5-FU联合热疗诱导SW480细胞凋亡及其对细胞周期的影响

目的探讨5-Fu（5-氟尿嘧啶）联合热疗诱导SW480细胞（人结直肠癌细胞株）的增殖抑制率、细胞周期各时相的影响及亚细胞结构改变。方法应用MTT比色法检测SW480细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期各时相的变化,电子显微镜观察亚细胞结构变化。结果联合热疗组与5-FU组、热疗组相比差异非常显著,P〈0．01。且SW480细胞周期进程发生明显改变,G1期细胞增多、S期细胞减少、G2／M细胞相对增多,细胞凋亡率升高。电子显微镜结果显示染色质趋边凝集、线粒体膜、溶酶体膜、内质网膜系统明显改变,可见凋亡小体。结论5-FU联合热疗可显著提高SW480细胞增殖抑制率,抑制SW480细胞G1期向S期转化进程,诱导细胞凋亡及亚细胞结构改变。     

5-氟尿嘧啶联合热疗对人肝癌细胞株的增殖抑制作用

目的 探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)联合热疗诱导人肝癌细胞株(SSMC7721细胞)的增殖抑制率,细胞凋亡率及其对细胞周期进程的影响,旨在为肝细胞癌的综合治疗提供理论依据.方法 应用MTT比色法检测不同条件下对SSMC7721细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化及凋亡率,电子显微镜检测亚细胞结构改变.结果 单纯热疗组、5-FU组及联合组对SSMC7721细胞抑制率分别为18.4%、28.3%和52.7%,与对照组相比差异均有统计学意义(P均＜0.01).流式细胞仪结果显示:G1期细胞增多,S期细胞减少、G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05),电子显微镜结果显示细胞核染色质趋边凝集、线粒体肿胀.结论 5-FU联合热疗能显著提高SSMC7721细胞的增殖抑制率,抑制SSMC7721细胞G1期向S期转化进程,诱导SSMC7721细胞凋亡及亚细胞结构改变.     

苯乙酸钠联合热疗诱导Hep-2细胞凋亡及其对细胞周期各时相的影响

目的探讨苯乙酸钠（sodium phenylacetate,NaPA）联合热疗诱导人喉癌细胞株（Hep-2细胞）的增殖抑制率、细胞凋亡率及其对细胞周期进程的影响,旨在为喉癌的综合治疗提供理论依据。方法应用MTT比色法检测不同条件下对Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化,荧光显微镜检测Hep-2细胞的细胞凋亡率。结果单纯热疗组、NaPA组及联合组对Hep-2细胞的抑制率分别为24.8%,27.5%和45.3%,与对照组相比差异显著,P〈0.01;流式细胞仪结果显示G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,组间比较差异显著;荧光染色结果：单纯热疗组与NaPA组细胞凋亡率无差异,但联合组效果明显。结论 NaPA联合热疗能显著提高Hep-2细胞的增殖抑制率,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡。     

姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡机制的实验研究

目的 探讨姜黄素对Jurkat（人T淋巴细胞白血病细胞株）细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化和亚细胞结构改变。方法 应用MTT（噻唑蓝）比色法流式细胞术、电子显微镜技术检测姜黄素对Jurkat细胞的增殖抑制率，细胞周期进程及凋亡率。结果 姜黄素对Jurkat细胞有明显的抑制作用，且呈剂量依赖性，流式细胞仪分析，G1期细胞增高，S期细胞减少，G2／M期细胞相对增多，凋亡率增加。亚细胞结构，细胞空化，染色质趋边凝集。结论 姜黄素能显著抑制Jurkat细胞增殖，阻止G1期细胞向S期转化进程。促进Jurkat细胞凋亡。     

姜黄素诱导K562细胞凋亡及其对细胞周期各时相影响

目的 探讨姜黄素诱导人红白血病细胞（K562）凋亡机制及其对细胞周期各时相变化。方法 应用噻唑蓝（MTT）比色法和流式细胞术检测不同浓度的姜黄素对K562细胞增殖抑制率。细胞周期及凋亡率变化，并通过电子显微镜观察其亚细胞结构改变。结果 姜黄素对K562有明显的增殖抑制作用，且呈剂量依赖性，流式细胞术结果显示，G1期细胞增多，S期细胞减少，G2／M期细胞相对增多，电子显微镜结果显示，细胞空化，线粒体肿胀，染色质趋边凝集。结论 姜黄素对K562细胞有明显的抑制作用，阻止G1期细胞向S期细胞转化进程，诱导K562细胞凋亡。     

榄香烯对人卵巢癌SKOV3细胞株生物学作用机制

目的观察外源性榄香烯注射液对人卵巢癌SKOV3细胞株生物学行为影响。旨在为寻找卵巢癌治疗的特效药物提供理论依据。方法应用MTT(四甲基偶氮唑蓝)比色法观察不同浓度的榄香烯注射液对SKOV3细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测不同浓度的榄香烯注射液对SKOV3细胞增殖周期各时相变化及凋亡率。透射电子显微镜观察SKOV3亚细胞结构变化。结果不同浓度的榄香烯注射液对SKOV3细胞增殖均有抑制作用。呈明显的剂量依赖性,流式细胞仪结果显示,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少。G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高。结论榄香烯注射液对SKOV3细胞有较强的敏感性和药物浓度依赖性,其机制可能与榄香烯注射液影响SKOV3细胞周期进程并调节凋亡相关蛋白基因表达有关     

姜黄素诱导Hep-2细胞凋亡及其对细胞周期各时相的影响

目的探讨姜黄素对Hep-2（人喉癌细胞株）细胞诱导分化机制，为喉癌治疗提供理论依据。方法应用MTT（塞唑兰）比色法和流式细胞仪检测Hep-2细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化和凋亡率，并通过电子显微镜观察经姜黄素诱导分化后的亚细胞结构改变。结果姜黄素对Hep-2细胞增殖有明显的抑制作用，且呈剂量依赖性，流式细胞仪分析，G1期细胞增多，S期细胞减少，C2／M期细胞相对增多，亚细胞结构、细胞空化，染色质趋边凝集。结论姜黄素能够抑制Hep-2细胞增殖，阻止G1期细胞向S期的进程，促进Hep-2细胞凋亡。     

SEA对PLA801D细胞体外生物学行为影响及相关机制

目的探讨葡萄球菌肠毒素A（stap-hylococcal enterotoxins,SEA）对人肺巨细胞癌株（PLA801D）细胞生长、增殖、凋亡等生物学行为的影响,为人肺癌的生物治疗提供实验依据。方法 MTT比色法检测不同浓度的SEA对PLA801D细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化,透射电子显微镜检测PLA801D亚细胞水平改变。结果不同浓度的SEA对PLA801D细胞增殖抑制率分别为22.8%、33.7%和42.1%,与对照组相比差异显著。流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,电子显微镜下见PLA801D细胞膜破裂,线粒体肿胀,可见凋亡小体改变。结论 SEA能显著抑制PLA801D细胞的增殖抑制率,抑制G1期向S期细胞转化进程,诱导PLA801D细胞凋亡及亚细胞结构改变。     

土贝母制剂诱导Tca8113细胞凋亡及其对细胞周期各时相的影响

目的 探讨土贝母制剂对Tca8113细胞（人舌癌细胞株）诱导分化机制,为舌癌治疗提供依据。方法 应用MTT（塞唑蓝）比色法和流式细胞仪检测不同浓度的土贝母制剂对Tca8113细胞增殖抑制率及细胞周期各相的变化和凋亡率,并通过电子显微镜观察其亚细胞结构改变。结果 土贝母制剂对Tca8113细胞细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性,流式细胞仪分析G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,亚细胞结构,细胞空化。线粒体肿胀,染色质趋边凝集。结论 土贝母制剂能够抑制Tca8113细胞增殖,阻止G1期细胞向S期的转化进程,诱导Tca8113细胞凋亡。     

不同温度热疗联合多西紫杉醇对人乳腺癌细胞株增殖的影响

目的探讨亚高温热疗联合多西紫杉醇对人乳腺癌增殖的影响及其相关机制。方法采取四甲基偶氮唑盐法观察多西紫杉醇对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖的影响,且筛选出有效浓度。将体外培养的MCF-7细胞分为空白对照组、多西紫杉醇组及热疗与多西紫杉醇联合组,热疗与多西紫杉醇联合组依据不同温度(39.0℃、39.5℃、40.0℃、40.5℃、41.0℃)分为5个亚组。对各组细胞予以相应干预后,采取流式细胞仪检测各组细胞凋亡状况及细胞生长周期变化。结果随着热疗温度上升,细胞凋亡比例渐渐增高,41.0℃热疗时凋亡率[(38.90±6.88)%]最高,显著高于单一应用多西紫杉醇与其他各亚组;c-Jun氨基末端激酶在热疗温度为41.0℃时达到最高值,而细胞外调节蛋白激酶1/2、p-p38蛋白表达在热疗温度为40.0℃达到最高值,同其余亚组相比,差异均有统计学意义(P0.05);热疗与多西紫杉醇联合等亚组G2/M期细胞比例明显多于单一使用多西紫杉醇组,抑制MCF-7细胞周期进程的效应明显强于多西紫杉醇,且随着热疗温度增加,G2/M期细胞比例增高,差异有统计学意义(P0.05)。热疗与多西紫杉醇联合组丝裂原活化蛋白激酶通路蛋白表达较多西紫杉醇组显著增强,Bcl-2蛋白表达则明显降低,而Bax蛋白表达有轻微升高。结论亚高温热疗联合多西紫杉醇干预能抑制人乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,具有协同抗肿瘤效应,其治疗机制可能与激活细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶、p38蛋白有关。     

氧化苏木素抑制人乳癌MCF-7细胞生长及其相关机制

目的:探讨氧化苏木素对人乳癌MCF-7细胞生长的抑制作用及其相关作用机制.方法:MTT实验检测氧化苏木素对乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制;PI染色流式细胞仪检测细胞周期的变化;Western blot 实验检测细胞CD1和β-Catenin蛋白的变化.结果:氧化苏木素显著性的抑制了人乳癌MCF-7细胞的生长,将细胞周期阻滞在G1期;0、7.5、15、30 μmol/L的氧化苏木素处理MCF-7细胞48 h后,G1期在整个细胞周期中的比率从(48.10±3.48)％依次增加到(59.56±4.31)％、(70.37±3.71)％、(77.75±6.12)％;Western blot结果显示氧化苏木素下调了MCF-7细胞CD1和3-Catenin蛋白的表达.结论:氧化苏木素具有高效的抑制人乳癌MCF-7细胞增殖的活性,抑制Wnt/β-Catenin信号通路,下调CD1蛋白是其抑制细胞生长的主要机制.     

基因FoxM1介导DFOG抑制人乳腺癌细胞生长和诱导凋亡的研究

目的探讨7-二氟甲氧基-5,4′-二-正辛烷氧基金雀异黄素(DFOG)对人乳腺癌细胞生长、凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-453细胞。平皿集落形成法测定DFOG对乳腺癌细胞集落形成率的影响;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡及分析细胞周期分布;Western blotting分析转录因子FoxM1及其下游蛋白CDK1、cyclin B、survivin、p27kip1表达。结果 DFOG以浓度依赖的方式抑制人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-453细胞生长和诱导凋亡,并且伴随G2/M期细胞周期阻滞。DFOG能下调FoxM1及其下游蛋白CDK1、cyclin B、survivin表达,上调p27kip1蛋白表达。通过siRNA干扰技术下调FoxM1表达能增强DFOG对乳腺癌细胞的诱导凋亡作用。结论 DFOG显著抑制人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-453细胞生长和诱导凋亡,下调FoxM1表达可能是其作用机制之一。     

三氧化二砷联合TPA对K562细胞作用的实验研究

本研究旨在观察三氧化二砷（As2O3）单独或联合12-氧-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯（TPA）对髓系白血病细胞系K562细胞的细胞周期、分化和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.采用TPA、As2O3、TPA联合As2O3分别作用于K562细胞株,在倒置显微镜下观察细胞形态改变,应用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,Annexin V法及琼脂糖凝胶电泳观察K562细胞凋亡情况,集落形成实验检测K562集落形成率,流式细胞术检测K562细胞分化及细胞周期改变,Western b1ot检测P38及p-P38蛋白的表达.结果表明,TPA联合As2O3对K562细胞的促凋亡作用较单药组明显增强;As2O3使K562细胞集落形成能力降低;TPA促使K562细胞向单核巨噬细胞分化;TPA使K562细胞阻滞于G1期,As2O3使K562细胞阻滞于G2期,TPA可增强As2O3对细胞周期的影响;TPA与As2O3联用增强As2O3促磷酸化P38蛋白表达的作用.结论：TPA与As2O3联合作用能增强As2O3对K562细胞的促凋亡作用及对其细胞周期的影响.     

Benzyl isothiocyanate-induced apoptosis in human breast cancer cells is initiated by reactive oxygen species and regulated by Bax and Bak

Epidemiologic studies have revealed an inverse correlation between dietary intake of cruciferous vegetables and the risk of breast cancer. We now show that cruciferous vegetable constituent benzyl isothiocyanate (BITC) effectively suppresses growth of cultured human breast cancer cells (MDA-MB-231 and MCF-7) by causing G(2)-M phase cell cycle arrest and apoptosis induction. On the other hand, a normal mammary epithelial cell line (MCF-10A) is significantly more resistant to growth arrest and apoptosis by BITC compared with breast cancer cells. The BITC-mediated cell cycle arrest was associated with a decrease in levels of proteins involved in regulation of G(2)-M transition, including cyclin B1, cyclin-dependent kinase 1, and cell division cycle 25C. The BITC-induced apoptosis correlated with induction of proapoptotic proteins Bax (MCF-7) and Bak (MDA-MB-231 and MCF-7) and down-regulation of antiapoptotic proteins Bcl-2 and Bcl-xL (MDA-MB-231). The SV40-immortalized mouse embryonic fibroblasts derived from Bax and Bak double knockout mice were significantly more resistant to BITC-induced DNA fragmentation compared with wild-type mouse embryonic fibroblasts. The BITC treatment caused rapid disruption of the mitochondrial membrane potential, leading to cytosolic release of apoptogenic molecules, which was accompanied by formation of autophagosome-like structures as revealed by transmission electron microscopy. The BITC-mediated apoptosis was associated with generation of reactive oxygen species and cleavage of caspase-9, caspase-8, and caspase-3. Apoptosis induction by BITC was significantly attenuated in the presence of a combined superoxide dismutase and catalase mimetic EUK134 as well as caspase inhibitors. In conclusion, the present study reveals a complex signaling leading to growth arrest and apoptosis induction by BITC.     

间充质干细胞对小鼠辐射早期造血组织细胞的细胞周期及凋亡的影响

本研究探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对急性放射病小鼠重要造血免疫器官的早期辐射防护作用及其机制。BALB/c小鼠受5.5Gy60Coγ射线照射后随机分为两组。MSC组照射后1小时内,经尾静脉输注BALB/c小鼠的MSC2.5×107/kg;对照组在照射后输注等体积生理盐水。用流式细胞术检测两组小鼠照射后6、12、24和72小时的骨髓、胸腺和脾细胞的凋亡及细胞周期变化;用免疫组织化学法检测照射后12小时胸腺和脾脏P53蛋白表达情况。结果显示:照射后6小时各器官细胞出现G0/G1及G2/M期阻滞,S期下降。胸腺细胞,脾细胞和骨髓细胞分别于照射后12、6和24小时后发现G0/G1期阻滞峰值,随后G0/G1期细胞减少,S和G2/M期细胞增多,72小时时G0/G1期细胞数低于正常值,S期细胞数高于正常值。胸腺和脾细胞周期改变快于骨髓细胞,改变幅度也大于骨髓细胞。MSC组细胞周期变化速度和程度高于对照组。流式细胞术显示各器官细胞照射后6小时凋亡率明显增加,12小时达高峰,24小时后逐渐降到正常,脾与胸腺细胞凋亡率高于骨髓细胞。MSC组的胸腺细胞照射后12小时、脾细胞照射后12、24小时、骨髓细胞照射后24小时的凋亡率均少于对照组。免疫组织化学检测显示,照射后12小时MSC组小鼠脾脏胸腺细胞P53蛋白表达低于对照组。结论:MSC加快辐射小鼠骨髓、胸腺和脾脏细胞的周期变化,减少细胞凋亡,促进受损的造血和免疫器官修复,从而对受照小鼠起到早期辐射保护作用。     

Prohibitin 表达及对乳腺癌细胞系MCF-7 抑制生长的机制研究

目的　该研究从细胞水平研究了抗增殖蛋白（prohibitin）高表达在乳腺癌细胞中的生物学功能,并研究其抑制 MCF-7 生长的分子机制。方法　使用基因重组法构建pEGFP-PHB 重组质粒,脂质体瞬时转染乳腺癌细胞系MCF-7, real time-PCR 和Western Blotting 验证其高表达后,检测细胞生物学功能。包括:MTT（噻唑蓝）法检测细胞生长、流 式细胞仪检测细胞周期与凋亡、肿瘤相关基因P53, Bcl-2, ERBB2 及E2F-1 的检测和Transwell 小室侵袭实验。两样本差 异比较采用t 检验,多样本差异采用单因素方差分析。结果　MTT 显示PHB 高表达组在转染24, 48 和72h 对细胞生长 的抑制率分别为20.98%, 14.93% 和62.94%,差异有统计学意义;流式细胞仪检测细胞分裂周期,phb 高表达G1 期无差异, S 期降低,G2 期增加;凋亡检测中,高表达组细胞总凋亡率为33.67%±8.68%,阴性对照组的凋亡率12.13%±3.76%, 空白对照组凋亡率为6.99%±2.33%,高表达组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义（F=18.992, P=0.003）; PHB 高表达时,肿瘤相关蛋白P53 和ERBB2 的表达量高于对照组（t=4.590, P=0.044; t=9.489, P=0.011）,Bcl-2 表达降 低,差异有统计学意义(t=7.143, P=0.019),E2F-1 蛋白各组间差异无统计学意义(t=2.175, P=0.162);PHB 高表达组细胞 侵袭能力低于对照组,差异有统计学意义（t=3.221, P=0.01;t=4.057, P=0.003）。结论　PHB 高表达抑制S 期DNA 的合 成,阻滞细胞于G2/M 期,增加细胞凋亡率,抑制肿瘤细胞MCF-7 的生长。其与肿瘤相关蛋白P53 和ERBB2 的增高, Bcl-2 表达的降低紧密相关。