野菊花总黄酮对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞的凋亡诱导作用

目的：研究野菊花总黄酮(TFC)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞的凋亡诱导作用，探讨TFC治疗AA的可能机制。方法：SD大鼠随机分成6组：正常组、模型组、TFC高、中、低剂量组和阳性药雷公藤多苷(TPT)组；SD大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂复制AA模型；MTT法检测滑膜细胞的增殖；原位末端标记检测(TUNEL)法观察滑膜组织中滑膜细胞的凋亡改变；流式细胞仪检测体外培养滑膜细胞的凋亡变化。结果：AA大鼠滑膜细胞出现凋亡抑制，增殖过度的类瘤样细胞特征，TFC可剂量依赖性地降低AA大鼠滑膜细胞的炎性增殖；TFC(168，336 mg·kg-1)治疗组大鼠滑膜细胞的凋亡率较模型组显著升高。结论：TFC可抑制AA大鼠滑膜细胞的过度增殖，诱导滑膜细胞凋亡，这可能是其治疗AA的机制之一。     

京尼平苷酸对佐剂性关节炎大鼠抗炎作用及滑膜细胞凋亡机制研究

目的:研究京尼平苷酸(GA)对佐剂性关节炎(AA)大鼠抗炎作用,探讨GA对AA大鼠滑膜细胞增殖影响的可能凋亡机制.方法:Wistar大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,200,100,50 mg·kg~(-1) GA组和0.75 mg·kg~(-1)甲氨蝶呤(MTX)组,右后足趾皮内注射弗氏完全佐剂后第19天给药,治疗4周,测定足肿胀指标和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β)水平.培养AA大鼠滑膜细胞给予GA(1,2,4μmol·L~(-1))和4μmol·L~(-1) MTX处理,MTT法检测细胞增殖,Hoechst/PI双染观察细胞凋亡,流式细胞仪检测凋亡细胞率,RT-PCR法检测Bcl-2和Bax基因mRNA表达水平.结果:200,100mg·kg~(-1) GA可以明显降低足肿胀度和关节炎指数(P＜0.05或P＜0.01),肿胀抑制率分别为25.4%,21.37%,并抑制血清中TNF-αIL-1β水平(P＜0.05),TNF-α抑制率为34.61%,28%,IL-1β抑制率为29.05%,21.65%.GA(1～4μmol·L~(-1))处理AA大鼠滑膜细胞5 d,明显抑制细胞增殖.流式细胞仪检测显示1,2,4μmol·L~(-1) GA组凋亡率分别为15.8%,24.3%,40.7%(P＜0.01).RT-PCR结果显示,不同浓度GA明显抑制Bcl-2 mRNA表达,而促进Ba)(mRNA表达(P＜0.05或P＜0.01).结论:京尼平苷酸可抑制AA大鼠继发性炎症,降低血清TNF-α,IL-1β水平,体外可抑制AA大鼠滑膜细胞增殖及诱导细胞凋亡,作用机制与其下调Bcl-2和上调Bax基因mRNA表达有关.     

黄芪桂枝五物汤对CIA模型大鼠关节滑膜细胞凋亡的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤(HGW)对胶原诱导型关节炎(CIA)模型大鼠关节滑膜细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:选用SD大鼠72只,随机分为正常组,模型组,HGW低、中、高剂量组,Tofacitinib(TFN)组,HGW低、中、高剂量组药物剂量分别为16,32,64 g·kg~(-1),相当于临床常人用量的3,6,12倍,TFN给药剂量为15 mg·kg~(-1),正常组、模型组每日给予10 m L·kg~(-1)蒸馏水。以牛Ⅱ型胶原加弗氏完全佐剂建立CIA大鼠模型,经HGW治疗4周后光镜下观察各组大鼠踝关节病理形态;通过流式细胞术检测白细胞介素(IL)-4,IL~(-1)0含量,免疫组化法检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)染色检测滑膜细胞的凋亡。结果:与正常组比较,模型组,HGW低、中、高剂量组,TFN组大鼠滑膜中Bcl-2蛋白表达增多(P0.05),模型组Bax蛋白表达减少(P0.05);与模型组比较,HGW高剂量组,TFN组大鼠滑膜中Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增多(P0.05)。滑膜细胞凋亡可见,与正常组比较,模型组,HGW低、中、高剂量组,TFN组滑膜细胞增多,凋亡率下降(P0.05);与模型组比较,HGW低、中、高剂量组,TFN组大鼠滑膜细胞凋亡率上升(P0.05);与HGW低剂量组比较,HGW高剂量组滑膜细胞凋亡率显著上升(P0.01);与HGW-M组比较,HGW高剂量组滑膜细胞凋亡率上升(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤可以促进RA大鼠异常亢进的滑膜细胞凋亡。     

虎杖大黄素对类风湿关节炎大鼠Bax及Bcl-2表达的影响

目的通过虎杖大黄素对类风湿关节炎大鼠Bax、Bcl-2表达的影响的具体实验,研究并阐述虎杖大黄素对治疗类风湿关节炎相关机制。方法将40只Wistart大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、虎杖大黄素组,每组10只。除正常组外其余组大鼠均用等量不完全氟氏佐剂及牛Ⅱ胶原乳化剂造模。虎杖大黄素40mg·kg-1,醋酸地塞米松7. 5mg·kg-1,连续灌胃20d。分别拍摄足爪照片及足爪X射线,用Elisa检测大鼠血清Bax、Bcl-2蛋白表达,用免疫组化检测关节滑膜组织Bax、Bcl-2蛋白表达,用PCR检测大鼠脾组织Bax、Bcl-2 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组中大鼠血清、膝关节滑膜组织、脾组织Bax、Bcl-2蛋白表达有显著差异(P 0. 01)。与模型组比较,虎杖大黄素组与地塞米松组大鼠脾组织Bax mRNA表达显著上调,Bcl-2 mRNA表达显著下调。结论虎杖大黄素可以促进RA大鼠促凋亡因子Bax表达上调,同时,下调抑凋亡因子Bcl-2表达从而缓解类风湿关节炎病情,研究为后续进一步完善虎杖大黄素干预类风湿关节炎机制奠定基础。     

独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用SD大鼠制备独活寄生汤含药血清,弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎,分离提取原代滑膜成纤维细胞。滑膜成纤维细胞分为6组,分别是空白组、模型组、甲氨喋呤组、独活寄生汤高、中、低剂量组,每组5个复孔,分别加入相应的药物。CCK8法检测各组细胞增殖率;荧光定量PCR和ELISA分别检测细胞Bax、Bcl-2、caspase3 m RNA和蛋白水平的表达变化。结果:空白组细胞在各时间点未见明显的变化;模型组细胞随时间延长,增殖抑制率升高(P0.05);甲氨喋呤组和独活寄生汤高、中、低剂量组细胞随干预时间的延长,增殖抑制率降低(P0.05)。与空白组比较,模型组细胞在各时间点的增殖抑制率均升高(P0.05);与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤各剂量组细胞在各时间点的增殖抑制率均降低(P0.05),尤以高剂量组的抑制率更为明显。与空白组比较,模型组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平降低,Bcl-2 m RNA和蛋白水平升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤中、高剂量组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平升高,Bcl-2 m RNA和蛋白水平降低(P0.05,P0.01),高剂量组的作用更为明显。结论:独活寄生汤能抑制佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的增殖,其作用机制与下调抗凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax和caspase3的表达有关。     

壮医药线点灸对佐剂关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响

目的通过建立大鼠类风湿关节炎模型,予以壮医药线点灸干预,观察治疗效果,并进一步探讨其对大鼠关节滑膜细胞凋亡的影响。方法建立佐剂关节炎大鼠模型,予以甲氨蝶呤(MTX组)、壮医药线点灸(ZHM组)和两者联合(CT组)干预。观察并评估大鼠关节炎指数和肿胀度;HE染色观察关节滑膜病理变化;TUNEL染色观察大鼠关节滑膜细胞凋亡率;Western blotting检测滑膜组织中Bcl-2/Bax的表达。结果 MTX组(P0.05)、ZHM组和CT组(P0.05)大鼠关节炎系数相比于关节炎模型组(RA组)均有不同程度的降低,其中CT组降低最为显著,ZHM组与MTX组相比差异亦具统计学意义(P0.05);HE染色结果显示MTX组、ZHM组和CT组大鼠滑膜衬里层细胞增生和炎性细胞浸润与RA组相比均有不同程度的改善;MTX组(P0.05)、ZHM组(P0.05)和CT组(P0.05)与RA组相比细胞凋亡数量显著增加,差异具有统计学意义,CT组和ZHM组与MTX组比较,细胞凋亡现象显著,差异具有统计学意义(P0.05);MTX组(P0.05)、ZHM组(P0.05)和CT组(P0.05)与RA组相比大鼠关节滑膜组织中Bcl-2蛋白表达显著下调,Bax显著上调,CT组和ZHM组与MTX组相比Bcl-2下调、Bax上调均更为显著,差异具统计学意义(P0.05)。结论壮医药线点灸干预能够在一定程度上改善佐剂关节炎大鼠症状,联合甲氨蝶呤使用效果更为显著;而且其作用机制可能是通过Bcl-2信号通路调控关节滑膜细胞凋亡来实现的。     

资木瓜总苷对佐剂性关节炎大鼠滑膜肥大细胞脱颗粒和类胰蛋白酶表达的影响

目的:观察资木瓜总苷(TSCS)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织病理改变、滑膜肥大细胞脱颗粒及类胰蛋白酶表达的影响,探讨肥大细胞功能与TSCS治疗大鼠AA的关系.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组和TSCS 组(200 mg·kg-1),每组15只,致炎后第3天开始ig给药,1次/d,模型组和正常对照组给予等容积生理盐水,持续21 d.除正常对照组外,其余大鼠足部注射弗氏完全佐剂诱导建立AA模型,检测大鼠体质量和足跖体积变化,HE染色评价滑膜组织病理改变,TB染色观察滑膜肥大细胞数量及其脱颗粒情况,免疫组化法检测滑膜组织中类胰蛋白酶表达情况.结果:TSCS能明显增加AA大鼠体质量,减轻足跖肿胀度,显著减轻滑膜组织炎性细胞浸润、滑膜细胞增生和滑膜纤维组织增生,有效抑制滑膜肥大细胞数量和脱颗粒率,显著抑制滑膜组织类胰蛋白酶表达.相关分析显示,滑膜肥大细胞数量及脱颗粒率均与滑膜组织病理改变总评分呈明显的正相关.结论:TSCS具有治疗大鼠AA和调节滑膜肥大细胞功能的作用,由于两者存在明显的正相关性,因此TSCS可能通过抑制滑膜肥大细胞功能,对AA大鼠起治疗作用.     

当归拈痛汤及其拆方对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织Fas/FasLmRNA表达的影响

目的：以原位杂交法检测当归拈痛汤对佐剂性关节炎（adjjuvantarthritis，AA）大鼠滑膜细胞凋亡的影响，探讨当归拈痛汤作用机制。方法：采用弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎（AA）大鼠模型，观察当归拈痛汤及其拆方对佐剂性关节炎大鼠炎症关节滑膜组织中Fas、FasL的mRNA表达。结果：当归拈痛汤全方组、拆方2组、拆方1组均能明显增加佐剂性关节炎大鼠滑膜组织Fas／LmRNA的表达，以全方组疗效最佳。结论：全方组和各拆方组可以促进凋亡因子Fas／LmRNA表达，改善AA大鼠的滑膜细胞凋亡障碍。     

豨莶醇对佐剂性关节炎大鼠血清细胞因子及滑膜细胞凋亡蛋白的影响

目的探讨豨醇(奇任醇)对佐剂性关节炎(AA)大鼠血清细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及滑膜细胞Bcl-2、Fas-L蛋白表达的影响。方法采用弗氏完全佐剂建立SD大鼠AA模型,分别给予奇任醇、氢化可的松、阿司匹林 环磷酰胺治疗;ILISA法测定实验大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平;踝关节滑膜细胞进行Bcl-2、Fas-L免疫组化染色,运用计算机图像分析系统对染色结果进行分析。结果与正常组相比,模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),滑膜细胞Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),Fas-L表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,奇任醇组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.01、0.05);滑膜细胞Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05),Fas-L蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论奇任醇可降低AA大鼠血清细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平,下调滑膜细胞Bcl-2蛋白表达、促进Fas-L蛋白表达。     

芹菜素对大鼠骨肉瘤细胞凋亡及相关蛋白Bax,Bcl-2,Caspase-3,Caspase-9,细胞色素C的影响

目的:探讨芹菜素对大鼠骨肉瘤细胞凋亡及相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),Caspase-9及细胞色素C的影响。方法:SD大鼠50只,建立大鼠骨肉瘤模型,随机分为模型组,顺氯氨铂组(10 mg·kg-1),芹菜素低、中、高剂量组(1,2,4 mg·kg-1),每组10只,ig给药,连续给药30 d。模型组ig给等体积的生理盐水。末次给药24 h后,切取骨肉瘤组织,称质量。TUNEL法原位标记凋亡的骨肉瘤细胞;免疫组化法检测骨肉瘤组织中Bax,Bcl-2的蛋白表达;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测骨肉瘤组织中Caspase-3,Caspase-9,细胞色素C的蛋白含量。结果:与模型组比较,芹菜素低、中、高剂量组的骨肉瘤的质量降低,细胞凋亡数量明显增加,明显上调Bax,Caspase-3,Caspase-9,细胞色素C蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达(P0.05)。结论:芹菜素可通过上调Bax,Caspase-3,Caspase-9,细胞色素C的蛋白表达,下调Bcl-2的蛋白表达,抑制骨肉瘤细胞的增殖,诱导骨肉瘤细胞凋亡,从而对骨肉瘤产生治疗和抑制作用。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠足趾滑膜组织自噬和凋亡的影响

目的:观察艾灸对佐剂性关节炎(AA)大鼠足趾滑膜组织自噬和凋亡相关指标的影响,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组、甲氨蝶呤组、雷帕霉素组,每组9只。采用弗氏完全佐剂注射法制备AA大鼠模型。艾灸组予艾灸“足三里”“关元”,每次20 min,每日1次;甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤(0.35 mg/kg)灌胃,每周2次;雷帕霉素组予雷帕霉素腹腔注射(1 mg/kg),隔日1次;3组均干预3周。采用足趾容积测量仪检测大鼠左后肢足趾容积,ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,透射电镜观察大鼠足趾关节滑膜细胞自噬体,Western blot法检测大鼠足趾滑膜组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)C1、磷酸化(p)-mTORC1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、死亡受体(Fas)、死亡受体配体(FasL)蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠足趾容积增大(P<0.01),血清中IL-1、TNF-α含量显著升高(P<0.001),足趾滑膜组织中p-mTORC1蛋白表达量升高(P<0...     

TUNEL法检测新风胶囊对AA大鼠滑膜胸腺及胃粘膜细胞凋亡的影响

目的 :观察以终末脱氧核糖核酸转移酶介导的原位缺口末端标记 (ter分钟aldeoxynucleotidyltrans ferasemediatedDUTPnickendlabeling ,TUNEL)技术检测新风胶囊对佐剂性关节炎 (adjuvantarthritis ,AA)大鼠滑膜、胸腺及胃粘膜细胞凋亡的影响 ,探讨新风胶囊的作用机制。方法 :采用弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎 (AA)大鼠模型 ,设立正常对照组、模型对照组、甲氨喋呤 (MTX)对照组、雷公藤多甙 (TriperygiumWilfordiiPolycorideTablet,TPT)对照组和新风胶囊 (XinfengCepsule ,XFC)治疗组。记录各组大鼠的关节炎指数及体重变化 ,应用流式细胞仪 (FCM)以TUNEL法测定各组大鼠滑膜、胸腺及胃粘膜细胞凋亡率。结果 :与治疗前相比 ,XFC、TPT及MTX组治疗后大鼠的关节炎指数显著降低 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,XFC组治疗后AA大鼠体重显著增加 (P <0 .0 5 ) ,而TPT及MTX组体重无显著变化 (P >0 .0 5 ) ;模型组滑膜及胸腺细胞凋亡率显著低于、胃粘膜细胞凋亡率显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,XFC组滑膜及胸腺细胞凋亡率显著高于、胃粘膜细胞凋亡率显著低于模型组、TPT及MTX组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论 :XFC与MTX、TPT一样能降低AA大鼠关节炎指数 ,在增加AA大鼠体重、促进滑膜、胸腺细胞凋亡及抑制胃粘膜细胞凋亡方     

青蒿琥酯对佐剂性关节炎滑膜组织中凋亡因子Fas／FasL及Bcl-2／Bax表达影响的实验观察

目的观察青蒿琥酯对佐剂性关节炎滑膜组织中凋亡因子Fas/FasL及Bc l-2/Bax表达的影响。方法雄性W istar大鼠60只随机分为6组,空白组、模型组(对照组)、青蒿琥酯I组(高剂量组)、青蒿琥酯Ⅱ组(低剂量组)、青蒿琥酯加甲氨喋呤组及甲氨喋呤组。除空白组外,各实验组用完全弗氏佐剂制备成佐剂性关节炎模型。记录用药干预后各组关节肿胀指数,免疫组化法检测滑膜组织中凋亡相关因子Fas/FasL,Bc l-2及Bax的表达情况。结果各实验组关节肿胀指数明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。滑膜组织中Fas/FasL及Bax被上调,Bc l-2被下调,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论实验证实了青蒿琥酯有诱导佐剂性关节炎病情缓解的作用,上调滑膜组织中Fas/FasL及Bax,下调Bc l-2的表达而诱导滑膜细胞凋亡可能是其机制之一。     

当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织内外凋亡途径关键因子的影响

目的:观察当归拈痛汤对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织内、外凋亡途径中关键调控因子表达水平的影响,进一步探讨该方防治类风湿关节炎的作用机制.方法:将40 只SPF 级SD 大鼠随机分为正常组、模型组、当归拈痛汤组(11.34 g·kg-1)和雷公藤组(9.45 mg·kg1),除正常组外,其余各组采用灭活结核分支杆菌佐...     

蒺藜提取物对阿霉素所致大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:研究蒺藜提取物对阿霉素(ADR)所致大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:将蒺藜提取物灌胃于ADR所致心肌细胞凋亡的大鼠,采用电镜对大鼠心肌细胞进行超微结构观察,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化SP法检测心肌细胞Bax,Bcl-2蛋白的表达。结果:ADR累积用量20 mg·kg-1可致大鼠心肌细胞凋亡,蒺藜提取物中、高剂量组(40,60 mg·kg-1)可减轻心肌细胞超微结构的损伤,蒺藜提取物中、高剂量组较模型组均可显著降低细胞凋亡率(P<0.05)。蒺藜提取物中、高剂量组可显著上调Bcl-2表达(P<0.01)、下调Bax表达(P<0.05)。结论:蒺藜提取物可抑制ADR所致大鼠心肌细胞的凋亡,对阿霉素所致的心脏毒性有保护作用。     

黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠脾细胞增殖与凋亡的影响研究

目的：探讨黄芪糖蛋白（HuangQi Glycoprotein,HQGP）对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）大鼠脾细胞增殖与凋亡的影响。方法：建立大鼠AA模型,1周后无菌取脾,制备细胞悬液,按浓度梯度给药处理,MTT法检测HQGP对体外培养的AA大鼠脾细胞增殖的影响。大鼠分组建模,1周后按浓度梯度给药治疗,3周后取各组大鼠脾组织,HE法观察各组大鼠脾组织形态学变化,TUNEL法检测大鼠脾组织原位细胞凋亡水平,免疫组织化学法检测大鼠脾组织中凋亡蛋白Bax、Bcl-2与核内转录因子Foxp3的表达水平。结果：MTT检测结果显示HQGP可显著抑制AA大鼠脾T细胞的增殖（P〈0.01）。TUNEL检测结果显示HQGP显著提高AA大鼠脾组织的凋亡细胞比例,免疫组化显示HQGP可回调脾组织中Bax、Bcl-2的蛋白表达水平,上调转录因子Foxp3的表达水平。结论：HQGP主要通过抑制脾T淋巴细胞的增殖来抑制机体的细胞免疫功能,同时通过调节Bax、Bcl-2的表达水平来诱导AA大鼠脾细胞凋亡,上调Foxp3的表达以提高机体的免疫耐受水平。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜组织低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察艾灸对佐剂性关节炎(AA)大鼠踝关节滑膜组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响,探讨艾灸抑制类风湿关节炎关节滑膜血管新生、改善关节症状的作用机制。方法:60只健康成年雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和甲氨蝶呤组,每组15只。采用右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂法制备AA大鼠模型。艾灸组予双侧“足三里”“关元”和“阿是穴”艾灸治疗,每次20 min,每日1次,连续干预3周;甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤(0.35 mg/kg)灌胃给药,每周2次,连续干预3周。采用足趾容积测量仪检测大鼠足跖容积;HE染色法观察大鼠踝关节滑膜组织病理情况;免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠踝关节滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠的足趾容积和踝关节滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白表达均明显升高(P<0.01),滑膜组织出现明显增生且有大量新生血管形成;与模型组比较,艾灸组和甲氨蝶呤组大鼠的足趾容积和踝关节滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),滑...     

彝药劳伤药对佐剂性关节炎大鼠滑膜病变及NF-κB蛋白表达的影响

目的:观察劳伤药乙醇浸膏对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜病变及滑膜细胞核转录因子(NF-κB)蛋白表达的影响,探讨其治疗类风湿性关节炎(RA)可能的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分成6组:空白组,模型组,尼美舒利组,劳伤药高、中、低剂量组,采用大鼠右后足趾皮内注射0.l m L弗氏完全佐剂,致炎形成AA模型,给药28 d后处死大鼠,HE染色观察踝关节滑膜组织形态学变化,酶联免疫吸附法测定大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、NO、PGE_2含量,免疫组化法检测滑膜组织中NF-κB的蛋白表达水平。结果:与模型组比较,劳伤药组(5 g/kg)明显减轻滑膜细胞的增生,减少滑膜层和滑膜下层淋巴细胞浸润,明显降低AA大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、PGE_2的含量和升高IL-10的含量,降低关节滑膜组织NF-κB的蛋白含量。结论:劳伤药能下调滑膜组织中NF-κB的蛋白表达,从而促进细胞凋亡,改善滑膜病变。     

灯盏花素对肾损害小鼠肾组织细胞凋亡及相关蛋白的影响

目的:观察灯盏花素对顺铂致小鼠肾损害肾组织细胞凋亡及相关蛋白的影响。方法:将昆明种小鼠随机分为对照组、模型组、灯盏花素25,50 mg.kg-1组。除对照组外,其余各组腹腔注射顺铂8 mg.kg-1制备小鼠肾损害模型,灯盏花素组分别灌胃给药,连续7 d。给药结束后收集小鼠尿液进行尿蛋白(Upr)/尿肌酐(Ucr)及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG-U)测定。原位末端标记法(TUNEL)检测小鼠肾脏细胞凋亡状况,免疫组化法检测肾脏相关凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:模型组小鼠Upr/Ucr及NAG-U较对照组明显升高,肾组织的凋亡指数增加,肾组织细胞凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达增强,Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05,P<0.01),而2个灯盏花素实验组Upr/Ucr、NAG-U较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01),其中灯盏花素50 mg.kg-1小鼠较模型组肾组织细胞凋亡指数、Bax表达、Bax/Bcl-2减少,Bcl-2的表达增强(P<0.05,P<0.01)。结论:Upr/Ucr与NAG-U可作为顺铂肾损害的评估指标。灯盏花素减轻顺铂肾损害的机制可能与增强凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,降低Bax表达及Bax/Bcl-2的比值有关。     

二紫胶囊对生精障碍大鼠凋亡调控基因的影响

目的:观察二紫胶囊对生精障碍大鼠凋亡调控基因的影响.方法:将40只健康雄性大鼠分为模型组、对照组、二紫胶囊高、低剂量组,以环磷酰胺注射液40 mg· kg-1,ip制造大鼠生精障碍模型,分别ig生理盐水、二紫胶囊浸膏(4.8,2.4g·kg-1),连续60 d,用TUNEL法检测大鼠睾丸生精细胞凋亡,免疫组化法测定Bax和Bcl-2蛋白在大鼠睾丸组织中的表达.结果:与模型组相比较,二紫胶囊高、低剂量组生精细胞凋亡指数明显下调[(7.16±1.47)％,(13.83±2.40)％ vs(20.50±2.17)％],Bax蛋白表达明显下调[(16.01±2.02),(26.67±1.79)vs(9.94±1.14)](P＜0.01),Bcl-2蛋白表达明显上调[(40 12±3.06),(22.87±2.94)vs(16.26±1.03)](P＜0.01).结论:二紫胶囊能通过下调Bax和上调Bcl-2表达,减少生精细胞凋亡的发生.