莱菔硫烷对膀胱癌细胞侵袭能力的影响及机制研究

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对膀胱癌细胞侵袭性及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响和作用机制。方法:常规培养膀胱癌细胞株T24后,采用Transwell侵袭小室法观察SFN对T24细胞体外侵袭能力的影响;采用Western blot法检测SFN作用T24细胞后EMT标志蛋白的表达变化。结果:10μmol/L SFN作用24h后的T24细胞穿透能力显著下降,明显诱导EMT标志蛋白E-cadherin的表达增高并下调vimentin的表达(P0.05)。结论:SFN能降低膀胱癌细胞的侵袭能力,其作用机制与抑制膀胱癌细胞EMT过程有关。     

十字花科植物种子中莱菔硫烷含量的比较

 目的研究十字花科植物种子中莱菔硫烷的含量和测定方法。方法采用反相高效液相色谱法对不同种属、不同产地的十字花科植物种子提取物中莱菔硫烷的含量进行了系统的分析。结果十字花科植物种子中莱菔硫烷的含量存在显著差异,且青花菜种子中莱菔硫烷的含量最高,可达4.748mg·g^-1。结论青花菜种子是制备莱菔硫烷的优良原材料。     

莱菔硫烷联合茶多酚对蛋白激酶A锚定蛋白95、细胞周期蛋白E2在肺癌组织中表达的影响研究

目的：探讨莱菔硫烷联合茶多酚对肺癌组织中蛋白激酶A锚定蛋白95、细胞周期蛋白E2的表达的影响。方法选取经病理证实并手术治疗的肺癌患者56例,随机分为治疗组和对照组。采用ELISA测定组织中蛋白激酶A锚定蛋白95、细胞周期蛋白 E2的浓度,免疫组化法测定组织中蛋白激酶 A 锚定蛋白95、细胞周期蛋白 E2的表达并统计微血管密度（MVD）,Western blotting法检测组织中蛋白激酶A锚定蛋白95、细胞周期蛋白E2蛋白表达情况。结果肺癌患者组织中蛋白激酶A锚定蛋白95、细胞周期蛋白E2的浓度水平高于治疗组（P＜0.05）;肺癌患者癌变组织中蛋白激酶A锚定蛋白95、细胞周期蛋白E2的表达均呈阳性,且对照组织中MVD高于治疗组（P＜0.05）,Western blotting法检测对照组组织中蛋白激酶A锚定蛋白95、细胞周期蛋白E2表达高于治疗组（P＜0.05）。结论蛋白激酶A锚定蛋白95、细胞周期蛋白E2在肺癌患者组织中均存在表达升高,与肿瘤生长呈正相关,莱菔硫烷联合茶多酚用药对两种蛋白起到抑制作用。     

莱菔硫烷诱导人肝癌HepG2细胞凋亡与Fas/FasL途径的相关性研究

目的 研究莱菔硫烷对人肝癌HepG2细胞Fas、FasL、Bid蛋白表达的影响,探讨其诱导HepG2细胞凋亡过程中Fas/FasL途径的作用.方法 Caspase-8试剂盒检测莱菔硫烷对HepG2细胞Caspase-8活性的影响;流式细胞仪检测莱菔硫烷对HepG2细胞中Fas、FasL、Bid蛋白表达的影响.结果 莱菔硫烷10、20、40 μmol/L作用于HepG2细胞48 h,可显著升高HepG2细胞Caspase-8活性(P＜0.01);可使HepG2细胞Fas、FasL蛋白的表达显著升高(P＜0.01);莱菔硫烷20、40 μmol/L时,可显著提高Bid蛋白的表达(P＜0.01),上述作用均呈剂量相关性.结论 激活Fas/FasL途径可能是莱菔硫烷诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的重要机制之一.     

莱菔硫烷抑制HepG-2细胞MMP-9的活性以及ERK1/2磷酸化

目的:探讨莱菔硫烷(su lforaphane,SFN)对肝癌细胞系HepG-2细胞基质金属蛋白酶(m atrix m etallo-prote inase,MMP)-9的活性及对细胞外信号调节激酶(extracelluar signal-regu lated k inase,ERK)1/2磷酸化的影响。方法:体外培养HepG-2细胞,用SFN预处理后,四氮唑盐酶还原法检测细胞的增殖情况,以及LDH的漏出率;明胶酶谱实验和实时荧光定量PCR检测MMP-9的酶活性和mRNA表达水平;W estern b lot检测ERK1/2的磷酸化情况;最后采用定量实时PCR法检测SFN对HepG-2细胞表达Raf激酶抑制蛋白(Raf k inase inh ib itorprote in,RK IP),Spred-1和Spred-2 mRNA的影响。结果:0,20,40,50μM SFN处理24~72h后,均能抑制HepG-2的生长,LHD漏出率实验显示SFN对细胞无明显的毒性;SFN能明显抑制MMP-9的活性和mRNA的表达水平,同时能抑制ERK1/2的磷酸化。另外,SFN能明显提高RK IP、Spred-1和Spred-2 mRNA的表达水平。结论:SFN对HepG-2细胞生长以及MMP-9的活性具有抑制作用,它可能通过抑制ERK1/2磷酸化,诱导RK IP,Spred-1和Spred-2表达而发挥抗肿瘤的作用。     

莱菔硫烷诱导HepG-2细胞G2/M期阻滞及其对Cdk1和CyclinB1蛋白表达的影响

目的：研究莱菔硫烷（SFN）在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法：10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对HepG2细胞内Cdk1、p-Cdk1（Thr14）和CyclinB1蛋白表达的影响。结果：SFN作用于HepG-2细胞48h后,随着SFN浓度的增大,G2/M期细胞比例逐渐升高,当SFN浓度达到40μmol·L-1时,G2/M期细胞比例达到31.95%,且出现凋亡峰;随SFN浓度的增大,细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达量显著降低（P〈0.01或P〈0.05）,同时p-Cdk1（Thr14）的表达显著升高（P〈0.01或P〈0.05）。结论：SFN可诱导人肝癌HepG-2细胞发生G2/M期阻滞;SFN可通过下调HepG-2细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达、上调p-Cdk1（Thr14）的蛋白表达水平,进而抑制Cdk1-CyclinB1复合物的形成和活化使人肝癌HepG-2细胞阻滞在G2/M期。     

温度、光照及pH对蟾酥提取液中指标成分稳定性的影响

目的:考察温度、光照及pH对蟾酥提取液中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、总蟾毒色胺稳定性的影响。方法:采用HPLC测定蟾酥提取液中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量,检测波长296 nm,流动相乙腈-水(58∶42);利用UV测定蟾酥提取液中总蟾毒色胺的含量,检测波长559 nm。分别考察高温(60,40℃),强光照射[(4 500±500)Lx]及不同pH(40℃,pH分别为4.32,4.99,5.73,6.47,6.97,7.75)条件下蟾酥提取液放置0,5,10 d后华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、总蟾毒色胺的含量变化。结果:60℃条件下放置10 d后3种指标成分降解率均5%;40℃及(4 500±500)Lx条件下华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的降解率均5%;总蟾毒色胺在上述条件下的降解率均5%。华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、总蟾毒色胺分别在pH 5.73,6.47,6.47时降解最慢。结论:蟾酥提取液中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基受高温及强光照射的影响较小,总蟾毒色胺受高温及强光照射的影响较大;pH是影响蟾酥提取液中3种指标成分稳定性的主要因素,不同pH条件对3种指标成分的稳定性有不同程度的影响。     

pH值对西洋参水溶液稳定性影响的考察

西洋参水溶性制剂易产生沉淀现象，本文采用恒温加速试验，以西洋参水溶液的主要有效成分西洋参总皂甙为考察指标，大孔吸附树脂-比色法测定其含量，探讨pH值对西洋参水溶液稳定性的影响。结果显示：在pH＜6．51，西洋参总皂甙的水解反应随溶液酸度的增大而加快；在pH＞6．51，水溶液中西洋参总皂甙几乎不水解而稳定存在。此结论可应用于改善西洋参水溶性制剂的澄明度。     

添加剂对丹参酚酸B水溶液稳定性的影响

丹参酚酸B是唇形科植物丹参Salvia miltior-rhiza Bunge中主要的水溶性成分,具有抗心肌缺血、缺氧[1]、改善血液流变性[2]等多种药理活性。其化学组成是二分子丹参素与一分子原紫草酸缩合而成的四聚咖啡酸类化合物。丹参酚酸B的化学性质很不稳定。实验中发现水溶液中的丹参酚酸B在低质量浓度(<0.1mg/mL)下室温过夜损失接近30%,其分解产物为丹参素、原儿茶醛等。大多数丹参制剂均采用丹参酚酸B的分解产物丹参素和原儿茶醛作为主要有效成分或质量检测指标,但丹参酚酸B分解过程尚存在诸多不确定因素,制剂质量的均一性难以得到保证。因此目…     

温度及pH值对赤芍总苷稳定性的影响

目的考察温度、pH值对赤苷总苷稳定性的影响。方法在不同的温度及pH值条件下,放置一定时间,再采用高效液相色谱(HPLC)法测定赤芍总苷中芍药苷的含量变化。结果芍药苷在高于60℃的条件下不稳定。结论赤芍总苷水溶液在高温条件下不稳定。     

姜黄素无水乙醇溶液的光稳定性研究

 目的采用UV-VIS、HPLC-UV、HPLC-MS等研究方法对姜黄素无水乙醇溶液光稳定性进行考察,研究姜黄素无水乙醇溶液的光降解动力学以及光解产物。方法姜黄素的无水乙醇溶液采用254nm紫外光照射。采用反相高效液相色谱法,以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(39∶12∶2∶47)为流动相,425nm为检测波长研究姜黄素的光降解动力学;以甲醇-冰醋酸-水(30∶3∶67)为流动相,310nm为检测波长研究姜黄素的无水乙醇溶液光降解产物动力学;HPLC-MS采用电喷雾离子源(ESI)和离子阱分析器,50-500m/z内扫描研究姜黄素无水乙醇溶液光解产物。结果UV-VIS法检测姜黄素的最大吸收峰位随着光照时间的延长向短波长移动。254nm紫外光照射24h,500,50,5mg·L^-1样品的浓度越低其降解速率越快;LC-MS检测光解产物中含有香草醛。结论姜黄素无水乙醇溶液对光不稳定,在光照作用下发生降解。     

安吉生溶液的稳定性考查

用恒温加速试验考查了当归乙酸乙酯提取物水溶液（安吉生溶液）的化学动力学，并求得该药液的有效期（ｔ＿（０．９））为１年。     

安吉生溶液的稳定性考查

用恒温加速试验考查了当归乙酸乙酯提取物水溶液(安吉生溶液)的化学动力学,并求得该药液的有效期(t_0.9)为1年。     

日光和温度对绿原酸供试液稳定性的影响

目的：研究绿原酸溶液的稳定性。方法：利用薄层扫描法对绿原酸供试液在不同光线强度和温度条件下的稳定性进行了研究。结果：置棕色瓶,冰箱保存时供试液最稳定;置无色瓶,室温条件下绿原酸最易分解。结论：可供检验工作者参考。     

阿魏酸水溶液稳定性研究

根据化学动力学原理,采用恒温加速试验方法对阿魏酸水溶液的化学稳定性进行了研究,通过高效液相色谱法测定样品中阿魏酸含量。结果表明,阿魏酸在水溶液中的分解符合一级反应,以经典法和简易法计算,预测得到室温下(25℃)阿魏酸在水溶液分解10％时间(即药物有效期)为1.59a和1.43～1.70a。     

筋骨痛消丸的稳定性研究

采用加速破坏和留样观察2种方法对筋骨痛消丸进行了稳定性考察。依样品中丹参酮Ⅱ_A含量变化,求得室温下有效期(t_0.9))分別为1.89年和2.30年。综合其它指标分析,暂定使用期限为2年。     

橙皮苷在碱性溶液中的稳定性研究

目的：研究橙皮苷在碱性溶液中的稳定性,为其提取、纯化工艺的质量控制以及制剂产品的开发提供实验依据。方法：采用RP-HPLC法测定不同温度、pH、加热时间下橙皮苷的含量变化。结果：加热条件下橙皮苷碱性溶液发生了降解,含量随加热温度的升高和加热时间的延长,呈不断下降趋势;弱碱条件下较稳定。结论：为保证溶液中橙皮苷的稳定,在生产过程中应使溶液处于低温（50℃以下）及弱碱条件下,并尽量减少溶液的受热时间。     

苦参素注射液与3种输液配伍的稳定性考察

目的　研究苦参素注射液在 5 %葡萄糖 ,10 %葡萄糖 ,0 .9%氯化钠 3种输液中的稳定性。方法　用紫外分光光度法测定苦参素注射液的含量 ,并观察输液的外观、p H及苦参素紫外光谱的变化。结果　苦参素液射液在 0 .9%氯化钠中 0 .6 7h内含量在 96 %以上 ,而在 5 %葡萄糖和 10 %葡萄糖注射液中 8h内含量在10 0 %以上。结论　可以同氯化钠注射液、葡萄糖注射液配伍。