长期骨髓培养,白细胞介素2,干扰素α2a体外净化慢性粒细？…

用长期骨髓培养的白细胞介素２（ＩＬ－２,０００Ｕ／ｍｌ）,干扰素α２ａ（ＩＦＮ－α２ａ,１０００Ｕ／ｍｌ）不同的组合方案,对１０例慢性粒细胞白血病骨髓进行体外净休培养２周,结果发现：（１）单用ＬＴＢＭＣ体系其次化效果差;（２）加入ＩＬ－２后,对ＣＭＬ的ＣＦＵ－ＧＭ以及ｐｈ’（＋）细胞有明显的杀伤作用,对正常的ＣＦＵ－ＧＭ则无影响;（３０ＩＦＵ－α２ａ在ＬＴＢＭＣ体系中抑制ｐｈ‘（＋）细胞生长而影响     

慢性粒细胞白血病骨髓的体外净化

目的 :探讨白细胞介素、干扰素α2α、bcr -abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法 :采用体外克隆形成培养技术 ,分别用白细胞介素、干扰素α2α、bcr-abl反义寡核苷酸不同的组合方案 ,进行体外净化 5例慢性粒细胞白血病 (CML)骨髓。结果 :联用IL - 2、IFN -α2α(各 80 0um/ml)、bcr-ablAS -ODN(30ug/ml)方案 ,对白血病细胞克隆形成单位 (L -CFU)抑制作用有显著差异 (P <0 .0 1 ) ,而相同条件下 ,GM-CFU及L -CFU的集落存活率分别为 2 6 .91 %和 3 .49% (P <0 .0 1 )。结论 :联用IL - 2、IFN -α2α(各 80 0u/ml)、bcr-ablAS -ODN(30ug/ml)方案 ,选择性体外净化慢性粒细胞白血病细胞的效果好 ,可用于临床净化CML骨髓。     

慢性粒细胞白血病骨髓体外净化的实验研究

目的　探讨白细胞介素、干扰素 α2 a、bcr- abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法　采用体外克隆形成培养技术 ,分别用白细胞介素、干扰素 α2 a、bcr- abl反义寡核苷酸不同的组合方案 ,体外净化 5例慢性粒细胞白血病 (CML)骨髓。结果　联用 IL- 2、IFN- α2 a(各 80 0 u/ m l)、bcr- abl AS- ODN(30 μg/ ml)方案 ,对白血病细胞克隆形成单位 (L- CFU)抑制作用有显著差异 (P<0 .0 1) ,而相同条件下 ,GM- CFU及 L- CFU的集落存活率分别为 2 6 .91%和 3.49% (P<0 .0 1)。结论　联用 IL- 2、IFN- α2 a(各 80 0 u/ m l)、bcr- abl AS- ODN(30 μg/ml)方案 ,选择性体外净化慢性粒细胞白血病细胞的效果好 ,可用于临床净化 CML 骨髓     

慢性粒细胞白血病骨髓体外净化的实验研究

OBJECTIVE: To investigate the effect of IL-2, IFN and bcr-abl AS-ODN on bone marrow purging in vitro for patients with chronic myelogenous leukemia (CML). METHODS: By amplifying in vitro clone forming culture, and purging the bone marrow of 5 CML patients through different combined use of IL-2, IFN and bcr-abl AS-ODN, we compared the effects of 4 combined regimens. RESULTS: It was found that the suppressive effects of the 4th regimen combining IL-2 (800 U/ml), IFN (800 u/ml) and bcr-abl AS-ODN (30 micrograms/ml) on leukemia cell clone forming unit (CFU) were significantly different from the suppressive effects of the other 3 regimens (P < 0.01). With the use of the 4th regimen, the GM-CFU and L-CFU survival rates were 26.91% and 3.49% respectively (P < 0.01). CONCLUSION: The combined regimen of IL-2 (800 U/ml), IFN (800 u/ml) and bcr-abl AS-ODN (30 micrograms/ml) has good effect on selective CML bone marrow purging in vitro and can be used in clinical purging of CML bone marrow.     

白细胞介素—2,γ干扰素净化模拟白血病缓解期骨髓及用PCR检 …

探讨白细胞介素２（ＩＬ－２）、γ－干扰素用于自体骨髓中残留白血病细胞的净化及用聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测净化效果。方法：将ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ与模拟慢性粒细胞白血病缓解解的骨髓在培养体系中分别培养１－６ｄ,通过ＲＴ－ＰＣＲ方法来检测缓解期骨髓中ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ消失情况。     

慢性粒细胞白血症骨髓的体外净化

目的：探讨白细胞介素，干扰素α2α，bcr-abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法：采用体外克隆形成培养技术，分别用白细胞介素，干扰素α2α，bcr-abl反义寡核苷酸不同的组合方案，进行体外净化5例慢性粒细胞白血病（CML）骨髓，结果：联用IL－2，IFN－α2α（各800um/ml),bcl-abl AS-ODN(30ug/ml)方案，对白血病细胞克隆形成单位（L－CFU）抑制作用有显著差异（P＜0．01），而相同条件下，GM－CFU及L－CFU的集落存活率 分别为26．91％和3．49％（P＜0．01），结论：联用IL－2，IFN－α2α（各800g/ml),bcr-abl AS-ODN(30ug/ml)方案，选择性体外净化慢性粒细胞白血病细胞的效果好，可用于临床净化CML骨髓。     

白细胞介素-2、γ干扰素净化模拟白血病缓解期骨髓及用PCR检测净化效果

目的:探讨白细胞介素 2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)用于自体骨髓中残留白血病细胞的净化及用聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测净化效果.方法:将IL-2、IFN-γ与模拟慢性粒细胞白血病(CML)缓解期的骨髓在培养体系中分别培养 1～6d,通过RT-PCR方法来检测缓解期骨髓中bcr/abl mRNA消失情况.结果:模拟缓解期CML骨髓经与IL-2、IFN-γ 24h、48h和 72h培养后用RT-PCR方法仍可检测到bcr/abl mRNA,而经 6d培养后则已测不到.若将IL-2、IFN-γ合用,经 24和 48h培养的骨髓可检测到bcr/abl mRNA,但经 72h和 6d培养后便检测不到,而对照组在 1～6d培养后仍可检测到该基因.结论:初步实验结果表明IL-2、IFN-γ对缓解期骨髓中的K562白血病细胞系具有净化作用,若两者合用具有协同作用,RT-PCR可作为评估净化效果较为敏感和较为可靠的检测方法.     

rhTNF—α联合IL—2对急性髓细胞白血病患者骨髓体外净化的研究

目的 探讨重组人肿瘤坏死因子α（rhTNF-α）联合白细胞介素2（IL-2）对急性髓细胞白血病（AML）骨髓体外净化的作用。方法 rhTNF-α(1000u/ml)和IL-2（500u/ml)联合，对17例AML患者骨髓体外净化培养1-3d，用甲基纤维素半固体培养法测定粒-巨噬细胞集落（CFU-GM）、白血病祖细胞（CFU-L）形成，并以免疫组化法测定CD33、CD38和CD34阳性表达率的变化。结果 （1）rhTNF-α对8例正常人和17例患者的CFU-GM均有明显的抑制作用。而与IL-2联合作用对CFU-GM则无明显影响；（2）单用rhTNF-α或IL-2与患者骨髓共同孵育1d和3d，CFU-L形成率均有所下降，但至孵育3d后，尚残余20%、6%的白血病克隆，不能完全根除CFU-L，而两者联合作用3d后，CFU-L抑制率达100%；（3）17例AML患者骨髓经rhTNF-α、IL-2净化培养3d后，白敌国病细胞CD33、左右8帮CD34阳性表达率发生了明显变化。结论 （1）单用rhTNF-α或IL-2净化效果不理想；（2）rhTNF-α联合IL-2对CD34阳性表达率发生了明显的变化。结论 （1）单用rhTNF-α或IL-2净化效果不理想；（2）rhTNF-α联合IL-2对CFU-L有选择性杀伤作用。而对正常CFU-GM无明显影响。净化效果较好；（3）白血病细胞CD33、CD38、CD34阳性率的变化可间接评价AML骰须净化效果。     

慢性粒细胞白血病36例血清可溶性白细胞介素2受体与T细胞亚群…

对３６例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患者血清可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）水平及１０例ＣＭＬ患者Ｔ细胞亚群进行了检测，结果显示各期ＣＭＬ患者血清ＳＩＬ－２Ｒ水平均较正常对照明显增高（Ｐ〈０．００１）。ＳＩＬ－２Ｒ水平与外周血及骨髓白血病细胞数呈正相关，而与Ｔ细胞亚群的变异无明显相关性。血清ＳＩＬ－２Ｒ水平在ＣＭＬ分期、判断疗效及预后上均可作为简单而实用的指标。     

阿糖胞苷,干扰素对慢性粒细胞白血病细胞凋亡影响的研究

将３１例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患者的骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）在体外与干扰素、阿糖胞苷作用一定时间后,以ＡＯ／ＥＢ法和ＦＣＭ法检测细胞凋亡率。结果：①干扰素、阿糖胞苷均可诱导ＣＭＬ细胞凋亡,前者诱导凋亡的强度强于后者（Ｐ＜０．０１）。②干扰素诱导凋亡,在ＣＭＬ不同病期间差异显著（Ｐ＜０．０１）。③阿糖胞苷与干扰素有协同诱导凋亡作用。④干扰素体外诱导凋亡率的高低与临床治疗效果密切相关。提示：诱导凋亡是干扰素、阿糖胞苷治疗ＣＭＬ的一个机制,体外筛选是一种有效的选择敏感病例的方法     

自体树突状细胞用于慢性粒细胞白血病骨髓净化的初步研究

目的 考察慢性粒细胞白血病（CML）树突状细胞（DC）刺激自体骨髓T细胞,清除白血病细胞的作用。方法 采用3例CML病人（2例慢性期和1例急变期）外周血,分离单个核细胞（PBMNC）,经塑料贴壁后在含自体血浆、重组人白介素4（rhIL－4)、重组人粒－单集落刺激因子（rhGM－CSF）和重组人肿瘤坏死因子（rhTNFα）的RPMI－1640培养液。37℃CO2孵箱培养10天,或用免疫磁珠从PBMNC分离DC,在含自体血浆、rhGMCSF和rhTNFα的RPMI1640培养液培养3天,收获的细胞即DC加到含rhIL－2的Dexter骨髓长期培养体系,置37℃,5％CO2孵箱培养7天,观察前后骨髓细胞的免疫表型和P210阳性细胞比例。结果 从CML病人外周血获得的DC大多数表达P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210阳性细胞减少,但在急性期病例,体系中P210细胞明显增加。结论 CML病人的DC表达P210,能刺激自体骨髓中T细胞增生,在慢性期病人,这些自体DC活化的骨髓T细胞有清除白血病细胞的作用。     

干扰素α对慢性粒细胞白血病患者体内髓样树突状细胞影响的研究

目的探讨干扰素α（IFN—α）治疗慢性粒细胞白血病（CML）患者有效的可能机制。方法应用流式细胞仪（FCM）分析健康人和CML患者治疗前（初诊未治的慢性期）与IFN—α治疗1年后外周血髓样树突状细胞（mDCs）的数量变化;分析CML患者外周血mDCs数量的变化与临床病情的关系。结果与健康人比较,CML患者外周血中mDCs数量减低（P〈0．01）;经IFN—α和羟基脲有效治疗后,病情稳定的患者体内mDCs的数量有所恢复,尤其是治疗后达MCR的患者,其mDCs数量接近正常;相关性分析表明,患者体内mDCs数量与白细胞数、年龄呈负相关,和IFN—α的疗效呈正相关,与患者性别无关。结论CML患者体内mDCs的数量降低,IFN—α有效治疗CML可能与恢复mDCs的数量有关。     

干扰素α-2b治疗慢性粒细胞性白血病的前瞻性随机对照研究

目的比较高、低剂量干扰素(IFN)α2b治疗慢性粒细胞性白血病(CML)的效果。方法建立检测融合基因bcr abl的荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ PCR)方法,观察治疗后融合基因表达水平的变化。选择30例临床初诊的CML患者随机分为两组,先服用羟基脲控制外周血白细胞达20×109/L以下,然后分别给予IFNα2b300万IU隔日皮下注射(3MIU组)和500万IU每周6次(5MIU组)皮下注射,治疗3～6个月,每月抽取骨髓标本,检测融合基因bcr abl的表达情况。结果RQ PCR的灵敏度达50拷贝bcr abl;分别取1×103拷贝/μl和1×107拷贝/μlbcr abl质粒,以及1例CML患者的cDNA同时作8管平行扩增bcr abl融合基因,批内变异系数分别为2.35%、1.48%和1.17%,不同批次之间以K562细胞cDNA作重复性分析,批间变异系数为5.13%;CML初诊患者bcr abl/GAPDH水平介于0.010～5.799,中位值为0.098;治疗3个月后3MIU组和5MIU组患者骨髓bcr abl水平平均下降19%和24%,两组比较差异无统计学意义(P=0.398),但是3MIU组副作用相对较小。结论RQ PCR监测融合基因bcr abl表达可以有效观察CML患者使用IFN的治疗效果;不同CML患者白血病细胞的bcr abl表达水平有较大差异;隔日3MIUIFN皮下注射治疗即可有效抑制CML白血病细胞的增殖,且副作用较小。     

小剂量干扰素联合白细胞介素-2治疗慢性乙型肝炎

病毒性乙型肝炎的抗病毒治疗,目前国内外首选是干扰素,单用干扰素疗效尚不尽人意,停药后复发率高,且大剂量副作用大[1～3]。我院于1995年8月至1996年12月,应用长春生物制品研究所生产的小剂量干扰素和白细胞介素-2治疗慢性乙型肝炎60例,报道如下。1　材料和方法1)　病例选择:按1995年5月第5次全国传染病寄生虫病学术会议讨论修订的“病毒性肝炎防治方案(试行)”诊断标准,选择无肝病家族史、HBeAg阳性,ALT异常慢性乙型肝炎60例,其病史均在5年以内。60例中,男性42例,女性18例;年龄最小者10岁,最大者43岁,平均25岁。选择同期住院病人30例,作…     

急性髓性白血病骨髓基质细胞白细胞介素—6分泌活性的研究

目的：检测急性髓性白血病（ Ａ Ｍ Ｌ）时骨髓基质细胞 Ｉ Ｌ６ 分泌活性，并探讨其对 Ａ Ｍ Ｌ增殖的作用。方法：我们选择了１５ 例 Ａ Ｍ Ｌ患者及１０ 例正常对照者，应用体外骨髓基质细胞培养法及 Ｉ Ｌ６ 生物活性检测法。 Ｉ Ｌ６活性测定采用 Ｉ Ｌ６ 依赖性细胞株 Ｍ Ｈ６０，染色后在酶标仪上测定。结果： Ａ Ｍ Ｌ骨髓基质细胞形成能力较差，但其 Ｉ Ｌ６ 活性明显高于未添加组（ Ｐ ＜ ００５）。结论： Ａ Ｍ Ｌ时骨髓基质细胞存在量和质的异常， Ｉ Ｌ３ 可促进 Ｉ Ｌ６ 的分泌， Ｉ Ｌ６ 的异常分泌在 Ａ Ｍ Ｌ的细胞增殖上可能起重要作用。     

羟基喜树碱联合α-干扰素治疗慢性粒细胞白血病

慢性粒细胞性白血病（CML）是发生在早期多能造血干细胞上的恶性骨髓增生性疾病。造血干细胞移植（HSCT）是根治CML的最好方法，但由于其价格昂贵，风险性高，70％以上患者选择了药物治疗。我们采用羟基喜树碱（HCPT）联合α-干扰素（IFN-α）治疗CML慢性期患者18例，疗效较好，现报道如下。     

重组α-干扰素治疗毛细胞白血病膜白细胞介素2受体的变化

本研究以间接免疫荧光法在流式细胞光度计下,检测一例用重组α-干扰素治疗毛细胞白血病(HCL)前后外周血mIL_2R阳性细胞的变化,治疗4个月后,外周血mIL_2R阳性细胞明显下降(由80.3％降至23.3％),而病人情况、临床体征、实验室检查指标好转。这表明毛细胞白血病外周血mIL_2R阳性细胞百分数拟可作为估价病情和预后的指标。