鼻咽癌中p53、bcl-2、bax、Fas的表达及其相互关系的研究

目的　了解凋亡相关基因p53、bcl2、bax、Fas在鼻咽癌(NPC)中的表达及相互关系。方法　在67例NPC、15例癌旁组织中用免疫组化技术标记bcl2、p53、bax、Fas;用免疫双标记技术同时标记p53与bcl2;从中选取15例NPC用DNA原位杂交技术检测bcl2基因扩增情况。结果　①67例NPC中p53蛋白阳性38例(567%),bcl2蛋白阳性48例(716%),bax蛋白阳性28例(418%),Fas蛋白阳性29例(433%);②NPC中,p53蛋白与bcl2蛋白的阳性率显著高于癌旁组织,而bax蛋白与Fas蛋白的阳性率却显著低于癌旁组织;③p53蛋白与bcl2蛋白阳性表达间呈正相关。④bcl2/bcl2同二聚体在NPC中占优势;p53蛋白表达在bcl2/bcl2同二聚体占优势的肿瘤中显著高于在bax/bax同二聚体占优势的肿瘤中。结论　①p53、bcl2、bax、Fas在NPC中有较高的阳性表达率,与NPC的发生、发展关系密切;②NPC中p53与bcl2蛋白表达呈正相关,提示NPC中p53蛋白主要不是突变型,有异于其它肿瘤。③抑制细胞凋亡的bcl2/bcl2同二聚体在NPC中占优势,尤其是在泡状核细胞癌中,提示其与NPC的发生及分化有关。     

鼻咽癌中p53、bcl-2、bax、Fas的表达及其相互关系的研究

目的　了解凋亡相关基因 p53、bcl 2、bax、Fas在鼻咽癌 (NPC)中的表达及相互关系。方法　在 67例NPC、5例癌旁组织中用免疫组化技术标记bcl 2、p53、bax、Fas ;用免疫双标技术同时标记 p53与bcl 2 ;从中选取 15例NPC用DNA原位杂交技术检测bcl 2基因扩增情况。结果　① 67例NPC中 p53蛋白阳性 38例 (56 7% ) ,bcl 2蛋白阳性 4 8例(71 6% ) ,bax蛋白阳性 2 8例 (4 1 8% ) ,Fas蛋白阳性 2 9例 (4 3 3% )。②NPC中 ,p53蛋白与bcl 2蛋白的阳性率显著高于癌旁组织 ,而bax蛋白与Fas蛋白的阳性率却显著低于癌旁组织。③ p53蛋白与bcl 2蛋白阳性表达间呈正相关。④bcl 2 /bcl 2同二聚体在NPC中占优势 ;p53蛋白表达在bcl 2 /bcl 2同二聚体占优势的肿瘤中显著高于bax/bax同二聚体占优势的肿瘤中。结论　①p53、bcl 2、bax、Fas在NPC中有较高的阳性表达率 ,与NPC的发生、发展关系密切。②NPC中 p53与bcl 2蛋白表达呈正相关 ,提示NPC中 p53蛋白主要不是突变型 ,有异于其它肿瘤。③抑制细胞凋亡的bcl 2 /bcl 2同二聚体在NPC中占优势 ,尤其是泡状核细胞癌中。提示其与NPC的发生及分化有关。     

增殖和凋亡基因ki-67、bcl-2、bax在前列腺增生、前列腺癌组织细胞中的表达及相关性

目的探讨前列腺癌(PCa)、良性前列腺增生(BPH)和正常前列腺(NP)组织中增殖细胞ki-67核抗原与细胞凋亡相关基因bcl-2、bax的临床意义及相关性。方法收集36例PCa、20例BPH和11例NP,应用免疫组织化学S-P法检测增殖相关基因ki-67核抗原、bcl-2、bax的表达。结果ki-67细胞增殖指数(PI)在PCa组织中表达明显高于BPH和NP(P<0.01),ki-67的PI与PCa分级有关,随着肿瘤分级增高而呈正相关(P<0.01),PCa和BPH中bcl-2阳性表达率高于NP(P<0.05),随着肿瘤分级增高而呈正相关(P<0.05),PCa、BPH和NP中bax阳性表达率差异无显著性。结论前列腺细胞增殖的增强、细胞凋亡的减少与PCa、BPH发生和发展有关,ki-67与bcl-2的检测对鉴别前列腺良、恶性病变有参考意义。     

生长抑素与大肠癌细胞凋亡及调控基因bcl-2、bax及p53关系的研究

目的　探讨生长抑素 (SS)与大肠癌细胞凋亡指数 (AI)和凋亡调控基因p5 3、bcl 2、bax的关系。方法　采用免疫组织化学SABC法和分子生物学细胞原位凋亡检测技术中的TUNEL法 ,检测 6 2例大肠癌组织中SS、p5 3、bcl 2、bax及细胞凋亡的表达情况。结果　在大肠癌组织SS高表达组、中表达组的AI明显高于SS低表达组 (P <0 .0 1) ;p5 3、bcl 2、bax阳性表达率在SS低表达组、中表达组、高表达组三组间相比较存在着明显差别 (P <0 .0 5 ) ,其中bax在SS高表达组、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组 (P <0 .0 5 ) ;bcl 2与其相反。p5 3在SS高表达组的阳性表达率明显低于低表达组 (P <0 .0 5 ) ;而p5 3在SS中表达组表达的阳性表达率低于低表达组 ,但其统计无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论　生长抑素对大肠癌细胞凋亡的调控可能与 p5 3、bcl 2、bax基因的异常表达有关     

Bax、bcl-2在组织工程软骨细胞中的表达及其意义

目的　比较分析离心管构建的组织工程软骨细胞与正常兔关节软骨细胞凋亡调控基因bax和bcl 2mRNA、蛋白表达的差别及意义。方法　取 8例离心管构建 3周的组织工程软骨做实验标本 ,以 6例 3周龄兔关节软骨作正常对照。采用逆转录 /聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测bax和bcl 2mRNA的表达 ,免疫组化技术检测bax、bcl 2蛋白。结果　组织工程软骨和正常关节软骨细胞均表达bax和bcl 2mRNA ;组织工程软骨细胞bax和bcl 2mRNA的表达量均较正常对照组增高 ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ;两组间bax/bcl 2的比值无显著差异 (P >0 .0 5 )。免疫组化检测到相应的bax与bcl 2蛋白表达。结论　组织工程软骨细胞凋亡同样受到bax与bcl 2基因的共同调节     

自然流产病例的绒毛与蜕膜细胞增殖和细胞凋亡的研究

目的　从细胞增殖与细胞凋亡的角度探讨自然流产的发生机制。方法　对 30例正常早孕吸宫流产病例和 30例自然流产病例的绒毛与蜕膜组织进行研究。常规光镜观察细胞形态学变化 ;免疫组织化学S P法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)在细胞中的表达 ;用DNA缺口原位未端标记技术 (TUNEL)检测细胞凋亡 ;免疫组化S P法检测bcl 2 bax基因蛋白表达率比值。结果　自然流产绒毛组织形态学结构均出现程度不同的退行性改变 ,绒毛的细胞滋养细胞及蜕膜中增殖指数 (PI)较正常早孕时明显减少 (P <0 0 1) ,而合体滋养细胞中从未发生过增殖 ,PI为 0 ;与此相反自然流产绒毛的细胞滋养细胞、合体滋养细胞及蜕膜中凋亡指数 (AI)较正常早孕时明显增多 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,同时 ,早孕流产的绒毛及蜕膜中促 /抑凋亡基因bcl 2 bax表达率的比值也较正常早孕时下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,结果与细胞凋亡的发生一致。结论　细胞增殖和凋亡可能在孕卵发育过程中起着重要作用 ,绒毛和蜕膜组织中大量的细胞凋亡是其形态学退变的根本 ,并进而阻碍了孕卵的发育。     

结肠癌及其癌前病变中bcl-2,bax蛋白的表达与细胞凋亡的关系

[目的 ]研究结肠癌及其癌前病变中bcl 2 ,bax蛋白的表达与细胞凋亡的关系 .[方法 ]用免疫组织化学S P法检测bcl 2及bax蛋白 ,TUNEL法检测细胞凋亡 .[结果 ]细胞凋亡指数在腺瘤中表达最高 ,与正常组织中的比较有非常显著性差异 ,而在腺癌中表达最低 ,与腺瘤中的比较有非常显著性差异 ;bcl 2蛋白在腺癌中的表达率最高 (34 / 40 ,85 % ) ,其次是腺瘤 (10 / 15 ,6 6 % ) ,两者与正常及息肉组织比较均有显著性差异 ;bcl 2阴性的腺瘤凋亡指数与bcl 2阳性的腺瘤凋亡指数比较有显著性差异 ;bax蛋白阳性的腺瘤及腺癌凋亡指数与bax阴性的腺瘤及腺癌比较均有显著性差异 .[结论 ]bcl 2蛋白的过表达在结肠癌发生发展过程中起重要作用 ;bcl 2蛋白对细胞凋亡起抑制作用 ,而bax蛋白对细胞凋亡起促进作用     

褪黑素对大鼠心肌缺血/再灌注后细胞凋亡的影响

目的　研究褪黑素 (MT)对大鼠心肌缺血 /再灌注后细胞凋亡及其相关基因bcl 2、bax蛋白表达的影响 ,以探讨其抗心肌缺血 /再灌注损伤的机制。方法　采用左冠状动脉前降支穿线结扎法制备心肌缺血 /再灌注模型 ,分别以缺口末端标记法 (TUNEL法 )及免疫组化法检测心肌细胞凋亡指数 (AI)及bcl 2、bax的蛋白表达的变化。结果　模型组心肌细胞凋亡指数 (AI)、bcl 2及bax蛋白阳性表达指数 (PEI)与假手术组比较均明显增加 ;MT干预后AI与bax蛋白阳性表达指数均下降 (2 1 96± 7 6 8下降至 12 17± 6 4 5 ,18 5 9± 5 6 8下降至 9 71± 2 82 ) ,而bcl 2蛋白阳性表达指数增高 (7 33± 2 0 5增高至 13 4 5± 2 76 )。结论　褪黑素可抑制缺血 /再灌注后心肌细胞凋亡、下调bax基因的蛋白表达与上调bcl 2基因的蛋白表达 ,从而抵抗缺血 /再灌注心肌损伤。     

胃癌中医证型与p53、bcl-2、bax基因蛋白表达关系的研究

目的　探讨胃癌中医证型与p5 3、bcl 2、bax基因蛋白表达的相关性 ,提示病与证之间的内在联系以及证的物质基础。方法　选择进展期低分化胃癌 6 5例 ,辨证分为脾虚组与非脾虚组 ,对其主要症状进行半定量积分 ,并设正常对照组 2 0例。采用免疫组化S P法检测病理组织中p5 3、bcl 2、bax蛋白的表达。结果　脾虚组患者p5 3、bcl 2蛋白的阳性表达率及表达水平显著高于非脾虚组(P <0 0 5 ) ,bax蛋白阳性表达脾虚组低于非脾虚组 ,但组间比较差异无显著性 ;脾虚患者症状积分与p5 3、bcl 2蛋白表达水平呈正相关 (P <0 0 1) ,与bax蛋白表达水平无相关性 ;非脾虚患者症状积分与p5 3、bcl 2、bax蛋白表达水平均无相关性。结论　p5 3、bcl 2蛋白的差异表达与胃癌脾虚证的发病学机理有关 ;p5 3、bcl 2基因是脾虚证的物质基础之一。     

肝细胞癌细胞凋亡、细胞增殖与病理组织学类型的关系

目的研究肝细胞癌细胞凋亡、细胞增殖及其与病理组织学类型的关系。方法经手术病理证实的6种组织学类型肝细胞癌57例,用TUNEL法检测凋亡细胞,用免疫组化检测各标本Bcl-2、Bax,P53,Ki-67和PCNA表达。结果透明细胞型和梁索型Ki-67蛋白表达较假腺样型、实体型和低(未)分化型低(P<0.05)。假腺样型Bcl-2蛋白较低(未)分化型低(P<0.05);Bax蛋白表达梁索型较实体型、低(未)分化型和硬化型高(P<0.05);透明细胞型较低(未)分化型高(P<0.05)。Bcl-2/Bax比值梁索型较假腺样型,硬化型和低(未)分化型低(P<0.05);透明细胞型较低(未)分化型低(P<0.05)。随病理分级的升高Ki-67和PCNA蛋白表达升高(P<0.05)。3级Bax蛋白表达较2级显著降低(P<0.05)。细胞凋亡与Bax蛋白表达显著正相关,与Ki-67蛋白表达和Bcl-2/Bax蛋白表达比值显著负相关(P<0.05)。Ki-67蛋白表达与PCNA和P53蛋白表达显著正相关(P<0.05),与细胞凋亡和Bax蛋白表达显著负相关(P<0.05)。P53蛋白表达与PCNA和Ki-67蛋白表达显著正相关(P<0.05),与Bcl-2/Bax蛋白表达比值显著负相关(P<0.05)。Bcl-2蛋白表达与Bcl-2/Bax蛋白表达比值显著正相关(P<0.05),与PCNA蛋白表达显著负相关(P<0.05)。Bax蛋白表达与细胞凋亡显著正相关(P<0.05),与Ki-67、PCNA蛋白表达和Bcl-2/Bax蛋白     

膀胱移行上皮细胞癌中凋亡、增殖、相关基因的研究

检测47例膀胱癌组织和8例正常膀胱组织的细胞凋亡和增殖状态,并就它们与p53,bcl-2和bax基因之间的关系进行了探讨。结果发现膀胱癌组织增殖水平和凋亡水平与正常对照组之间有非常显著的差异（P<0.001和P<0.01）。随着肿瘤分级的增加,细胞增殖水平的增幅远远大于细胞凋亡水平的增幅（P<0.001）。p53和bcl-2基因的表达分别与细胞增殖和凋亡水平明显相关。提示细胞增殖和凋亡均参与膀胱癌的发生发展,p53和bcl-2基因分别与细胞增殖、凋亡水平的调控有关。     

Bcl-2、bax、P53蛋白表达与老年妇女外阴营养不良细胞凋亡的相关性研究

目的 :探讨老年妇女外阴营养不良组织中细胞凋亡及相关基因的表达情况。方法 :采用原位末端标记及免疫组化S -P法检测 78例老年妇女外阴营养不良和 12例老年妇女外阴营养不良恶变石蜡包埋组织中的细胞凋亡及相关基因bcl- 2、bax、p5 3的表达情况。另取石蜡包埋的老年妇女正常外阴皮肤 10例作为对照。结果 :老年妇女正常外阴皮肤、外阴营养不良及外阴营养不良恶变中均存在细胞凋亡及bcl- 2、bax和p5 3的表达 ,细胞凋亡指数 (AI)及bcl- 2和bax的表达在营养不良组明显高于营养不良恶变组 (P >0 .0 1) ,而 p5 3的表达却相反 (P >0 .0 1)。在老年妇女正常外阴皮肤及外阴营养不良中凋亡细胞的分布区域与表达bcl- 2和bax蛋白的细胞分布区域一致 ,bcl- 2与bax表达呈正相关 (P >0 .0 5 ) ;在恶变部位凋亡细胞的分布区域与突变型 p5 3蛋白表达呈负相关 ,p5 3分别与bcl- 2和bax的表达呈负相关 (P >0 .0 5 )。结论 :老年妇女外阴营养不良的发生发展和恶变与细胞凋亡有关 ,bcl- 2、bax和p5 3起一定作用。     

Expression of Survivin, p53 and its relationship with apoptosis, proliferation in hepatocellular carcinoma（HCC）

Objective:To investigate the expression of Survivin p53 and its relationship with apoptosis、proliferation in hepatocellular carcinoma(HCC). Methods:The expression of Survivin, p53 and the proliferation of tumor cells marked by proliferation cell nuclear antigen (PCNA) in 42 cases of HCC were assessed by immunohistochemical method. TUNEL was used to detect apoptosis. Results:Survivin protein was expressed in 30 of 42 cases of HCC(71.4%) and in 4 of 34 cases of adjacent cirrhosis tissues(11.8%). Expression of Survivin protein was negative in 10 cases of normal tissues. Survivin protein positive expression rate in HCC was significantly higher than adjacent cirrhosis tissues and normal tissues(P < 0.001). The increased Survivin protein expression in cancer was significantly associated with histological grade(P = 0.003), p53 protein(P = 0.013), survival time(P < 0.05) and the ratio of proliferative index to apoptotic index(P < 0.01), but was not significantly correlated with age, sex, clinical stage, tumor size, metastasis, AFP, HBs-Ag(P > 0.05).Conclusion:There is a marked increased expression of Survivin in HCC, which may play an important role in breaking the balance of proliferation and apoptosis of HCC cells. The correlation between Survivin and p53 expression in HCC indicates that cooperation between Survivin and p53 plays a certain role in occurrence and /or development of HCC.     

p53、bcl-2和bax基因蛋白表达与眼眶泪腺腺样囊性癌的关系

目的 探讨细胞凋亡控制p53、bel-2和bax基因在眼眶泪腺腺样囊性癌中表达的作用及其临床意义.方法 对天津医科大学二附属医院1962年1月至1998年1月收治的56例经手术及放疗联合治疗的眼眶泪腺腺样囊性癌资料进行回顾性分析,将其按疗效分为两组,5年内复发转移组32例和5年内无瘤生存组24例,观察其p53、bcl-2和bax基因蛋白表达情况,并以8名正常泪腺组织作为对照.结果 (1)p53在腺样囊性癌组的总表达阳性率为73.2%,其中复发转移组阳性率(81.3%,26/32)与无瘤生存组阳性率(62.5%,15/24),明显高于正常泪腺组织组(8例均为阴性)的表达率(均P<0.05);其中复发转移组阳性率明显高于无瘤生存组,其蛋白表达与临床预后呈负相关.(2)bcl-2在腺样囊性癌的总表达率为69.6%,其中复发转移组阳性率(18/32)与无瘤生存组阳性率(21/24),明显低于正常泪腺组织组(8例均为阳性)(P<0.05);复发转移组阳性率明显低于无瘤生存组,其蛋白表达与临床预后呈正相关.(3)bax在腺样囊性癌组的总表达阳性率为60.7%,总表达阳性率与正常泪腺组织组(1例为阴性,7例为阳性)比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 p53、bcl-2和bax基因的表达均与临床预后密切相关,p53低表达和bel-2、bax的过表达临床预后较好,检测p53、bcl-2和bax可以作为判断眼眶泪腺腺样囊性癌临床预后的有价值的参考指标.     

凋亡相关基因的表达与胃癌的关系

目的：研究凋亡相关基因bcl-2、bax、p53表达在胃癌发展过程中可能的作用机制。方法：采用免疫组化SABC法检测81例临床标本(慢性浅表性胃炎29例、萎缩性胃炎13例、胃炎伴异型增生21例、胃癌18例)的bcl-2、bax、p53蛋白表达。结果：在慢性浅表性胃炎组中无bcl-2表达，异型增生组阳性表达率5％，胃癌组为20％，阳性表达率呈逐渐增加趋势；bax蛋白阳性表达率在慢性浅表性胃炎组为83．3％，萎缩性胃炎组为64．3％，异型增生组为60％，胃癌组为46．7％，阳性表达率呈逐渐减少趋势；p53在慢性浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组无表达，在异型增生组阳性表达率20．6％，胃癌组为42．4％，阳性表达率呈逐渐增加趋势。结论：在胃癌的发展过程中可能存在凋亡抑制，促凋亡基因bax的表达逐渐受抑而抑凋亡基因的表达逐渐增加。     

环氧化酶-2的表达与食管癌细胞增殖和凋亡的关系

目的:研究食管癌环氧化酶-2(COX-2)的表达与增殖细胞核抗原以及凋亡的关系.方法:采用免疫组化方法检测96例食管癌组织和20例对照组中的COX-2、bcl-2和PCNA,同时用末端脱氧核苷酸转移介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)进行原位凋亡检测,并计算增殖指数(proliferation index PI)和凋亡指数(apoptotic index AI).结果:96例食管癌组织中的COX-2和bcl-2表达升高,PI为72.20%,AI为8.67%,COX-2、PI和AI与肿瘤的淋巴结转移、血管的浸润以及临床分期密切相关.结论:COX-2通过上调bcl-2促进肿瘤细胞增殖和抑制细胞凋亡参与了食管癌的发生机理.     

Clusterin、bcl-2及p53在前列腺上皮组织中的表达及相关性研究

目的通过检测新的凋亡抑制因子Clusterin在前列腺癌组织中的表达,探讨其与前列腺癌发生发展的关系及其与bcl-2和p53表达的关系.方法采用免疫组织化学染色法检测Clusterin、bcl-2、p53在10例正常前列腺组织、15例良性前列腺增生组织(BPH)、49例前列腺癌组织标本中的表达.结果Clusterin在前列腺正常、增生、癌组织中的阳性及弱阳性表达率分别为10%(1/10)、66.6%(10/15)、91.8%(45/49).前列腺癌组织中Clusterin表达水平明显高于前列腺正常组织(P＜0.005)及增生组织(P＜0.005),且在癌组织中与肿瘤临床分期(P＜0.001)、病理分级(P＜0.001)呈正相关.前列腺癌Clusterin表达与bcl-2(P＜0.05)及p53(P＜0.001)表达呈正相关关系.结论Clusterin基因可能通过抑制凋亡在前列腺癌的发生发展中发挥重要作用,且其表达与bcl-2、p53的异常表达密切相关.     

硒对镉转化人支气管上皮细胞系16HBE凋亡和癌基因表达的影响

目的研究在体外染毒条件下硒对镉转化人支气管上皮细胞系16HBE凋亡和癌基因表达的影响。方法用0.625、1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠染毒镉转化16HBE细胞24h,用流式细胞术检测凋亡,用RT-PCR检测p53,bcl-2和bax表达。结果 0.625、1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠染毒镉转化16HBE细胞后,随硒剂量升高细胞凋亡率增高,相关系数r=0.987 9(P<0.01),并且在1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠剂量组的凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。亚硒酸钠可以抑制镉转化16HBE细胞p53和bcl-2的表达(P<0.05或P<0.01),bax表达虽有所增强但P>0.05。进行相关性分析,细胞凋亡与p53和bcl-2表达呈负相关,相关系数r分别为-0.923 6(P<0.01)和-0.862 1(P<0.05),而细胞凋亡与bax表达呈正相关,相关系数r=0.781 8(P<0.05)。p53表达和bcl-2表达呈正相关,相关系数r=0.894 1(P<0.05)。p53、bcl-2表达和bax表达之间呈显著负相关,相关系数分别为-0.822 2(P<0.05)和-0.961 3(P<0.01)。结论亚硒酸钠处理镉转化16HBE细胞,通过使p53和bcl-2表达下调、bax表达上调,诱导细胞凋亡从而起到抑制细胞恶性转化的作用。