自制GICA试纸条检测样品中人血红蛋白的初步研究

目的建立一种国产的简易快速,自测式胶体金免疫层析测试条(gold-immunochromatography assay,GICA)用于检测人血红蛋白(人Hb).方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗人血红蛋白抗体(抗人Hb抗体),制成免疫层析法试纸条.样品中人Hb抗原与试纸条上金标抗体结合后沿着硝酸纤维膜移动,与硝酸纤维膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色沉淀线.结果GICA试纸条仅与人Hb发生特异性反应,与牛、马、羊、猪等动物血清无交叉反应.检测人Hb参比品溶液,灵敏度可达30 ng/ml,与进口商品试纸条符合率为90%.结论GICA检测人Hb样品特异性强,灵敏性较高,简便快速,无需特殊仪器设备,具有广泛应用价值.     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病表面抗原(HBsAg)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs),制成免疫层析测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动。与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果GICA试条只与HBsAg有特异性反应,与乙型肝炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应,检测中国药品生物制品检定所HBsAg标准品,灵敏度可达1ng/ml。用GICA与酶免疫法比较检测了395份不同血清标本中HBsAg,两法符合率为99%,结论GICA检测血清中的HBsAg特异性强、灵敏度高、简便快速、无需特殊仪器设备,有广泛应用价值。     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原395例临床体会

目的:建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。方法:采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗—HBs),制成免疫层析检测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果:GICA试条只与HBsAg有特异性反应,与乙型肝炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应。检测中国药品生物制品检定所HBsAg标准品,灵敏度可达1ng/ml。用GICA与酶免疫法比较检测了395份不同血清标本中HBsAg,两法符合率为99.0％。结论:GICA检测血清中的HBsAg特异性强,灵敏度高,简便快速,无需特殊仪器设备,有广泛应用价值。     

胶体金标试条与酶联检测乙肝表面抗原的比较

胶体金免疫层析(GICA)是1997年采用胶体金标记MC抗HBs,以硝酸纤维素膜为载体进行层析检测HBsAg的技术[1],它具有简便、快速、特异性高、试剂稳定的优点,已在免疫检验中广泛应用[1,2].目前越来越多的实验室采用GICA试纸条测定乙型肝炎表面抗原(HB8Ag)[3].为进一步弄清GICA与EIA的阳性符合率.作者对100份健康体检者血清和55份确诊为乙肝患者的血清同时用EIA与GICA进行了检测,其结果报告如下:     

CMV抗体免疫金快速检测试剂盒的开发与初步应用

目的: 开发一种低成本、简单易用的基于免疫金渗滤法的试剂盒,以用于检测分析血清中的巨细胞病毒抗体. 方法: 将用人工合成的人巨细胞病毒(HCMV)抗原表位的线性肽和分支多抗原肽分别划线固定于硝酸素纤维膜上,制成免疫层析检测试纸条,血清中IgG与测试条上金标记物结合后沿硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗原结合形成肉眼可见的红色带条并用GICA和ELISA试剂盒对比检测120份血清标本中抗HCMV抗体. 结果: 分支多抗原肽制成的免疫层析检测试纸条的灵敏度为97.9%,特异度为87.5%,两法符合率为95.8%. 结论: GICA检测血清中的抗HCMV抗体特异性强,灵敏度高,简便快速,有广泛应用价值.     

创伤弧菌快速检测试纸条的研制

摘要：目的研制一种敏感、特异、快速的免疫试纸条,用于创伤弧菌检测。方法用创伤弧菌（ATCC27562）菌体抗原免疫
家兔,制备兔抗创伤弧菌多克隆抗体;采用柠檬酸盐还原法制备胶体金颗粒并标记多克隆抗体,纯化后滴加在玻璃纤维素
膜上;在硝酸纤维素膜上包被兔抗创伤弧菌多克隆抗体和羊抗兔IgG,分别作为检测线和质控线;将处理后的硝酸纤维膜、
玻璃纤维素膜与样品垫、吸水纸组装成试纸条,4 ℃保存并定期检测;设阳性及阴性对照,对本试纸条检测的灵敏度、特异
性进行检测。结果将试纸条插入样品溶液中,20~30 min内即可显示结果,其检测灵敏度为2×106 CFU/ml;特异性检测显
示本试纸条与溶血性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌等12种菌株均无交叉反应;稳定性检测表明该试纸条可4 ℃保
存4个月。结论本研究构建出创伤弧菌多克隆检测试纸条,具有较高的灵敏度和较好的特异性,简便,20~30 min即可获
得检测结果,可用于创伤弧菌的快速检测。     

双单克隆抗体的免疫层析一步法的建立及测定hCG

建立应用一对单克隆抗体（ＭｏＡｂ）的免疫层析一步法测定ｈＣＧ。测定在硝酸纤维素膜上进行，上面包被一条抗αｈＣＧＭｏＡｂ。用胶体金标记抗βｈＣＧＭｏＡｂ，作为显示试剂。浸入尿样后，试纸条由于形成ＡｂｈＣＧＡｂ胶体金而出现紫红色线。本法灵敏度为２５ｍＩＵ／ｍｌ。假阳性率为０；假阴性率为０。干扰物质在高浓度条件下对测定均无明显影响。当促黄体生成素浓度高至５００ｍＩＵ／ｍｌ时不出现交叉反应。说明本方法测试准确，性能稳定     

胶体金免疫层析法快速检测霍乱弧菌的初步应用

目的 为检验胶体金免疫层析法(GICA)试纸条检测霍乱弧菌(VC)的灵敏性及其实际应用意义。方法 以VC菌株模拟标本检验GICA的检测灵敏度,并与培养法平行检测流行期间的霍乱标本进行比较。结果 GICA检测纸条检出VC的下限为10^5cfu/ml,比培养法灵敏度低,但已达到检测条原定技术指标;实际应用检出率比培养法稍低,其差异无显性意义。结论 应用GICA试纸条检测VC的方法具有快速、简便、特异和适合基层单位使用的优点。     

胶体金免疫层析法检测抗幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体

目的　建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白 A(Cag A)抗体的胶体金免疫层析法(GICA) .方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体颗粒 ,标记葡萄球菌 A蛋白 (SPA) ,将重组的 Cag A抗原划线固定于硝酸纤维素膜上 ,制成免疫层析检测试条 .血清中 Ig G与测试条上金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动 ,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条 .结果　用 GICA与 EL ISA试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗 Cag A抗体 ,本方法的特异性为95 .8% ,敏感性为 97.3% ,两法符合率为 96 .6 % .结论　 GICA检测…     

基于近红外免疫层析技术食源性诺如病毒快速检测方法研究

目的建立一种快速、灵敏检测食源性GⅡ型诺如病毒的近红外免疫层析法。方法采用低噪声激发式荧光染料标记鼠抗诺如病毒单克隆抗体,将诺如病毒多克隆抗体和羊抗鸡Ig Y多克隆抗体喷涂于硝酸纤维膜上分别作为检测线和质控线,制备靶向于诺如病毒衣壳蛋白的免疫层析试纸条,研制检测诺如病毒的近红外免疫层析试纸条。结果采用便携式低噪声激发式荧光扫描仪分别扫描质控线和检测线,以检测线荧光强度检测值实现样本的定性检测,在45 min内即可完成检测。该试纸条与肠道病毒EV71、腺病毒、轮状病毒、甲肝病毒均无交叉反应。结论 GⅡ型诺如病毒的近红外免疫层析法具有良好的特异性和较高的灵敏度。通过效果评价试验发现,与荧光RT-PCR、胶体金法相比较,所建立的近红外荧光法检测时间最短,检测限低于胶体金法。因此,近红外免疫层析法可用于食品中GⅡ型诺如病毒的高效检测,为食品安全监管提供可靠的技术支持。     

胶体金免疫层析法和ELISA法在HBsAg检测中的方法学评价

目的：对胶体金免疫层析法（GICA）和ELISA两种方法检测HBsAg进行方法学比较。方法：用胶体金纸条和ELISA试剂同时检测HBsAg血清标本。结果：与ELISA相比,胶体金免疫层析法检测HBsAg的灵敏度为96%,特异性为100%。胶体金免疫层析法与ELISA相比特异性基本一致,但胶体金免疫层析法灵敏度稍差。结论：HBsAg胶体金纸条与ELISA试剂相比有较高的特异性,但灵敏度有待于进一步提高。     

新型冠状病毒IgM-IgG抗体检测试剂盒的制备及对15例患者临床应用初试

目的 开发一种快速检测SARS-CoV-2病毒的IgM-IgG抗体的胶体金免疫层析检测试剂盒,并优化研发及应用策略,分析IgM-IgG抗体联合检测在新冠病毒检测中的临床应用价值。 方法 表达纯化SARS-CoV-2病毒S蛋白的RBD和NTD结构域,通过胶体金制备工艺包被抗原及多克隆抗体,制备IgM-IgG抗体检测试剂盒;收集15例阳性患者的血清进行抗体检测分析,计算试剂盒检测的阳性率,分析SARS-CoV-2抗体IgM-IgG对病毒响应的过程。 结果 在15例核酸RT-PCR检测阳性的患者血清样本中,IgM-IgG联合抗体检测的阳性率为73.33%,其中IgM阳性占总标本数的53.33%,IgG阳性占总标本数的60.00%;5例境外人员中有3例为抗体阳性;对患者的流行病学分析发现,病毒感染1周以上的患者共7例,抗体检测全部为阳性;抗体检测试剂盒的灵敏度73.33%,特异性95.00%。 结论 IgM-IgG联合抗体检测法具有快速、方便、易操作等特点,可以作为核酸检测的辅助手段对疑似患者(尤其是境外人员及无症状患者)进行初筛;且IgM-IgG的检测结果可以作为推测患者病毒感染过程的依据;快速检测IgM-IgG抗体将为COVID-19疾病的诊断和治疗提供帮助。     

胶体金检测抗环瓜氨酸肽抗体性能评价

目的对胶体金免疫层析（GICA）技术检测患者血清抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体进行性能验证和评价。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和GICA,同时对104例可疑类风湿性关节炎（RA）患者进行抗-CCP抗体检测,计算两种方法检测结果的阴性符合率、阳性符合率、总符合率以及Kappa值。用±20％临界值浓度标本各重复检测20次,记录阴性和阳性结果数,验证GICA法重复性。结果两种方法检测结果比较,阴性符合率、阳性符合率、总符合率、Kappa值分别为92％、100％、96％、0．92。GICA法检测＋20％临界值浓度标本结果阳性数为20次,阳性率100％;-20％临界值浓度标本结果阴性数为15次,阴性率为75％。结论GICA法与ELISA法检测抗-CCP抗体结果一致性良好,而且GICA方法简单、快速,敏感性和特异性较高,是早期筛查类风湿性关节炎值得推广的方法。     

胶体金免疫层析法快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的对比研究

目的 评估胶体金免疫层析法快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯酶。方法 收集西安交通大学第二附属医院血培养79株肠杆菌目细菌,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌57株和碳青霉烯类敏感肠杆菌目细菌22株,按照NG-Test CARBA 5试剂盒说明书检测待测菌株五种主要碳青霉烯酶[klebsiella pneumoniae carbapenemase(KPC)、new delhi metallo-β-lactamase(NDM)、verona integron-encoded metallo-β-lactamase(VIM)、imipenemase metallo-β-lactamase(IMP)、oxacillinase48(OXA)-48]。碳青霉烯酶基因经PCR测序确认。结果 57株血培养碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌,NG-Test Carba 5在15 min内检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM和NDM+IMP,其敏感度和特异度分别为100%和100%。金山川碳青霉烯酶耐药检测试剂检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM和NDM+IMP的敏感度和特异度分别为94.74%和1...     

纳米金层析免疫法快速检测黄热病病毒

目的:探索快速、简便、高效、灵敏、低廉地检测黄热病病毒感染的方法。方法:用纳米金免疫层析试验原理研制了一种快速诊断试纸。将制备的纳米金颗粒用SPA标记形成金-SPA复合物,其复合物结合在聚酯膜上制成金标结合释放垫;通过基因工程技术在大肠杆菌中克隆和表达黄热病E蛋白,经纯化的抗原蛋白被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,样品中的病毒抗体通过免疫反应与膜上的抗原蛋白结合,待其渗过膜片后,与金-SPA复合物结合形成肉眼可见的红色线条。结果:用已确证的21份黄热病阳性血清和30份阴性血清进行了试验,该快速检测方法与ELISA方法无显著差异。结论:该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5min。与传统的ELISA法相比,具有方便快速、成本低廉、应用范围广等优点。     

纳米金增敏 cTnI 金标免疫层析试验研究

目的：研究一种纳米金增强心肌肌钙蛋白I（cTnI）金标免疫层析试验灵敏度的试验方法。方法以血清cTnI金标免疫层析试验为基础,以改性溶液做预处理,盐酸羟胺还原氯金酸制备纳米金颗粒,使金标抗原抗体反应复合物的颗粒增大,金标处颜色加深,显色信号增强,提高检测灵敏度,并以此做批内和日间重复性检测。结果盐酸羟胺还原氯金酸增敏cTnI金标免疫层析试验,较增敏前检测灵敏度提高16倍,在10～15 min内可完成,批内和日间重复性较好,试验结果快速、稳定、可靠。结论盐酸羟胺还原氯金酸制备纳米金颗粒在一定改性溶液环境下,对人血清cTnI金标免疫层析试验有一定增敏效果,重复性较好,结果稳定可靠,可为适时、快速、灵敏的现场检测方法提供一定技术支持。     

胶体金免疫层析试纸检测乙型肝炎病毒表面抗原的评价

目的：对四种胶体金免疫层析测定（GICA）试纸条检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）进行评价，以此为实验室选择提供依据。方法：采用GICA法和酶免疫（ELA）法对定值的HbsAg样品和1210份病人血清标本同时测定，测定其敏感性、特异性和物理特性。结果：四种GILA对表面抗原的最小检出量为1－5ng/ml。与ELA法比较检出率为92．7％－99．1％，未发现假阳性及前带现象。结论：GICA检测血清中HbsAg敏感性低于ELA法，成本较高，但特异性强，简便快速，无需特殊仪器设备，适用急诊和献血员的现场采血前的筛选，有一定的应用价值。     

快速胶体金免疫层析法在疟原虫感染诊断中的应用

目的探讨快速胶体金免疫层析法(GICA)在疟原虫感染诊断中的应用价值。方法以传统的血涂片法为金标准,以抗疟药治疗有效性作为回顾性诊断依据,分析GICA在疟原虫感染诊断中的特异性、敏感性。结果检测发热病人334例,其中间日疟特异性达94.16%,敏感性达75%;恶性疟特异性98%,敏感性81%。结论GICA敏感性、特异性较高,具有较高的可靠性,且方便快捷适于现场应用。     

斑点免疫金渗滤试验检测淋球菌抗原的应用研究

目的：建立一种简易快速的斑点免疫金渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）用于检测淋球功抗原。方法：用抗淋球菌单克隆抗体为包被抗体,以胶体金标记兔抗淋球菌ＩｇＧ作探针,制成ＤＩＧＦＡ反应盒。持异性强。与脑膜炎球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、大肠杆菌等无交交丸反应,淋球菌抗原最低检出量为６３．００ｎｇ／ｍｌ。经５１例临床分离株测定,敏感性为９８．０４％,特异性１００％。结论：检测淋球菌抗原的ＤＩＧＦＡ是一种简易快速、敏感、