原位杂交法检测喉癌组织中人乳头状瘤病毒的研究

采用原位核酸杂交技术，地高辛标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ／１１，１６／１８型ＤＮＡ作探针，对４４例喉癌石蜡包埋标本中ＨＰＶ－ＤＮＡ同源序列进行了检测，同时用１６例喉息肉石蜡包埋标本作为对照。结果显示：ＨＰＶ６Ｂ／１１杂交阳性者在喉癌组为８／４４（１８．２％），喉息肉组为２／１６，（１２．５％）（Ｐ〉０．０５），ＨＰＶ１６／１８杂交阳性者在喉癌组为１９／４４（４３．２％），喉息肉组为２／１６（１     

喉癌组织乳头状瘤病毒的检测

应用聚合酶链反应对成人型喉癌，喉癌旁组织及颈部淋巴结组织进行乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）检测，发现２０例喉癌组织中有１６例呈ＨＰＶ－６，１１例阳性，１例ＨＰＶ－１６，１８例阳性，２例癌旁１ｃｍ内组织有１例ＨＰＶ－６，１１阳性，２例癌旁２ｃｍ外组织均呈ＨＰＶ－６，１１，１６，１８阴性，３例淋巴结病是检查有癌转移，均主ＨＰＶ－６，１１型阳性。     

原位杂交法检测喉癌组织中人乳头状瘤病毒的研究

采用原位核酸杂交技术，地高辛标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ／１１，１６／１８型ＤＮＡ作 探针，对４４例喉癌石蜡包埋标本中ＨＰＶ－ＤＮＡ同源序列进行了检测，同时用１６例喉息肉石蜡包埋 标本作为对照。结果显示：ＨＰＶ ６Ｂ／１１杂交阳性者在喉癌组为 ８／４４（１８． ２％），喉息肉组为２／１６ （１２．５％）（Ｐ＞０．０５）；ＨＰＶ １６／１８杂交阳性者在喉癌组为 １９／４４（４３．２％），喉息肉组为 ２／１６ （１２．５％）（Ｐ＜０．０５）。提示：ＨＰＶ １６／１８型感染与喉癌的发生有密切关系，是喉癌发病学中一个不 容忽视的致癌因素。     

人喉癌组织中人乳头瘤病毒DNA的检测

目的：为探讨喉癌与人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染的关系和ＨＰＶ在喉癌中基因组型的分布与表达。方法：应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）制备非放射性探针标记物－地高辛标记ＨＰＶ共有引物探针，对１４６例喉不同病变的新鲜组织标本（喉癌６８例，喉其他病变４８例，正常喉组织３０例），进行ＨＰＶ６，１１，１６，１８，３１，３３，３５，４２，５８共９型ＨＰＶＤＮＡ感染的检测；阳性者用多重引物ＰＣＲ方法分型。结果：喉癌ＨＰＶ感染阳性率４５．６％（３１／６８），喉癌颈转移淋巴结组织阳性率２０．０％（３／１５），喉癌前病变阳性率１１．８％（２／１７），声带息肉阳性率６．３％（１／１６），１５例癌旁及１５例癌周正常喉组织均为ＨＰＶＤＮＡ阴性。ＨＰＶＤＮＡ型别分布在喉癌中以ＨＰＶ１６，１８型为主，喉良性病变中以ＨＰＶ６，１１型为主。结论：喉癌发生与ＨＰＶ感染有关。     

人乳头瘤病毒DNA6B／11,16,18在喉鳞癌组织中的表达

为了证实人乳头瘤病毒亚型的感染与喉鳞癌的关系，采用原位杂交技术，荧光素标记ＨＰＶ ６Ｂ／１１，１６，１８ＤＮＡ为探针，分别为３２例福尔马林固定，石蜡包埋的喉鳞癌进行ＨＰＢ ６Ｂ／１１，１６，１８型检测。结果显示：ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性，ＨＰＶ１８型阳性９例，ＨＰＶ６Ｂ／１１阴性。提示：喉鳞癌的发生与ＨＰＶ１６，１８型感染有关。     

人乳头瘤病毒DNA 6B/11、16、18在喉鳞癌组织中的表达

为了证实人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）亚型的感染与喉鳞癌的关系，采用原位杂交技术，荧光素标记ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８ＤＮＡ为探针，分别对３２例福尔马林固定、石蜡包埋的喉鳞癌进行ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８型检测。结果显示：ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性１４例（４６％），ＨＰＶ１８型阳性９例（２８％），ＨＰＶ６Ｂ／１１阴性。提示：喉鳞癌的发生与ＨＰＶ１６、１８型感染有关。     

喉鳞癌及乳头状瘤组织中人乳头瘤病毒DNA的PCR检测

①目的探讨人乳头瘤病毒１６型和１８型（ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８）与喉鳞癌、喉乳头状瘤的关系。②方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测３４例喉乳头状瘤、８３例喉鳞状细胞癌石蜡包埋组织中ＨＰＶ１６及ＨＰＶ１８的ＤＮＡ．③结果喉乳头状瘤及喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率为１４．７１％和３０．１２％，两组比较差异无显著性（χ２＝３．００６，Ｐ＞０．０５）；ＨＰＶ１８在喉乳头状瘤组织中未检出，而在喉鳞癌组织中为６．０２％，两组比较，差异无显著意义（χ２＝０．０８７，Ｐ＞０．０５）。高分化喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率显著高于中分化鳞癌（χ２＝６．０３２，Ｐ＜０．０５），而高分化与低分化、中分化与低分化鳞癌之间的差异均无显著性（χ２＝０．３５１，１．５００，Ｐ均＞０．０５）；不同病理分化喉鳞癌组织中ＨＰＶ１８的检出率差异无显著性（χ２＝０．０６０，Ｐ＞０．０５）。④结论喉鳞癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，尤以ＨＰＶ１６明显     

喉鳞癌及乳头状瘤组织中人乳头瘤病毒DNA的PCR检测

探讨人乳头瘤病毒１６型和１８型与喉鳞癌，喉乳头状瘤的关系。２．方法 应用聚合酶链反应技术检测３４例喉乳头状瘤，８３例喉鳞状细胞癌石蜡包埋组织中ＨＰＶ１６及ＨＰＶ１８的ＤＮＡ。３．结果 喉乳头状瘤及喉鳞癌组织中的ＨＰＶ１６的检出率为１４．７１％和３０．１２％，两组比较差异无显著性；ＨＰＶ１８在喉乳头状瘤组织中未检出，而在喉鳞癌组织中为６．０２％，两组比较，差异无显著性意义。     

多重多聚酶链反应和原位杂交检测成人咽喉病变中人乳头瘤病毒感染

用多重我聚酶链反应（ＰＣＲ）和生物素标记探针的原位杂交方法对３６例石蜡包埋的成人咽、喉部乳头状瘤、上皮不典型增生和鳞状细胞癌的组织标本进行了检测。结果共检出６例ＨＰＶＤＮＡ阳性病例，全部为ＨＰＶ６／１１，其中仅１例伴ＨＰＶ１６型感染。６例阳性病例包括喉乳头状瘤３例，咽乳头状瘤、喉粘膜上皮高度不典型增生及喉鳞癌各１例。原位杂交显了ＨＰＶＤＮＡ在肿瘤组织、组织中的分布。     

喉部肿瘤与人类乳头状瘤病毒相关性研究

目的 明确喉部良、恶性肿瘤与人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）之间的关系。方法 采用型特异性聚合酶反应（ＰＣＲ）技术,对６０例喉癌、３６例喉乳头状瘤及７８例声带息肉的新鲜冰冻组织标本进行ＨＰＶ－ＤＮＡ的检测。结果 ＨＰＶ１６型阳性者在喉癌组为２０例（３３．３３％）,喉乳头状瘤组为４例（１１．１１％）及声带息肉组为４例（５．１３％）（Ｐ〈０．００５）;ＨＰＶ６／１１型阳性者在喉乳头状瘤组为３５例（９７．２２     

人乳头状瘤病毒16/18感染与喉鳞状细胞癌关系

目的研究喉鳞癌组织中人乳头状瘤病毒（human papillomavirus,HPV）16／18亚型的感染情况并进行临床分析。方法应用原位杂交法分别检测39例喉鳞癌组织,10例声带息肉组织中HPV16／18亚型的感染情况,并分析喉鳞癌组织中HPV16／18阳性感染与肿瘤各项临床病理参数的关系。结果39例喉鳞癌组织中HPV16／18阳性率为48．7％（19／39）。10例声带息肉组织中均未见HPV16／18感染（0／10）。HPV16／18在喉鳞癌组织与声带息肉组织中的表达差异经χ^2检验有统计学意义。喉鳞癌组织中HPV16／18感染与癌组织的的组织学分级、临床分期、淋巴结转移间经Fisher＇s精确概率法χ^2检验均未见相关性。结论喉鳞癌的发生与HPV16／18感染相关。     

喉鳞状细胞癌组织中HPV16/18感染与hTERT、c-myc蛋白表达的关系及意义

目的研究喉鳞状细胞癌组织中人乳头状瘤病毒（HPV）16／18感染与端粒酶催化亚单位（hTERT）和c—myc蛋白表达的关系及意义。方法在39例喉鳞癌组织、10例声带息肉组织中应用原位杂交法检测HPV16／18的感染情况,同时应用免疫组化法检测hTERT和c—myc蛋白的表达情况,并分析喉鳞癌组织中HPV16／18感染、hTERT和c—myc蛋白表达之间的相关性。结果39例喉鳞癌组织中HPV16／18感染阳性表达率48．7％（19／39）,hTERT、c—myc蛋白阳性表达率分别为84．6％（33／39）、82．1％（32／39）。10例声带息肉组织中HPV16／18感染、hTERT蛋白均未见阳性表达,c—myc蛋白阳性表达率为10％（1／10）。经统计学分析HPV16／18感染、hTERT和c—myc蛋白在喉鳞癌组织与声带息肉组织间的表达差异均有统计学意义。喉鳞癌组织中HPV16／18感染与hTERT和c—myc蛋白阳性表达之间均存在显著正相关关系。结论喉鳞癌组织中hTERT和c—myc蛋白表达的改变可能与HPV16／18感染有关,且三者相互作用,共同影响喉鳞癌的发生、发展。这些指标综合分析可能为阐明HPV16／18的恶性转化机制以及为喉鳞癌早期诊断和基因治疗提供参考依据。     

骨桥蛋白在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的:研究喉鳞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达状况及其与临床病理特征之间的关系,阐明骨桥蛋白在喉鳞癌侵袭和转移过程中的作用,并为临床治疗及防治喉鳞癌侵袭、转移提供理论依据和新的思路。方法:收集40例接受手术治疗并经病理诊断证实为原发性喉鳞癌(LSCC)患者病理组织石蜡标本作为试验组,另取40例同期手术切除经病理证实为癌旁阴性喉黏膜组织石蜡标本作为对照组。所有石蜡标本5μm连续切片2张,其中1张行HE染色,证实其为何种病理组织,另外1张用免疫组织化学染色SP法检测OPN的表达。结果:OPN在喉鳞癌组中的阳性表达率为75.00%;在癌旁阴性喉黏膜组中阳性表达率为5.00%;表达强度差异具有统计学意义(P<0.05)。OPN表达与喉鳞癌原发部位无明显关系(P>0.05),而与T分期呈正相关(P<0.05);有局部淋巴结转移组高于无局部淋巴结转移组,其比较差异具有统计学意义(P<0.05);与喉鳞癌细胞分化程度呈负相关(P<0.05)。结论:OPN在喉鳞癌中高表达,与有无局部淋巴结转移、病理学分级、T分期等有关,与喉鳞癌原发部位无关。高表达的OPN在喉鳞癌的发生、发展、侵袭和转移中发挥作用,同时OPN可作为评估喉鳞癌进展、转移的有价值的指标。因此,推测阻断或抑制其表达和活性,干预传导通路中的某些关键位点,可能会成为有效治疗喉鳞癌的新思路。     

原位杂交法检测喉鳞癌组织中人乳头状瘤病毒的研究

目的探讨喉鳞状细胞癌与人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）亚型的关系。方法采用原位杂交技术,地高辛标记Ｈｐｖ６Ｂ／１１、１６和１８型ＤＮＡ作探针,对３２例喉鳞癌石蜡包埋标本中Ｈｐｖ－ＤＮＡ同源序列进行了检测。结果Ｈｐｖ６Ｂ／１１型杂交在喉鳞癌中阴性;Ｈｐｖ１６型杂交阳性在喉鳞癌为１４／３２（４６％）;Ｈｐｖ１８型杂交阳性在喉鳞癌为９／３２（２８％）。各型表达与肿瘤分化程度无关（Ｐ＞０．０５）。结论Ｈｐｖ１６和Ｈｐｖ１８型感染与喉鳞癌的发生有密切关系,是喉鳞癌发病学中一个不容忽视的致癌因素     

喉鳞状细胞癌组织中decorin的表达及其临床意义

目的：观察核心蛋白聚糖（decorin）在喉鳞状细胞癌中的表达情况,探讨decorin与喉鳞状细胞癌发生发展的关系与临床意义。方法：采用免疫组织化学方法（S-P法）对30例低分化喉鳞状细胞癌、24例高分化喉鳞状细胞癌进行decorin蛋白表达的检测,并与14例癌旁正常喉组织中decorin表达进行比较。结果：decorin主要表达在基质部分,decorin蛋白在喉鳞状细胞癌组织中呈阳性表达,而在癌旁正常组织中表达缺失。Decorin在低分化喉鳞状细胞癌组织中呈高表达,表达的阳性率为86.6%,在高分化喉鳞状细胞癌组织中呈中表达,表达的阳性表达率为70.8%,两者之间存在显著性差异（χ2=12.191,P〈0.01）。decorin在喉鳞状细胞癌中的表达与临床分期和病理分级有关（P〈0.05）,与患者的年龄、肿瘤位置、T分期及淋巴结转移无关（P〉0.05）。结论：decorin在喉鳞状细胞癌基质中的表达明显升高,推测decorin在细胞外基质中的改变对于喉鳞状细胞癌肿瘤细胞侵袭可能具有重要作用。     

喉鳞状细胞癌中RAGE与amphoterin的表达

目的:探讨RAGE(receptor for advanced glycation end products)与amphoterin在喉鳞状细胞癌中的表达与临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法测定RAGE及amphotein在27例喉鳞状细胞癌中的表达,并以声带息肉作为对照组,结合喉鳞状细胞癌的临床特征进行分析。RAGE与amphoterin主要定位于细胞膜上,表达强度按阳性细胞数计算。结果:RAGE在喉鳞状细胞癌的表达明显高于在声带息肉中的表达,转移性喉鳞状细胞癌表达高于非转移性喉鳞状细胞癌。Amphoterin在几乎所有的喉鳞癌中表达,且高于声带息肉中的表达。结论:RAGE与amphoterin的表达与喉鳞状细胞癌的侵袭和转移有关,可作为预测喉鳞状细胞癌转移潜能的指标。     

增殖诱导配体在喉鳞状细胞癌中的表达

目的观察增殖诱导配体（APRIL）在喉鳞癌（LSCC）中的表达。方法采用免疫组织化学SABC法检测150例喉鳞癌患者中癌旁喉黏膜组织、癌组织中是否有APRIL的表达及APRIL的表达量与临床指标之间的关系。结果APRIL在癌旁喉黏膜组织及癌组织中的阳性表达率分别为6．7％（10／150）、89．3％（134／150）,在喉鳞癌不同的TNM分期中随着分期的增进APRIL的表达量逐渐增加且差异有统计学意义（P〈0．05）,APRIL的表达量与TNM分期相关（P〈0．05）。结论APRIL蛋白在喉鳞癌中高表达,且在不同TNM分期之间差异有统计学意义。     

喉癌p53基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的探讨喉癌细胞ｐ５３基因突变与人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染的关系及其临床意义。方法应用星普旋转离心柱Ｂ溶液系统,结合聚合酶反应链多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及ＤＮＡ序列分析（ＰＣＲ－ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）,对３６例喉癌组织新鲜标本进行ＨＰＶ定型、相对定量及ｐ５３基因第４至第８外显子突变检测。结果３６例喉癌标本中有１３例发生基因点突变或转码突变,其中１０例为ＨＰＶ１６／１８感染者,且与细胞内病毒含量呈正相关。２４例晚期喉癌（临床Ⅲ－Ⅳ期）有颈淋巴结转移者突变检出率明显高于无转移者（Ｐ＜０．０５）。结论喉癌ｐ５３基因突变与ＨＰＶ１６／１８感染有关,晚期喉癌颈淋巴结转移与ｐ５３基因突变有关。     

P~(73)基因在喉鳞癌中的表达及相关性研究

目的:探讨P73基因的表达与喉鳞癌LSCC的关系。方法:用免疫组化方法检测30例喉鳞癌组织和30例声带息肉中P73的表达。结果:P73阳性表达除2例定位于胞浆,1例定位于核膜外,其余均定位于细胞核。P73阳性表达率在喉癌组织和声带息肉中分别为:66.7%(20/30),50.0%(15/30)(P>0.05),P73与喉鳞癌的临床分型、分期无相关性。结论:P73基因可能并非喉癌癌变过程中的靶基因,在喉癌的发生发展中可能不发挥重要作用。