin D1和CDK 4蛋白的表达情况.结果:宫颈癌组织中Cyclin D1 蛋白阳性表达率为75%,高于正常对照组的30%(P<0.01);CDK 4蛋白阳性表达率(87%),高于正常对照组(44%)(P<0.01).结论:Cyclin D1和CDK 4在新疆维吾尔族妇女宫颈癌中高表达,且与新疆维吾尔族妇女宫颈癌的发生、发展有关.     

p16,Cyclin D1在胃癌发生过程中的表达

研究ｐ１６,ＣｙｃｌｉｎＤ１在胃癌发生过程中的表达。方法：采用免疫组化ＡＢＣ法,检测胃癌、不典型增生、萎缩性胃炎及正常胃粘膜组织Ｐ１６和ＣｙｃｌｉｎＤ１的表达。结论：Ｐ１６和ＣｈｃｌｉｎＤ１在胃上皮癌变过程中起着重要作用,其在胃癌中的反向表达趋势提人才是可能存在相互抑制机制。     

Survivin、P21WAF1/CIP1及Cyclin D1蛋白表达及与早期宫颈癌复发的关系

目的 :探讨凋亡抑制蛋白Survivin、细胞周期蛋白CyclinD1及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P2 1WAF1/CIP1在宫颈癌中的表达及与早期宫颈癌复发的关系。方法 :应用免疫组化S P法 ,检测Survivin、CyclinD1及P2 1WAF1/CIP1蛋白在 5 5例宫颈癌 (鳞癌 4 5例 ,腺癌 10例 )及 10例正常宫颈组织中的表达。结果 :①Survivin、CyclinD1及P2 1WAF1/CIP1蛋白在正常宫颈组织的阳性表达率分别为 0、10 0 %、2 0 0 % ;在宫颈鳞癌中阳性表达率分别为 6 8 9%、5 1 1%、5 7 8% ;在宫颈腺癌中阳性表达率分别为 6 0 0 %、90 0 %、80 0 % ;与正常宫颈组织比较 ,三者在宫颈癌中的阳性表达率明显增高 (P <0 0 5 )。②Survivin或CyclinD1蛋白的表达与鳞癌临床分期及病理分级成正相关 (P <0 0 5 ) ,而P2 1WAF1/CIP1蛋白的表达与其无关 (P >0 0 5 )。③P2 1WAF1/CIP1与Survivin或CyclinD1的共表达仅与病理分级有关 (P <0 0 5 )。而三种蛋白的共表达时与临床分期及病理分级均有关 (P <0 0 5 )。④Survivin、cyclinD1蛋白单独表达与早期宫颈癌的复发有关 (P <0 0 5 ) ,二者的共表达与早期宫颈癌的盆腔淋巴结转移有关(P <0 0 5 )。结论 :Survivin及cyclinD1蛋白在宫颈癌中的表达与临床晚期、分化不良及复     

Cyclin D1、Ki-67在宫颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探索细胞周期蛋白Cyclin D1和细胞增殖活性标记物Ki-67在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理特征的相关性.方法 采用免疫组织化学方法检测宫颈鳞状细胞癌中Cyclin D1和Ki-67的表达，并进行相关分析。结果 Cyclin D1在宫颈鳞状细胞癌组织中阳性率为46．7％（14／30）；Ki-67在宫颈鳞状细胞癌组织中阳性率为73．3％（22／30）。Cyclin D1表达与有无转移呈正相关（P〈0．05），与病理分级及临床分期无明显相关性（P〉0．05）。Ki-67表达与病理分级及临床分期呈正相关（P〈0．05），与有无转移无明显相关性（P〉0．05）。结论 Cyclin D1和Ki-67的过表达可能与宫颈鳞状细胞癌的高侵袭性和不良预后密切相关。