微卫星不稳定性恶性肿瘤合成致死新靶点WRN的研究进展

微卫星不稳定性（microsatellite instability,MSI）是一种肿瘤细胞中由错配修复受损或缺陷导致而出现新的微卫星等位基因的现象。MSI可以导致肿瘤细胞基因组进一步紊乱和突变,从而促进恶性肿瘤的发生发展,是公认的重要致癌途径之一。Werner syndrome protein （WRN）解旋酶是属于RecQ家族的DNA解旋酶,该酶在DNA修复和维持基因组稳定性中发挥着重要的作用。近年来研究发现,MSI恶性肿瘤的生长高度依赖WRN解旋酶,提示WRN是潜在的MSI恶性肿瘤合成致死新靶点。文章系统综述了WRN解旋酶的结构和生物学功能,总结该蛋白作为合成致死新靶点的最新进展,以及WRN解旋酶抑制剂的研究进展,以期为MSI恶性肿瘤的治疗和WRN抑制剂研发提供参考。     

蒽环类抗肿瘤药物对解螺旋酶的抑制

解螺旋酶(Helicascs)对 DNA 的复制和转录极为重要,它们可使 DNA 双链解开,生成单链并提供复制和转录。作者用~32P标记17-mer复式DNA解螺旋酶底物,检查     

WRN基因在氢醌致U937细胞DNA损伤中的作用

目的 WRN基因在氢醌(HQ)致U937细胞DNA损伤中的作用.方法 常规培养白血病细胞U937至生长对数期,低剂量HQ组、中剂量HQ组、高剂量HQ组分别以10、20、40μmol/L HQ染毒24 h及48 h,以等体积的完全培养基培养的细胞组为完全空白对照组.采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞DNA损伤;采用免疫印迹法检测WRN蛋白的相对表达量.结果 (1)HQ可导致细胞DNA损伤,且损伤效用随染毒浓度增加而增大,48 h比24 h的DNA损伤程度增加,呈时间—剂量依赖性(P＜0.05);(2)免疫印迹结果显示,HQ染毒24 h,WRN蛋白相对表达量在各组差异无统计学意义(P＞0.05);HQ染毒48 h高剂量组分别与空白组、低剂量、中剂量中比较,WRN蛋白相对表达量呈降低的趋势(P＜0.05).结论 HQ诱导WRN蛋白表达下调影响U937细胞DNA损伤修复.     

简便快速检测DNA链断裂的大鼠脾细胞FADU方法

本文报道简便快速检测DNA链断裂的大鼠脾细胞FADU方法,本文研究了DNA解螺旋温度、解螺旋时间和解旋液NaOH浓度对检测结果的影响。结果表明,DNA在0℃解螺旋所得T/B比值、D_0值和ΔD值,较15℃解螺旋为佳。解螺旋时间选用1小时、解旋液NaOH浓度选用0.2N为最佳。     

喹诺酮类药物不良反应与用药注意事项

喹诺酮类药物是人工合成的含4-喹诺酮基本结构的药物,它与细菌DNA螺旋酶的DNA双链中非配对碱基结合,抑制DNA螺旋酶亚A单位,使DNA超螺旋酶结构不能封口,从而使DNA单链暴露,导致mRNA与蛋白质合成失败,使细菌死亡。目前,喹诺酮类药物主要有诺氟沙星、     

HBcAg基因BglⅡ片段插入pUR222的研究

乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)的基因片段为 lkb。用 Bgl Ⅱ酶解 pSH117,回收lkb 片段;用 BamHI 酶解 pUR222,回收片段。将得到的 DNA 片段分别用 CIP 处理。然后用T_4DNA 连接酶连接,转化到 EcoIiBMH71-18中表达。经过筛选和检测,得到了3株高效表达的 HBcAg 阳性克隆菌株,再经 ELISA 检测,其效价可达1024x。酶解和分析电泳,重组质粒小于3.7kb。     

盐酸诺美沙星胶囊变态反应1例

诺美沙星是人工合成的喹诺酮类广谱抗生素。诺美沙星抗菌机制为抑制细菌DNA螺旋酶的活性，从而抑制细菌DNA转录与复制，对多种革兰阳性及阴性细菌均有杀菌作用。广泛用于临床。诺美沙星常见不良反应有头痛、恶心、腹部不适，变态反应也是该药的不良反应之一。     

DNA回旋酶及其抑制剂的研究进展

1 DNA四旋酶的结构、作用机制和生物学功能细菌的DNA回旋酶是一类广泛存在于细菌中的拓扑异构酶,这种酶可以催化闭环双链DNA形成负担螺旋.自从1976年Gellert等发现该酶,近二十年来,对DNA回旋酶的结构、作用机制和生物学功能及与其抑制剂的相互作用进行了广泛而深入的研究.     

喹诺酮类抗菌药对耐甲氧西林金葡球菌DNA螺旋酶的作用

喹诺酮类抗菌药对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)具强大的抗菌作用,1987年上海地区临床分离菌MRSA对氟喹诺酮类抗菌药的敏感率为98.1％,临床应用也取得满意疗效。然而,随着这类药物的广泛应用,耐药菌株逐渐增多。新近文献报道,从葡萄球菌和MRSA中已提取到DNA螺旋酶(以下简称“酶”),喹诺酮类抗菌药对细菌的MIC与对酶活性的50％抑制浓度(IC_(50))有一定关系,其规律与革兰阴性杆菌相仿。提示DNA螺旋酶的改变乃是产生喹诺酮耐药性的主要原因之一。 本文系作者从金葡菌FDA209p中提取出DNA螺旋酶并测定5种喹诺酮类药物的抑酶作用后,从临床分离的对喹诺酮敏感或耐药的MRSA中提取出DNA螺旋酶,测定6种喹诺酮类药物的抑酶作用。     

加替沙星的抗感染作用

<正> 加替沙星(gatifloxacin,AM-1155,CG5501)是一种新型广谱8-甲氧氟喹诺酮抗菌药。其作用机制与其它抗菌药物完全不同,对已对β内酰胺类药物产生耐药性的流感杆菌、葡萄球菌、淋球菌、肺炎链球菌等仍具有抗菌活性。加替沙星有抑制螺旋酶的作用,由等位基因特异性地通过8-甲氧基团产生抑制和杀灭细菌活性,对耐喹诺酮的细菌也有效,与非喹诺酮类药物无交叉耐药。加替沙星以 DNA 螺旋酶(DNA gyrase)为靶酶,主要与α螺旋单位结合构成螺     

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与不育不孕症相关性研究进展

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶是叶酸代谢通路中的关键酶,在编码该酶的MTHFR基因中已发现多种单核苷酸多态性位点可能导致该酶活性的降低。该酶维持体内同型半胱氨酸正常水平及参与DNA的合成。MTHFR基因多态性被发现可能与男性不育及育龄女性复发性流产有关,将可能导致体内高同型半胱氨酸水平和DNA合成障碍及低甲基化反应,使人体叶酸代谢发生障碍。本文就5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性对男性不育、育龄女性复发性流产的影响进行综述。     

通气和碳源对大肠埃希菌ZK650产生小菌素B17的影响

MccB17是大肠埃希菌ZK650核糖体产生的抗菌物质,其分子量比大肠埃希菌素低,产生于菌体生长稳定期的开始阶段.合成基因位于70kb质粒的3.5kb基因簇上,共有7个基因,从mcbA到mcbG,另外还有调节基因ompR.MccB17是一种DNA旋转酶的抑制剂,通过与DNA旋转酶B亚单位结合使双链DNA裂解,一个分子的MccB17即可导致菌体死亡,MccB17可抑制多种革兰阴性细菌,且对高温和极端pH非常稳定.     

丝状真菌顶头孢霉染色体DNA的提取

目的探索提取头孢菌素C产生菌顶头孢霉基因组DNA的方法。方法采用氯化苄法、液氮研磨法和酶裂解法。结果较其他两种方法比 ,氯化苄法提取效果好。当提取液pH值为 9 0～10 0、EDTA浓度为 12 0mmol·L-1时 ,所得的顶头孢霉染色体DNA的质量和数量均较理想 ,每克(湿重 )顶头孢霉菌丝体能得到 96 μg的染色体DNA。常规琼脂糖凝胶电泳分析 ,其DNA片断大于2 3kb。结论该分离方法获得的染色体DNA质量较高 ,可进行限制性内切酶酶解并适合后续特定基因的PCR扩增反应     

加替沙星的不良反应与合理应用

加替沙星是第四代氟喹诺酮类药品，抗菌机制是以DNA螺旋酶为靶酶，阻碍酶反应过程，干扰细菌DNA复制而起到杀菌作用。因其对革兰阳性菌、革兰阴性菌、厌氧菌均有较好疗效，临床广泛用于呼吸系统、泌尿生殖系统等感染。目前．国内生产加替沙星的企业有几十家，商品名有天坤、海超、利欧、恒森等，剂型有片剂、胶囊剂、注射剂、滴眼液。     

DNA甲基化在药物效应和新药研发中的研究进展

DNA甲基化对药物作用的影响日渐受到关注。许多编码药物代谢酶、药物转运体、核受体及药物靶点的基因受DNA甲基化调控。DNA甲基化在影响细胞色素P450酶(CYP450)的表达水平上起着重要的作用,而CYP450酶系催化多种药物代谢反应,能显著影响药物疗效。目前的研究也发现DNA甲基化水平在个体间的差异与药物疗效和不良反应在个体间的差异是紧密相关的。DNA甲基化状态会受药物作用影响,进而引起不同程度的药物不良反应。近年来,以DNA甲基化为靶向的药物研发呈增长态势,DNA甲基转移酶抑制剂对肿瘤等重大疾病治疗具决定性作用。临床试验结果显示,DNA甲基化药物治疗已在改善药物疗效、稳定药理作用及减少药物不良反应上初见成效。DNA甲基化可能成为早期预测药物效应的潜在生物标记,将成为实现临床个体化用药的有力工具。     

抗乙型肝炎病毒基因治疗的若干进展

随着分子生物学特别是基因工程技术的发展，抗乙型肝炎病毒基因治疗有较深入的研究，利用基因重组、转基因及反义核酸等技术，在细胞水平或通过动物实验阶段的研究，基因有关治疗在抗乙肝病毒、抑制乙肝病毒复制中的作用已被证实。本对转基因干扰素、DNA疫苗(DNA免疫)、反义寡核苷酸、三螺旋形成寡核苷酸(反基因寡核苷酸)、核酶有关抗乙型肝炎病毒基因治疗的研究进行综述。     

喹诺酮类药物不良反应及其机制研究进展

喹诺酮类抗生素(qu inolone antibacterials,QA),又称吡酮酸类或吡啶酮酸类,是一类合成抗菌药,以细菌DNA螺旋酶为作用靶标,通过抑制细菌的DNA促螺旋酶(该酶是细菌的II型拓扑异构酶,能以其独特的超螺旋和舒张活性来控制细菌DNA的形状和功能),从而使DNA不能控制mRNA和蛋白质的合成,细菌菌体延伸成丝状或形成液泡,再通过核酸外切酶降解染色体DNA,因而影响了DNA的正常形态与功能,造成染色体的不可逆损害,从而阻断DNA的复制,使中国现代应用药学杂志2006年9月第23卷第8期Ch in JMAP,2006 September,Vol.23 No.8细菌细胞不再分裂,产…     

转录辅抑制因子RIP140在代谢组织中的作用及机制

核受体超家族在调节能量平衡过程中扮演重要角色。转录辅助调节因子通过募集一系列DNA或组蛋白结构修饰酶,调节核受体介导的靶基因转录。受体相互作用蛋白140(receptor-interacting protein140,RIP140)是一种转录辅抑制因子,其与核受体结合后能够负向调节多种代谢组织中靶基因的转录,包括脂肪组织、肌肉组织以及肝脏等。基因沉默RIP140后,多种代谢途径相关基因表达上调,主要涉及糖酵解、甘油三酯合成、三羧酸循环、脂肪酸β氧化、线粒体电子传递以及氧化磷酸化等能量代谢过程。RIP140有望成为治疗代谢综合征的候选靶点。     

喹诺酮类药物的一些进展

自1962年第一个喹诺酮类药物萘啶酮酸(nalidixic acid/NegGram)上市以后,对喹诺酮类构效关系的研究推动了新药的开发。到目前为止,喹诺酮类药物已经发展到第四代,并且对某些革兰阳性菌也有抗菌活性。1作用机制喹诺酮类药物能够通过促使由DNA螺旋酶和拓扑异构酶Ⅳ组成的DNA-酶络合物中的细菌DNA裂解而迅速抑制DNA合成,由此导致细菌死亡。一般来讲,喹诺酮类药物的抗革兰阴性细菌活性与其抑制DNA螺旋酶有关,而抗革兰阳性细菌活性则源于其DNA拓扑异构酶Ⅳ的抑制作用。2药动学和氨基糖甙类抗生素一样,喹诺酮类药物也呈现浓度依赖性的杀菌…