Skp2和p27kip1蛋白在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达、定位及意义

目的 探讨B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中Skp2和p27kip1蛋白的表达、定位及意义.方法 用免疫组织化学方法检测72例B-NHL和14例反应性增生淋巴结组织Skp2、p27kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;用免疫荧光双标记技术检测淋巴瘤Raji细胞株Skp2和p27kip1蛋白的定位情况.结果 Skp2蛋白在B-NHL组织中的表达高于反应性增生的淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达高于惰性组;p27kip1蛋白在B-NHL组织中的表达低于反应性增生淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达低于惰性组;skp2蛋白主要在Raji细胞的胞浆中表达,p27kip1蛋白主要表达于胞核.结论 在B-NHL组织中,Skp2的高表达和p27kip1的低表达可能与其发生发展有关;skp2和p27kip1在Raji细胞中的亚细胞定位与其生物学功能一致.     

细胞周期素E和增殖细胞核抗原在胃癌中表达的预后价值

目的：研究细胞周期素E和增殖细胞核抗原在胃癌中的表达及与胃癌预后的关系。方法：采用免疫组化S-P法检到128例胃腺癌组织中cyclin E蛋白和PCNA的表达，分析其表达状况及生存率与临床、病理参数的相关性。结果：128例胃癌中57例cyclin E蛋白阳性表达(占44．5％)，PCNA LI≥50％者60例(占47％);cyclin E蛋白表达水平和PCNA LI均与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、脉管侵犯、运距离转移及TNM分期呈正相关(P＝0．001)，与肿瘤组织学分级无相关性(P＞0．05)。PCNA LI与cyclin E表达呈相关性(P＝0．001)。多因素分析PCNA与cyclin E蛋白表达水平分别是独立的预后指标。结论：PCNA和cyclin E的异常表达与胃癌生物学行为密切相关;cyclin E异常表达合并PCNA LI≥50％的胃癌患者手术后预后最差。     

B细胞非霍奇金淋巴瘤患者细胞增殖和凋亡相关指标检测结果分析

目的:分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B cell non-Hodgkin's lymphoma,B-NHL)患者细胞增殖和凋亡相关指标的检测结果。方法:分别检测72例B-NHL患者的经病理诊断证实的病灶组织石蜡包埋标本(实验组)和50例淋巴结反应性增生患者的淋巴结石蜡标本(对照组)的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,BCL-2)表达情况,并分析其与病理因素的关系。结果:实验组PCNA阳性细胞百分率及XIAP、BCL-2阳性率均显著高于对照组(P0.05);Ⅲ-Ⅳ期B-NHL患者PCNA阳性细胞百分率显著高于Ⅰ-Ⅱ期患者(P0.05);不同病理因素B-NHL患者XIAP和BCL-2阳性率并无明显差异(P0.05);PCNA低阳性表达组无进展生存期显著长于PCNA高阳性表达组(P0.05);XIAP~+组与XIAP-组无进展生存期并无显著差异(P0.05);BCL-2~+组与BCL-2~-组无进展生存期亦无显著差异(P0.05)。结论:增殖因子PCNA与凋亡因子XIAP、BCL-2均参与了B-NHL的发生,其中PCNA阳性情况对临床分期有明显影响。     

P27kip1与细胞周期素D3在非霍奇金淋巴瘤中的表达、定位及相互关系

目的探讨P27^kip1和细胞周期素（cyclin）D3在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达、定位、相互关系及意义.方法采用免疫组织化学方法检测100例NHL患者病理标本及20例反应性增生淋巴结标本中P27^kip1、cyclin D3及细胞增殖指标Ki-67的表达.采用Western blot、免疫荧光双标法和激光共聚焦技术检测3种淋巴瘤细胞系细胞内P27^kip1和cyclin D3的表达、定位.结果 P27^kip1在NHL组织中的阳性率低于反应性增生淋巴结,且与肿瘤侵袭性以及增殖活性（Ki-67指数,Ki-67 LI）呈负相关;cyclin D3在NHL组织中的阳性率高于反应性增生淋巴结,且与肿瘤侵袭性以及增殖活性呈正相关;P27^kip1与cyclin D3呈负相关.但在少数病例出现P27^kip1的异常高表达并伴有cyclin D3和Ki-67的高表达.P27^kip1与cyclin D3在3种淋巴瘤细胞系的表达水平不一,在Raji细胞中P27^kip1与cyclin D3共同高表达并且共定位.结论 P27^kip1的低表达,cyclin D3的高表达与多数NHL的发生发展有关;部分病例或细胞系中P27^kip1的异常高表达及其与cyclin D3相互作用可能是NHL发生的另一机制.     

PCNA和P21蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

目的探讨P21蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclearantigen,PCNA)在子宫内膜癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测正常子宫内膜组织20例(对照组)、子宫内膜非典型增生组织9例(非典型增生组)和子宫内膜腺癌组织57例(子宫内膜癌组)中P21蛋白和PCNA的表达情况。结果对照组P21蛋白阳性表达率明显高于非典型增生组与子宫内膜癌组(P<0.05),子宫内膜癌组PCNA高增殖率明显高于对照组与非典型增生组(P<0.05);P21蛋白阳性表达率及PCNA高增殖率在子宫内膜组织的手术-病理分期、分化程度及淋巴结转移方面差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜癌组PCNA高增殖率P21表达阳性者为37%,P21表达阴性者为80%,差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜癌组织P21蛋白阳性表达率与PCNA高增殖率呈负相关(r=-0.414,P=0.002)。结论 P21蛋白和PCNA异常表达可能在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用。     

IgH基因克隆性重排检测在B细胞淋巴瘤诊断中的应用

目的建立B-NHL临床诊断中IgH基因克隆性重排检测基本方法.方法应用PCR方法,采用IgH FR3A引物,检测了7例B-NHL及4例反应性增生的淋巴结石蜡样本中IgH基因重排情况.结果黏膜相关型边缘区B细胞淋巴瘤（MALT）3例中有2例（2/3）,弥漫大B细胞淋巴瘤2例中2例（2/2）,滤泡淋巴瘤1例中0例（0/1）,套细胞淋巴瘤1例中1例（1/1）检测到IgH基因的克隆性重排.总检测率为5/7（71%）,4例淋巴结反应性增生病例病例均为IgH基因的多克隆性重排.结论PCR-FR3A在鉴别淋巴组织肿瘤性或反应性增生和最终确诊B-NHL上是一项有效的辅助方法.     

Livin和增殖细胞核抗原蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:研究livin蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)组织中的表达,探讨它们之间的关系,并了解其临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测58例喉鳞癌组织和10例正常喉黏膜livin和PCNA蛋白的表达水平。结果:喉鳞癌组织中有livin蛋白的表达,其阳性表达率为82.76%(48/58);平均PCNA标记指数(labelingindex,LI)为(70.47±15.39)%。Livin蛋白表达阳性的喉鳞癌细胞PCNALI为(74.76±12.27)%,高于livin蛋白表达阴性者的(49.87±12.01)%;有颈淋巴结转移的喉鳞癌中livin蛋白阳性率(97.22%)高于无颈淋巴结转移者(59.09%);生存期5年以上的livin蛋白阳性表达率(70.37%,19/27)比生存期5年内者(93.55%,29/31)低。正常喉黏膜未检出阳性结果。结论:喉鳞癌组织中有livin蛋白的表达,其表达与PCNA正相关;livin蛋白能促进喉鳞癌颈淋巴结转移;Livin蛋白阳性表达者的预后较差。     

Livin在非霍奇金淋巴瘤中表达的临床意义

本研究旨在探讨凋亡抑制因子Livin在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及其临床意义。应用免疫组织化学法检测Livin蛋白在30例非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin′s lymphoma,NHL)患者及11例淋巴结反应性增生(reac-tive hyperplasia of lymph node)患者淋巴结中的表达,并应用real-time PCR对其中20例非霍奇金淋巴瘤、10例淋巴结反应性增生及4例正常人的淋巴结组织中Livin mRNA表达水平进行检测,分析livin蛋白和mRNA表达与NHL患者临床表现及其特征的相关性。结果表明,NHL患者淋巴结组织中Livin mRNA表达水平与正常淋巴结组织以及淋巴结反应性增生组织比较均显著增高(RQ中位数分别为12.4vs0.34和12.4vs0.61)(p0.01)。30例非霍奇金淋巴瘤中有16例Livin蛋白表达阳性,阳性率为53.3%;11例淋巴结反应性增生患者仅1例表达阳性,阳性率为9.1%;而且观察到Livin蛋白主要在细胞浆中表达,在胞核内极少见有表达。研究还显示,无论是LivinmRNA表达还是蛋白表达均与NHL的临床分期(p=0.023;p=0.009)、B症状(p=0.015;p=0.026)、血β2微球蛋白(β2-MG,p=0.031;p=0.012)及血清乳酸脱氢酶(LDH,p=0.037;p=0.007)密切相关,而两者的表达与年龄、性别及分型无明显相关性(p0.05)。结论:Livin mRNA及蛋白在NHL患者中表达增高,并与临床多项指标存在相关性,因此Livin表达水平对评价患者临床分期及预后可能具有重要的指导意义;对Livin在NHL中的作用机制的深入探讨将有助于揭示NHL的发生、发展及治疗的机理,并有望成为NHL未来治疗的重要突破点。     

弥漫大B细胞淋巴瘤survivin、p63、Ki-67的表达及临床意义

目的 探讨p63蛋白和生存survivin蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义。方法采用免疫组化染色法检测p63蛋白、survivin蛋白及Ki-67在52例淋巴瘤（DLBCL）患者和10例反应性增生淋巴结石蜡标本中的表达。结果p63和survivin在DLBCL中表达阳性率分别为63．5％和76．9％。p63在反应性增生淋巴结呈阴性表达,survivin在反应性增生淋巴结中阳性率为20％,p63和survivin的表达在两组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。在DLBCL中p63、survivin表达之间有相关性,二者的表达与Ki-67增值指数有相关性。p63、survivin阳性组复发率分别为68．0％和71．4％高于阴性组22．2％和30．8％。结论P63和survivin在DLBCL中异常表达,与DLBCL的增殖有关,二者表达是临床治疗和预后的不利因素。     

EGFR、cyclinD1和CD31在子宫内膜腺癌的表达及其临床意义

目的探讨EGFR、cyclin D1、CD31在子宫内膜腺癌组织中的表达及临床病理学意义。方法采用免疫组织化学检测20例正常增生期子宫内膜、30例子宫内膜不典型增生、71例子宫内膜腺癌组织中EGFR、cyclin D1和CD31蛋白表达,并计算微血管密度(MVD)。结果 EGFR、cyclin D1在子宫内膜腺癌组的阳性表达率及MVD明显高于正常增生期子宫内膜组和子宫内膜不典型增生组(P<0.05);EGFR的阳性表达率在子宫内膜不典型增生组比正常增生期子宫内膜组高(P<0.05);EGFR、cyclin D1的过表达在子宫内膜腺癌组明显比不典型增生组高(P<0.01),正常增生期子宫内膜组无过表达;EGFR的阳性表达与子宫内膜腺癌的临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05);cyclin D1的阳性表达与子宫内膜腺癌的组织病理学分级、临床分期有关(P<0.05);MVD与子宫内膜腺癌的临床分期、组织病理学分级和淋巴结转移有高度相关(P<0.01);EGFR的阳性表达在子宫内膜腺癌MVD>x组比MVD≤x组高(P<0.05),EGFR与cyclin D1阳性表达呈正相关(P<0.01)。结论 EGFR、cyclin D1在子宫内膜腺癌组织中高表达及高MVD可促进子宫内膜腺癌的发生与发展;EGFR可通过微血管生成,加速子宫内膜腺癌的侵袭和转移。     

存活蛋白和P63蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及其对细胞凋亡和增殖的作用

本研究探讨存活蛋白（Survivin）和P63蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤（B—NHL）发生发展中的可能作用及其与细胞凋亡和增殖的相互关系。应用免疫组织化学SP法和TdT介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术检测43例B-NHL和10例反应性增殖淋巴组织（RHL）中的survivin和P63蛋白表达以及细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）的水平。结果表明：survivin和P63在43例B-NHL中表达的阳性率分别为69．8％（30／43）和82．7％（36／43），survivin和P63在10例RHL中表达阳性率分别为10％（1／10）和40％（4／10），survivin在侵袭性B—NHL中的阳性率明显高于惰性B—NHL（83．3％vs46．2％，P〈0．01），P63蛋白表达差异无显著性意义；survivin阳性表达与凋亡指数（AI）和增殖指数（PI）呈正相关（r=0．429，P〈0．01；r=0．348，P〈0．01），P63蛋白阳性表达与AI和PI呈正相关（r=0．451，P〈0．01；r=0．369，P〈0．05），B—NHL的AI和PI呈显著正相关（r=0．598，P〈0．001）。结论：survivin可能参与了B—NHL的凋亡和增殖调控机制，P63作为癌基因参与B—NHL发生，二者可能共同影响细胞增殖和凋亡。     

淋巴结细针穿刺标本的流式细胞术分析

目的 评价淋巴结细针穿刺标本流式细胞术分析方法在诊断淋巴结病变,以及在恶性淋巴瘤和淋巴结反应性增生鉴别诊断中的应用价值.方法 对99份疑为淋巴结病变的淋巴结针吸标本涂片进行常规细胞学分析,并结合病理活组织检查确诊分型.使用三色标记的流式细胞术方法分析针吸标本中各细胞免疫表型(CD3、CD3、CD4、CD5、CD10、CD19、CD20、CD23、CD45、K、λ、FMC7、 CD34),确定标本中各细胞组成及有无异常表型细胞.对于淋巴瘤病例,则按照WHO分型标准,根据免疫表型进一步确定其亚型,并对各类病例流式细胞术分型结果和细胞学结果进行比较.结果 99份标本中,细胞涂片检出淋巴瘤40例,转移癌29例,反应性增生、坏死、结核30例,有2例非霍奇金淋巴瘤(NHL)被误诊为反应性增生;对其中18例NHL进行了病理活组织检查,其中包括B淋巴细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)16例,T淋巴细胞非霍奇金淋巴瘤2例.流式细胞术分析结果显示,99份标本中检出淋巴瘤35例(淋巴母细胞淋巴瘤4例,T淋巴细胞病变1例,其余30例为B-NHL);有28份B-NHL检测到K或λ轻链限制性表达,其K:λ或λ:K大于3:1,B淋巴细胞所占比例为(73.2±27.2)%,其中26份能根据免疫标志物的表达确定其亚型.经病理活组织检查确定为B-NHL的16份标本中,仅2例滤泡淋巴瘤与流式细胞术分型结果不一致.对于反应性增生及转移癌等标本,流式细胞术分析未查见异常淋巴细胞,其k:λ或λ:k均小于3:1.结论 淋巴结细针穿刺标本的流式细胞术分析有助于淋巴结病变的诊断和鉴别诊断,并可确定NHL的亚型.     

Primary small-bowel non-Hodgkin's lymphoma: a study of clinical features, pathology, management and prognosis

The records of 34 patients diagnosed with primary small bowel non-Hodgkin's lymphoma during a 10-year period between January 1996 and December 2005, including 27 cases for which complete follow-up records were available, were studied. Abdominal pain (70.6% of patients) was the main presenting symptom, followed by intestinal obstruction (38.2%). The most common primary site was the ileum (58.8%), followed by the jejunum (26.5%) and duodenum (17.6%); one case had tumours at two sites in the small bowel. Twenty-seven patients had small bowel B-cell lymphoma (24 diffuse large B-cell lymphoma; three mucosa-associated lymphoid tissue B-cell lymphoma) and seven patients had small bowel T-cell lymphoma. Cumulative survival in patients with small bowel B-cell lymphoma was higher than that in patients with small bowel T-cell lymphoma. Data on 16 male and eight female patients with diffuse large B-cell lymphoma showed that 62.5% of these patients presented with disease stages I or II and 37.5% with stages III or IV. Cumulative survival in patients at stages IE or IIE was significantly higher than that of patients at stages IIIE or IVE. Four of five patients who died from diffuse large B-cell lymphoma had abnormal levels of lactate dehydrogenase and serum albumin.     

石蜡包埋组织恶性淋巴瘤免疫球蛋白重链基因重排研究

目的探讨免疫球蛋白重链基因重排现象应用于石蜡包埋非何杰金氏淋巴瘤（NHL）病理诊断及鉴别诊断中的意义，分析影响实验结果的可能因素。方法应用B细胞性淋巴瘤细胞株Raji作为阳性对照，免疫球蛋白重链V区及J区特异性引物，单轮PCR扩增方法对存档的29例恶性淋巴瘤（B细胞性对例，T细胞性2例），6例淋巴组织反应性增生，2例上皮性肿瘤石蜡包埋组织进行了研究。结果70．4％（19／27）的B细胞性淋巴瘤免疫球蛋白重链基因存在重排现象，并均表现为单克隆性。而T细胞性淋巴瘤以及非淋巴瘤性病变无重排现象。本研究所用方法免疫球蛋白重链基因重排的阳性检出率低于半筑巢式peR扩增（80％）。结论免疫球蛋白重链基因重排在B细胞性淋巴瘤具有特异性，能够用于该类疾病诊断及鉴别诊断中。     

Detection of T-regulatory cells has a potential role in the diagnosis of classical Hodgkin lymphoma

Previous studies have demonstrated an increase in T-regulatory cells in the involved lymph nodes and peripheral blood of patients with Hodgkin lymphoma. Our study examined whether the detection of T-regulatory cells by flow cytometry could distinguish classical Hodgkin lymphoma (CHL) from benign cases and B-cell non-Hodgkin lymphomas (B-NHL). We measured CD4, CD25, and CD152 in 14 CHLs, 2 nodular lymphocyte-predominant Hodgkin lymphomas, 31 B-NHLs, and 54 benign cases. All T-regulatory cell parameters, including percent lymphocytes CD4+/CD152+ and CD4+/CD25+/CD152+, and mean and median CD152 expression in CD4+/CD25+ lymphocytes, were higher in CHL than in B-NHL and benign. Mean CD152 in CD4+/CD25+ lymphocytes distinguished CHL from benign with 79% sensitivity and 100% specificity, and from B-NHL with 71% sensitivity and 90% specificity. Overall, our results show that T-regulatory cells are increased in CHL and their detection may be a useful tool in differentiating CHL from other entities.     

Flow cytometric immunophenotyping including Bcl-2 detection on fine needle aspirates in the diagnosis of reactive lymphadenopathy and non-Hodgkin's lymphoma

BACKGROUND: Fine-needle aspiration (FNA) with immunophenotyping by immunocytochemistry (IC) on cytospins has recently received increased consideration in the diagnosis of lymphoma. The aim of our study was to establish the diagnostic value of a four-color flow cytometric (FCM) panel, including cytoplasmic Bcl-2, in cytologic diagnosis of malignant non-Hodgkin's lymphoma (NHL) and reactive lymphoid hyperplasia (RH). METHODS: We investigated 424 FNAs from 396 patients. FCM panel included lambda/kappa/CD19/CD5, CD23/CD10/CD20/CD19, CD4/CD7/CD8/CD3 and Bcl-2/CD10/CD19/CD3 in fluorescein isothiocyanate, phycoerythrin, and peridinin chlorophyll protein or a tandem conjugate of R-phycoerythrin and indodicarbocyanine and allophycocyanin. Bcl-2 expression was evaluated separately for gated B and T cells. RESULTS: In 97% of 172 RH samples, FCM was concordant with the diagnosis. FCM gave correct immunologic diagnosis in 95% of low-grade B-cell NHLs, 78% of high-grade B-cell NHLs, and 53% of T-cell lymphomas. Malignant B cells had higher Bcl-2 expression than did reactive B and T cells. This helped to establish a correct diagnosis especially in cases where no clear-cut monoclonality could be shown by kappa/lambda staining or where there was no expression of surface light chain. The highest Bcl-2 expression was found in follicular lymphomas. CONCLUSION: Our FCM panel allowed precise classification of NHL in FNA material in 89.5% of all samples. Bcl-2 staining can be recommended for primary differentiation between reactive hyperplasia and NHL.